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鳜不同亚型瘦素受体基因克隆与表达分析

华中农业大学学报 2021年第4期40卷 157-165页

作者：魏君冉梁旭方徐晶蔡文静华中农业大学水产学院/华中农业大学鳜鱼研究中心/农业农村部淡水生物繁育重点实验室/湖北省名优鱼育种与健康养殖工程技术研究中心武汉430070

以鳜(Siniperca chuatsi)为研究对象,使用cDNA 3′末端快速克隆法扩增瘦素受体基因(lepr)cDNA序列,获得了由mRNA 3′端可变剪切产生的鳜lepr的4个不同亚型,包括编码序列(coding sequence,CDS)长度为3474 bp、编码1157个氨基酸的长型受... 详细信息

以鳜(Siniperca chuatsi)为研究对象,使用cDNA 3′末端快速克隆法扩增瘦素受体基因(lepr)cDNA序列,获得了由mRNA 3′端可变剪切产生的鳜lepr的4个不同亚型,包括编码序列(coding sequence,CDS)长度为3474 bp、编码1157个氨基酸的长型受体亚型lepr-L,以及3个短型受体亚型lepr-S1、lepr-S2和lepr-S3,CDS长度分别为1512、945和915 bp,分别编码503、314、304个氨基酸。对氨基酸序列进行结构域分析和多重比对发现,鳜lepr长型受体亚型包含完整的功能域,短型受体亚型无跨膜区及胞内结构,鳜lepr及其leptin结合域(leptin binding domain,LBD)序列保守程度高。鳜lepr在鳃中表达最高,其次是肾和垂体,腹腔注射鳜leptin B而非leptin A的同源重组蛋白2 h后引起脑lepr表达量的升高(P<0.05)。以上结果表明,鳜leptins能引起组织中lepr表达的不同变化而发挥独特的生理功能。

关键词：鳜瘦素受体 RACE 基因克隆基因功能摄食调控受体亚型饱食因子

M3受体亚型介导内毒素诱导兔离体肺动脉舒张反应的研究

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中国呼吸与危重监护杂志 2016年第5期15卷 506-510页

作者：索良源于泓波张锦中国医科大学肿瘤医院辽宁省肿瘤医院麻醉科辽宁沈阳110042 沈阳市骨科医院麻醉科辽宁沈阳110044 中国医科大学附属盛京医院麻醉科辽宁沈阳110004

目的探讨M毒蕈碱受体（muscarinic receptor M）亚型M3对内毒素诱导的肺动脉环张力的调节作用及在内毒素作用下M3受体的变化,以探讨感染性休克肺动脉血管反应性改变的机制。方法选择健康雄性新西兰大白兔26只,体重2.0-2.5 kg,随机分2... 详细信息

目的探讨M毒蕈碱受体（muscarinic receptor M）亚型M3对内毒素诱导的肺动脉环张力的调节作用及在内毒素作用下M3受体的变化,以探讨感染性休克肺动脉血管反应性改变的机制。方法选择健康雄性新西兰大白兔26只,体重2.0-2.5 kg,随机分2组：盐水加达非那新正常组（N组,n=45）,内毒素加达非那新组（L组,n=48）。通过离体血管环技术观察正常及M3受体亚型阻断剂达非那新不同剂量（100、10、1、0.1和0.01μmol/L）分别预孵育后血管对苯肾上腺素（PE1μmol/L）及乙酰胆碱（ACH 1、10和100μmol/L）的张力变化。结果（1）正常组肺动脉对ACH累计曲线的舒张百分比分别为（0.095±0.034）%,（0.150±0.036）%,（0.445±0.090）%,用内毒素（4μg/m L,4 h）处理后分别为（0.044±0.016）%,（0.093±0.029）%,（0.311±0.028）%。（2）达非那新对不同浓度ACH（1、10和100μmol/L）反应得出的EC50值分别为正常组1.483、2.757和2.958,内毒素组6.015、6.242和6.411。（3）达非那新对不同浓度的ACH（1、10和100μmol/L）反应得出的内在活性a值分别为正常组0.014 6、0.032 3和0.082 5,内毒素组0.012 4、0.024 5和0.055 6。结论内毒素孵育降低了肺动脉对ACH的舒张反应,M3受体亚型介导了此舒张反应;内毒素减低了M3受体亚型的内在活性。内毒素使M3受体亚型内在活性降低是内毒素作用下肺动脉对ACH舒张反应降低的作用机制之一,也可能是感染性休克时肺动脉高压形成的作用机制之一。

