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双根清脑颗粒对血管性痴呆模型大鼠神经干细胞增殖迁移的影响

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中国实验方剂学杂志 2010年第15期16卷 110-113,116页

作者：吴颢昕李辉岳晓杰郑鸿燕南京中医药大学脑病基础研究实验室南京210029

目的:观察双根清脑颗粒对血管性痴呆(VD)模型大鼠神经干细胞(NSCs)增殖、迁移的影响,探讨双根清脑颗粒治疗VD的机理。方法:SPF级SD大鼠42只,随机分为双根清脑颗粒高、中、低剂量组,脑复康组、模型组、假手术组、正常组等7组,每组大鼠6... 详细信息

目的:观察双根清脑颗粒对血管性痴呆(VD)模型大鼠神经干细胞(NSCs)增殖、迁移的影响,探讨双根清脑颗粒治疗VD的机理。方法:SPF级SD大鼠42只,随机分为双根清脑颗粒高、中、低剂量组,脑复康组、模型组、假手术组、正常组等7组,每组大鼠6只。采用注入同种血栓栓子方法造成VD模型,中药高、中、低剂量组分别以双根清脑颗粒36,12,4 ***-1 ig,脑复康组以0.108 ***-1 ig,给药容积均为1.5 ***-1,模型组、假手术组和正常组以等量生理盐水ig。免疫组化法分别标记5-溴脱氧尿苷(BrdU)阳性细胞和微管相关蛋白(DCX)阳性细胞,显微镜下观察BrdU与DCX阳性细胞的表达。结果:双根清脑颗粒中、低剂量组、脑复康组大鼠皮质区与SGZ区BrdU阳性细胞数均明显增加(P双根清脑颗粒中、低剂量组SGZ区BrdU阳性细胞比脑复康组增加更为显著(P双根清脑颗粒中、低剂量组大鼠SGZ区DCX阳性细胞数明显增加(P脑复康组大鼠SGZ区DCX阳性细胞数亦显著增加(P双根清脑颗粒中、低剂量组大鼠SGZ区DCX阳性细胞数比脑复康组明显增加(P双根清脑颗粒可促进VD模型大鼠脑内NSCs的增殖与迁移。

关键词：双根清脑颗粒血管性痴呆神经干细胞增殖迁移

双根清脑颗粒对血管性痴呆血管内皮细胞的保护作用

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辽宁中医药大学学报 2011年第3期13卷 5-7页

作者：梅晓云吴秀芹吴颢昕南京中医药大学江苏南京210046

目的:探讨双根清脑颗粒对血管性痴呆大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用。方法:原代培养的大鼠脑血管内皮细胞,以低氧低糖方式造模。以不同浓度含药双根清脑颗粒血清药干预,以MTT法检测脑血管内皮细胞的存活率,以流式细胞仪检测细胞凋亡的... 详细信息

目的:探讨双根清脑颗粒对血管性痴呆大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用。方法:原代培养的大鼠脑血管内皮细胞,以低氧低糖方式造模。以不同浓度含药双根清脑颗粒血清药干预,以MTT法检测脑血管内皮细胞的存活率,以流式细胞仪检测细胞凋亡的情况。结果:中剂量的含药血清能显著保护血管内皮细胞,与模型组对比存在统计学意义。结论:在一定浓度范围内的双根清脑颗粒含药血清能够明显保护原代培养的脑血管内皮细胞。

关键词：血管性痴呆双根清脑颗粒内皮细胞凋亡

双根清脑颗粒对VD模型大鼠行为学与脑微血管内皮细胞ICAM-1表达影响的实验研究

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中华中医药学刊 2010年第1期28卷 104-106页

作者：吴颢昕刘旭峰郑鸿燕狄留庆蔡建伟南京中医药大学中医脑病基础研究实验室江苏南京210046

目的:观察双根清脑颗粒对VD模型大鼠行为学与脑微血管内皮细胞ICAM-1表达的影响,探讨双根清脑颗粒治疗VD的机理。方法:从颈外动脉插管缓慢注入同种血栓栓子造成VD大鼠模型。中药组以双根清脑颗粒干预,模型组、对照组、正常组给予生理盐... 详细信息

