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产神经酸菌种的筛选及发酵条件优化研究

中国油脂 2024年

作者：宋贤娟孙爱娣张瑞周佩蓉黄艾祥王雪峰滨州市检验检测中心云南农业大学食品科学技术学院

神经酸是国际上公认的能促进受损神经组织修复、再生，治疗脑部疾病的有效物质，但目前神经酸的获取途径较为单一复杂，成本较高。本文以云南特色辣木籽油为底物，从4种产油菌株中筛选出产神经酸较高的菌种，进行发酵条件优化并采用GC-M... 详细信息

神经酸是国际上公认的能促进受损神经组织修复、再生，治疗脑部疾病的有效物质，但目前神经酸的获取途径较为单一复杂，成本较高。本文以云南特色辣木籽油为底物，从4种产油菌株中筛选出产神经酸较高的菌种，进行发酵条件优化并采用GC-MS测定工艺优化前后酵母提取物中脂肪酸组成及含量。结果表明，圆红冬孢酵母菌为产神经酸最佳菌株；单因素结合响应面法得到最优发酵条件为：培养时间48 h、菌种添加量10%、油添加量7%，在此工艺下得到酵母提取物中神经酸浓度为2.40 mg/mL；采用气相色谱质谱联用仪检测圆红冬孢酵母原始菌冻干物中饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸（占总脂肪酸）分别为39.81%、43.19%、17%，神经酸含量为10.983 μg/g；最优发酵条件酵母提取物冻干粉中分别为45.09%、30.78%、24.23%，神经酸含量为13.518 μg/g，比圆红冬孢酵母原始菌冻干物中神经酸含量提升了23%。该研究可为神经酸的获取及其相关研究提供理论依据。

关键词：神经酸圆红冬孢酵母菌辣木籽油发酵条件优化 GC-MS

淀粉液化芽孢杆菌BS5582产蛋白酶的发酵条件优化、酶学性质分析及其在牛皮脱毛中的应用

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食品与发酵工业 2024年

作者：任涛钮成拓郑飞云刘春凤王金晶李崎工业生物技术教育部重点实验室(江南大学) 江南大学酿酒科学与工程研究室

蛋白酶法脱毛是皮革脱毛中可替代传统化学方法的清洁生产技术。该文旨在优化1株高产蛋白酶淀粉液化芽孢杆菌BS5582的产酶条件，分析其酶学性质，并考察了其在牛皮脱毛工艺中的应用效果。结果表明，BS5582菌株的较优产酶培养基组成为(g/L... 详细信息

蛋白酶法脱毛是皮革脱毛中可替代传统化学方法的清洁生产技术。该文旨在优化1株高产蛋白酶淀粉液化芽孢杆菌BS5582的产酶条件，分析其酶学性质，并考察了其在牛皮脱毛工艺中的应用效果。结果表明，BS5582菌株的较优产酶培养基组成为(g/L)：玉米粉50.0，豆饼粉40.0，Na2HPO4·12H2O 6.0，KH2PO43.0，MgSO41.8，CaCl20.75；培养基初始pH 6；较优发酵条件为：发酵温度35 ℃，接种量10%，装液量15 mL。在较优条件下，该菌株产蛋白酶活力达到(5 270.59±19.61)U/mL，是优化前的21倍。BS5582菌株所产蛋白酶的最适温度和最适pH值分别为40 ℃和8.5，Mn2+对酶有明显激活作用，而Fe2+、Fe3+和苯甲基磺酰氟对酶活力有显著抑制作用。将该酶应用于牛皮脱毛，发现其具有良好的牛皮脱毛能力且胶原损伤小。相比于传统灰碱法脱毛，该蛋白酶脱毛后牛皮毛孔中无发根残留，毛发完整脱落，脱毛废水的污染指标TSS、COD和BOD5值分别比化学脱毛法降低约87%、39%和45%，这说明BS5582菌株产蛋白酶具有潜在的清洁脱毛应用价值。

关键词：蛋白酶淀粉液化芽孢杆菌发酵条件优化酶学性质牛皮脱毛

树灵芝(Ganoderma sessile， SCAU-My1)菌丝体液态发酵条件优化以及菌丝体复合材料制备

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食品与发酵工业 2024年

作者：钟梓杰李雪玲胡文锋杨美艳深圳循环生物科技有限公司华南农业大学食品学院

该研究以树灵芝(Ganoderma sessile，SCAU-My1)为发酵菌株，采用菌丝体液态发酵制备种子，参考食用菌栽培技术进行菌丝体复合材料(mycelium-base composites，MBCs)制备。分别以麻秆和玉米秸秆为主要原料，接种上述菌丝体液态种后，固... 详细信息

