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中国药科大学学报 2013年第2期44卷 182-187页

作者：唐建兴王维胜季晖刘景根中国药科大学药理学教研室南京210009 中科院上海药物研究所新药研究国家重点实验室上海201203

γ-氨基丁酸(GABA)能中间神经元是中枢神经系统内主要的抑制性神经递质突触前释放源,GABA能神经元控制整个神经网络。介导GABA能神经元中枢效应的受体至少包括GABAA型和GABAB型两大类,前者属于受体门控通道超家族成员,后者属G蛋白连接... 详细信息

γ-氨基丁酸(GABA)能中间神经元是中枢神经系统内主要的抑制性神经递质突触前释放源,GABA能神经元控制整个神经网络。介导GABA能神经元中枢效应的受体至少包括GABAA型和GABAB型两大类,前者属于受体门控通道超家族成员,后者属G蛋白连接受体超家族成员;介导动物大脑中大多数快速型突触抑制的主要是GABAA型受体。本文归纳了近年来对GABAA型受体转运胞内调节分子机制的研究工作,讨论了受体翻译后修饰、辅助蛋白、骨架蛋白和酶体等分子在该转运过程中所发挥的作用,对GABAA型受体转运失调在相关神经精神性疾病中的研究进展进行了综述。

关键词： GABAA受体受体转运睡眠障碍癫痫药物滥用

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全身麻醉药物对γ-氨基丁酸A受体作用的研究进展

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神经解剖学杂志 2019年第2期35卷 212-216页

作者：李隆渝罗天元余守洋喻田遵义医科大学贵州省普通高等学校脑科学特色重点实验室贵州省麻醉与器官保护基础研究重点实验室遵义563000

全身麻醉药物通过调控中枢神经系统中的离子通道,特别是γ-氨基丁酸A受体(GABAARs),进而产生一系列的药理学效应。而GABAARs各种亚型的区域分布和药理特异性都是不同的,并且麻醉本身可能会使包括GABAARs在内的离子通道表达改变。可见全... 详细信息

全身麻醉药物通过调控中枢神经系统中的离子通道,特别是γ-氨基丁酸A受体(GABAARs),进而产生一系列的药理学效应。而GABAARs各种亚型的区域分布和药理特异性都是不同的,并且麻醉本身可能会使包括GABAARs在内的离子通道表达改变。可见全身麻醉药物对GABAARs的作用是复杂而重要的。深入探讨全身麻醉药物对GABAARs各亚型的影响,阐述不同受体亚型表达的区域分布和药理特异性在全身麻醉中的不同作用,能更合理地解释全麻机制,对临床应用和开发新一代药物具有借鉴作用。

关键词： γ-氨基丁酸A受体受体转运 tonic抑制麻醉

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水杨酸钠的耳毒性机制研究 ——AMPA受体在SGN兴奋毒性中的表达

水杨酸钠的耳毒性机制研究 ——AMPA受体在SGN兴奋毒性中的表达

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作者：叶文华广西医科大学

学位级别：硕士

目的:观察大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(Spiral Ganglion Neuron,SGN)AMPAR(α-氨-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体)各亚单位m RNA表达水平与大脑皮层神经元表达差异;观察水杨酸钠(Sodium Salicylate,SS)作用SGN后,AMPA受体亚单位m RNA及... 详细信息

目的:观察大鼠耳蜗螺旋神经节神经元(Spiral Ganglion Neuron,SGN)AMPAR(α-氨-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体)各亚单位m RNA表达水平与大脑皮层神经元表达差异;观察水杨酸钠(Sodium Salicylate,SS)作用SGN后,AMPA受体亚单位m RNA及蛋白表达情况,以探讨AMPA受体在SGN兴奋毒性中的作用。方法:急性分离培养原代SGN,采用免疫荧光技术检测SGN中AMPA受体定位的表达;生理状态下培养大脑皮层神经元后采用FQ-PCR技术,检测SGN和大脑皮层神经元中AMPAR各亚单位m RNA的表达;将急性分离培养的原代SGN分为正常对照组和药物处理组,采用FQ-PCR和Western Blot技术检测SGN中AMPA受体亚单位m RNA与蛋白表达的改变。结果:免疫荧光显示,SGN胞体和轴突上均有AMPAR的表达。FQ-PCR发现,(1)SGN及大脑皮层神经元中AMPA受体各亚单位Glu A1、Glu A2、Glu A3和Glu A4(简称A1、A2、A3、A4)均有表达。其中SGN中除A2和A4的表达量差异无统计学意义(P>0.05)外,其余亚单位之间表达量差异具有显著意义(P受体各亚单位表达量呈:A3>A2/A4>A1。在大脑皮层神经元中,AMPA受体各亚单位之间表达量差异均具有统计学意义(PA3>A1>A4。SGN与大脑皮层神经元的比较发现,A1、A2的表达量低于大脑皮层神经元,A3、A4的表达量高于大脑皮层神经元(P0.05);随后在1h,3h和6h各亚单位之间m RNA表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)5m MSS作用后,30min时,AMPA受体全部亚单位表达量均降低(P受体各亚单位表达,可能Glu A2/A3组合为主的功能型受体。(2)在SS致SGN兴奋毒性中,主要的功能型AMPA受体发生内化。

