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几种常见双特异性抗体研究进展

军事医学 2023年第2期47卷 146-149页

作者：郭家正王荣陆健昇杨志新军事科学院军事医学研究院生物工程研究所北京100071

随着基因编辑等生物技术进步,双特异性抗体研究和应用有了极大发展。双特异性抗体具有2个抗原结合区,可同时靶向2个不同抗原表位,在临床治疗方面具有重大意义,广泛应用于癌症治疗和炎症反应。但双特异性抗体构建方式并不固定,且每种结... 详细信息

随着基因编辑等生物技术进步,双特异性抗体研究和应用有了极大发展。双特异性抗体具有2个抗原结合区,可同时靶向2个不同抗原表位,在临床治疗方面具有重大意义,广泛应用于癌症治疗和炎症反应。但双特异性抗体构建方式并不固定,且每种结构各具特色。该文简要介绍了几种常见双特异性抗体构建方式、构建原理及其应用进展。

关键词：抗体双特异性 scFv-IgG DVD-IgG 构建方式构建原理临床应用

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双特异性抗体的制备与应用

免疫学杂志 1994年第3期10卷 206-209,149页

作者：孙瑛勋军事医学科学院基础医学研究所

双特异性抗体的制备与应用孙瑛勋，综述沈倍奋审阅（军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０）双特异性抗体（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）又称双功能抗体（ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＢＦ... 详细信息

双特异性抗体的制备与应用孙瑛勋，综述沈倍奋审阅（军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０）双特异性抗体（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）又称双功能抗体（ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＢＦＡ），此类抗体单体的两个抗原结合位...

关键词：抗体双特异性制备

CD3/CD19双特异性单克隆抗体的制备、鉴定及其再导向的研究

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中国医学科学院学报 1998年第5期20卷 351-356页

作者：陈晓钎沈德诚孙同哲白金芬黄丽华佘鸣山芝芳李洪钊张金香刘俊霞郭桂庆周立中国医学科学院中国协和医科大学

目的制备ＣＤ３／ＣＤ１９双特异性单克隆抗体（ＢｓＡｂ）并研究其生物学作用。方法采用杂交－杂交瘤技术制备ＢｓＡｂ，以双亚类ＥＬＩＳＡ和细胞结合试验确证ＢｓＡｂ的存在，再用５１Ｃｒ释放试验证实ＢｓＡｂ的再导向细胞毒效应。... 详细信息

目的制备ＣＤ３／ＣＤ１９双特异性单克隆抗体（ＢｓＡｂ）并研究其生物学作用。方法采用杂交－杂交瘤技术制备ＢｓＡｂ，以双亚类ＥＬＩＳＡ和细胞结合试验确证ＢｓＡｂ的存在，再用５１Ｃｒ释放试验证实ＢｓＡｂ的再导向细胞毒效应。结果获得３株ＣＤ３／ＣＤ１９四源杂交瘤细胞，其中１株已成为稳定分泌ＣＤ３／ＣＤ１９ＢｓＡｂ的四源杂交瘤细胞株。细胞毒试验表明ＣＤ３／ＣＤ１９ＢｓＡｂ上清、ＣＤ３／ＣＤ１９纯化抗体以及ＣＤ３／ＣＤ１９化学交联ＢｓＡｂ都能增强ＣＤ３激活杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ细胞）对Ｎａｌｍ－６靶细胞的杀伤作用（Ｐ＜０．０５～０．００１）。结论ＣＤ３／ＣＤ１９ＢｓＡｂ具有显著的再导向激活Ｔ细胞杀伤特异肿瘤靶细胞的功能，提示该ＢｓＡｂ有临床应用的潜在价值。

关键词：双特异性单克隆抗体 CD3 CD19

抗纤维蛋白-抗尿激酶双特异性单克隆抗体的体内外溶栓效果的研究

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中国医学科学院学报 1998年第5期20卷 357-360页