该研究以树灵芝(Ganoderma sessile，SCAU-My1)为发酵菌株，采用菌丝体液态发酵制备种子，参考食用菌栽培技术进行菌丝体复合材料(mycelium-base composites，MBCs)制备。分别以麻秆和玉米秸秆为主要原料，接种上述菌丝体液态种后，固态发酵培养5 d，从而制备可生物降解的MBCs。首先，对树灵芝的菌丝体液态发酵种子培养基及培养条件进行了优化，研究碳源、氮源、发酵温度等因素对菌丝体生物量的影响。结果表明，最佳制种培养基配方为玉米淀粉25 g/L、黄豆粉14 g/L、KH2PO43 g/L、7H2O·MgSO43 g/L；最佳培养条件为发酵温度28 ℃，初始pH 5.5，接种量5%，装瓶量150 mL/500 mL，转速为180 r/min。在此条件下，种子液菌丝体生物量达18.73 g/L，较优化前的13.90 g/L，提高了34.7%。制备的MBCs在形变发生50%时，玉米秸秆-菌丝体复合材料(C-MBCs)压缩应力为聚乙烯(EPS)材料的5.4倍，为麻秆-菌丝体复合材料(H-MBCs)的0.6倍；在热重分析中，经过600 ℃热处理C-MBCs质量剩余约39%，H-MBCs质量剩余约33%，而EPS材料仅剩1.08%，说明玉米秸秆或麻秆制成的MBCs承重能力、热稳定性均优于EPS材料。此结果为菌丝体复合材料替代发泡塑料作为缓冲包装材料提供有意义的参考。

关键词：树灵芝菌丝体培养基优化发酵条件优化菌丝体复合材料可生物降解

产生物碱苦豆子内生真菌筛选及其发酵条件优化

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草地学报 2024年

作者：王文凯鞠明岫金婧刘冠兰顾沛雯宁夏大学农学院银川市金凤区农业农村和水务局

本研究旨在筛选出能够产喹诺里西啶类生物碱的苦豆子（Sophora alopecuroides）内生真菌菌株，探究其发酵条件，提高碱产率。以前期从苦豆子健康种子中分离的50株内生真菌为材料，采用薄层色谱法、高效液相色谱法和酸性染料比色法进行... 详细信息

本研究旨在筛选出能够产喹诺里西啶类生物碱的苦豆子（Sophora alopecuroides）内生真菌菌株，探究其发酵条件，提高碱产率。以前期从苦豆子健康种子中分离的50株内生真菌为材料，采用薄层色谱法、高效液相色谱法和酸性染料比色法进行产生物碱菌株的筛选，对获得的菌株进行形态学和多基因序列比对分析，确定分类地位。随后，通过单因素和响应面法探究添加L-哌啶酸、L-赖氨酸和α-酮戊二酸对产生物碱菌株碱产率的影响。结果表明，共筛选出3株高活性产槐定碱菌株DSD103，DSD201和DSD308，均属于互隔链格孢（Alternaria alternata），其菌丝中槐定碱的产率分别为0.212，0.544和0.276 mg·g-1。碱产率最高的菌株DSD201在L-哌啶酸浓度为1.079 μmol·L-1、L-赖氨酸浓度为6.251 μmol·L-1和α-酮戊二酸浓度为0.153 μmol·L-1时，菌丝中碱产率达到最大，为0.949 mg·g-1，比对照提高了74.12%。所筛选的产生物碱菌株为通过微生物发酵生产喹诺里西啶类生物碱提供了一种新方法。

关键词：苦豆子内生真菌产生物碱菌株筛选发酵条件优化喹诺里西啶类生物碱

产蛋白酶高温菌株筛选及豆粕固态发酵条件优化

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中国粮油学报 2024年

作者：张军燕张焕新吴平刘萍黄延莉代春华何荣海江苏农牧科技职业学院江苏大学食品与生物工程学院

本文从云烟卷烟中分离纯化后，得到1株产蛋白酶能力较强的高温菌株YYC4。经16S rRNA基因序列分子生物学鉴定该菌株为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）。通过单因素和响应面优化确定YYC4菌株高温固态发酵未灭菌豆粕的最佳条件为... 详细信息

