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中华医学杂志 2016年第48期96卷 3898-3901页

作者：俞元斌何荣新浙江大学医学院附属第二医院骨科杭州310009

目的探索重组甲状旁腺素[rhPTH（1—34）]间断注射对磨损颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解的抑制作用。方法选择8周龄C57BL／J6小鼠48只，数字随机分为空白对照组、钛颗粒对照组、低剂量rhPTH组及高剂量rhPTH组（每组12只）。利用钛颗粒建立颅... 详细信息

目的探索重组甲状旁腺素[rhPTH（1—34）]间断注射对磨损颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解的抑制作用。方法选择8周龄C57BL／J6小鼠48只，数字随机分为空白对照组、钛颗粒对照组、低剂量rhPTH组及高剂量rhPTH组（每组12只）。利用钛颗粒建立颅骨骨溶解模型，空白对照组及钛颗粒对照组术后手术区域局部注射生理盐水，低剂量及高剂量钛颗粒组术后分别局部注射30μg·kg-1·d-1及60μg·kg-1·d-1 rhPTH（1．34），每周间断注射3次。间断注射2周后处死实验动物，收集颅骨组织及外周血。采用计算机断层扫描（micro—CT）分析标本骨溶解程度，运用实时（real-time）聚合酶链反应（PCR）及ELISA技术分析颅骨组织及外周血中骨保护素（OPG），核因子KB受体活化因子配体（RANKLigand，RANKL）基因及蛋白的表达情况。结果rhPTH局部注射显著抑制了钛颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解程度。与钛颗粒对照组对比，rhPTH（1—34）明显促进OPGmRNA及蛋白的表达，rhPTH治疗组RANKIMOPG比值明显低于钛颗粒对照组（P〈0．05）。结论rhPTH（1—34）可有效抑制颗粒诱导小鼠骨溶解。

关键词：甲状旁腺素核因子xB 受体激活剂配体骨保护素

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吡格列酮对RANKL联合M-CSF体外诱导的人破骨样细胞MMP-9 mRNA表达的影响

吡格列酮对RANKL联合M-CSF体外诱导的人破骨样细胞MMP-9 mRNA表达...

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作者：祝捷安徽医科大学

学位级别：硕士

目的探讨吡格列酮(pioglitazone)对核因子NF-κB受体激活剂配体(receptor activator of NF-κB ligand , RANKL)联合巨噬细胞集落刺激因子(macrophage-colony stimulating factor,M-CSF)诱导的人破骨样细胞(osteoclast-like cells,OLCs)基质金属蛋白酶-9 (matrix metalloproteinase-9,MMP-9) mRNA表达的影响。方法从人外周血以密度梯度离心法分离出单个核细胞贴壁培养,之后以RANKL(50 ng/mL)联合M-CSF(25 ng/mL)进行诱导。14天后使用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法以及扫描电镜观察骨片以鉴定细胞是否具有破骨细胞的特征。诱导成功后再使用不同浓度的吡格列酮(0,10-5 ,10-6,10-7mol/l)继续干预培养48小时,之后收集各组细胞,使用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测各组MMP-9 mRNA的表达变化。结果(1) RANKL联合M-CSF诱导生成的细胞形态具备破骨细胞的特征,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性,具有在骨片上形成骨吸收陷窝的能力。(2) RT-PCR检测结果显示:人破骨样细胞能够表达MMP-9 mRNA。(3)在各浓度吡格列酮(10-5 ,10-6,10-7mol/l)干预培养48小时后,MMP-9 mRNA表达均较空白对照组显著下降(P<0.01),各不同浓度吡格列酮干预组之间的MMP-9 mRNA表达也有显著差异(P<0.01)。结论RANKL联合M-CSF诱导可以从人外周血中诱导出破骨样细胞。诱导所得的人破骨样细胞能够表达MMP-9 mRNA。吡格列酮可以抑制人破骨样细胞MMP-9 mRNA的表达,且存在浓度依赖性。

关键词：吡格列酮核因子 NF-κB 受体激活剂配体巨噬细胞集落刺激因子破骨样细胞基质金属蛋白酶-9

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破骨细胞在多发性骨髓瘤发病中的作用

破骨细胞在多发性骨髓瘤发病中的作用

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作者：张建华苏州大学

学位级别：硕士

骨质破坏是多发性骨髓瘤(MM)突出的床表现之一,与疾病的预后直接相关。业已证实,破骨细胞(OC)在MM骨病发生中发挥重要的调控作用,MM细胞浸润部位OC及其介导的溶骨性骨重吸收明显增加,骨重吸收增加使细胞外基质释放多种细胞因子促进MM细... 详细信息

