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腺苷a2a受体拮抗剂改善帕金森病运动并发症

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中华神经科杂志 2008年第12期41卷 843-847页

作者：宋璐马雅萍刘振国巴茂文上海交通大学医学院附属新华医院神经内科 200092

目的探讨腺苷a2a受体拮抗剂8-（3-Chlorostyryl）caffeine（CSC）对左旋多巴诱发的运动并发症的行为学与细胞学影响。方法通过6-羟基多巴（6-OHDA）立体定向注射至大鼠前脑内侧束建立帕金森病（PD）动物模型。模型成功大鼠接受每日2次... 详细信息

目的探讨腺苷a2a受体拮抗剂8-（3-Chlorostyryl）caffeine（CSC）对左旋多巴诱发的运动并发症的行为学与细胞学影响。方法通过6-羟基多巴（6-OHDA）立体定向注射至大鼠前脑内侧束建立帕金森病（PD）动物模型。模型成功大鼠接受每日2次左旋多巴甲酯（50mg／kg加12．5ms／kg苄丝肼）腹腔注射，持续22d。在第23天，运动并发症模型组大鼠（n=8）继续接受如上用药，用药组（n=8）在左旋多巴注射前注射腺苷a2a受体拮抗剂CSC，均用药至第29天。同时设假手术组（n=8）和PD对照组（n=8）。评估旋转时间，并采用免疫组织化学法和蛋白印迹法观察和检测纹状体区腺a2a受体的表达情况。结果左旋多巴长期用药诱发PD大鼠模型旋转反应时间缩短，同时模型组损伤侧纹状体区腺苷a2a受体的表达升高[阳性细胞指数（IOD），（11．55±2．75）×10^4]，较假手术组[IOD，（6．02±1．29）×10^4]和PD组[IOD，（5．60±1．83）×10^4]有统计学意义（F=33．31，P〈0．05）。CSC用药逆转了左旋多巴诱导的PD大鼠旋转时间的缩短，损伤侧纹状体区腺苷a2a受体的表达[IOD，（5．80±1．56）×10^4]也下调至对照组和PD组水平。结论腺苷a2a受体参与了左旋多巴诱发的运动并发症的发生，腺苷a2a受体拮抗剂可能是治疗PD运动并发症有前景的药物。

关键词：帕金森病运动障碍受体,腺苷a2a 咖啡因左旋多巴

白细胞腺苷a2a受体基因缺失小鼠模型的建立

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中华血液学杂志 2007年第3期28卷 174-177页

作者：安建宏李玮谢松朱佩芳戴双双熊仁平胡春周元国第三军医大学大坪医院野战外科研究所重庆400042

目的建立选择性外周血自细胞腺苷a2a受体基因缺失的小鼠模型。方法分别采用一次9．5GyX线照射和2次6．2GyX线间隔照射对小鼠进行清髓处理，将腺苷a2a受体基因敲除的小鼠骨髓细胞移植到清髓性处理的野生型小鼠体内，使其白细胞的腺苷a2a... 详细信息

目的建立选择性外周血自细胞腺苷a2a受体基因缺失的小鼠模型。方法分别采用一次9．5GyX线照射和2次6．2GyX线间隔照射对小鼠进行清髓处理，将腺苷a2a受体基因敲除的小鼠骨髓细胞移植到清髓性处理的野生型小鼠体内，使其白细胞的腺苷a2a受体选择性缺失，并对移植效果进行鉴定。结果通过基因型鉴定发现骨髓移植6周后受体小鼠的白细胞性染色体基因PCR产物电泳条带为300和330bp；腺苷a2a受体阳性细胞率为10．21％，而野生型小鼠为96．72％；2次分割放疗结合大于6×10。个骨髓细胞的移植量可以得到满意的小鼠存活率（91％）。结论成功地建立了选择性缺失白细胞腺苷a2a受体基因的小鼠模型。

关键词：白细胞受体,腺苷a2a 骨髓移植

腺苷a2a受体基因敲除小鼠瘢痕增生中TGF-β的表达及意义

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中华整形外科杂志 2010年第2期26卷 136-138页

