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Notch受体蛋白1、Delta样配体4在增生型糖尿病视网膜病变新生血管形成中的作用

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中华眼底病杂志 2017年第3期33卷 275-280页

作者：郭庆敏孟旭霞刘鹏辉周贤慧青岛大学附属医院眼科 266500 河北省眼科医院烟台业达医院眼科

目的观察Notch受体蛋白1（Notch1）、Delta样配体4（Dll4）在增生型糖尿病视网膜病变（PDR）纤维血管膜中的表达，初步探讨Notch1、Dll4在PDR新生血管形成中的作用及与血管内皮生长因子（VEGF）信号通路的关系。方法行玻璃体切割手术... 详细信息

目的观察Notch受体蛋白1（Notch1）、Delta样配体4（Dll4）在增生型糖尿病视网膜病变（PDR）纤维血管膜中的表达，初步探讨Notch1、Dll4在PDR新生血管形成中的作用及与血管内皮生长因子（VEGF）信号通路的关系。方法行玻璃体切割手术的PDR患者57例60只眼纳入研究。根据手术前是否行抗VEGF药物玻璃体腔注射将患眼分为PDR未注药组和PDR注药组，分别为30例32只眼、27例28只眼。PDR注药组患眼手术前2～7 d行雷珠单抗玻璃体腔注射治疗。选取同期非糖尿病伴特发性黄斑前膜患者18例18只眼作为对照组。于玻璃体切割手术中获得PDR纤维血管膜病理标本及黄斑前膜病理标本。应用荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫组织化学染色法检测各组病理标本中Notch1、Dll4、VEGF受体2（VEGFR2）的表达；采用苏木精-伊红染色计数突破内界膜的血管内皮细胞数量。结果免疫组织化学染色结果显示，PDR注药组、PDR未注药组病理标本中均有Notch1、Dll4、VEGFR2蛋白表达。PDR未注药组病理标本中Notch1、Dll4、VEGFR2蛋白相对表达量均高于PDR注药组，差异均有统计学意义（t=3.45、6.01、4.08，P=0.030、0.008、0.023）。PDR未注药组、PDR注药组病理标本中，突破内界膜的血管内皮细胞数量分别为（41.50±5.57）、（17.17±2.48）个，差异有统计学意义（t=9.58，P＜0.05）。RT-PCR检测结果显示，PDR未注药组（H=12.50）、PDR注药组（H=12.50）、对照组（H=12.02）病理标本中Notch1、Dll4、VEGFR2 mRNA相对表达量比较，差异均有统计学意义（P＜0.005）。其中，PDR注药组、PDR未注药组病理标本中Notch1、Dll4、VEGFR2 mRNA相对表达量显著高于对照组；与PDR未注药组比较，PDR注药组病理标本中Notch1、Dll4、VEGFR2 mRNA相对表达量均减少。Spearman相关性分析结果显示，VEGFR2与Dll4（r=0.83）、VEGFR2与Notch1（r=0.81）、Notch1与Dll4（r=0.87）之间mRNA相对表达量均呈显著正相关（P＜0.05）。结论 Notch1、Dll4在PDR纤维血管膜中的表达均高于对照组，且与VEGFR2的表达呈正相关；Notch1、Dll4在PDR新生血管的发生中发挥调节作用，其作用途径可能与VEGFR2相关。

关键词：视网膜新生血管化/病因学糖尿病视网膜病变/病理学受体,notchl 血管内皮生长因子受体2

notchl信号在乙型肝炎病毒X基因介导的肾小管上皮细胞免疫活性异常中的作用

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中华医学杂志 2013年第24期93卷 1906-1910页

作者：王轩周益袁伟杰尚明花包谨芳朱楠上海交通大学附属第一人民医院肾内科 200080

目的探讨乙型肝炎病毒x基因（HBx）转染人近端肾小管上皮细胞系HK一2细胞后对其表达notchl信号的影响，并观察notchl信号在HBx介导的肾小管上皮细胞免疫活性中的作用。方法用分子克隆的方法构建pcDNA3．1／***质粒及pcDNA3．1／myc—Not... 详细信息

目的探讨乙型肝炎病毒x基因（HBx）转染人近端肾小管上皮细胞系HK一2细胞后对其表达notchl信号的影响，并观察notchl信号在HBx介导的肾小管上皮细胞免疫活性中的作用。方法用分子克隆的方法构建pcDNA3．1／***质粒及pcDNA3．1／myc—notchl质粒，转染HK-2细胞，并应用短发卡RNA（shRNA）沉默notchl基因表达。将细胞分为7组：①正常培养组；②转染HBx空载质粒组；③转染HBx质粒组；④转染HBx质粒＋notchl空载质粒组；⑤转染HBx质粒＋notchl质粒组；⑥转染HBx质粒＋notchlshRNA空载质粒组；⑦转染HBx质粒＋notchlshRNA沉默质粒组。实时定量PCR和蛋白印迹法检测细胞中notchl受体的变化，流式细胞术检测细胞表面人主要组织相容性复合物（MHC）一II、CD40表达的变化，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清中白细胞介素（IL）-4、干扰素（IFN）一1水平。结果HK-2细胞经转染HBx基因后，可高表达HBx，notchlshRNA在HK-2细胞中的转染效率也高达70％，基因沉默有效；转染HBx基因组细胞notchl水平高于正常培养组及转染HBx空载质粒组相比，且notchl过表达组细胞表面MHC。II、CD40表达均明显高于notchl空载质粒组（9．69％±0．52％比4．90％±0．32％，21．56％±0．71％比15．74％-4-0．20％，均P〈0．05），其上清液中IL_4水平亦高于notchl空载质粒组（50．2±0．6比28．1±1．2，P〈0．05），而IFN一1水平较低（11．9-4-1．7比18．8±0．8，P〈0．05）。notchl基因沉默后上述指标结果呈相反变化。结论HBx基因转染HK-2细胞后可引起notchl表达上调；notchl又可促进细胞表面免疫分子的表达，并调控细胞因子分泌，最终导致细胞损伤及免疫微环境的紊乱。

