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抑制基质金属蛋白酶-9对脑出血大鼠双皮质素表达的影响

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神经解剖学杂志 2012年第5期28卷 491-494页

作者：杨晓波任伟民王志强陈英辉复旦大学附属金山医院神经内科上海200540 复旦大学附属金山医院病理科上海200540 山东省诸城市人民医院MR室诸城262200

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)抑制剂-强力霉素对脑出血大鼠神经再生的影响。方法:采用自体血注射法制作大鼠脑出血模型,随机分为对照组、模型组、干预组(脑出血后第1～7 d给予强力霉素30 mg/kg,1次/d,灌胃),第14 d处死动物并取脑,... 详细信息

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)抑制剂-强力霉素对脑出血大鼠神经再生的影响。方法:采用自体血注射法制作大鼠脑出血模型,随机分为对照组、模型组、干预组(脑出血后第1～7 d给予强力霉素30 mg/kg,1次/d,灌胃),第14 d处死动物并取脑,用免疫组化方法测定脑出血后血肿周围侧脑室嘴侧的室下区(SVZ)双皮质素(DCX)及MMP-9的表达。结果:与对照组(灰度值:MMP-9:116.87±5.13;DCX:121.34±2.76)相比,脑出血组大鼠在脑出血后第14 d时MMP9、DCX表达增强(灰度值:MMP-9:102.80±2.42,P<0.05;DCX:110.58±2.29,P<0.05)。干预组较脑出血组MMP-9表达减弱(灰度值:MMP-9:104.24±3.70,P<0.05),DCX表达增强(灰度值:DCX:106.50±3.12,P<0.01)。结论:脑出血急性期给予基质金属蛋白酶-9抑制剂强力霉素可以促进神经再生。

关键词：脑出血神经再生强力霉素基质金属蛋白酶-9 双皮质素

双皮质素过表达载体的构建及其对大鼠脑胶质瘤细胞迁移能力的影响

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江苏医药 2017年第24期43卷 1749-1752,F0002,I0001页

作者：高玥姬广全高殿帅 Abiola Abdulrahman Ayanlaja 徐州医科大学江苏省221004

目的观察过表达双皮质素(DCX)基因对大鼠脑胶质瘤细胞迁移能力的影响。方法采用PCR扩增DCX基因片段,构建DCX慢病毒表达载体,感染293T细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达。筛选稳定表达DCX的大鼠脑胶质瘤C6细胞,将C6细胞分为空载... 详细信息

目的观察过表达双皮质素(DCX)基因对大鼠脑胶质瘤细胞迁移能力的影响。方法采用PCR扩增DCX基因片段,构建DCX慢病毒表达载体,感染293T细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达。筛选稳定表达DCX的大鼠脑胶质瘤C6细胞,将C6细胞分为空载体病毒感染组(GV468组)和过表达DCX病毒感染组(GV468-DCX组),qRT-PCR和Western blot法检测DCX表达。Transwell实验检测过表达DCX对大鼠胶质瘤C6细胞迁移能力的影响。结果成功构建过表达DCX的慢病毒载体,感染C6细胞的效率达到90%。感染C6细胞后,GV468-DCX组DCX mRNA和蛋白表达较GV468组高(P<0.01或P<0.05),GV468-DCX组迁移能力高于GV468组(P<0.05)。结论成功构建DCX慢病毒表达载体,获得稳定表达DCX的大鼠胶质瘤细胞系,过表达DCX基因能促进胶质瘤细胞的迁移能力,为脑胶质瘤的基因治疗提供参考。

关键词：双皮质素脑胶质瘤慢病毒

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过表达双皮质素对胶质瘤细胞存活能力的影响

解剖学杂志 2021年第S1期44卷 131-132页

作者：高殿帅程博徐州医科大学神经生物学与解剖学系神经生物学重点实验室徐州221004

恶性胶质瘤是成人中枢神经系统中恶性程度最高的肿瘤。研究人员发现,针对恶性胶质瘤的特定基因进行靶向治疗,可能为治疗胶质瘤提供新的方法。本实验研究了双皮质素对胶质瘤细胞增殖能力、细胞周期及凋亡的影响,揭示其在维持胶质瘤细胞... 详细信息

恶性胶质瘤是成人中枢神经系统中恶性程度最高的肿瘤。研究人员发现,针对恶性胶质瘤的特定基因进行靶向治疗,可能为治疗胶质瘤提供新的方法。本实验研究了双皮质素对胶质瘤细胞增殖能力、细胞周期及凋亡的影响,揭示其在维持胶质瘤细胞存活中的作用,进一步了解了双皮质素与胶质瘤存活之间的关系。

