检索结果-南通市图书馆

猪流产胎儿中猪繁殖与呼吸综合征病毒的检测及GP5抗原分析

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动物医学进展 2018年第3期39卷 24-29页

作者：蒋增海赵攀登邓同炜陈益徐耀辉河南牧业经济学院动物医学院河南郑州450046 河南省猪病防控工程技术研究中心河南郑州450046

河南某规模化猪场,按照每年4次高致病性猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗免疫接种,2016年11月,妊娠后期母猪陆续产死胎。为确诊病因,采集死产胎儿肺脏组织,采用RT-PCR方法,扩增PRRSV NSP2基因部分片段(根据产物片段大小,能区分高致病性与经... 详细信息

河南某规模化猪场,按照每年4次高致病性猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗免疫接种,2016年11月,妊娠后期母猪陆续产死胎。为确诊病因,采集死产胎儿肺脏组织,采用RT-PCR方法,扩增PRRSV NSP2基因部分片段(根据产物片段大小,能区分高致病性与经典毒株)和ORF5全长基因,结果显示,NSP2片段扩增大小约为418bp,表明检测毒株是高致病性PRRSV毒株;ORF5全长基因扩增结果,与预期大小片段一致。为分析猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫失败的原因,利用DNA Star软件,将检测毒株ORF5基因序列与其他17种PRRSV毒株ORF5基因序列构建遗传进化树,并对检测毒株与其他9种高致病性PRRSV毒株ORF5基因推导的氨基酸序列进行分析、比较及GP5抗原性分析。结果显示,ORF5序列分析表明,检测毒株与2015年福建分离毒株FJYR、河南分离毒株TJbd14-2同源性最高,分别为97.2%和97.0%,与美洲型经典毒株VR-2332同源性为87.7%,与欧洲型毒株Lelystad virus、NMEU09-1亲缘关系最远,分别为62.8%和62.6%;根据ORF5DNA序列推导氨基酸序列分析表明,与其他9种高致病性PRRSV毒株相比,从病料中检测毒株的GP5共有13个位置发生变异;GP5抗原指数分析表明,第30-40、51-63位抗原性,相比其他9种高致病性PRRSV毒株显著降低,据此推测这是导致免疫失败的根本原因,导致该猪场母猪流产的病原为一种变异的美洲型高致病性猪繁殖与呼吸综合征毒株。

关键词：流产胎儿猪繁殖与综合征病毒反转录-聚合酶链反应 GP5抗原性分析

成都市猫诺如病毒的检测及VP1基因序列分析

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动物医学进展 2021年第1期42卷 25-32页

作者：黄思琦黄坚杨晓农郭琪李妍西南民族大学畜牧兽医学院四川成都610041

为了解四川成都市猫诺如病毒(FNoV)的感染情况,应用公开报道的3对PCR引物对127份临床采集的猫粪便样本(含临床腹泻样本71例,临床健康样本56例)进行FNoV核酸检测,并根据病毒基因片段序列构建遗传进化树。结果显示,采用猫诺如病毒特异性引... 详细信息

为了解四川成都市猫诺如病毒(FNoV)的感染情况,应用公开报道的3对PCR引物对127份临床采集的猫粪便样本(含临床腹泻样本71例,临床健康样本56例)进行FNoV核酸检测,并根据病毒基因片段序列构建遗传进化树。结果显示,采用猫诺如病毒特异性引物FNoV-F9/R15的检出率为9.45%(12/127),高于采用杯状病毒广泛性引物p289d-p290d(2.36%,3/127)及诺如病毒特异性引物JV12Y/13I的检出率(0.79%,1/127)。检测发现在临床阳性样本中存在猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、猫肠道冠状病毒(FECoV)和猫星状病毒(FAstV)的混合感染。12株临床阳性样本病毒的RNA聚合酶基因序列分析显示,它们与GenBank上提交的猫诺如病毒及狮子诺如病毒处于同一分支,证实为猫诺如病毒。基于VP1基因序列分析结果显示,临床毒株间核苷酸同源性为89.0%~100.0%,氨基酸同源性为96.5%~100%,均位于诺如病毒GⅣ.2分支。临床毒株可分为2个分支,其中4株与日本毒株(GenBank登录号:LC389583)、美国毒株(GenBank登录号:JF781268)关系紧密;而另外3株则独立聚为1个分支,并存在共有的氨基酸变异位点。结果表明,成都市猫群中存在FNoV的流行,并与其他猫肠道病毒呈现混合感染。采用引物FNoV-F9/R15检测灵敏度高,适用于FNoV的临床检测。由于FNoV基因不断变异,存在临床发病风险,需要对其进行持续监测。

