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基因探针的发光标记

天津医科大学学报 1997年第1期3卷 59-60页

作者：宋学文邓彤黄乃萍赵崇何炜张镜宇天津市内分泌所生化室

基因探针的发光标记天津市内分泌所生化室宋学文邓彤黄乃萍赵崇何炜张镜宇ＤＮＡ探针技术的应用已经有十多年了，以往用作探针的ＤＮＡ片段需用放射性同位素标记，用放射自显影检测。近年来人们力求减少放射性物质的使用，这对人身安全... 详细信息

基因探针的发光标记天津市内分泌所生化室宋学文邓彤黄乃萍赵崇何炜张镜宇ＤＮＡ探针技术的应用已经有十多年了，以往用作探针的ＤＮＡ片段需用放射性同位素标记，用放射自显影检测。近年来人们力求减少放射性物质的使用，这对人身安全和环境保护均有益处，并可减少同位素...

关键词：基因探针发光标记临床检验

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化学发光标记及发光免疫分析研究进展

海军军医大学学报 1994年第1期 41-41页

化学发光标记及发光免疫分析研究进展［张丽民，陈杞．中华流行病学杂志，１９９３；１４（特刊１１号）：１３］化学发光标记（ＣＬＬ）及发光免疫分析（ＬＩＡ）是一灵敏度高、特异性强、检测快速，无放射危害的分析技术。７０年代末... 详细信息

化学发光标记及发光免疫分析研究进展［张丽民，陈杞．中华流行病学杂志，１９９３；１４（特刊１１号）：１３］化学发光标记（ＣＬＬ）及发光免疫分析（ＬＩＡ）是一灵敏度高、特异性强、检测快速，无放射危害的分析技术。７０年代末以来，ＣＬＬ及ＬＩＡ得到了迅速发展...

关键词：免疫分析研究进展发光标记陈杞

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新型免疫发光标记试剂AE的合成及标记

云南大学学报（自然科学版） 1993年第S1期15卷 118-118页

作者：仲伯华王亚平韩树森龚雄麒军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

吖啶酯(AE)衍生物是继鲁米诺以后发展起来的一类新型发光标记试剂,它具有更高的发光效率,而且不需催化剂即能引发发光,因而具有更高的信噪比;灵敏度可与放射标记相比,鉴于此,我们开展了吖啶酯的合成及标记研究。以吖啶为原料,通过9-C羧... 详细信息

吖啶酯(AE)衍生物是继鲁米诺以后发展起来的一类新型发光标记试剂,它具有更高的发光效率,而且不需催化剂即能引发发光,因而具有更高的信噪比;灵敏度可与放射标记相比,鉴于此,我们开展了吖啶酯的合成及标记研究。以吖啶为原料,通过9-C羧基化,得9—吖啶甲酸(Ⅱ),(Ⅱ)在氯化亚砜作用下转化为酰氯衍生物(Ⅲ),后者与苄基—4—羧基—苯丙酸酯(Ⅳ)反应,得4—(2—苄氧羰乙基)—酚基—9—吖啶甲酸酯(Ⅴ),将(Ⅴ)脱去苄基保护基得到4—(2—羧乙基)—酚基—9—吖啶甲酸酯(Ⅵ);在二环已基碳二亚胺作用下,(Ⅵ)与N—羟基琥珀酰亚胺缩合成活泼酯(Ⅷ);最后(Ⅶ)与甲基氟磺酸酯成季铵盐即得目的化合物4—(2—琥珀酰亚胺基氧羰乙基)

关键词：吖啶发光标记 AE 琥珀酰亚胺乙基酚基甲基氟标记率鲁米诺羧基化

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纳米金介导的电化学发光免疫分析研究

纳米金介导的电化学发光免疫分析研究

作者：田茂杰成都理工大学

学位级别：硕士

电化学发光免疫分析法(Electrochemiluminescence immunoassay,ECLIA)是将高选择性的免疫反应与高灵敏的电化学发光检测技术相结合的一种新的免疫分析方法。将金属纳米粒子的表面效应与电化学发光免疫分析相结合,有望进一步改善基于电... 详细信息