关键词：舒张反应 M3受体内在活性内毒素休克内毒素诱导感染性休克受体亚型阻断剂血管反应性毒蕈碱受体

血管内皮生长因子受体1及其可溶性受体亚型在血管新生中的作用

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中华糖尿病杂志 2015年第7期7卷 457-460页

作者：王瑜贾黎静黄沙姜玉峰王鸿博支忠继河北医科大学第三医院内分泌科石家庄050000 解放军第三0四医院基础实验室

血管新生是指从原有的血管内皮细胞增殖、游走，形成新的血管网，并在原来存在的血管结构上长出新血管的生物学过程。血管新生参与体内许多重要生理和病理进程的发生发展。正常情况下血管新生仅发生在胚胎发育期（胚胎发育早期涉及血管... 详细信息

血管新生是指从原有的血管内皮细胞增殖、游走，形成新的血管网，并在原来存在的血管结构上长出新血管的生物学过程。血管新生参与体内许多重要生理和病理进程的发生发展。正常情况下血管新生仅发生在胚胎发育期（胚胎发育早期涉及血管发生，即血管从无到有的过程），

关键词：血管内皮生长因子受体1 血管新生受体亚型可溶性血管内皮细胞增殖胚胎发育期生物学过程血管结构

雌激素受体相关受体亚型在卵巢癌中的表达及其与预后的关系

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中华妇产科杂志 2005年第8期40卷 544-548页

作者：孙蓬明魏丽惠 Jalid Sehouli Carsten Denkert 赵丹高敏孙秀丽 Werner Litchtenegger 北京大学人民医院妇科 100044 Department of Obstetric&Gynecology Campus Virchow KlninkumCharite Universitatmedizin BerlinGermany Institute of Pathology CampusMitteHumboldt UniversitatGermany

目的探讨雌激素受体相关受体(ERRs)亚型α、β、γ在卵巢癌中的表达及其与预后的关系。方法激光共聚焦显微镜观察ERRα蛋白在卵巢癌细胞株SKOV3和OVCAR3细胞内的定位。RT-PCR技术检测33份卵巢癌组织以及12份正常卵巢组织中3种ERRs亚型的... 详细信息

目的探讨雌激素受体相关受体(ERRs)亚型α、β、γ在卵巢癌中的表达及其与预后的关系。方法激光共聚焦显微镜观察ERRα蛋白在卵巢癌细胞株SKOV3和OVCAR3细胞内的定位。RT-PCR技术检测33份卵巢癌组织以及12份正常卵巢组织中3种ERRs亚型的mRNA表达,并结合临床病理指标分析其预后情况。结果ERRα蛋白主要分布于SKOV3和OVCAR3细胞的细胞核内。卵巢癌组织中ERRαmRNA的阳性表达率(58%)和ERRγmRNA的阳性表达率(48%)显著高于正常卵巢组织(分别为17%和33%,P<0.05);ERRβmRNA的阳性表达率在卵巢癌组织和正常卵巢组织中都很低(分别为9%和0),两者比较,差异无统计学意义(P=0.795)。ERRαmRNA的阳性表达与卵巢癌的手术病理分期(r=0.639,P=0.017)、病理分级(r=0.520,P=0.022)呈正相关。ERRαmRNA阳性表达的卵巢癌患者,其中位数整体生存时间(19.0个月)明显短于ERRαmRNA阴性表达患者(31.5个月,P=0.015),但两者间的无瘤生存时间(分别为12.6和14.5个月)比较,差异无统计学意义(P=0.820);ERRγmRNA阳性表达患者的中位数无瘤生存时间(18.0个月)显著长于ERRγmRNA阴性表达患者(13.5个月,P=0.020),但两者间中位数整体生存时间(分别为23.4和19.6个月)比较,差异无统计学意义(P=0.093)。结论ERRα蛋白主要表达于卵巢癌细胞核内。ERRαmRNA高表达与卵巢癌患者的预后差有关,而ERRγmRNA高表达可能提示患者预后较好。

