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PCR方法快速检测鸡传染性支气管炎病毒

中国预防兽医学报 2000年第S1期22卷 231-页

作者：刘思国康丽娟江国托孔宪刚刘忠贵韩业超卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所东北农业大学动物医学院吉林省畜牧局

本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性ＰＣＲ方法。通过对纯化后ＩＢＶ核蛋白基因进行直接ＰＣＲ及套式ＰＣＲ扩增表明，两次ＰＣＲ产物的大小为０．７ｋｂ和０．５ｋｂ，与实际设计相符。而对照的ＮＤＶ及ＩＢＤＶ的... 详细信息

本试验建立了一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒的通用性ＰＣＲ方法。通过对纯化后ＩＢＶ核蛋白基因进行直接ＰＣＲ及套式ＰＣＲ扩增表明，两次ＰＣＲ产物的大小为０．７ｋｂ和０．５ｋｂ，与实际设计相符。而对照的ＮＤＶ及ＩＢＤＶ的ＰＣＲ扩增产物均为阴性。用ＩＢＶＨＢ株感染ＳＰＦ鸡后，应用我们所建立的ＰＣＲ方法去检测不同时期所采集的肾脏、气管、盲肠扁桃体、肺脏和肝脏中的ＩＢＶ，在ＳＰＦ鸡感染ＩＢＶ后的２１天仍然能够检测到ＩＢＶ的基因组，Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ杂交试验证明了我们获得的ＰＣＲ产物为ＩＢＶ的核蛋白基因。该ＰＣＲ检测方法比免疫荧光抗体（ＦＡ）法更具敏感、特异、快速等特点，完全适用于不同来源及不同血清型ＩＢＶ的检测。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒反转录-聚合酶链反应检测

成年大鼠弥漫性脑损伤后海马神经发生与神经生长因子的表达

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中华烧伤杂志 2003年第9期12卷 590-590页

目的观察弥漫性脑损伤后大鼠海马神经发生和神经生长因子(NGF)表达水平的变化,从分子水平探讨成年大鼠海马齿状回神经发生机制.方法选用成年大鼠DBI模型,采用BrdU标记分裂细胞、免疫组织化学及RT-PCR方法观察比较弥漫性脑损伤后1～12 d... 详细信息

目的观察弥漫性脑损伤后大鼠海马神经发生和神经生长因子(NGF)表达水平的变化,从分子水平探讨成年大鼠海马齿状回神经发生机制.方法选用成年大鼠DBI模型,采用BrdU标记分裂细胞、免疫组织化学及RT-PCR方法观察比较弥漫性脑损伤后1～12 d大鼠海马齿状回神经前体细胞增殖水平和神经生长因子表达的变化.结果①弥漫性脑损伤后4～12 d时间段内,成年大鼠海马齿状回神经发生水平显著升高(P<0.01),其中第6天时达到峰值.②弥漫性脑损伤后1 d时NGF表达水平迅速达到峰值(P<0.05).其后,在DBI后第4～12 d时间段内,NGF表达水平再次明显上调(P<0.05),并维持较长一段时间.结论弥漫性脑损伤后成年脑海马齿状回神经前体细胞增殖水平在一定时间窗内上调,脑损伤诱导的迟发性NGF表达水平上调参与了这一过程.

关键词：弥漫性脑损伤神经发生神经生长因子反转录-聚合酶链反应

猪流行性腹泻病毒PCR检测及其M基因的遗传变异分析

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中国畜牧兽医文摘 2014年第11期30卷 105-105页

作者：张志李岚董雅琴中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032

为了解我国猪流行性腹泻病毒（PEDV）的流行情况，利用套式反转录-聚合酶链反应（nRT-PCR）技术，从表现腹泻症状的仔猪粪便中扩增出6份阳性样品，测序表明，一扩PCR产物的大小为854bp，涵盖PEDV的M基因。选择34个参考毒株基于M基因进... 详细信息

为了解我国猪流行性腹泻病毒（PEDV）的流行情况，利用套式反转录-聚合酶链反应（nRT-PCR）技术，从表现腹泻症状的仔猪粪便中扩增出6份阳性样品，测序表明，一扩PCR产物的大小为854bp，涵盖PEDV的M基因。选择34个参考毒株基于M基因进行进化树分析，结果显示PEDV可以分为G1和G2两个基因型7个基因亚型。G1型以2007年前的经典毒株为主，包括CV777、Br1／87、KPEDV-9、JMe2和CH／S株等；G2型则以近年分离的毒株为主，包括GDXS5、JS-2004-2、PFF188、KU06RB08等。其中G2．3亚型已经成为目前世界上主要的PEDV流行毒株，包括本次检测的6株PEDV、泰国的KU06RB08及GenBank中我国和韩国2011年的流行毒株。通过同源性比较发现，这6株PEDV之间的同源性为98．2％-100％，与经典毒株CV777的同源性为97．6％-98．2％。结果表明，尽管PEDV之间的同源性仍较高，但PEDV流行毒株已经逐渐形成独特的流行进化分支。

关键词：猪流行性腹泻病毒 PCR检测 M基因遗传变异分析反转录-聚合酶链反应同源性比较 PEDV GenBank

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RT-PCR检测猪瘟病毒初探

广西农业生物科学 2001年第1期20卷 17-20页

作者：罗廷荣波丹黄宪高梁家权刘芳黄伟坚秦爱珍温荣辉陆芹章余克伦广西大学动物科技学院广西南宁530005

本研究建立了反转录聚合酶链反应 ( RT PCR)技术检测猪瘟病毒 ( Hog Cholera Virus,HCV)方法。合成的二对引物 HCV 1 / HCV 2和 HCV A1 / HCV A2成功地扩增兔化弱毒株、法国株和石门株的核酸 ,并对采自博白县 3个、贵港市 1个和武宣县 ... 详细信息

本研究建立了反转录聚合酶链反应 ( RT PCR)技术检测猪瘟病毒 ( Hog Cholera Virus,HCV)方法。合成的二对引物 HCV 1 / HCV 2和 HCV A1 / HCV A2成功地扩增兔化弱毒株、法国株和石门株的核酸 ,并对采自博白县 3个、贵港市 1个和武宣县 1个猪场共 1 3份病料进行检测。结果从博白县和贵港市的 1 1份材料中检测到 HCV的核酸。

关键词：反转录-聚合酶链反应猪瘟病毒检测

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用RT-PCR检测乳样中的BVDV

畜牧兽医科技信息 1999年第24期1卷 7-7页

作者：刘伯淳

反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)实验,检测乳样品体细胞的BVDV。本实验采用RNA提取试剂盒和RT-PCR程序构形。通过检查80群有BVD史的乳样,并与类似大小对照组样品的结果作对比。证明本实验特异性高,在20.5％有BVD史牛群中显示阳性结果,而对... 详细信息

反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)实验,检测乳样品体细胞的BVDV。本实验采用RNA提取试剂盒和RT-PCR程序构形。通过检查80群有BVD史的乳样,并与类似大小对照组样品的结果作对比。证明本实验特异性高,在20.5％有BVD史牛群中显示阳性结果,而对照群则无阳性者。

关键词： RT-PCR检测反转录-聚合酶链反应 BVDV RNA提取体细胞阳性结果特异性试剂盒泌乳母牛长期感染