本文从云烟卷烟中分离纯化后，得到1株产蛋白酶能力较强的高温菌株YYC4。经16S rRNA基因序列分子生物学鉴定该菌株为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）。通过单因素和响应面优化确定YYC4菌株高温固态发酵未灭菌豆粕的最佳条件为：料液比1:1.80 g/mL、发酵温度55℃、接种量107CFU/g含水基质、相对湿度80%、发酵时间50 h、MgSO4质量分数0.12%。在此条件下发酵，豆粕可溶性蛋白质量分数由4.92%升高至18.57%，总蛋白质量分数由40.42%增加至47.95%，胰蛋白酶抑制剂质量分数则由8.19 mg/kg降低至3.19 mg/kg。本研究为该菌株在饼粕固态高温发酵中的应用提供了理论依据和技术支持。

关键词：豆粕高温固态发酵菌株筛选发酵条件优化

一株能降解木聚糖菌株的筛选、鉴定、发酵条件优化及其酶学性质研究

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食品与发酵工业 2024年

作者：区晓阳杨豫陈菲陆光远李莉梅欧阳乐军广东石油化工学院生物与食品工程学院广东省农产品绿色生产与农业智能装备重点实验室

该研究旨在挖掘更符合工业化生产的木聚糖酶，提升木聚糖高值转化效率，推动生物能源化使用。先以木聚糖为唯一碳源的固体培养基筛选能产木聚糖酶的菌株，然后通过形态学和分子生物学鉴定木聚糖酶生产菌株的归属，进一步优化菌株的发酵... 详细信息

该研究旨在挖掘更符合工业化生产的木聚糖酶，提升木聚糖高值转化效率，推动生物能源化使用。先以木聚糖为唯一碳源的固体培养基筛选能产木聚糖酶的菌株，然后通过形态学和分子生物学鉴定木聚糖酶生产菌株的归属，进一步优化菌株的发酵产酶条件，最后对菌株所产木聚糖酶的酶学性质进行研究。以木聚糖酶活力最高的赖氨酸芽孢杆菌属XYL1菌株作为研究对象，研究发现最适碳源为细麸皮，最适氮源为硫酸铵，最适发酵培养温度、pH和培养周期分别为35 ℃、8.0和48 h。最后研究了木聚糖酶的酶学性质，得出其最适催化温度和pH值为55 ℃和7.0。在30～45 ℃和pH 5.0～8.0时保温1 h仍保持较高的酶活力，分别达到96%和72%以上；金属离子Ni2+、Mg2+、Ca2+、Zn2+、Cu2+、Mn2+对酶反应都有一定的促进作用，而Fe2+、Fe3+、Co2+和十二烷基磺酸钠（sodium dodecyl sulfate，SDS）对酶有严重的抑制作用；乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetie acid，EDTA）对酶反应有轻微的抑制作用，表明该菌所产木聚糖酶可能不是金属酶。反应动力学研究表明，木聚糖酶催化木聚糖水解的Km为 27.23 mg/mL，Vmax为0.071 mg/（mL·min）。研究结果为XYL1菌株产木聚糖酶在工业生产中的应用奠定了基础。

关键词：木聚糖酶鉴定发酵条件优化酶学性质

高产酯酶格氏乳球菌的ARTP-UV复合诱变选育及发酵条件优化

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中国酿造 2024年第2期43卷 125-133页

作者：蔡岭肸陈晓松邹伟汤秀娟四川轻化工大学生物工程学院四川宜宾644000 酿酒生物技术及应用四川省重点实验室四川宜宾644000 乐山职业技术学院四川乐山614000

以实验室前期筛选保藏的格氏乳球菌(Lactococcus garvieae)S5-4为出发菌株,采用多轮次常压室温等离子体-紫外(ARTPUV)复合诱变对出发菌株S5-4进行诱变选育,以产酯酶酶活为评价指标,得到一株高产酯酶突变株ARUV3-26,其产酯酶活力达到(25... 详细信息

以实验室前期筛选保藏的格氏乳球菌(Lactococcus garvieae)S5-4为出发菌株,采用多轮次常压室温等离子体-紫外(ARTPUV)复合诱变对出发菌株S5-4进行诱变选育,以产酯酶酶活为评价指标,得到一株高产酯酶突变株ARUV3-26,其产酯酶活力达到(25.88±0.02)U/mL,较原始菌株S5-4提高了64.42%。经15代传代测试后,突变菌株ARUV3-26产酯酶活力稳定在(23.51±0.02)~(23.56±0.02)U/mL,与原始菌株S5-4相比提高了49.36%~49.68%。生理耐受性试验表明,突变株ARUV3-26与原始菌株S5-4相比,温度耐受性、pH耐受性、葡萄糖耐受性、乙醇耐受性、丁酸和己酸耐受性均有提升。通过单因素试验优化最佳培养基组分为:葡萄糖20 g/L,蛋白胨15 g/L,NaCl 5 g/L。通过单因素和响应面试验优化突变株ARUV3-26发酵条件为发酵时间3.0 d、发酵温度为30℃、初始pH值为7.0。此优化条件下,突变菌株ARUV3-26的产酯酶活力为(30.67±0.17)U/m L,比原始菌株S5-4的产酯酶能力提高了30.45%。