关键词：恶性胶质瘤中枢神经系统恶性程度胶质瘤细胞靶向治疗存活能力细胞周期双皮质素

不同强度有氧运动对APP/PS1双转基因小鼠海马双皮质素及β-淀粉样蛋白的影响

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西安体育学院学报 2022年第2期39卷 214-223页

作者：李垂坤张业廷魏翠兰袁琼嘉成都大学体育学院成都610106 成都体育学院运动医学与健康学院成都610041 中国民航飞行学院四川广汉618307 成都理工大学体育学院成都610059

目的观察5个月规律不同强度有氧运动对APP/PS1双转基因小鼠海马齿状回双皮质素及β-淀粉样蛋白的影响。方法将3月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为5组:空白对照组(AD^(C))、低强度运动组(AD^(L))、中强度运动组(AD^(M))、大强度运动组(AD^... 详细信息

目的观察5个月规律不同强度有氧运动对APP/PS1双转基因小鼠海马齿状回双皮质素及β-淀粉样蛋白的影响。方法将3月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为5组:空白对照组(AD^(C))、低强度运动组(AD^(L))、中强度运动组(AD^(M))、大强度运动组(AD^(H)),另设野生型组(WT^(C)),每组8只。运动组以不同强度有氧运动进行干预:低强度跑速为12 m/min,中强度跑速为15 m/min,大强度跑速为18 m/min。每周5 d,每天30 min,持续5个月。在各运动强度下,当小鼠停止不运动时,不对小鼠进行电刺激,只轻柔地触摸尾巴让小鼠继续运动。然后,通过Morris水迷宫及八臂迷宫实验评估小鼠的学习和记忆能力,利用免疫荧光和Western blot检测小鼠海马双皮质素及Aβ_(1-42)的蛋白表达水平。结果(1)在MWM定位航行实验过程中,各组小鼠的逃避潜伏期都是逐渐减少的。从第2天开始,AD^(C)组小鼠的平均逃避潜伏期就显著高于WT^(C)组(P0.05)。在MWM定位航行实验中,与WT^(C)组小鼠相比,AD^(C)组穿越原平台所在区域的次数显著降低(P双转基因小鼠的学习记忆能力;运动尤其是中等强度有氧运动可以增强APP/PS1双转基因小鼠海马DCX的表达,降低其Aβ_(1-42)的沉积。

关键词：有氧运动阿尔兹海默症双皮质素 β-淀粉样蛋白神经发生

喹硫平对精神分裂症模型小鼠记忆功能及海马双皮质素表达的影响

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中华行为医学与脑科学杂志 2015年第11期24卷 970-973页

作者：李锐何珊珊王霞刘高华彭正午王化宁谭庆荣第四军医大学西京医院心身科西安710032 陕西中医药大学

目的探讨喹硫平（Quetiapine,QUE）对铜离子螯合剂双环己酮草酰二腙（Cuprizone,CPZ）诱导的C57BL/6小鼠精神分裂症模型记忆功能及海马双皮质素（Doublecortin,DCX）表达的影响.方法 48只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组（sham）... 详细信息

目的探讨喹硫平（Quetiapine,QUE）对铜离子螯合剂双环己酮草酰二腙（Cuprizone,CPZ）诱导的C57BL/6小鼠精神分裂症模型记忆功能及海马双皮质素（Doublecortin,DCX）表达的影响.方法 48只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组（sham）、模型组（CPZ）及药物干预组（CPZ＋QUE）,每组16只.sham组给予普通饲料,CPZ组及CPZ＋QUE组小鼠饲喂含0.2％ CPZ的饲料造模.同时,在CPZ＋QUE组饮水中添加1％二甲基亚砜（DMSO）溶液溶解的QUE（10mg· kg-1·d-1）,sham组与CPZ组接受1％ DMSO溶液作为对照,模型制备及药物干预持续6周.采用Y-迷宫测试观察各组小鼠空间工作记忆能力;免疫荧光染色观察海马DCX阳性新生神经元数量的变化;RT-PCR技术检测海马Notch1、Hes1含量.结果（1）Y-迷宫实验：CPZ组正确转换率[（22.70±6.70）％]与sham组[（57.69±6.70）％]比较显著降低（P＜0.05）,CPZ组表现出明显的空间工作记忆损害;CPZ＋QUE组的正确转换率为（54.69± 10.06）％,显著高于CPZ组,差异具有统计学意义（P＜0.01）.（2）免疫荧光染色：与sham组比较,CPZ组小鼠海马DCX阳性细胞数量显著降低[（6342.85±1801.72） vs （19428.57±2507.13）,P＜0.01],QUE干预则逆转了这一改变[CPZ＋QUE组vs CPZ组,（15928.57±2049.97）vs（6342.85± 1801.72）,P＜0.01].（3）RT-PCR：CPZ＋QUE组与CPZ组比较,Notch1[（0.97±0.29） vs （0.23±0.20）,P＜0.01]和Hes1[（1.00±0.41） vs （0.38±0.30）,P＜0.01]的mRNA表达量升高,差异有统计学意义（P＜0.01）,与sham组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论喹硫平缓解了CPZ对小鼠海马DCX表达的影响,改善了小鼠的认知功能;喹硫平的上述作用可能是通过激活Notchl信号通路来实现的.