作者：袁洪卫林汉朱锡霞张一泉张晓蓉褚丽萍雷震赵明辉武怀珠中国医学科学院中国协和医科大学

目的研究抗纤维蛋白－抗尿激酶双特异性单克隆抗体在体内外的溶栓效力。方法通过分泌抗纤维蛋白单抗的杂交瘤细胞（变异株）与尿激酶免疫小鼠的脾细胞融合，获得分泌双特异性单抗（ｂｓＭｃＡｂｓ）杂交－杂交瘤细胞。采用ＥＬＩＳＡ法... 详细信息

目的研究抗纤维蛋白－抗尿激酶双特异性单克隆抗体在体内外的溶栓效力。方法通过分泌抗纤维蛋白单抗的杂交瘤细胞（变异株）与尿激酶免疫小鼠的脾细胞融合，获得分泌双特异性单抗（ｂｓＭｃＡｂｓ）杂交－杂交瘤细胞。采用ＥＬＩＳＡ法检测该ｂｓＭｃＡｂｓ与纤维蛋白和尿激酶的结合力。用１３１Ｉ血浆－血浆凝块溶解率法测定体外溶栓效力。用兔血栓模型测定体内溶栓效力。结果获得８株分泌抗纤维蛋白－抗尿激酶双特异性单抗的杂交－杂交瘤细胞。ＥＬＩＳＡ实验证明ｂｓＭｃＡｂｓ与纤维蛋白和尿激酶均有很强的结合力。体外溶栓实验证明ｂｓＭｃＡｂｓ可使尿激酶的溶栓效力增强１５．５％。体内溶栓实验证明ｂｓＭｃＡｂｓ的溶栓效力为尿激酶的１．６～２．１倍。结论单抗导向溶栓剂具有高度特异性和局部溶栓效力强等优点，值得进一步研究。

关键词：尿激酶双特异性单克隆抗体纤维蛋白溶栓治疗

温莪术提取物协同抗CD3-抗胶质瘤双特异性抗体抑制神经胶质瘤生长

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中国临床康复 2006年第23期10卷 124-126,F0003页

作者：衣服新黄强周丽英锦州医学院附属第一医院神经外科辽宁省锦州市121000 苏州大学附属第二医院肿瘤研究所江苏省苏州市215000

目的:观察具有诱导癌细胞凋亡的作用,并作为免疫调节剂的温莪术提取物β-榄香烯是否可协同抗CD3-抗胶质瘤双特异性抗体免疫抑制胶质瘤生长。方法:实验于2003-12/2005-08在苏州大学附属第二医院脑肿瘤研究室完成。①选用重度联合免疫缺陷... 详细信息

目的:观察具有诱导癌细胞凋亡的作用,并作为免疫调节剂的温莪术提取物β-榄香烯是否可协同抗CD3-抗胶质瘤双特异性抗体免疫抑制胶质瘤生长。方法:实验于2003-12/2005-08在苏州大学附属第二医院脑肿瘤研究室完成。①选用重度联合免疫缺陷SCID小鼠30只,雌雄不拘,鼠龄4～6周。温莪术提取物β-榄香烯由大连市医药科学研究所馈赠。采用化学偶联法将由解放军第二军医大学长海医院免疫室提供的CD3单抗和本室制备的SZ39抗人脑胶质瘤单抗制备为双特异性抗体。②取培养生长的人脑胶瘤体外细胞系SHG-44细胞3×108L-1,于人外周血单个核细胞转输后次日,直接注射于SCID鼠右腋皮下。将种瘤后SCID小鼠按随机抽签法分为5组:β-榄香烯+抗体+白细胞介素2+单个核细胞组:每天腹腔注射β-榄香烯(1.5mg/只)和双特异性抗体200μg/只,每天尾静脉注射白细胞介素2(5×105U/只),接种肿瘤前1天及第14天尾静脉注射人外周血单个核细胞(3.16×1010L-1,0.5mL,取自苏州大学附属第二医院健康志愿者2名外周血);抗体+白细胞介素2+单个核细胞组:注射3种物质剂量和方法同上组;白细胞介素2+单个核细胞组:注射2种物质剂量和方法同上组;外周单个核细胞组:注射外周单个核细胞剂量和方法同上组;对照组:尾静脉注射培养液。③记录肿瘤增殖的潜伏期,即接种日至皮下扪及微结节的时间。接种肿瘤28d后,称肿瘤质量。荧光原位杂交法测算每克肿瘤人淋巴细胞数量。苏木精-伊红染色,Olympus光学显微镜(×200)下观察肿瘤组织病理学变化。结果:SCID小鼠30只均进入结果分析。①神经胶质瘤组织病理学观察结果:β-榄香烯+抗体+白细胞介素2+外周血单个核细胞组和抗体+白细胞介素2+外周单个核细胞组肿瘤细胞有部分坏死,并有淋巴细胞浸润,其余各组形态相近,淋巴细胞浸润相对较少。②肿瘤增殖潜伏期:β-榄香烯+抗体+白细胞介素2+单个核细胞组明显长于其他4组(P双特异性抗体抑制神经胶质瘤生长。

