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变形杆菌属中抗菌药物亚胺培南稀释法和纸片法的对比研究

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系统医学 2023年第19期8卷 28-31页

作者：伍萃欣廖志玲黄顺娇吴洁英广东省英德市人民医院检验科广东英德513000

目的提高亚胺培南对变形杆菌属药敏报告的正确性。方法选取2021年5月—2023年8月广东省英德市人民医院临床标本分离出的208株变形杆菌属,对同一标本来源分离出的变形杆菌属同时进行抗菌药物亚胺培南仪器稀释法药物敏感试验和手工K-B纸... 详细信息

目的提高亚胺培南对变形杆菌属药敏报告的正确性。方法选取2021年5月—2023年8月广东省英德市人民医院临床标本分离出的208株变形杆菌属,对同一标本来源分离出的变形杆菌属同时进行抗菌药物亚胺培南仪器稀释法药物敏感试验和手工K-B纸片扩散法药物敏感试验,进一步作结果对比分析。结果仪器稀释法与手工K-B纸片扩散法试验结果呈耐药判读的相符率是52.63%,呈中介判读的相符率是64.71%,呈敏感判读的相符率是94.12%,从变形杆菌属中细分出来的奇异变形杆菌,普通变形杆菌及豪泽变形杆菌在研究试验中得出的相符率与总相符率保持一致,其耐药判读结果相符率为52.94%和50.00%,中介判读结果相符率为65.19%和61.11%,敏感判读结果相符率为92.86%和100.00%,试验数据可见相关统计表格。结论仪器稀释法检测抗菌药物亚胺培南药敏时,由于方法学的局限性,当其结果呈现耐药或中介时存在判读过高,可使用手工K-B纸片扩散法对药敏结果予以纠正,提高结果报告的准确性。

关键词：变形杆菌属仪器稀释法手工纸片法药敏结果纠正

2005—2014年CHINET变形杆菌属、沙雷菌属、枸橼酸杆菌属、摩根菌属及普罗威登菌属细菌耐药性监测

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中国感染与化疗杂志 2016年第3期16卷 284-293页

作者：李金胡志东汪复朱德妹胡付品孙自镛陈中举谢轶康梅徐英春张小江张朝霞季萍王传清王爱敏倪语星孙景勇俞云松林洁褚云卓田素飞徐元宏沈继录单斌杜艳卓超苏丹虹张泓孔菁魏莲花吴玲胡云建艾效曼韩艳秋郭素芳杨青贾蓓黄文祥天津医科大学总医院检验科天津300052 复旦大学附属华山医院华中科技大学同济医学院附属同济医院四川大学华西医院北京协和医院新疆医科大学第一附属医院复旦大学附属儿科医院上海交通大学医学院附属瑞金医院浙江大学医学院附属邵逸夫医院中国医科大学附属第一医院安徽医科大学第一附属医院昆明医科大学第一附属医院广州医科大学附属第一医院上海交通大学附属儿童医院甘肃省人民医院北京医院内蒙古医科大学附属医院浙江大学附属第一医院重庆医科大学附属第一医院

目的了解国内主要地区临床分离变形杆菌属、沙雷菌属、枸橼酸杆菌属、摩根菌属及普罗威登菌属细菌对常用抗菌药物的敏感性和耐药性。方法对CHINET细菌耐药性监测网临床分离菌,采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一方案进行药物敏感性试... 详细信息

目的了解国内主要地区临床分离变形杆菌属、沙雷菌属、枸橼酸杆菌属、摩根菌属及普罗威登菌属细菌对常用抗菌药物的敏感性和耐药性。方法对CHINET细菌耐药性监测网临床分离菌,采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一方案进行药物敏感性试验。结果 2005—2014年分离出变形杆菌属、沙雷菌属、枸橼酸杆菌属、摩根菌属、普罗威登菌属共计21 663株。10年间,变形杆菌属细菌的检出率呈上升趋势:2005年为1.41%,2014年为2.09%;沙雷菌属细菌的检出率呈上升趋势:2005年为0.99%,2014年为1.28%;枸橼酸杆菌属、摩根菌属和普罗威登菌属细菌的检出率基本无变化。变形杆菌属对头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、头孢他啶、头孢西丁、阿米卡星、替加环素耐药率低于10%。沙雷菌属对头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、阿米卡星、替加环素耐药率低于10%。枸橼酸杆菌属对头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、头孢吡肟、阿米卡星、替加环素耐药率低于20%。摩根菌属对头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、头孢吡肟、阿米卡星、替加环素耐药率低于10%。普罗威登菌属对头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、头孢吡肟、头孢西丁、替加环素耐药率低于20%。结论 10年中细菌耐药性仍呈增长趋势,严格采取有效的感控措施及合理用药是减缓耐药性增长的有效方法。