关键词：猫诺如病毒病毒性腹泻反转录-聚合酶链反应 VP1基因

不同时期有氧运动对大鼠脑衰老和额叶NCAM表达的影响

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成都体育学院学报 2014年第6期40卷 62-67页

作者：林雪灵李雪邓文骞王璐杨澎湃张业廷袁琼嘉成都体育学院运动医学系四川成都610041

目的:探讨D-半乳糖致衰老的SD大鼠在衰老前和衰老过程中进行有氧运动对其脑衰老和额叶NCAM表达的影响。方法:3月龄雄性SD大鼠60只随机分成运动预处理组(SD组)、衰老组(ND组)、生理盐水对照组(NNa组)、衰老过程中有氧运动干预组(NDs组),n... 详细信息

目的:探讨D-半乳糖致衰老的SD大鼠在衰老前和衰老过程中进行有氧运动对其脑衰老和额叶NCAM表达的影响。方法:3月龄雄性SD大鼠60只随机分成运动预处理组(SD组)、衰老组(ND组)、生理盐水对照组(NNa组)、衰老过程中有氧运动干预组(NDs组),n=15。取材后,测定大脑皮质的SOD、GSH-Px活性和MDA含量,Real-time PCR、Western blotting检测额叶NCAM基因的表达,免疫组织化学检测其表达部位。结果:ND组大鼠较NNa组出现了嗜睡、食欲不振、行动迟缓、毛色枯黄卷曲并大量脱落等衰老体征;ND组SOD、GSH-Px活性非常显著性低于NNa组(P0.05),NDs组SOD、GSH-Px活性非常显著性高于ND组(P0.05),NDs组额叶NCAM基因的mRNA和蛋白质表达水平非常显著性高于ND组(P<0.01),额叶NCAM的免疫产物呈棕褐色,阳性表达主要位于额叶颗粒层细胞周缘的神经元胞浆中。结论:D-半乳糖致大鼠脑衰老造模成功;运动预处理对大鼠脑衰老和额叶NCAM的表达均未产生积极作用;衰老过程中进行有氧运动有效地延缓脑衰老,显著上调额叶NCAM的表达。

关键词：有氧运动衰老神经细胞粘附分子额叶反转录-聚合酶链反应免疫印迹法免疫组织化学大鼠

FoxM1在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2012年第19期26卷 897-900页

作者：江黎珠王棚陈鸿雁重庆市大足区人民医院耳鼻咽喉科重庆402360 重庆市大足区人民医院骨科重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科

目的:研究FoxM1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法:运用免疫组织化学方法检测89例喉鳞状细胞癌组织、89例癌旁组织及20例喉乳头状瘤组织中FoxM1蛋白的表达情况,分析其与喉鳞状细胞癌临床病理参数的关系。采用反转录-聚合酶... 详细信息

目的:研究FoxM1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法:运用免疫组织化学方法检测89例喉鳞状细胞癌组织、89例癌旁组织及20例喉乳头状瘤组织中FoxM1蛋白的表达情况,分析其与喉鳞状细胞癌临床病理参数的关系。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测20例喉鳞状细胞癌、20例喉乳头状瘤组织以及20例癌旁组织中FoxM1mRNA表达情况。结果:FoxM1mRNA和蛋白表达的阳性率在喉鳞状细胞癌、喉乳头状瘤及癌旁组织中逐渐降低,其差异有统计学意义(P0.05)。结论:FoxM1蛋白在喉鳞状细胞癌组织中表达的上调可能与喉鳞状细胞癌的发生及浸润转移有关。

关键词：喉肿瘤免疫组织化学反转录-聚合酶链反应 FoxM1

猪传染性胃肠炎病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

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动物医学进展 2019年第9期40卷 29-33页

作者：杜雅楠李静刘艳成杜鹏包福祥内蒙古农业大学兽医学院/农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 兴安盟动物疫病预防控制中心内蒙古乌兰浩特137400