关键词：水杨酸钠耳蜗螺旋神经节神经元兴奋毒性 AMPA受体受体转运

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钙黏蛋白氨基酸突变导致昆虫细胞对Bt毒素产生抗性的分子机理

钙黏蛋白氨基酸突变导致昆虫细胞对Bt毒素产生抗性的分子机理

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作者：戴晴华中师范大学

学位级别：硕士

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)产生的杀虫晶体蛋白,可以安全有效的杀死农业和卫生害虫。棉铃虫是一种对棉花等多种作物造成严重损害的多食性农业害虫,每年都会给全球农业造成重大的经济损失。世界范围内广泛种植Bt转基因棉来... 详细信息

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)产生的杀虫晶体蛋白,可以安全有效的杀死农业和卫生害虫。棉铃虫是一种对棉花等多种作物造成严重损害的多食性农业害虫,每年都会给全球农业造成重大的经济损失。世界范围内广泛种植Bt转基因棉来控制棉铃虫等害虫。但是Bt毒素的长期大规模使用导致昆虫对Bt毒素产生了抗性,极大地降低了 Bt转基因作物和Bt产品对害虫的有效防控。关于昆虫对Bt毒素的抗性机制,有些已经明确,如:早期翻译终止;Cry毒素受体的基因表达降低或者Cry毒素与受体的亲和力下降;有些机制尚不明确。前期另一研究组(中国农业科学院植物保护研究所吴孔明老师组)发现,与敏感棉铃虫96S相比,抗性棉铃虫96CAD的Cry1Ac抗性与钙黏蛋白的基因位点密切连锁。通过氨基酸序列比对,发现96CAD中的钙黏蛋白(mHaCAD)与96S(HaCAD)钙黏蛋白有35个差异氨基酸。离体实验表明Cry1Ac毒素与敏感和抗性棉铃虫中钙黏蛋白的结合是相似的,而且钙黏蛋白在两种棉铃虫中的表达在mRNA水平没有显著差异。但是抗性机理尚不清楚。本研究发现mHaCAD蛋白在96CAD中肠上皮细胞刷状缘膜上的分布明显低于96S品系。将96S和96CAD中的钙黏蛋白分别在Hi5细胞中表达,通过免疫荧光技术发现96S-HaCAD蛋白主要分布于细胞膜上,96CAD-mHaCAD蛋白主要滞留在内质网上。通过片段替换,结合免疫荧光技术,发现导致抗性棉铃虫的钙黏蛋白在细胞中差异分布的机制是第172个氨基酸(D172G)发生了突变。这些结果表明钙黏蛋白在细胞中分布的改变,可能导致是细胞对Cry1Ac毒素产生高抗性的原因之一。虽然昆虫的中肠上皮细胞微绒毛膜中缺少钙黏蛋白等受体蛋白,是公认的昆虫对Bt杀虫晶体蛋白产生抗性的机制。但是本研究发现细胞膜上的Bt受体蛋白转运的改变可导致细胞膜上受体的减少,这是以前没有报道的一种新的Bt抗性机制。此外,本文还发现人工缺失敏感棉铃虫钙黏蛋白的不同结构域之后,虽然一些突变体在细胞中的定位没有发生明显的变化,但是如果缺失近膜区,毒素结合区,部分钙离子结合区域,瞬时表达这些突变体的细胞对Cry1Ac毒素的敏感性显著降低。这表明钙黏蛋白的多种突变都可以导致昆虫对Cry1Ac毒素产生高水平抗性。

关键词：苏云金芽胞杆菌棉铃虫 Cry1Ac抗性钙黏蛋白受体转运

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