关键词：卵巢肿瘤受体,雌激素肿瘤标记,生物学卵巢癌细胞株雌激素受体受体亚型相关受体预后差表达及 mRNA表达

大鼠输尿管中α_1肾上腺素能受体亚型的分布特征

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中国兽医学报 2010年第6期30卷 822-824页

作者：梁春宇高建邦张培因段志雄潘日润中国人民解放军第208医院泌尿外科吉林长春130062 吉林大学基础医学院吉林长春130021

采用放射配基结合法,利用GraphPad PRISM5.01软件计算出受体及其亚型的密度,从而比较α1肾上腺素能受体(α1-AR)亚型在大鼠输尿管各段中的分布情况。α1-AR在大鼠输尿管各段的结合位点是非均匀分布的,下段输尿管的Bmax为(14911±1253)pm... 详细信息

采用放射配基结合法,利用GraphPad PRISM5.01软件计算出受体及其亚型的密度,从而比较α1肾上腺素能受体(α1-AR)亚型在大鼠输尿管各段中的分布情况。α1-AR在大鼠输尿管各段的结合位点是非均匀分布的,下段输尿管的Bmax为(14911±1253)pmol/g,明显高于上段(9077±211)pmol/g及中段(9164±158)pmol/g,上段与中段的分布差别不显著。粗制膜标本经过CEC预温育后,α1-AR与[125I]-HEAT的最大结合容量Bmax比对照组下降约64%。在有α1-AR亚型高特异性拮抗剂(5-MU,Cyclazosin,BMY7378)存在时α1-AR与[125I]-HEAT的最大结合容量Bmax均有不同程度的下降。放射性配基结合试验结果显示,α1-AR在输尿管下段的密度要高于上段及中段,但Kd值及Hill系数并没有区别。通过单点竞争抑制反应表明,大鼠输尿管中存在3种α1-AR亚型,即α1A-AR、α1B-AR和α1D-AR亚型,但是α1D-AR亚型与α1A-AR亚型的分布要明显多于α1B-AR亚型,而α1D-AR亚型分布略高于α1A-AR亚型。

关键词：大鼠输尿管肾上腺素能受体受体亚型

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卵巢上皮性癌组织中雌激素受体亚型的表达

四川大学学报（医学版） 2006年第4期37卷 606-610页

作者：韩丽萍董子明乔玉环 Jahn M.Nesland 索振河郑州大学第一附属医院妇产科郑州450052 郑州大学基础医学院病理生理学教研室挪威奥斯陆大学肿瘤医院病理科

目的探讨雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型ERα及ERβ蛋白在卵巢上皮性癌中的表达及其与临床病理学因素及生存的关系。方法应用免疫组化法对118例卵巢上皮性癌组织进行ERα及ERβ检测,对其中10例ERα及ERβ阳性表达的冰冻组织标本... 详细信息

目的探讨雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型ERα及ERβ蛋白在卵巢上皮性癌中的表达及其与临床病理学因素及生存的关系。方法应用免疫组化法对118例卵巢上皮性癌组织进行ERα及ERβ检测,对其中10例ERα及ERβ阳性表达的冰冻组织标本,应用激光捕获显微切割技术(laser capture m icod issection,LCM)捕获卵巢癌细胞,应用W estern印迹分析方法检测其蛋白表达水平。结果118例卵巢上皮性癌组织中ERα表达为0级32例(27.1%),1级表达20例(16.9%),2级表达17例(14.4%),3级表达49例(41.5%);ERβ表达为0级表达1例(0.8%),1级表达7例(5.9%),2级表达13例(11%),3级表达97例(82.2%)。ERα蛋白表达在卵巢癌患者不同的年龄、组织学类型、F IGO分期、组织分化程度以及残余肿瘤大小间差异无统计学意义(P>0.05);ERβ蛋白表达在卵巢癌患者的年龄、F IGO分期、残余肿瘤大小间差异无统计学意义(P>0.05),在不同组织分化程度间差异有统计学意义,低分化者显著高于中、高分化者(P0.05),在ERβ表达各组间比较差异有统计学意义,强表达组生存期明显缩短(P<0.05)。W estern印迹结果与免疫组化结果一致。结论卵巢上皮性癌组织以ERβ表达为主,ERβ蛋白表达与组织分化程度有关。