电化学发光免疫分析法(Electrochemiluminescence immunoassay,ECLIA)是将高选择性的免疫反应与高灵敏的电化学发光检测技术相结合的一种新的免疫分析方法。将金属纳米粒子的表面效应与电化学发光免疫分析相结合,有望进一步改善基于电化学发光的免疫分析法的分析特性。本论文旨在将纳米金应用于电化学发光免疫分析,建立高灵敏的电化学发光免疫分析方法测定环境雌激素类物质。同时通过调控纳米金的表面效应与电化学发光辐射之间的作用,揭示表面效应的机理,研究影响表面效应的影响因素,利用纳米金的表面增强效应改善电化学发光免疫方法的分析特性。本论文主要包括两部分内容:第一部分,综述了电化学发光免疫分析的发展过程、原理和主要特点,再系统的介绍了纳米金在电化学发光分析中的应用;第二部分为研究报告,主要研究内容包括以下三个部分:1.牛血清蛋白-雌二醇(BSA-E)半抗原的合成与表征:首先对雌二醇小分子进行了衍生,使它与牛血清蛋白成功发生偶联,通过紫外-可见吸收光谱表征合成的BSA-E半抗原,测得BSA-E浓度为2.965×10 mol/L,E同BSA的平均结合比为15.8。其次用三联吡啶钌衍生物(联吡啶-4’-甲基-4-羰基吡啶钌-N-琥珀酰亚胺酯双六氟磷酸酯,RuNHS)标记了雌二醇抗体(Ab),通过紫外-可见吸收光谱法表征Ab复合物的标记率为5.4和浓度为3.5×1066 mol/L。最后将合成的BSA-E修饰在金电极上,通过免疫反应后在三丙胺溶液中测量电化学发光信号,以此证明所合成的BSA-E能被雌二醇抗体所识别,可用于后续的免疫反应。2.纳米金猝灭电化学发光免疫分析检测雌二醇:首先采用Frens法合成了平均粒径为15 nm的纳米金,分别使用扫描电子显微镜(SEM)和紫外-可见吸收光谱法进行表征;接下来将制备的纳米金标记到雌二醇抗体上,通过对AuNPs-Ab紫外表征发现有8 cm的红移。最后,将BSA-E固定到工作金电极上,通过免疫反应再将纳米金结合到电极表面,考察纳米金对三联吡啶钌体系电化学发光行为的影响。研究发现纳米金对电化学反应过程没有促进作用,但是对发光辐射表现出明显的猝灭现象。基于纳米金对电化学发光的猝灭作用,构建了一种信号升高的电化学发光竞争免疫分析法,实现了对雌二醇的定量分析,线性检测范围为0.1 ng/mL,检出限为38pg/mL。3.纳米金的表面增强效应研究:金属纳米材料的表面增强与猝灭作用是一个竞争作用的过程,均与空间距离有关且均随距离的增加而减弱。本研究工作中,我们利用免疫反应调控纳米金与发光分子的空间距离,考察纳米金的表面效应对电化学发光免疫分析的影响。首先选用雌二醇的免疫反应为模型,利用纳米金分别标记雌二醇一抗(Ab1)和二抗(Ab2),在电极表面分别发生一次和两次免疫反应,调节发光分子与纳米金的距离,发现使用纳米金标记的抗体后发光信号均降低。在此基础上,我们选择微乳液法制备二氧化硅纳米粒子标记抗体,作为纳米金效应实验的对照。结果发现,当发生一次免疫时(发光分子与纳米金的间隔距离为Ab1),纳米金仍然对发光产生猝灭,猝灭比率60%;而当发生两次免疫反应后(发光分子与纳米金的间隔距离为Ab1+Ab2,距离增大),纳米金对发光产生一定的增强作用,增强了90%。

关键词：电化学发光免疫分析表面效应纳米金雌二醇发光标记

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睾酮异鲁米诺标记物的化学发光测定

蚌埠医学院学报 1995年第3期20卷 182-183页

作者：张翊徐兆昌陆明廉上海医科大学分析化学教研室

本文研究睾酮异鲁米诺标记物的化学发光测定；探讨氢氧化钠、过氧化氢、微晶过氧化酶用量对该标记物化学发光的影响．得出各试剂的最佳浓度，氢氧化钠为６ｍｏｌ／Ｌ，过氧化氢为０．２％，微晶过氧化酶为３０μｇ／ｍｌ．发光检测限为... 详细信息