目的:观察双根清脑颗粒对VD模型大鼠行为学与脑微血管内皮细胞ICAM-1表达的影响,探讨双根清脑颗粒治疗VD的机理。方法:从颈外动脉插管缓慢注入同种血栓栓子造成VD大鼠模型。中药组以双根清脑颗粒干预,模型组、对照组、正常组给予生理盐水。Moriss水迷宫观察隐匿平台获得时间与大鼠空间搜索时间;免疫组织化学方法检测大鼠脑微血管ICAM-1的表达。结果:Moriss水迷宫试验发现,与模型组相比,中药组隐匿平台获得时间明显缩短(P脑微血管ICAM-1的表达(P双根清脑颗粒可改善VD模型大鼠的学习与记忆的功能,其机制与下调VD模型大鼠脑微血管内皮细胞ICAM-1表达有关。

关键词：血管性痴呆双根清脑颗粒行为学指标ICAM-1

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双根清脑颗粒质量标准研究

中国中医药信息杂志 2007年第5期14卷 46-47页

作者：于燕燕狄留庆黄耀洲祖强陈文霞南京中医药大学江苏南京210029

目的对双根清脑颗粒的质量标准进行研究。方法采用薄层色谱法鉴别薏苡仁、板蓝根、郁金;采用高效液相色谱法测定葛根素的含量。结果薄层色谱分离效果较好,斑点清晰,阴性无干扰。葛根素的线性范围为5.184～40.50μg/mL,平均加样回收率为9... 详细信息

目的对双根清脑颗粒的质量标准进行研究。方法采用薄层色谱法鉴别薏苡仁、板蓝根、郁金;采用高效液相色谱法测定葛根素的含量。结果薄层色谱分离效果较好,斑点清晰,阴性无干扰。葛根素的线性范围为5.184～40.50μg/mL,平均加样回收率为99.93%,RSD=1.81%。结论本方法可行,重复性好,能有效控制双根清脑颗粒的质量。

关键词：双根清脑颗粒葛根素质量标准薄层色谱法高效液相色谱法

双根清脑颗粒对血管性痴呆模型大鼠BrdU阳性细胞增殖的影响

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辽宁中医药大学学报 2010年第1期12卷 40-42页

作者：刘旭峰吴颢昕南京中医药大学中医脑病基础研究实验室江苏南京210046

目的:探讨双根清脑颗粒治疗血管性痴呆的机理。方法:采用梅氏法复制VD大鼠模型。以双根清脑颗粒干预,免疫组化方法检测模型大鼠脑切片BrdU阳性细胞;Moriss水迷宫观察隐匿平台获得时间与大鼠空间搜索时间。结果:Moriss水迷宫实验,双根清... 详细信息

目的:探讨双根清脑颗粒治疗血管性痴呆的机理。方法:采用梅氏法复制VD大鼠模型。以双根清脑颗粒干预,免疫组化方法检测模型大鼠脑切片BrdU阳性细胞;Moriss水迷宫观察隐匿平台获得时间与大鼠空间搜索时间。结果:Moriss水迷宫实验,双根清脑颗粒组与模型组相比,隐匿平台获得时间明显缩短(P双根清脑颗粒各组大鼠BrdU阳性细胞表达明显高于模型组(P双根清脑颗粒可改善VD模型大鼠的学习与记忆的功能,其机制可能与促进VD模型大鼠新生神经元增殖有关。

关键词：血管性痴呆双根清脑颗粒行为学指标 Brdu阳性神经元

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清毒活血化痰法治疗血管性痴呆的机理研究

清毒活血化痰法治疗血管性痴呆的机理研究

作者：李辉南京中医药大学

学位级别：硕士

血管性痴呆（vascular dementia, VD）是指由缺血性或出血性中风或缺血缺氧性脑损害导致的以认知损害为特征的慢性进行性疾病。随着我国老龄化社会的到来,脑血管病发病率升高,血管性痴呆的发病率逐年上升,已严重威胁中老年人的健康和生... 详细信息