关键词：雌激素受体受体亚型卵巢肿瘤免疫组织化学 Western印迹

美乐托宁受体MT_2亚型选择性配体的研究进展

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中国新药杂志 2012年第19期21卷 2265-2271页

作者：万宁巨佳刘道洲杜江波周四元张邦乐第四军医大学药学院西安710032

美乐托宁受体广泛存在于中枢神经系统以及机体其他组织中,其内源性配体美乐托宁可作用于不同亚型受体(MT1,MT2和MT3),参与调节机体的不同生理功能。由于美乐托宁自身无亚型选择性,因此不同亚型受体的选择性配体研究对亚型受体的生理作... 详细信息

美乐托宁受体广泛存在于中枢神经系统以及机体其他组织中,其内源性配体美乐托宁可作用于不同亚型受体(MT1,MT2和MT3),参与调节机体的不同生理功能。由于美乐托宁自身无亚型选择性,因此不同亚型受体的选择性配体研究对亚型受体的生理作用和新药研发具有重要意义。本文对研究得较为成熟的MT2受体选择性配体研究做一综述,通过探讨配体结构与亲和性和选择性之间的关系,为美乐托宁受体亚型配体的开发研究提供指导。

关键词：美乐托宁受体亚型选择性配体

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α_1-肾上腺素受体亚型的分布及特点

中国医院药学杂志 2007年第12期27卷 1728-1731页

作者：吴虹孙银香南昌市第一医院药剂科江西南昌330008 珠海市人民医院广东珠海519000

近年来,运用分子生物学技术、放射配体结合技术、拮抗剂功能分析等手段,深入研究α1-肾上腺素受体亚型的分类、分布、受体蛋白结构等方面内容并取得很大进展。现将近几年研究状况综述如下。

关键词： α1-肾上腺素受体受体亚型蛋白结构分布特点

糖皮质激素四种受体亚型在系统性红斑狼疮表达特征及剪接子30c、40对其表达的调控

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糖皮质激素四种受体亚型在系统性红斑狼疮表达特征及剪接子30c、4...

作者：关艳春大连医科大学

学位级别：硕士

目的：研究系统性红斑狼疮（Systemic lupus erythematosus，SLE）患者糖皮质激素受体（Glucocorticoid receptor，GR）α、β、γ、P亚型表达特征，研究SLE患者糖皮质激素（Glucocorticoid，GC）抵抗时受体亚型表达变化，同时探索富含... 详细信息