作者：肖虎冉丽禚莹莹王德昌霍然王一兵冯永强李强山东大学附属省立医院烧伤整形科济南250021

目的探讨腺苷a2a受体基因敲除小鼠在瘢痕形成中的作用及其机制.方法 4周大腺苷a2a受体基因敲除小鼠和同窝野生型小鼠各12只,制作瘢痕模型,利用HE染色观察瘢痕组织厚度、横截面积变化情况.采用比色氯胺T法测量组织羟脯氨酸含量,利用West... 详细信息

目的探讨腺苷a2a受体基因敲除小鼠在瘢痕形成中的作用及其机制.方法 4周大腺苷a2a受体基因敲除小鼠和同窝野生型小鼠各12只,制作瘢痕模型,利用HE染色观察瘢痕组织厚度、横截面积变化情况.采用比色氯胺T法测量组织羟脯氨酸含量,利用Western免疫印迹测量TGF-β表达.结果野生型组小鼠瘢痕增生明显,其厚度、横截面积比自身对照增加倍数显著大于腺苷a2a受体基因敲除组小鼠（P〈0.01）,腺苷a2a受体基因敲除小鼠瘢痕增生轻,羟脯氨酸含量与同窝野生型组小鼠瘢痕含量相比差异有统计学（P〈0.01）,野生型组小鼠瘢痕TGF-β表达比自身对照增加倍数显著大于腺苷a2a受体基因敲除小鼠组（P〈0.01）.结论腺苷a2a受体基因敲除小鼠瘢痕TGF-β表达降低,瘢痕增生显著减轻.

关键词：腺苷受体,腺苷a2a 瘢痕转化生长因子B

腺苷a2a受体激动剂联合骨髓间充质干细胞移植对急性肝功能衰竭小鼠负向免疫调节作用的研究

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中华传染病杂志 2017年第1期35卷 15-21页

作者：肖茜茜王永林陈泽萧云蕾许烂漫林镯王晓东陈永平温州医科大学附属第一医院感染科温州市肝脏病重点实验室温州医科大学肝病研究所浙江省温州市325000

目的探讨腺苷a2a受体激动剂（CGS21680）联合骨髓间充质干细胞（BMMSC）移植治疗急性肝功能衰竭（ALF）的疗效及可能机制。方法50只6～8周雄性C57BL/6小鼠普通饲养1周后，采用随机数字法将小鼠分为健康对照组6只，模型对照组11只，BMMSC... 详细信息

目的探讨腺苷a2a受体激动剂（CGS21680）联合骨髓间充质干细胞（BMMSC）移植治疗急性肝功能衰竭（ALF）的疗效及可能机制。方法50只6～8周雄性C57BL/6小鼠普通饲养1周后，采用随机数字法将小鼠分为健康对照组6只，模型对照组11只，BMMSC组11只，CGS21680/BMMSC组11只，CGS21680组11只。除健康对照组外，其余小鼠腹腔注射D-GalN和脂多糖建立ALF模型。10 h后，CGS21680/BMMSC组、CGS21680组腹腔注射腺苷a2a受体激动剂CGS21680（2.1 mg/kg）。另外，BMMSC组、CGS21680/BMMSC组尾静脉注射BMMSC 1×10^6/只。24 h后，苏木精-伊红染色观察肝脏组织病理变化，流式细胞仪检测各组小鼠脾脏Treg占CD4＋T淋巴细胞比例变化，ELISA试剂盒检测血清炎性因子IL-6、TNF-ɑ含量，实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测肝组织TLR4、核因子-κB表达水平。应用单因素方差分析（one-way ANOVA）和SNK-q检验。结果健康对照组血清IL-6为（23.67±2.97） pg/mL，模型对照组为（151.47±6.03） pg/mL，BMMSC组为（72.10±3.74） pg/mL，CGS21680/BMMSC组为（53.35±2.50） pg/mL，CGS21680组为（84.85±3.25） pg/mL，健康对照组与其他4组比较差异均有统计学意义（t值分别为46.02、25.51、19.58和34.03，均P〈0.01）。健康对照组血清TNF-ɑ水平为（24.62±3.19） pg/mL，模型对照组为（102.25±2.10） pg/mL、BMMSC组为（54.71±2.23） pg/mL，CGS21680/BMMSC组为（42.20±4.72） pg/mL，CGS21680组为（81.76±3.50） pg/mL，健康对照组与其他4组比较差异均有统计学意义（t值分别为46.49、19.97、7.72和29.57，均P〈0.01）。健康对照组脾脏Treg比例与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为51.67、12.22、5.91和18.21，均P〈0.01）。健康对照组肝组织TLR4 mRNA水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为26.31、21.33、13.24和27.14，均P〈0.01）；健康对照组肝组织核因子-κB mRNA水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为16.56、16.34、7.83和13.11，均P〈0.01）。健康对照组肝组织TLR4蛋白水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为35.60、10.38、6.05和18.02，均P〈0.05）；健康对照组肝组织NF-κB蛋白水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为10.80、7.30、4.61和13.24，均P〈0.05）。结论腺苷a2a受体激动剂联合BMMSC移植可显著上调ALF小鼠体内Treg比例，抑制TLR4/核因子-κB通路的激活，两者协同调节作用，进而进一步抑制肝脏炎性反应。