关键词：喹硫平记忆精神分裂症小鼠海马双皮质素

癫痫大鼠模型中miR-134-5p和神经元迁移蛋白双皮质素(DCX)的异常表达

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癫痫大鼠模型中miR-134-5p和神经元迁移蛋白双皮质素(DCX)的异常...

作者： KRIVOSHAPKINA LIUBOV 大连医科大学

学位级别：硕士

2.1.背景及目的:目前,癫痫的诊断主要依据临床表现、脑电图及影像学检查。据世界卫生组织统计,癫痫是最目前常见的疾病之一。截至到2016年,全球范围内约有5千万癫痫患者,发病率约为0.85%。因此目前研究尝试从形态学,神经化学,神经生理学... 详细信息

2.1.背景及目的:目前,癫痫的诊断主要依据临床表现、脑电图及影像学检查。据世界卫生组织统计,癫痫是最目前常见的疾病之一。截至到2016年,全球范围内约有5千万癫痫患者,发病率约为0.85%。因此目前研究尝试从形态学,神经化学,神经生理学,神经药理学等多方面去探索癫痫疾病的机制及治疗(Scharfman.,2002,Harvey.B.D et al.,2003,Kalinichenko S.G et al.,2004)。目前研究发现脑组织可以分泌数种miRNA,进而影响树突的形态,神经元的迁移和胶质细胞的功能(***-Mateos,***,2013),并可以通过影响基因及蛋白的表达水平参与癫痫疾病的病理生理过程。miRNA是一类由20-24个核苷酸组成的,非编码小分子RNA,其主要的生物学功能是抑制靶基因的表达。有研究发现miR-134的功能与神经触突的可塑性有关,并且参与神经细胞的迁移与分化(E.M.J-Mateos,2012)。目前研究发现,miRNA-134-5p(miRNA-134)的靶基因有PUM2(Fiore et al.2009),CREB(Gao et al.2010)and DCX(Gaughwin et al.2011)等。而双皮质素(DCX)参与皮质发育过程中的神经细胞的迁移。DCX基因的突变可以引起神经元迁移的异常导致癫痫。DCX可以用测量作齿状回成熟神经元的标志物,与无脑回畸形和灰质异位症的致病机制有关(Rayner et al.2006)。故本文采用PCR、Western blot等方法研究miR-134及DCX在癫痫动物模型中的异常表达,探讨其在癫痫中的作用。2.2.材料与方法:采用匹罗卡品-氯化锂点燃模型作为大鼠的癫痫发作模型,将实验大鼠分为对照组、急性期(发作后24小时)组、亚急性期(发作3周)组,慢性期(发作后2个月)组。采集模型大鼠脑组织中的海马标本,采用q PT-PCR检测miRNA-134的表达,Western blot等检测DCX的表达,探寻其异常表达及关系。2.3.结果:qPT-PCR检测发现大鼠癫痫模型的海马组织中的miRNA-134在发作24小时后升高明显,而三周及两个月组则无明显升高。Western blot发现大鼠癫痫模型的海马组织中的DCX在各个时期的表达均下降明显。2.4.结论:癫痫大鼠模型海马组织中miR-134在急性发作时升高明显,此后在亚急性期及慢性期又逐渐下降至正常,而DCX在癫痫大鼠模型海马组织中发作后各个时期均程下降。二者可能参与癫痫的致病机制及发作后的神经元损伤与修复过程。