为建立一种操作简便、准确率高的检测方法,对内蒙古地区猪传染性胃肠炎流行情况进行调查,参考GenBank中收录的猪传染性胃肠炎病毒的N基因序列,设计合成了一对特异性引物,针对该基因建立了TGEV的RT-PCR检测方法。应用建立的RT-PCR方法对... 详细信息

为建立一种操作简便、准确率高的检测方法,对内蒙古地区猪传染性胃肠炎流行情况进行调查,参考GenBank中收录的猪传染性胃肠炎病毒的N基因序列,设计合成了一对特异性引物,针对该基因建立了TGEV的RT-PCR检测方法。应用建立的RT-PCR方法对从内蒙古地区7个盟市采集的204份猪腹泻样品进行了TGEV检测。结果显示,受检的204份样品中有24份样品呈现TGEV阳性,阳性率为11.76%。其中从赤峰市采集的样品TGEV阳性率最高,为20.83%;不同类型样品TGEV的检出率也有差异,其中肛门拭子的检出率最高(15.56%),其次是肠道样品(12.00%),粪便样品的检出率最低(7.87%)。表明所建立的RT-PCR检测方法灵敏度高、特异性强,可用于猪传染性胃肠炎病毒的快速检测。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒反转录-聚合酶链反应检测

2019年福建某原种猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒流行毒株ORF5基因的遗传变异分析

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动物医学进展 2021年第2期42卷 46-50页

作者：林楚云刘建奎林志锋林日丹杨小燕戴爱玲福建农林大学动物科学学院福建福州350002 龙岩学院生命科学学院福建龙岩364000 福建省生猪疫病防控工程技术研究中心福建龙岩364000

为确诊福建某原种猪场保育猪群临床暴发的疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),以及了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)毒株流行情况,从该猪场采集2周龄~8周龄各周龄段保育猪临床疑似发病猪全血各5份,将各周龄段5份血样各取50μL混匀,并分别... 详细信息

为确诊福建某原种猪场保育猪群临床暴发的疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),以及了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)毒株流行情况,从该猪场采集2周龄~8周龄各周龄段保育猪临床疑似发病猪全血各5份,将各周龄段5份血样各取50μL混匀,并分别命名为2W、3W、4W、5W、6W、7W、8W。利用PRRSV ORF5基因特异性引物通过RT-PCR方法进行检测,并对阳性结果进行ORF5基因序列分析。RT-PCR结果显示,2周~4周的保育猪全血中未检出PRRSV,5周~8周的保育猪全血中检出PRRSV。ORF5基因序列分析显示,5W毒株的ORF5基因与JXA1、HuN4和TJ等HP-PRRSV代表毒株同源性较高,为95.4%~95.6%,而与NADC30、VR2332、QYYZ等毒株的同源性较低,为82.7%~87.4%;6W、7W、8W毒株的ORF5基因与NADC30、FJZ03、FJY04和CHsx1401等类NADC30 PRRSV代表毒株同源性较高,为88.9%~91.6%,而与JXA1、VR2332、QYYZ等毒株的同源性较低,为83.3%~85.6%。基于ORF5基因构建的遗传进化树显示,5W毒株属于HP-PRRSV,6W、7W、8W毒株属于类NADC30 PRRSV。结果表明,该猪场保育猪存在类NADC30和HP-PRRSV毒株混合感染。研究结果可为福建省防控PRRS提供理论依据。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒反转录-聚合酶链反应 ORF5基因序列分析

二氧化碳浓度对A549细胞活性和肺泡表面活性蛋白C表达的影响

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中华实验外科杂志 2015年第11期32卷 2761-2763页

作者：彭丹晖黄英明老启芳覃韬谢显龙黄冰黎阳广西医科大学附属肿瘤医院麻醉科南宁530021 广西医科大学附属肿瘤医院重症医学科南宁530021

目的观察CO2培养浓度对A549细胞活性,合成和分泌肺泡表面活性蛋白C（SP-C）的影响.方法 A549细胞按CO2培养浓度分为：A组（5％CO2）;B组（10％ CO2）;C组（18％ CO2）.各组在CO2培养24、36、48 h后,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率;反... 详细信息