关键词：间质干细胞肝功能衰竭,急性受体,腺苷a2a Toll样受体4/核因子-κB信号通路

大鼠丙泊酚精神依赖形成的机制:腺苷a2a受体-神经递质-ERK通路

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中华麻醉学杂志 2021年第9期41卷 1092-1096页

作者：陈鹏丽何毕晨闫睿黄蓉周涵丹张冰新疆医科大学第三临床医学院乌鲁木齐830000 新疆医科大学附属肿瘤医院麻醉科乌鲁木齐830000

目的探讨大鼠丙泊酚精神依赖形成的机制与腺苷a2a受体-神经递质-细胞外信号调节激酶(ERK)通路的关系。方法健康雄性SD大鼠48只,采用间断腹腔注射丙泊酚40 mg/kg,连续14 d的方法建立丙泊酚依赖模型。采用随机数字表法将大鼠分为6组(n=8)... 详细信息

目的探讨大鼠丙泊酚精神依赖形成的机制与腺苷a2a受体-神经递质-细胞外信号调节激酶(ERK)通路的关系。方法健康雄性SD大鼠48只,采用间断腹腔注射丙泊酚40 mg/kg,连续14 d的方法建立丙泊酚依赖模型。采用随机数字表法将大鼠分为6组(n=8):中枢对照组(c-C组)、中枢激动剂组(c-CGS组)、中枢拮抗剂组(c-DMPX组)、外周对照组(p-C组)、外周激动剂组(p-CGS组)和外周拮抗剂组(p-DMPX组)。c-CGS组和c-C组于建模后立即颅内注射腺苷a2a激动剂CGS-216802.5 ng/0.5μl或等量生理盐水,p-CGS组和p-C组腹腔注射CGS-216800.1 mg/kg或等量生理盐水;c-DMPX组于每次丙泊酚注射前20 min颅内注射腺苷a2a受体拮抗剂DMPX 50 ng/0.5μl,p-DMPX组腹腔注射DMPX 0.25 mg/kg。分别于建模前、建模后即刻、激动剂或生理盐水给药后(干预后)测定位置偏爱值(CPP值)。建模后1 d时处死大鼠取血标本及脑组织,采用ELISA法检测血浆及海马多巴胺(DA)、谷氨酸(Glu)及大脑皮层5-羟色胺(5-HT)水平,采用Western blot法检测大脑皮层磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的表达。结果与建模前比较,建模后即刻c-C组、c-CGS组、p-C组和p-CGS组CPP值升高(P0.05);与造模后即刻比较,干预后c-C组和p-C组CPP值差异无统计学意义(P>0.05),c-CGS组和p-CGS组CPP值升高(P2表达下调(P2水平差异无统计学意义(P>0.05),p-DMPX组海马DA和Glu含量减少,大脑皮层5-HT含量增加,p-ERK1/2表达下调(P腺苷a2a受体,增加脑内兴奋性神经递质,进而上调ERK活性有关。

关键词：二异丙酚物质相关性障碍受体,腺苷a2a 神经递质 MAP激酶信号系统

激活腺苷a2a受体对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响:与自噬的关系

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中华麻醉学杂志 2019年第4期39卷 418-421页

