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一个巨大的多烯抗生素基因簇中聚酮合酶(PKS)基因单元在大肠杆菌中的双重诱导超量表达

Acta Genetica Sinica 1999年第6期26卷 721-730页

作者：陶美凤胡志浩周秀芬周启邓子新 Tobias KIESER David A HOPWOOD 华中农业大学生命科技学院武汉430070 John Innes Centre NorwichU.K

根据序列分析信息，将链霉菌FR－008中与多烯大环内酯抗生素生物合成直接有关的PKS基因簇内长2671bp的一个PKS单元以正确框架克隆于表达载体pET－15b中P（T7）启动子下游的BamHI位点上，经IPTG诱导只得到微量PKS表达。同样地克隆于pBV22... 详细信息

根据序列分析信息，将链霉菌FR－008中与多烯大环内酯抗生素生物合成直接有关的PKS基因簇内长2671bp的一个PKS单元以正确框架克隆于表达载体pET－15b中P（T7）启动子下游的BamHI位点上，经IPTG诱导只得到微量PKS表达。同样地克隆于pBV220中PRPL启动子下游的PKS基因在42℃诱导后也不能超量表达出PKS蛋白。然而克隆于串联启动子PRP（T7）或PRPLP（T7）下游的PKS基因却得到了超量表达。在PRPLP（T7）下游PKS基因的超量表达依赖于IPTG及42℃两个条件的双重诱导，而42℃及IPTG单独诱导只得到常量表达。而在PRP（T7）启动子下游时PKS基因在42℃、IPTG单独诱导或42℃＋IPTG双重诱导时均可获得超量表达。据此构建了启动子PR、P（T7）串联排列的表达载体pH2330。外源基因克隆于该载体起始密码子下游的多克隆位点时，表达的外源蛋白可用Ni（＋＋）"柱亲和纯化。此外，用在大肠杆菌中表达的PKS蛋白作为抗原免疫大白兔制备了特异性的抗体，Westernblotting实验证明该抗体是PKS特异性的，可用于PKS基因簇及PKS异源表达的深入研究。

关键词： PKS 串联启动子抗PKS抗体大肠杆菌双重诱导

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Poly hⅠ：C—HB疫苗双重免疫诱导加强抗病毒疗法治疗慢…

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中国实验临床免疫学杂志 1995年第6期7卷 37-38页

作者：李光荣郝恩柱

本研究以干扰素诱导剂ＰＯＬＹＩ：Ｃ与病毒蛋白ＨＢ疫苗双重刺激作用于机体，促使机体产生更多的干扰素，起到强有力的抗病毒作用。经三年对６０名病例的对照试验，达到了预期的效果。

关键词： PyLYI:C HB疫苗双重诱导乙型肝炎

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富含白藜芦醇花生芽油的制备及品质研究

富含白藜芦醇花生芽油的制备及品质研究

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作者：李淑莹华南理工大学

学位级别：硕士

众多医学研究证明,白藜芦醇可保护心血管系统。除了白叶藜芦、虎杖及葡萄外,花生是第四种被发现含有天然白藜芦醇的植物。花生是我国重要的油料作物,具有资源丰富、价格低廉、日常食用等优点。然而,天然花生中仅有少量白藜芦醇。因此如... 详细信息