关键词：癫痫 miRNA-134 双皮质素神经发育

加巴喷丁对慢性疼痛和抑郁共病成年大鼠海马齿状回神经发生的影响

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中南大学学报（医学版） 2022年第7期47卷 839-846页

作者：曾文飞谭燕梦杨林江兴华湖南省人民医院麻醉科长沙410005 中南大学湘雅二医院麻醉科长沙410011

目的:持续3个月以上的慢性疼痛往往合并抑郁、焦虑等负性情绪。长期的慢性疼痛应激可以导致海马结构和功能上的可塑性改变。加巴喷丁除镇痛作用外,同时具有一定的脑保护作用。本研究观察加巴喷丁对慢性疼痛和抑郁共病成年大鼠海马齿状回... 详细信息

目的:持续3个月以上的慢性疼痛往往合并抑郁、焦虑等负性情绪。长期的慢性疼痛应激可以导致海马结构和功能上的可塑性改变。加巴喷丁除镇痛作用外,同时具有一定的脑保护作用。本研究观察加巴喷丁对慢性疼痛和抑郁共病成年大鼠海马齿状回(dentate gyrus,DG)神经发生的影响。方法:将成年Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分成4组:假手术(Sham)组、共病模型+生理盐水(CCI+Veh)组(1 m L生理盐水)、共病模型+低剂量加巴喷丁(CCI+LG)组(将加巴喷丁用生理盐水稀释至1 mL,加巴喷丁剂量为30 mg/kg)、共病模型+高剂量加巴喷丁(CCI+HG)组(将加巴喷丁用生理盐水稀释至1 mL,加巴喷丁剂量为100 mg/kg),每组8只。采用坐骨神经环扎造成慢性压迫性损伤(chronic constrictive injury,CCI)建立共病模型。于手术后第30天开始经腹腔注射给药,连续7 d。测定大鼠术前1天及术后第7、14、21、28、40天右后肢的机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT);术后第28、40天进行强迫游泳实验及糖水偏爱实验并测量被动漂浮时间和糖水偏爱率;采用免疫组织化学染色观察海马DG的神经元双皮质素(doublecortin,DCX)阳性神经元数目和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达,高尔基染色观察大鼠海马神经元结构。结果:与Sham组相比,CCI共病模型大鼠PWMT术后第7天达到最低值并持续至术后第28天,第40天仍处于较低水平(均P<0.05);与CCI+Veh组相比,术后第40天CCI+LG组、CCI+HG组大鼠PWMT均有提高(均P<0.05)。与Sham组相比,CCI共病模型大鼠在术后第28天被动漂浮时间显著增长(均P<0.01),糖水偏爱率显著降低(均P<0.01);与CCI+Veh组相比,CCI+HG组大鼠在术后第40天被动漂浮时间缩短(P<0.05),糖水偏爱率显著增加(P<0.01)。与CCI+Veh组相比,CCI+LG组和CCI+HG组的大鼠海马DG的DCX阳性细胞增加,且CCI+HG组增加更加明显(P<0.05);与Sham组相比,CCI+Veh组大鼠的海马DG的BDNF表达水平下降(P<0.05);与CCI+Veh组相比,CCI+HG组大鼠的海马DG的BDNF表达水平上升(P<0.05),海马神经元树突棘的长度增加(P<0.05)。结论:加巴喷丁可缓解慢性疼痛和抑郁共病模型大鼠慢性疼痛及抑郁样行为,促进其海马齿状回神经元的神经发生。

关键词：神经病理性疼痛抑郁加巴喷丁脑源性神经营养因子双皮质素神经发生

化瘀通络灸对血管性痴呆大鼠延迟回忆及海马神经新生的影响

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针刺研究 2018年第3期43卷 133-139页

作者：樊吟秋崔竟成杨骏王频安徽中医药大学研究生部合肥230038 安徽中医药大学第一附属医院合肥230038 安徽中医药大学针灸骨伤临床学院合肥230038

目的:观察化瘀通络灸对血管性痴呆(VD)大鼠神经干细胞(NSCs)、内皮祖细胞(EPCs)移植后延迟回忆及海马巢蛋白(Nestin)、双皮质素(DCX)表达的影响,并探索其与脑内神经新生的关系。方法:Wistar大鼠采用Morris水迷宫筛选后随机分为假手术组... 详细信息