作者：王正刚柯剑娟王焱林陈超陈春意国奥熊颖武汉大学中南医院麻醉科 430071

目的评价激活腺苷a2a受体对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其与自噬的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠,6周龄,体重200~250 g,采用腹腔注射1%链脲佐菌素60 mg/kg制备大鼠糖尿病模型。取糖尿病大鼠40只,采用随机数字表法分为4组(n=... 详细信息

目的评价激活腺苷a2a受体对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其与自噬的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠,6周龄,体重200~250 g,采用腹腔注射1%链脲佐菌素60 mg/kg制备大鼠糖尿病模型。取糖尿病大鼠40只,采用随机数字表法分为4组(n=10):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血再灌注+腺苷a2a受体激动剂CGS21680组(CGS组)、缺血再灌注+CGS21680+腺苷a2a受体拮抗剂ZM241385组(CGS+ZM组)。采用结扎左冠状动脉前降支30 min再灌注120 min的方法制备糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。CGS组于再灌注前10 min静脉注射CGS21680 10 μg/100 g,CGS+ZM组于再灌注前10 min依次静脉注射CGS21680 10 μg/100 g和ZM241385 0.2 mg/kg。再灌注结束时,取血标本,采用ELISA法检测血清CK-MB、LDH以cTnI浓度;处死取心肌组织,采用TTC染色法确定心肌梗死体积百分比,采用Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)和LC3Ⅱ、p62及Beclin-1的表达。结果与Sham组比较,I/R组血清CK-MB、LDH、cTnI浓度和心肌梗死体积百分比升高,p62和Beclin-1表达上调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高(P2和Beclin-1表达下调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高(P0.05)。与CGS组比较,CGS+ZM组血清CK-MB、LDH、cTnI浓度和心肌梗死体积百分比升高,p62和Beclin-1表达下调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低(P腺苷a2a受体可减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤,机制可能与增强自噬水平有关。

关键词：受体,腺苷a2a 自噬糖尿病心肌再灌注损伤

腺苷a2a受体激动剂后处理对兔缺血再灌注心肌的保护作用

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中国心血管杂志 2010年第1期15卷 50-53页

作者：李妮妮廉哲勋葛毅萍陈晓青岛大学医学院附属医院心内科 266003 青岛阜外心血管病医院

目的观察三磷酸腺苷（ATP）、腺苷a2a受体激动剂CGS-21680及缺血后处理对兔缺血再灌注心肌的影响，并探讨后处理与腺苷受体亚型的关系及其保护机制。方法健康新西兰大耳白兔48只，随机分成4组：缺血再灌注组（IR组）、缺血后处理组（IP... 详细信息

目的观察三磷酸腺苷（ATP）、腺苷a2a受体激动剂CGS-21680及缺血后处理对兔缺血再灌注心肌的影响，并探讨后处理与腺苷受体亚型的关系及其保护机制。方法健康新西兰大耳白兔48只，随机分成4组：缺血再灌注组（IR组）、缺血后处理组（IPO组）、ATP后处理组（ATP组）和CGS．21680后处理组（CGS-21680组），每组12只。建立兔急性心肌缺血再灌注模型，实验终点测定血清肌酸激酶同工酶（CK—MB）、丙二醛（MDA）水平及超氧化物歧化酶（SOD）活力；采用Evans蓝和四氮唑蓝（NBT）双重染色测定心肌梗死面积。光镜下观察心肌组织病理形态变化。结果IR组心肌损伤较重，有心肌断裂、坏死，间质肿胀、出血及中性粒细胞浸润，IPO组、ATP组及CGS-21680组心肌组织损伤明显轻于IR组。与IR组比较，IPO组、ATP组和CGS-21680组血清MDA生成量减少[（3．68±0．60）U／ml、（3．75±0．82）U／ml和（4．05±0．86）U／ml比（5．05±0．65）U／ml，均为P〈0．05]，CK—MB活性降低[（231．83±16．22）U／L、（225．83±9．22）U／L和（238．33±22．26）U／L比（343．42±21．55）U／L，均为P〈0．01]，心肌梗死面积降低（13．86％±2．77％、14．22％±2．24％和14．57％±1．66％比30．49％±1．57％，均为P〈0．01）以及SOD活力升高[（238．08±38．22）nmol／ml、（261．75±40．27）nmol／ml和（294．78±23．38）nmol／ml比（149．98±42．42）nmol／ml，均为P〈0．05]；而CGS-21680组、IPO组和ATP组组间比较，差异无统计学意义。结论ATP和CGS-21680后处理可减轻心肌缺血再灌注损伤，保护强度与机械性缺血后处理相似，且后处理对再灌注心肌的保护与腺苷a2a受体的激活有关，其机制可能与清除氧自由基，抑制脂质过氧化反应从而提高机体的抗氧化能力有关。