关键词：变形杆菌属沙雷菌属枸橼酸杆菌属摩根菌属普罗威登菌属耐药性检测

环介导等温扩增技术快速检测变形杆菌属的研究

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食品工业 2011年第10期32卷 106-109页

作者：王鹏张会彦马晓燕张伟河北农业大学食品科技学院保定071001

建立了一种快速、灵敏、高度特异的检测变形杆菌属(Proteus)的方法——环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)。通过对GenBank中变形杆菌属atpD基因序列(AX109601)进行分析,设计了6条引物(2条内引物、2条外... 详细信息

建立了一种快速、灵敏、高度特异的检测变形杆菌属(Proteus)的方法——环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)。通过对GenBank中变形杆菌属atpD基因序列(AX109601)进行分析,设计了6条引物(2条内引物、2条外引物、2条环引物),在Bst大片段聚合酶的作用下,对模板DNA进行梯状等温扩增,产生白色沉淀,并且优化LAMP的反应体系,检验其灵敏性与特异性。扩增产物用限制性内切酶Psp1406Ⅰ(AclⅠ)酶切,观察酶切片段大小,验证方法的正确性。结果表明,该方法在61℃保温50 min即可完成,最低检测限为5.4 CFU/mL,灵敏度高于常规PCR 10倍。对其它食品病原菌进行检测,结果均未出现目的条带。表明LAMP法检测变形杆菌属灵敏度高、特异性好,操作简便,无需特殊的仪器设备,有恒温加热设备就可以满足检测条件,极适合在我国广大基层实验室开展应用。

关键词：变形杆菌属环介导等温扩增(LAMP) 检测

环介导等温扩增技术快速检测变形杆菌属的研究

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环介导等温扩增技术快速检测变形杆菌属的研究

作者：王鹏河北农业大学

学位级别：硕士

病原微生物与食品污染构成了一个巨大并不断扩大的世界性公共卫生问题。我国食源性疾病监测网的统计数字显示:近十年来,由病原微生物引起的食源性疾病事件和涉及的人数最多占46.4%,其中变形杆菌属占11.3%,普通变形杆菌和奇异变形杆菌是... 详细信息

病原微生物与食品污染构成了一个巨大并不断扩大的世界性公共卫生问题。我国食源性疾病监测网的统计数字显示:近十年来,由病原微生物引起的食源性疾病事件和涉及的人数最多占46.4%,其中变形杆菌属占11.3%,普通变形杆菌和奇异变形杆菌是引起食物中毒的主要变形杆菌。因此,普通变形杆菌和奇异变形杆菌的检测、鉴定以及防控技术已经受到极大的关注。变形杆菌属的检测方法一直沿用过去传统培养法,己不能适应现代快速检测的要求。环介导等温扩增技术（Loop-mediated isothermal amplification,简称LAMP）是日本学者Notomi等于2000年发明的一种全新的核酸扩增方法。该技术利用能识别靶序列上6个位点的4个特殊的引物和一种具有链置换活性的DNA聚合酶,在恒温条件下,特异、高效、快速地扩增核酸。在1 h内扩增效率可达到10～9-10～10个数量级,扩增产物是一系列反向重复的靶序列构成的茎环结构和多环花椰菜样结构的DNA片段混合物,电泳后在凝胶上显现出由不同大小的区带组成的阶梯式图谱。另外,在反应中添加特异性环引物（loop primer）能够把扩增时间缩短到原来的一半,使反应速率极大地得到提高。近年来LAMP技术以其特异性强、等温、灵敏、操作简单、产物易检测等优点已经应用于食品安全检测领域的多个方面。本研究针对变形杆菌属atpD基因序列（AX10～9601）进行分析,设计6条引物（2条内引物、2条外引物、2条环引物）,对普通变形杆菌和奇异变形杆菌进行检测,优化反应条件,验证检测的特异性和灵敏度,应用于食品样品的直接检测,并用限制性内切酶Psp1406Ⅰ酶切扩增产物,观察酶切片段大小,验证方法的正确性,建立了变形杆菌属的LAMP检测方法。为了确立最佳反应条件我们对LAMP反应体系进行了优化。实验表明温度是LAMP的最大影响因素,而镁离子和引物浓度比对反应影响不大。从而获知外环内引物浓度比为1:2:6、Mg添加浓度为2.0 mmol/L、反应温度为61℃、反应时间为50 min时检测最灵敏。为评价该技术的特异性,我们同时对1株普通变形杆菌、1株奇异变形杆菌和13株其它肠杆菌致病菌进行特异性试验。结果表明仅变形杆菌属DNA扩增产物在电泳后出现特异的梯状条带,进一步对该扩增产物进行酶切,结果也与预期相符。这表明LAMP技术对变形杆菌属DNA的扩增是特异的。我们对原始模板进行梯度稀释来测试其敏感性,实验结果表明LAMP技术可以稳定检出变形杆菌DNA的下限为5.4 CFU/mL。应用LAMP方法对猪肉样品进行变形杆菌DNA检测,并将结果与普通PCR法相比较。结果显示,LAMP检测猪肉中变形杆菌的检出限为15 CFU/mL,对照PCR检测猪肉中变形杆菌的检出限为150 CFU/mL。LAMP方法比PCR方法检出限高了10倍,时间也缩短了一半。因此,我们的实验表明LAMP技术用于食品中变形杆菌属DNA检测具有很高的特异性和敏感性。并且LAMP所具有操作简单快速,结果易判断和不需要复杂技术及设备的低成本优势也是PCR所不能及的。如果进一步优化、完善和推广,我们相信该技术将会在食品感染变形杆菌的预防上发挥重要作用。