众多医学研究证明,白藜芦醇可保护心血管系统。除了白叶藜芦、虎杖及葡萄外,花生是第四种被发现含有天然白藜芦醇的植物。花生是我国重要的油料作物,具有资源丰富、价格低廉、日常食用等优点。然而,天然花生中仅有少量白藜芦醇。因此如何提高花生中的白藜芦醇含量已受到国内外学者广泛关注。除了常见的生物诱导及非生物诱导方式外,发芽也是提高花生中白藜芦醇含量的有效方式。近年来,已有研究报道单一非生物诱导花生发芽能富集白藜芦醇,但单一的非生物诱导方式存在局限性。因此,本研究拟通过双重非生物诱导研究花生芽中白藜芦醇富集的方式及调控富集的机理。并以富集白藜芦醇的花生芽为原料,通过冷榨工艺制得油脂,再对油脂品质进行分析,以期为富含白藜芦醇花生芽油的制备提供理论基础和技术指导。具体内容如下:以粤油13号花生种子为原料,首先研究了Phe、UV及US三种单一非生物诱导方式及其双重组合诱导方式对花生发芽过程白藜芦醇富集的影响,并通过研究发芽过程关键酶的活性变化探讨双重非生物诱导促进花生中白藜芦醇富集的关键因子、机理和最佳诱导方式。在此基础上对制备得到的富含白藜芦醇花生芽油的性质、脂类营养伴随物和黄曲霉毒素B、油脂品质及氧化稳定性进行进一步分析研究。(一)诱导方式对花生发芽过程中白藜芦醇富集的影响研究首先研究了三种单一非生物诱导方式对花生芽中白藜芦醇富集的影响,结果发现Phe、UV及US的单一诱导方式在一定程度上能促进花生芽中白藜芦醇的富集。又研究了双重组合诱导对花生芽中白藜芦醇富集的影响,结果发现UV-Phe和US-Phe双重诱导方式对花生芽中白藜芦醇的富集产生协同效应,而UV-US双重诱导方式则对白藜芦醇的富集产生拮抗效应。这是因为外源添加前体物质Phe可提高PAL、C4H、4CL、3-O-GT四种酶的活性;US可提高C4H和RS两种酶的活性;UV可提高与白藜芦醇富集相关的PAL、C4H、4CL、RS、3-O-GT及β-D-G六种酶的活性。相比于单一诱导方式,UV-Phe及US-Phe双重诱导方式能更显著提高酶的活性,对白藜芦醇的富集有协同促进作用。UV-Phe双重诱导方式对花生发芽过程中白藜芦醇的富集效果最佳,参数条件为:Phe浓度为0.6 mmol/L,UV强度为120μW/cm,辐照时间为45 min。在此处理下,随着发芽时间延长,Res含量呈先上升后下降趋势,Pd含量呈持续上升趋势,TR总量于第4 d达到最大值。此时,Res含量为2.88±0.12μg/g,Pd含量为1.68±0.11μg/g,TR总量为4.56±0.17μg/g,是花生的7.24倍。但在UV-US双重诱导方式中,发现PAL、C4H、4CL、RS活性总体低于单一诱导方式,说明这种双重诱导方式对花生芽中白藜芦醇富集有拮抗作用。(二)诱导发芽过程对花生芽油性质、脂溶性营养伴随物等的影响研究经最佳诱导发芽后,富含白藜芦醇的第4 d花生芽中脂肪含量仍高达46.73±0.75%。从油脂性质上看,诱导发芽对花生芽油的脂肪酸含量和种类影响不大。但诱导发芽能显著提高油脂中的脂溶性营养伴随物,包括生育酚、植物甾醇和植物多酚的含量,其总量分别是原来的1.39、1.31、1.70倍,说明油脂的营养品质得以显著强化。从油脂安全角度出发,发芽过程中未检出黄曲霉毒素B,表明了花生芽油的安全可食用性及其在油脂加工应用中的可行性。(三)富含白藜芦醇花生芽油的品质及氧化稳定性研究以经最佳诱导方式处理后第4 d花生芽为原料,通过冷榨工艺制得RPO。RPO的Res含量为0.98±0.03μg/g,分别是SO及PO的5.16和5.16倍;Pd含量为0.54±0.03μg/g,分别是SO及PO的2.70和3.61倍;TR总量为1.52±0.04μg/g,分别是SO及PO的3.90和4.47倍,说明成功制备了富含白藜芦醇的花生芽油。RPO的水分、酸价、过氧化值及碘值均符合国标。RPO的风味丰富,不仅具备冷榨花生油特有的清香味,2,3-丁二醇、苯甲醛及酮类等风味物质的增加还赋予其浓郁甜味及浓香花生油特有的烘烤味。在Schaal加速试验中,RPO所产生的初级氧化产物及次级氧化产物均比SO、PO少,说明RPO油脂品质优于SO、PO。Rancimat及Raman两种方法的结果均显示三种油样的氧化稳定性大小排序为:RPO>SO>PO。RPO的氧化诱导期比SO、PO高,说明经诱导发芽处理所提高的白藜芦醇及生育酚、植物甾醇、植物多酚等其它组分对油脂起了很好的保护作用,能延长其货架期。30 d的加速氧化后,RPO中的Res含量仍有0.56±0.04μg/g,Pd含量仍有0.22±0.22μg/g,TR总量为0.78±0.06μg/g。RPO的白藜芦醇损耗率比SO、PO低,这说明花生发芽后产生的较多生育酚和植物多酚对白藜芦醇有一定的保护作用。

关键词：白藜芦醇花生芽双重诱导富集花生芽油

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基于红外热成像仪的乳腺癌检查应用效果研究

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红外 2021年第7期42卷 43-49页

作者：陈玉英云南省老年病医院云南昆明650011

乳腺癌是全球女性发病率和死亡率最高的癌症。采用红外热成像技术能发现早期乳腺癌,并降低死亡率。借鉴了国内外的相关研究成果,采用冷环境及热电激发双重诱导下的红外热成像方法来解决小尺寸癌变组织和乳腺深部癌变组织的红外热成像应... 详细信息

乳腺癌是全球女性发病率和死亡率最高的癌症。采用红外热成像技术能发现早期乳腺癌,并降低死亡率。借鉴了国内外的相关研究成果,采用冷环境及热电激发双重诱导下的红外热成像方法来解决小尺寸癌变组织和乳腺深部癌变组织的红外热成像应用效果差的问题。红外热成像的对比度显著增加了,且通电模式下的温度对比度提高了26.5%。研究表明,热对比度主要受癌变组织大小、深度和温度的影响,同时还受环境温度和换热系数的影响。通过同时控制环境和热源温度的措施提高了热对比度,预期乳腺癌的早期筛查效果可提高50%以上。

关键词：乳腺癌红外热成像表面温度双重诱导早期筛查

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