关键词：受体,腺苷a2a 心肌再灌注损伤心肌缺血

氯化锂-匹鲁卡品慢性点燃模型脑中腺苷受体表达失衡的动态研究

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中华神经科杂志 2009年第3期42卷 185-189页

作者：康慧聪胡琦刘晓艳许峰李巷王媛唐坤朱遂强华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科武汉430030

目的探讨慢性点燃癫痫大鼠脑内腺苷受体A1（A1R）及a2a（a2aR）表达的动态演变，评价腺苷受体表达改变在癫痫发病机制中的作用。方法选用氯化锂-匹鲁卡品慢性点燃小鼠模型，分为模型组、对照组和正常组。采用逆转录PCR（RT—PCR）、免... 详细信息

目的探讨慢性点燃癫痫大鼠脑内腺苷受体A1（A1R）及a2a（a2aR）表达的动态演变，评价腺苷受体表达改变在癫痫发病机制中的作用。方法选用氯化锂-匹鲁卡品慢性点燃小鼠模型，分为模型组、对照组和正常组。采用逆转录PCR（RT—PCR）、免疫荧光及Western blot监测发作后24h，1、6个月时，脑内A1R、a2aR表达的动态改变。结果点燃后24h，小鼠脑内A1R表达增高[受体mRNA（1．1483±0．1182）；Western blot（0．7872±0．0621）；免疫荧光阳性细胞（76．17±4．62）个／高倍镜视野]，a2aR表达降低[受体mRNA（0．8338±0．0572）；Western blot（0．2098±0．0257）；免疫荧光阳性细胞（43．83±5．12）个／高倍镜视野]，与正常组及对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。在点燃后1个月、6个月时，A1R表达较点燃前下降，a2aR则明显增高，差异亦具有统计学意义（P〈0．01）；it与1个月时比较，6个月时A1R表达更低[受体mRNA（0．5682±0．0443）；Western blot（0．7749±0．0262）；免疫荧光阳性细胞（38．50±4．81）个／高倍镜视野]，a2aR表达更高[受体mRNA（1．2169±0．0332）；Western blot（0．7080±0．0371）；免疫荧光阳性细胞（114．50±4．04）个／高倍镜视野]，即慢性期A1R表达降低，a2aR表达增高，且随时间延长越来越明显（t=-19．02～13．28，P〈0．05）。结论腺苷受体表达失衡在点燃过程中呈现双向改变特征，急性期适应性调整以最大限度抑制癫痫发作，慢性反复发作则导致A1R及a2aR的表达失衡，可能是导致癫痫发作无法控制的重要因素。

关键词：癫痫受体,腺苷A1 受体,腺苷a2a 氯化锂毛果芸香碱点燃效应,神经病学

新型腺苷A_(2A)受体激动药瑞加诺生在心肌灌注显像中的应用

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中国新药与临床杂志 2010年第10期29卷 793-796页

作者：黄震华上海交通大学医学院附属第九人民医院心血管病研究室上海200011

心肌灌注显像在测定冠状动脉病变、危险性测定、判断心肌存活、评价治疗效果中发挥重要作用。瑞加诺生是一个新型的腺苷a2a受体激动药。与在心肌灌注显像中用于激发的经典药物腺苷相比,瑞加诺生不引起支气管收缩,不引起房室传导阻滞,具... 详细信息

心肌灌注显像在测定冠状动脉病变、危险性测定、判断心肌存活、评价治疗效果中发挥重要作用。瑞加诺生是一个新型的腺苷a2a受体激动药。与在心肌灌注显像中用于激发的经典药物腺苷相比,瑞加诺生不引起支气管收缩,不引起房室传导阻滞,具有作用显著、不良反应小等优点。

关键词：瑞加诺生心肌再灌注腺苷受体,腺苷a2a 诊断显像