关键词：变形杆菌属环介导等温扩增(LAMP) 检测猪肉

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食源性变形杆菌属PCR检测方法

食品研究与开发 2010年第2期31卷 155-159页

作者：毕水莲唐书泽陈守义吴希阳石磊华南理工大学轻工与食品学院广东广州510640 暨南大学食品科学与工程系广东广州510632 广州市疾病预防控制中心广东广州510080

建立一种快速、准确检测变形杆菌属的PCR方法。选择tuf基因作为靶基因设计引物,分别对3株变形杆菌属标准菌株、66株变形杆菌属样品分离株及12株非变形杆菌属菌株进行扩增试验,结果3株标准菌株和66株样品分离株均扩增出541bp的特异性片断... 详细信息

建立一种快速、准确检测变形杆菌属的PCR方法。选择tuf基因作为靶基因设计引物,分别对3株变形杆菌属标准菌株、66株变形杆菌属样品分离株及12株非变形杆菌属菌株进行扩增试验,结果3株标准菌株和66株样品分离株均扩增出541bp的特异性片断,12株非变形杆菌属菌株均未有特异性条带产生,呈阴性。灵敏度试验结果表明:该法检测限可低至1.08×103cfu/mL。该方法可用于食品中变形杆菌属的快速检测。

关键词：食源性致病菌变形杆菌属聚合酶链反应检测

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变形杆菌属食物中毒的特点与防控措施

现代食品科技 2009年第6期25卷 690-695页

作者：毕水莲李琳唐书泽陈守义吴希阳张学武石磊华南理工大学轻工与食品学院广东广州510640 暨南大学食品科学与工程系广东广州510632 广州市疾病预防控制中心广东广州510080

变形杆菌属食物中毒是一种常见的细菌性食物中毒,近年来,此菌食物中毒案例呈逐年上升趋势。本文在对国内外相关文献资料进行整理的基础上,综述了变形杆菌属的有关特性,主要包括变形杆菌属的生物学特性、流行病学特点、临床资料以及预防... 详细信息

变形杆菌属食物中毒是一种常见的细菌性食物中毒,近年来,此菌食物中毒案例呈逐年上升趋势。本文在对国内外相关文献资料进行整理的基础上,综述了变形杆菌属的有关特性,主要包括变形杆菌属的生物学特性、流行病学特点、临床资料以及预防控制变形杆菌属食物中毒的措施,对变形杆菌属的检测、诊断、防控技术等研究提供背景参考。

关键词：变形杆菌属食物中毒特性防控措施

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食源性变形杆菌属PCR检测方法的研究

食源性变形杆菌属PCR检测方法的研究

作者：毕水莲暨南大学

学位级别：硕士

针对食源性变形杆菌属食物中毒事件逐年上升的趋势,研究建立新型快速灵敏的变形杆菌属检测鉴定方法。通过建立3种常规PCR方法和1种荧光PCR方法,对66株变形杆菌属鉴定,与传统分离培养法和全自动微生物分析系统检测法进行比较研究,结果如... 详细信息