关键词：莪术植物提取物抗体双特异性重症联合免疫缺陷神经胶质瘤

超声微泡联合双特异性抗体对骨髓间充质干细胞干预心肌纤维化的实验研究

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中华超声影像学杂志 2011年第3期20卷 258-263页

作者：邓玮陈庆伟王志刚李兴升刘灏周玥李桂琼柯大智莫显刚重庆医科大学附属第二医院老年病科 400010 重庆医科大学附属第二医院消化内科 400010 重庆医科大学超声影像学研究所重庆医科大学基础医学院组胚教研室

目的探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）在超声辐照微泡（MB）和双特异抗体（BiAb）的辅助下干预心肌纤维化的效果及可能机制。方法在MB的辅助下，将雄性小鼠MsCs与BiAb输入异丙肾性心肌纤维化雌性小鼠（MSCs＋BiAb＋MB组）。BiAb由能识别间... 详细信息

目的探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）在超声辐照微泡（MB）和双特异抗体（BiAb）的辅助下干预心肌纤维化的效果及可能机制。方法在MB的辅助下，将雄性小鼠MsCs与BiAb输入异丙肾性心肌纤维化雌性小鼠（MSCs＋BiAb＋MB组）。BiAb由能识别间充质干细胞的anti—CD29和能特异性结合损伤心肌的抗肌凝蛋白轻链抗体（AMLcA）制备。另设未治疗组、单纯MSCs组、单纯BiAb组、单纯MB组、MSCs＋BiAb组和正常对照组。5周后处死小鼠，实时荧光定量PCR检测心肌Y染色体鉴别基因（SRY）的表达。天狼猩红染色对比心脏胶原纤维含量。免疫组织化学染色法观察心脏热休克蛋白-70（HSP-70）表达。结果MSCs归巢数最多的是MSCs＋BiAb＋MB组，其次为MSCs＋BiAb组，MSCs组归巢数最少。与未治疗组相比，MSCs＋BiAb＋MB组、MSCs＋BiAb组和单纯MCSs组的心肌胶原纤维含量下降（P〈0．05），HSP-70表达下调（P〈0．05）。其中，与单纯MSCs组相比，MSCs＋BiAb＋MB组的心肌胶原沉积量更低（P〈0．05）。单纯MB组、单纯BlAb组与未治疗组的胶原沉积量、HSP-70表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MB可促进骨髓间充质于细胞的归巢，联合BiAb，可进一步增加干细胞的归巢率和修复效果。MSCs归巢后能干预心肌纤维化，其机制可能与HSP-70的介导有关。

关键词：超声检查微气泡间质干细胞抗体双特异性心肌纤维化

抗人IgG-抗HRP双特异性单克隆抗体的研制及初步应用

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中国生物制品学杂志 1997年第3期10卷 144-147页