目的观察CO2培养浓度对A549细胞活性,合成和分泌肺泡表面活性蛋白C（SP-C）的影响.方法 A549细胞按CO2培养浓度分为：A组（5％CO2）;B组（10％ CO2）;C组（18％ CO2）.各组在CO2培养24、36、48 h后,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率;反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测SP-C mRNA表达;酶联免疫吸附法检测细胞培养液中SP-C浓度.结果（1）与A组比较,B组G1峰和凋亡率在24、36、48 h,差异无统计学意义（P＞0.05）;C组与B组比在24h（68.0±6.2比55.0±3.8,P＜0.01）、36 h（71.0±2.0比63.0±1.3）出现G1峰升高（P＜0.05）,并于36 h（10.0±1.2比6.9±1.9）、48 h（12.8 ±2.6比7.3±2.0）凋亡增加（P＜0.05）.（2）3组SP-C mRNA表达在24h比较差异无统计学意义（P＞0.05）;与A组比较,B组在36 h（0.32±0.02比0.24±0.02）（P＜0.01）、48 h（0.24±0.03比0.16±0.03）SP-C mRNA表达升高（P＜0.05）,而C组均降低（0.17 ±0.04、0.10 ±0.02）（P ＜0.05）.（3） SP-C 3组浓度在24h比较差异无统计学意义（P＞0.05）;与A组比较,B组SP-C浓度在36 h（31.00±2.00比21.00±0.85）（P＜0.01）,48 h（42.00±1.02比26.00±0.97）升高（P＜0.05）;C组SP-C浓度在48 h（20.00±0.51比26.00±0.97）降低（P＜0.05）,24、36 h比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 A549细胞活性和SP-C的表达受CO2培养浓度的影响;随着CO2浓度的升高,其作用由上调转为抑制.

关键词： A549 反转录-聚合酶链反应肺泡表面活性蛋白C

维普期刊数据库评论

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新乡市某猪场猪瘟病毒的鉴别检测

动物医学进展 2015年第3期36卷 120-123页

作者：孔令芸陈玲丽李冲孙相和李鹏王选年银梅河南科技学院动物科学学院河南新乡453003 新乡学院生命科学与技术系河南新乡453003

新乡市某猪场发生疑似猪瘟病例,为了鉴别其为疫苗毒还是野毒,采用细胞免疫化学方法和RT-PCR,并对其NS5B基因进行序列测定,序列比对并构建进化树,结果表明,猪只为猪瘟野毒感染,且分离的猪瘟病毒与石门(Shimen)株在基因序列上未发生大的... 详细信息

新乡市某猪场发生疑似猪瘟病例,为了鉴别其为疫苗毒还是野毒,采用细胞免疫化学方法和RT-PCR,并对其NS5B基因进行序列测定,序列比对并构建进化树,结果表明,猪只为猪瘟野毒感染,且分离的猪瘟病毒与石门(Shimen)株在基因序列上未发生大的变异。

关键词：猪瘟病毒免疫细胞化学反转录-聚合酶链反应序列分析

BMI-1基因在儿童急性白血病中表达的意义

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实用儿科临床杂志 2010年第3期25卷 198-200页

作者：张彦洁王军高峰郑州大学第三附属医院儿科郑州450052 河南省/郑州大学药科学研究院免疫学研究室郑州450052

目的研究BMI-l基因在儿童急性白血病患者中的表达及临床意义。方法收集2008年7月1日-2009年4月30日郑州大学第三附属医院和郑州市其他医院的初诊急性白血病患儿标本46例,对照组标本30例。实验经患儿监护人知情同意,并经医院伦理委员会... 详细信息

目的研究BMI-l基因在儿童急性白血病患者中的表达及临床意义。方法收集2008年7月1日-2009年4月30日郑州大学第三附属医院和郑州市其他医院的初诊急性白血病患儿标本46例,对照组标本30例。实验经患儿监护人知情同意,并经医院伦理委员会批准。运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测其外周血BMI-1 mRNA表达水平,应用SPSS12.0软件进行数据分析。结果***-l基因在儿童急性白血病中的表达水平显著高于对照组(P0.05),缓解后均未检测到BMI-1 mRNA;4.初治组、复发组与完全缓解组比较,前二者BMI-1 mRNA表达均显著高于后者(P0.05)。结论BMI-1基因在儿童急性白血病中表达增高,完全缓解者该基因表达水平趋于正常,提示BMI-1基因可能参与急性白血病的发生、发展过程,并可作为急性白血病的发病、复发及治疗和预后判断的指标之一。

关键词： BMI-1基因急性白血病反转录-聚合酶链反应儿童