关键词：受体,notchl 肝炎病毒,乙型肾小管,近端上皮细胞免疫分子

靶向沉默Notch1基因对人膀胱癌细胞生物学行为的影响

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中华泌尿外科杂志 2009年第5期30卷 328-331页

作者：艾星王保军徐华史涛坪居正华刘双林吴准马鑫李宏召张旭北京军区总医院泌尿外科华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科解放军总医院泌尿外科

目的探讨沉默Notch1基因对人膀胱癌细胞生物学行为的影响。方法将靶向Notch1的siRNA真核表达载体psiRNA Notch1-1转染膀胱癌细胞株T24和BIU-87,噻唑盐法、流式细胞术检测沉默Notch1后膀胱癌细胞生长、细胞周期和凋亡情况。RT-PCR和蛋白... 详细信息

目的探讨沉默Notch1基因对人膀胱癌细胞生物学行为的影响。方法将靶向Notch1的siRNA真核表达载体psiRNA Notch1-1转染膀胱癌细胞株T24和BIU-87,噻唑盐法、流式细胞术检测沉默Notch1后膀胱癌细胞生长、细胞周期和凋亡情况。RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染前后Notch1基因mRNA和蛋白表达的变化。结果转染后72 h,T24和BIU-87细胞G0/G1期细胞比例明显增加,分别为(80.13±2.69)%和(69.44±2.41)%,与T24对照组(23.89±1.32)%和BIU-87对照组(24.63±1.68)%比较差异有统计学意义(P值均<0.05)。转染后72 h,T24和BIU-87细胞凋亡率分别为(13.75±1.23)%和(8.72±1.01)%,与T24对照组(1.28±0.14)%和BIU-87对照组(1.01±0.27)%比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。转染后24 h细胞生长明显受到抑制,该抑制作用持续到转染后96 h。转染后72 h,T24和BIU-87细胞中Notch1基因mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论 Notch1在膀胱癌细胞株中可能起致癌作用,沉默Notch1基因能够抑制膀胱癌细胞的增殖。

关键词：基因沉默受体,notchl 膀胱肿瘤细胞增殖

Notch信号通路对人胰腺癌细胞NF-KB活性和侵袭能力的影响

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胃肠病学 2012年第7期17卷 413-416页

作者：史薇辜金莲曾峥李莉莉黎钟燕李洁陈蕴贤冯凯瑜莫少芬广州市第一人民医院老年病科 510180

背景:Notch信号通路在多种人类恶性肿瘤的发生、发展中起关键作用。研究显示Notch与NF-κB信号通路之间的交互作用可促进胰腺癌进展。目的:明确Notch信号通路对胰腺癌侵袭性的影响及其可能机制。方法:体外培养人胰腺癌细胞株BxPC3,以Not... 详细信息

背景:Notch信号通路在多种人类恶性肿瘤的发生、发展中起关键作用。研究显示Notch与NF-κB信号通路之间的交互作用可促进胰腺癌进展。目的:明确Notch信号通路对胰腺癌侵袭性的影响及其可能机制。方法:体外培养人胰腺癌细胞株BxPC3,以Notch-1 siRNA下调其Notch-1表达,同时设置转染对照siRNA的阴性对照组和不予siRNA干扰的空白对照组。以Transwell细胞侵袭实验观察各组BxPC3细胞的侵袭能力,电泳迁移率变动分析(EMSA)检测NF-κB活性,蛋白质印迹法检测Notch-1、NF-κB P65、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达。结果:经Notch-1 siRNA干扰、Notch-1表达下调的BxPC3细胞,Transwell细胞侵袭实验穿膜细胞数较空白对照组和阴性对照组显著减少(26.5±1.3对78.5±2.4和76.7±2.2,P<0.01),NF-κB活性显著降低(P<0.01),NF-κB p65、VEGF、MMP-9蛋白表达显著下调(P<0.05)。结论:Notch-1可通过激活NF-κB促进其下游基因VEGF、MMP-9表达,由此增强胰腺癌的侵袭性。

关键词：胰腺肿瘤肿瘤侵润受体,notchl RNA干扰 NF-KB 血管内皮生长因子类基质金属蛋白酶9

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乏氧及Notch1在多发性骨髓瘤中的作用

国际肿瘤学杂志 2013年第7期40卷 542-546页

作者：李斑斑郭冬梅滕清良山东省泰安市中心医院血液内科 271000

多发性骨髓瘤（MM）存在明显的骨髓乏氧微环境，骨髓高表达乏氧诱导因子-1α（HIF—1α），其与预后不良相关。Notch信号通路是造血微环境中调控细胞增殖与分化的重要信号转导系统，与多发性骨髓瘤的发生和耐药有关。新近研究显示乏氧与... 详细信息

多发性骨髓瘤（MM）存在明显的骨髓乏氧微环境，骨髓高表达乏氧诱导因子-1α（HIF—1α），其与预后不良相关。Notch信号通路是造血微环境中调控细胞增殖与分化的重要信号转导系统，与多发性骨髓瘤的发生和耐药有关。新近研究显示乏氧与Notch通路在多种恶性肿瘤发生发展中存在密切联系。乏氧微环境、HIF-1α及Notch相关信号通路的相互作用为开拓MM分子靶向治疗提供理论依据。

关键词：细胞低氧缺氧诱导因子1,α亚基多发性骨髓瘤受体,notchl