目的：研究系统性红斑狼疮（Systemic lupus erythematosus，SLE）患者糖皮质激素受体（Glucocorticoid receptor，GR）α、β、γ、P亚型表达特征，研究SLE患者糖皮质激素（Glucocorticoid，GC）抵抗时受体亚型表达变化，同时探索富含丝氨酸/苏氨酸蛋白家族（Serine/arginine-rich protein，SRp）30c、40对GR亚型表达的转录调控作用及与GC抵抗的相关性。方法：收集2009年10月至2012年6月就诊和入住大连医科大学附属第一医院风湿科的SLE患者70例（女性65例，男性5例，中位年龄42岁）。依据入院时SLE疾病活动度评分（Systemic lupus erythematosusdisease activity index， SLEDAI）分为低活动组（32例，女性29例，男性3例，中位年龄41.5岁，SLEDAI评分≤10）和高活动组（38例，女性36例，男性2例，中位年龄43岁，SLEDAI评分>10）。所有患者接受醋酸泼尼松（0.5-1mg/kg/d，连续4周）为主治疗，依据GC疗效分为敏感组（56例，女性52例，男性4例，中位年龄46岁）和抵抗组（14例，女性13例，男性1例，中位年龄40岁）。38例健康志愿者（女性35例，男性3例，中位年龄40岁）作为正常对照，通过实时荧光定量SYBR GreenI法检测受试者外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）内GRα、β、γ、P和SRp30c、40的mRNA表达， β-actin为内参。临床注册号：ChiCTR-RCH-12002808。结果： 1.对照组四种GR亚型mRNA表达呈以下趋势： GRα> GRγ>GRP>GRβ，表达量占四种GR总和的百分比分别为66.20%、19.37%、14.20%、0.23%;SLE组四种GR亚型mRNA表达呈以下趋势：GRα>GRP>GRγ>GRβ，表达量占四种GR总和的百分比分别为59.88%、26.06%、14.02%、0.04%;SLE组GRα、 GRβ、 GRγ的表达低于对照组，GRβ在SLE组显著低于对照组（0.68×10-2v4.10×10-2， P=0.002）。GRP的表达明显高于正常对照（4.64v2.56， P=0.004）。 2.四种GR亚型表达在抵抗组均低于敏感组， GRα表达显著低于敏感组（8.79v17.34， P=0.050）。GRα表达与治疗前SLEDAI评分呈明显负相关（r=-0.289，P=0.021）。 3.GRγ亚型表达无论在SLE组与健康对照组的比较中还是在敏感组和抵抗组的比较中差异均无统计学意义（2.50v3.49，P=0.294;3.72v3.27， P=0.724）。 4.SRp30c、40表达在抵抗组均低于敏感组，SRp40表达显著低于敏感组（55.55v72.29， P=0.039），SLE患者中GRα表达与SRp40表达呈显著的正相关（r＝0.444，P＜0.001）。结论： 1. SLE患者与正常人GRα、 GRβ、 GRγ和GRP亚型中， GRα表达水平最高，是介导GC效应的主要亚型。两组四种亚型构成比明显不同，SLE患者与对照组相比GRα表达下降， GRP表达明显升高，提示SLE患者体内环境失调参与GR表达调控。 2. GRα亚型表达在高活动组及抵抗组下降尤为明显，提示GRα表达可作为评估疾病活动度及评价GC疗效的指标。 3. SRp40在敏感组表达显著高于抵抗组，且与GRα呈现明显正相关，推测提高SRp40表达可以上调GRα转录，这可能成为提高GC疗效的潜在治疗靶点。目的：研究氨磷汀对多发性骨髓瘤患者（Multiple myeloma, MM）应用硼替佐米治疗所致周围神经炎（Bortezomib-induced peripheral neuropa-thy，BiPN）的预防及缓解作用，探索氨磷汀对周围神经的保护机制，同时研究氨磷汀是否影响硼替佐米对肿瘤细胞的杀伤作用。方法：选用施万细胞（RSC-96细胞株）进行体外试验。硼替佐米按浓度梯度0、50、100、200、400、800nM分别处理RSC-96细胞5小时，CCK-8检测细胞活力，计算各浓度细胞生存率，绘制细胞生存率-浓度曲线，确定硼替佐米作用细胞的IC50值。实验分组：空白对照组（A组）、硼替佐米组（B组）、氨磷汀（浓度分别为0.5、1、2、4mM）+硼替佐米组（氨磷汀预处理30分钟，其后加入硼替佐米，依氨磷汀的浓度分别为C1、C2、C3、C4组），硼替佐米按IC50浓度实验。用CCK-8检测细胞活力;流式细胞术检测活性氧（Reactive oxygen species， ROS）水平;荧光显微镜观察外周髓鞘蛋白22（Peripheral myelin pro

关键词：系统性红斑狼疮糖皮质激素受体受体亚型剪接因子激素抵抗多发性骨髓瘤周围神经病变氨磷汀硼替佐米自噬活性氧