本文研究睾酮异鲁米诺标记物的化学发光测定；探讨氢氧化钠、过氧化氢、微晶过氧化酶用量对该标记物化学发光的影响．得出各试剂的最佳浓度，氢氧化钠为６ｍｏｌ／Ｌ，过氧化氢为０．２％，微晶过氧化酶为３０μｇ／ｍｌ．发光检测限为０．２１ｐｇ／管．

关键词：睾酮异鲁米诺发光标记化学发光测定

Gd2O3：Eu和Fe3O4@Gd2O3：Eu纳米标记粒子的制备与性能研究

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Gd2O3：Eu和Fe3O4@Gd2O3：Eu纳米标记粒子的制备与性能研究

作者：栾丹东北大学

学位级别：硕士

在化学、生物医学及生物技术的研究中,用于生物识别的分子探针已经成功应用于生物功能的研究,以及许多疾病的超灵敏检测。随着现代生物技术的不断发展,出现了多种多样的探针标记方法,其中,发光标记技术,磁标记等,无论从灵敏度、稳定性... 详细信息

在化学、生物医学及生物技术的研究中,用于生物识别的分子探针已经成功应用于生物功能的研究,以及许多疾病的超灵敏检测。随着现代生物技术的不断发展,出现了多种多样的探针标记方法,其中,发光标记技术,磁标记等,无论从灵敏度、稳定性和安全性及成本各方面考虑,都是非常有前途的标记技术,已经有许多标记方法在医学和生物检测中成功的获得了商业化应用。本实验把磁标记和发光标记结合,制备具有Fe304磁性核的Gd2O3:Eu核壳纳米粒子用于标记。利用均相沉淀法以六次亚甲基四胺为沉淀剂制备Gd2O3:Eu粉体。以稀土硝酸盐、稀土氯化物为原料时前驱物经800℃煅烧后即可生成Gd2O3相,不同的是前者生成的产物为大的片状晶体,后者生成的产物为均匀的球形;以稀土硫酸盐为原料产物易成球形,升高Gd3+:SO42-比例可有效降低产物的粒径,但需要1200℃以上煅烧生成Gd2O3晶相。以尿素做沉淀剂均相沉淀法制备Gd2O3:Eu粉体,无论是在以稀土硫酸盐为原料,还是以稀土硝酸盐和硫酸盐混合溶液为原料,都易生成球形均匀的粒子。升高Gd3+:SO42-比例产物粒径降低,均匀性得到提高;在800℃煅烧Gd3+:SO42-=1:0.8的粉体的发光强度高于Gd3+:SO42-=1:0.2的粉体的发光强度;与以六次亚甲基四胺做沉淀剂相同的是1000℃以下煅烧粉体生成的是Gd2O2SO4相,在1200℃煅烧可生成Gd2O3相;不同的是经1200℃煅烧后,尿素为沉淀剂获得的Gd2O3结晶更完善,晶体对称性增强。相比以六次亚甲基四胺做沉淀剂,以尿素做沉淀剂生成的粒子更小,且呈均匀的球形。采用共沉淀法以NaOH为沉淀剂制备Fe3O4纳米粉体。以饱和磁化强度为主要考察指标,获得制备Fe3O4粉体的最优工艺参数是铁离子浓度0.2mol/l,碱浓度为0.2mol/l,温度70℃,Fe3+:Fe2+的比例为1.8。制得的Fe3O4颗粒形状呈近球形,尺寸均匀,约为20nm,矫顽力小,基本无磁滞效应。Fe3O4@SiO2@Gd2O3:Eu复合粒子制备工艺中,Gd/Fe比例增加易生成球形,比例减小产物易长成针状形貌;Fe3O4核的引入降低了发光强度,但随着Gd3+:Fe3+比例的增加发光强度随之增强。

关键词：磁标记发光标记 Gd2O3:Eu Fe3O4@SiO2@Gd2O3:Eu 共沉淀法均相沉淀法

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生物芯片与后基因时代

中学生物教学 2001年第1期 1-2页

作者：章竹君陕西师范大学 710062