针对食源性变形杆菌属食物中毒事件逐年上升的趋势,研究建立新型快速灵敏的变形杆菌属检测鉴定方法。通过建立3种常规PCR方法和1种荧光PCR方法,对66株变形杆菌属鉴定,与传统分离培养法和全自动微生物分析系统检测法进行比较研究,结果如下: 根据1961-2007年发表的218篇关于264起变形杆菌属食物中毒案例分析,变形杆菌属食物中毒自二十世纪的80年代到90年代到目前的21世纪,呈现上升趋势,广东省和山东省为变形杆菌属食物中毒多发省份,绝大多数中毒事件都发生在夏秋季节,以城市中的饮食服务单位居多,中毒食品多为动物性食品,尤其是熟食制品,中毒菌种主要是奇异变形杆菌和普通变形杆菌。在187起变形杆菌属食物中毒的检测方法中,94.65%采用传统分离培养法,其余5.35%采用全自动微生物分析系统法,没有任何采用PCR及其它分子生物学检测方法的报道。传统分离培养法和全自动微生物分析系统检测法对66株样本分离菌株的鉴定结果全部为阳性,鉴定结果与中山大学附属第三医院和暨南大学附属第一医院菌种鉴定保存的结果一致,符合率100%,验证了变形杆菌属菌种的真实性。选取atpD基因和tuf基因作为靶序列,设计了3对特异性引物,分别建立了3种相应的检测变形杆菌属的常规PCR法,对3株变形杆菌属标准菌株、66株样品分离株及13株非变形杆菌属菌株进行扩增实验,结果显示,3种常规PCR法对3株标准菌株和66株样品分离株的检测结果均为阳性,13株非变形杆菌属菌株检测结果均为阴性。鉴定结果与传统分离培养法和全自动微生物分析系统检测法结果完全一致,但检测时间仅为6-8 h,其检测速度、灵敏度和特异性表现出独特的优势。基于atpD基因设计1对特异性引物,建立了1种SYBR GreenⅠ荧光PCR法,用于检测变形杆菌属,其鉴定结果与常规PCR方法完全一致,但本方法所耗时间仅为1-2 h,表现出更优的特异性、重现性和灵敏度,并且操作更为简便。对8条变形杆菌属菌株atpD基因测序,其结果与Genbank中变形杆菌属atpD基因序列不同,本文所测基因序列是截至目前为止尚未公开的新的变形杆菌属atpD基因序列。综上所述,本文所建立的3种常规PCR方法和1种荧光PCR方法都可作为快速检测鉴定变形杆菌属的可选方法。

关键词：食源性致病菌变形杆菌属聚合酶链反应荧光PCR

致羔羊肺炎奇异变形杆菌的分离鉴定及毒力性和耐药性分析

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北方牧业 2024年第10期 14-14页

作者：袁丽宁马玉忠刘月杨威河北农业大学动物医学院河北保定071000 河北省畜牧兽医研究所河北保定071000

近年来,随着抗生素在生产中长期不规范使用,细菌耐药现象越来越严重。奇异变形杆菌属于肠杆菌科变形杆菌属的革兰氏阴性菌,对奇异变形杆菌感染羔羊并引起肺炎的相关报道较少。本研究对保定地区以肺炎为主要症状的患病羔羊进行剖检,采集... 详细信息

近年来,随着抗生素在生产中长期不规范使用,细菌耐药现象越来越严重。奇异变形杆菌属于肠杆菌科变形杆菌属的革兰氏阴性菌,对奇异变形杆菌感染羔羊并引起肺炎的相关报道较少。本研究对保定地区以肺炎为主要症状的患病羔羊进行剖检,采集病变组织进行奇异变形杆菌的分离鉴定,并检测其致病性、耐药性及毒力基因和耐药基因的携带情况,以期为致羔羊肺炎性奇异变形杆菌的防控和治疗提供参考。

关键词：奇异变形杆菌毒力基因耐药基因变形杆菌属羔羊肺炎病变组织肠杆菌科保定地区

变形杆菌属对抗生素的敏感性取决于其分离部位和菌种

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国外医药(抗生素分册) 1988年第4期 271-272页

作者： Нехорошева АГ 于守汎

目前革蓝氏阴性条件致病菌包括变形杆菌属在感染性疾病的发展过程、合并各种病因的合并症和住院期间创口的污染上起重要作用。这些细菌的特点是对化学抗菌药物具有多重性高度耐药性,因而使此种细菌感染的抗菌疗法发生了很大困难。

关键词：奇异变形杆菌耐药性抗药性抗生素菌种变形菌属肠杆菌科变形杆菌属敏感性