目的:观察化瘀通络灸对血管性痴呆(VD)大鼠神经干细胞(NSCs)、内皮祖细胞(EPCs)移植后延迟回忆及海马巢蛋白(Nestin)、双皮质素(DCX)表达的影响,并探索其与脑内神经新生的关系。方法:Wistar大鼠采用Morris水迷宫筛选后随机分为假手术组、VD模型组、共植体艾灸组、共植体空白组。采用改良的缺血再灌注后结扎剪断法复制VD模型,NSCs、EPCs细胞培养后进行共植体构建,共植体艾灸组及共植体空白组大鼠于模型鉴定后3d进行共植体右侧侧脑室移植。共植体艾灸组于移植后3d进行化瘀通络灸治疗,取"百会""大椎""神庭"悬灸20min,每天1次,7次为1个疗程,共3个疗程,每疗程结束后休息1d。运用Morris水迷宫测试各组大鼠延迟回忆成绩,免疫荧光双标激光共聚焦检测大鼠右侧海马Nestin、DCX的表达。结果:Morris水迷宫结果显示,治疗前VD模型组、共植体空白组、共植体艾灸组逃避潜伏期均较假手术组延长,120s内穿越原平台次数减少(P0.05),假手术组、共植体艾灸组、共植体空白组大鼠逃避潜伏期均较治疗前缩短(P<0.05);且共植体艾灸组大鼠120s内穿越原平台次数较治疗前增多(P<0.05)。与假手术组相比,造模后大鼠逃避潜伏期延长,穿越原平台次数减少(P<0.008);共植体艾灸组大鼠逃避潜伏期较VD模型组缩短,穿越原平台次数较VD模型组增多(P<0.008);与共植体空白组相比,共植体艾灸组逃避潜伏期缩短(P<0.008)。免疫荧光结果显示,共植体艾灸组治疗1、3个疗程后海马区Nestin的阳性表达多于共植体空白组(P<0.05);Nestin、DCX分别在治疗1、2个疗程后表达最多(P<0.05)。结论:化瘀通络灸可提高VD大鼠NSCs、EPCs移植后的延迟回忆,并通过上调海马区Nestin、DCX的表达,促进脑内神经新生。

关键词：艾灸血管性痴呆海马延迟回忆巢蛋白双皮质素

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牦牛海马的形态特征及成体神经发生的初探

兽类学报 2012年第2期32卷 137-148页

作者：许文强徐鑫佳范力邵虹刘兵峰邵宝平王建林赵善廷兰州大学生命科学学院兰州730000 西北农林科技大学动物医学院杨凌712100

采用传统H.E染色和Golgi-Cox染色方法观察成年牦牛海马结构的形态和细胞构筑,并通过DCX-DAB免疫组化染色和DCX/NeuN、GFAP/NeuN双重免疫荧光标记等技术观察齿状回颗粒下层中的新生神经元和放射状胶质细胞。结果表明,牦牛海马结构主要包... 详细信息

采用传统H.E染色和Golgi-Cox染色方法观察成年牦牛海马结构的形态和细胞构筑,并通过DCX-DAB免疫组化染色和DCX/NeuN、GFAP/NeuN双重免疫荧光标记等技术观察齿状回颗粒下层中的新生神经元和放射状胶质细胞。结果表明,牦牛海马结构主要包括齿状回和海马本部,二者分层清晰。海马的主要细胞为颗粒细胞、苔藓细胞和锥体细胞。CA3区的锥体细胞胞体较CA1区的大,但其顶树突的平均长度较短。CA1区的锥体细胞明显分为两层,而CA3区的则为一层。DCX阳性细胞的胞体主要集中在齿状回颗粒下层靠近门区处,沿颗粒层内侧单个或少数聚集分布。沿齿状回颗粒下层分布着一层GFAP阳性的放射状胶质细胞样细胞,其胞质和单极性的细长突起均呈GFAP阳性,而胞核为阴性。在整个海马结构中均有大量星形GFAP阳性细胞散在分布,特别是海马分子层和门区内靠近颗粒层部分的密度较其它部位大。牦牛海马的形态结构与绵羊的相似,而与大鼠、小鼠、家猫、兔子等小型哺乳动物有一定差别。两种DCX免疫组化实验结果表明在牦牛海马中存在着新生神经元。GFAP免疫荧光标记表明,牦牛海马结构中分布有星形胶质细胞;特别是放射状胶质细胞。

关键词：牦牛齿状回双皮质素成体神经发生