骨质破坏是多发性骨髓瘤(MM)突出的床表现之一,与疾病的预后直接相关。业已证实,破骨细胞(OC)在MM骨病发生中发挥重要的调控作用,MM细胞浸润部位OC及其介导的溶骨性骨重吸收明显增加,骨重吸收增加使细胞外基质释放多种细胞因子促进MM细胞生长,从而在骨质破坏与MM进展之间形成恶性循环。因此,阐明骨质破坏及肿瘤进展之间的分子机制将为MM治疗、提高MM患者生存期及生存质量提供更好的选择。近年来研究发现,核因子κB受体激活剂配体(RANKL)为OC生成及激活的关键调控因子,然而MM细胞是否直接表达或产生RANKL尚有争议。人骨髓中的间充质干细胞是具有多重功能的干细胞, MM患者的骨髓间充质细胞异常表达的黏附分子及细胞因子对MM细胞的生长是必需的。近年来,将人胚胎股骨植入SCID小鼠皮下建立的SCID-人鼠模型已成功运用于MM发病机制、治疗以及并发症等方面的研究,而对人胚胎骨髓间充质干细胞(hFMSC)的生长特性研究甚少。目的研究体外不同培养体系中MM细胞对OC生成的影响;人骨髓瘤细胞系(HMCL)是否表达RANKL及护骨素(OPG);MM细胞对骨髓基质细胞(BMSC)表达RANKL/OPG的影响;正常人破骨细胞体外分离培养的可行性及与MM细胞之间的相互作用;hFMSC的体外分离培养、鉴定、成骨成脂分化潜能,以及MM细胞对其表达RANKL/OPG的影响。方法MM细胞与破骨细胞前体(pOC)在不同培养体系共培养后行TRAP染色;RT-PCR检测MM细胞对RANKL/OPG的表达及MM细胞对BMSC及hFMSC表达RANKL/OPG的影响;分离外周血单个核细胞(PBMC)体外培养形成OC;PI染色流式细胞仪(FCM)检测OC对MM细胞增殖周期的影响;Annexin-V/PI标记检测OC对MM细胞存活的影响;体外分离培养hFMSC,FCM检测其免疫表型,von Kossa染色及油红O染色观察hFMSC向成骨细胞及脂肪细胞分化。结果8226及XG1均可直接促进pOC向TRAP+多个核的OC分化,且共培养后8226及XG1细胞明显增殖;8226、XG1及XG7均不表达RANKL及OPG mRNA,8226

关键词：多发性骨髓瘤破骨细胞核因子κB 受体激活剂配体人胚胎骨髓间充质干细胞

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RANK/RANKL/OPG系统在骨性关节炎与骨质疏松相关性中的作用机制

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中国中医骨伤科杂志 2019年第1期27卷 86-88页

作者：陈瀚宇徐颖鹏李鼎鹏白璧辉田伟中国中医科学院广安门医院北京100053 甘肃省中医院首都医科大学附属北京医院

骨性关节炎(Osteoarthritis,0A)是一种以骨关节软骨退变和继发性骨质增生为特点的慢性疾病[1],研究发现60岁以上OA的发病率为50%,致残率高达53%[2].骨质疏松症(Osteoporosis,OP)是以骨量减少、骨的微观结构退化为特征,致使骨的脆性增加... 详细信息

骨性关节炎(Osteoarthritis,0A)是一种以骨关节软骨退变和继发性骨质增生为特点的慢性疾病[1],研究发现60岁以上OA的发病率为50%,致残率高达53%[2].骨质疏松症(Osteoporosis,OP)是以骨量减少、骨的微观结构退化为特征,致使骨的脆性增加,以致易于发生骨折的一种全身性骨骼疾病[3],全世界骨质疏松症患者总数已超过2亿[4]。

关键词：受体激活剂受体激活剂配体骨保护素骨性关节炎骨质疏松

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RANKL/OPG在骨髓瘤中的表达

RANKL/OPG在骨髓瘤中的表达

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第十一届山西省血液病学术年会暨国家级及山西省继续医学教育学习班

作者：张建华杨林花山西医科大学第二医院血液科

目的:骨质破坏是多发性骨髓瘤(MM)突出的临床表现之一,核因子κB受体激活剂配体(RANKL)/护骨素(OPG)系统在MM骨病发生中发挥重要作用,然而MM是否直接表达或产生RANKL尚有争议。研究RANKL/OPG在骨髓瘤中的表达情况。

关键词：骨髓瘤核因子κB 受体激活剂配体护骨素

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