关键词：酯酶格氏乳球菌复合诱变响应面法发酵条件优化

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植物乳杆菌NMGL2的安全性评价及其产细菌素发酵条件优化

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中国食品学报 2024年

作者：任青霞户行宇张敏周增佳杨贞耐北京工商大学北京老年营养与健康教育部重点实验室北京食品营养与人类健康高精尖创新中心农业农村部规划设计研究院

目前乳酸菌发酵产细菌素的含量较低，因此优化产细菌素的发酵条件是最直接的方式。对分离自内蒙古传统干酪的植物乳杆菌NMGL2的抗生素药敏性、溶血性以及全基因组序列进行分析，结果表明该菌株无明显毒力作用，不携带高毒力因子，抗性... 详细信息

目前乳酸菌发酵产细菌素的含量较低，因此优化产细菌素的发酵条件是最直接的方式。对分离自内蒙古传统干酪的植物乳杆菌NMGL2的抗生素药敏性、溶血性以及全基因组序列进行分析，结果表明该菌株无明显毒力作用，不携带高毒力因子，抗性基因无转移风险。对植物乳杆菌NMGL2产细菌素的发酵条件进行研究，以金黄色葡萄球菌为指示菌，通过单因素实验以及基于接种率、发酵起始pH值、培养温度3个因素的Box-Behnken法三因素三水平的响应面分析，确定植物乳杆菌NMGL2产细菌素的最佳发酵条件是：发酵起始pH 7.0，接种率1.3%，培养温度37 ℃。验证试验结果显示在此优化发酵条件下获得对指示菌（金黄色葡萄球菌）的抑菌圈直径为 13.8 mm，与模型预测值（13.4 mm）基本吻合，拟合率达到 96.64%，证明该模型可靠有效。本研究为植物乳杆菌NMGL2发酵生产细菌素及其应用提供了技术参考。

关键词：植物乳杆菌NMGL2 全基因组测序安全性细菌素发酵条件优化

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黄鳝来源阿氏芽孢杆菌的筛选及发酵条件优化

饲料研究 2024年第3期47卷 73-78页

作者：郑菲菲何鑫尹丽张靖悦祝东梅高坚宋玉峰赵玉华华中农业大学水产学院湖北武汉430070 水产养殖国家级实验教学示范中心(华中农业大学) 湖北武汉430070

试验旨在从人工养殖的黄鳝体内分离高产蛋白酶菌株,为后续微生物蛋白酶的制备和微生态制剂的开发提供菌种资源,以解决黄鳝摄食率低、消化不完全及水体氮污染等问题。通过采用脱脂奶粉培养基透明圈法初筛和Folin-酚法测定酶活复筛相结合... 详细信息

试验旨在从人工养殖的黄鳝体内分离高产蛋白酶菌株,为后续微生物蛋白酶的制备和微生态制剂的开发提供菌种资源,以解决黄鳝摄食率低、消化不完全及水体氮污染等问题。通过采用脱脂奶粉培养基透明圈法初筛和Folin-酚法测定酶活复筛相结合的方式筛选人工养殖黄鳝肠道中的高产蛋白酶菌株,通过溶血试验与药敏试验检测菌株安全性,并进行常规生化和分子生物学鉴定。通过单因素和正交试验优化其发酵条件,筛选到一株高产蛋白酶、产过氧化氢酶的菌株Ma-4,初步鉴定其为阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)。该菌株最适产酶条件为发酵时间48 h、发酵温度36℃、可溶性淀粉添加量15 g/L、牛肉浸粉添加量15 g/L和pH值6.0。优化后菌株酶活力为288.14 U/mL,较优化前提高了3.34倍。研究表明,菌株Ma-4为高产蛋白酶、产过氧化氢酶、不溶血、不耐药的阿氏芽孢杆菌,该菌株为开发黄鳝微生态制剂开拓了菌种资源。

关键词：黄鳝阿氏芽孢杆菌筛选鉴定安全性评价发酵条件优化

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