作者：汪厚平巫山金玉玲卫生部武汉生物制品研究所

用8－AG（8－氮杂鸟嘌呤）驯化的HRP－MCAb（抗辣根过氧化物酶单克隆抗体）杂交瘤细胞HAT（次黄嘌呤氨基喋呤胸苷）敏感株与人IgG免疫的BALB／c小鼠脾细胞进行二次融合，获得5株能稳定分泌抗人IgG－抗HRP的BsMcAb（双特异性单克隆抗体... 详细信息

用8－AG（8－氮杂鸟嘌呤）驯化的HRP－MCAb（抗辣根过氧化物酶单克隆抗体）杂交瘤细胞HAT（次黄嘌呤氨基喋呤胸苷）敏感株与人IgG免疫的BALB／c小鼠脾细胞进行二次融合，获得5株能稳定分泌抗人IgG－抗HRP的BsMcAb（双特异性单克隆抗体）杂交－杂交癌细胞，用其混合腹水经HRP亲和层析纯化的BsMcAb制备BsMcAbPAP（双特异性单抗过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物）试剂代替丙肝诊断试剂盒中酶标二抗，比较结果初步表明两者差异无显著意义，将为IgG的检测提供有用试剂。

关键词：抗人IgG 抗HRP 双特异性单克隆抗体研制

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杂化杂交瘤产生双特异性单克隆抗体研究进展

单克隆抗体通讯 1995年第3期11卷 100-103页

作者：吴玉水朱忠勇南京军区福州总医院实验科

杂化杂交瘤产生的双特异性单克隆抗体已广泛应用于体内外研究，包括细胞间的相互作用、改进免疫学诊断方法、自身免疫性疾病和肿瘤的导向治疗等诸多领域。本文着重就杂交瘤融合技术制备的双特异性单克隆抗体的有关理论和技术的优缺点，... 详细信息

杂化杂交瘤产生的双特异性单克隆抗体已广泛应用于体内外研究，包括细胞间的相互作用、改进免疫学诊断方法、自身免疫性疾病和肿瘤的导向治疗等诸多领域。本文着重就杂交瘤融合技术制备的双特异性单克隆抗体的有关理论和技术的优缺点，以及应用研究进展作一简要综述。

关键词：单克隆抗体杂交瘤技术双特异性抗体制备

双特异性抗体blinatumomab治疗B淋巴细胞肿瘤的研究进展

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实用肿瘤杂志 2017年第3期32卷 279-283页

作者：高洁吴丹李姝林黎明徐旸浙江大学医学院附属第二医院血液科浙江杭州310009

双特异性抗体是一种以T细胞作为效应细胞的新型肿瘤免疫治疗分子,由2种单链抗体可变区片段(single-chain variable fragment,ScFv)及中间的柔韧性链接肽组成,因此具有2个特异性抗原结合位点,可同时与T细胞表面白细胞分化抗原3(cluster o... 详细信息

双特异性抗体是一种以T细胞作为效应细胞的新型肿瘤免疫治疗分子,由2种单链抗体可变区片段(single-chain variable fragment,ScFv)及中间的柔韧性链接肽组成,因此具有2个特异性抗原结合位点,可同时与T细胞表面白细胞分化抗原3(cluster of differentiation 3,CD3)及靶细胞表面特异性抗原结合,形成免疫突触,无需主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)-Ⅰ类分子及共刺激分子参与激活细胞毒性T细胞杀伤肿瘤细胞。Blinatumomab是首个被FDA批准用于临床治疗的双特异性抗体,以CD19作为靶点,因此对B淋巴细胞恶性肿瘤,包括复发/难治B淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤治疗效果显著。本文就双特异性抗体以及Blinatumomab的结构、作用机制及其在肿瘤治疗中的应用等方面作一综述。

关键词：白血病/治疗 B淋巴细胞白血病 B细胞/治疗抗体双特异性抗原 cD3 细胞毒性免疫