血管性痴呆（vascular dementia, VD）是指由缺血性或出血性中风或缺血缺氧性脑损害导致的以认知损害为特征的慢性进行性疾病。随着我国老龄化社会的到来,脑血管病发病率升高,血管性痴呆的发病率逐年上升,已严重威胁中老年人的健康和生命。近年来,许多中医学者发掘中医传统疗法治疗血管性痴呆的有效方药,在血管性痴呆的治疗上取得了较好的疗效,但对其治疗机理尚未完全阐明,阻碍了中药在临床的推广运用。因此,积极开展中医药治疗血管性痴呆的研究具有重要的现实意义。导师在长期临床和实验研究的基础上,结合现代中医对血管性痴呆的认识和研究,提出血管性痴呆发病急性期或波动期痰瘀互结、热毒为甚的病理关键,采用清毒活血化瘀为基本治法治疗。本研究以清毒活血化痰为大法设立双根清脑颗粒（Shuanggen Qinnao Granules, SG）干预血管性痴呆模型大鼠,取得了较好疗效。本文从理论和实验两方面探讨清毒活血化痰法治疗血管性痴呆的机理。理论研究运用中医理论探讨血管性痴呆的发病部位,病因病机、治则治法,提出痰瘀阻滞日久,化热化毒,损伤脑髓是血管性痴呆发病急性期或波动期的病理关键,说明清毒活血化痰法是此期的治疗大法,并对双根清脑颗粒的组方依据、方解及治疗机理进行探讨。实验研究分为整体实验和离体实验两部分,从行为学、形态学、生化学、细胞学、分子水平探讨血管性痴呆发病急性期“痰、瘀、毒”的病理关键及清毒活血化痰法治疗血管性痴呆的现代药理学机制。整体实验研究采用TTC染色计算血管性痴呆模型大鼠脑梗死体积,结果表明：双根清脑颗粒各组的脑梗死体积明显小于血管性痴呆模型大鼠（P＜0.05,P＜0.01）,尤其是中、小剂量显著（P＜0.01）。采用Morris水迷宫观察血管性痴呆模型大鼠空间分辨和学习记忆能力,与模型组相比,双根清脑颗粒各组大鼠隐匿平台获得实验时间缩短,每分钟搜索到平台的次数增多,且有统计学意义（P＜0.05）。双根清脑颗粒可提高血清SOD活力及SOD/MDA的比值（P＜0.01）,降低血清MDA、NO的含量及NOS活性（P＜0.05、P＜0.01）,从而减轻氧自由基对脑组织的损伤。采用免疫组织化学法发现：双根清脑颗粒中、低剂量组BrdU DCX、BrdU/DCX,三者阳性细胞数比模型组明显增多（P＜0.05,P＜0.01）;模型大鼠脑内毒性产物（血管内皮细胞ICAM-1、海马区nNOS阳性神经元）增高,但双根清脑颗粒各组ICAM-1的表达及nNOS阳性神经元少于模型组（P＜0.05,P＜0.01）。采用Westerblot;测定发现模型大鼠海马nNOS蛋白表达较强,双根清脑颗粒中、低剂量组nNOS的表达量显著减少（P＜0.05）。离体实验研究采用MTT法测定缺氧状态神经干细胞（NSCs）的活性,结果表明双根清脑颗粒各组OD值都高于假手术组,尤其是中剂量显著（P＜0.05）,表明双根清脑颗粒药物血清能促进神经干细胞的活。采用Westerblot法测定缺氧状态下NSCs中nNOS、DCX蛋白的结果表明,双根清脑颗粒各组DCX蛋白量均高于模型组,但无显著性差异（P＞0.05）,而nNOS含量均增高,中、高剂量组显著（P＜0.01）,表明双根清脑颗粒能促进缺氧时NSCs的增殖和分化,提高nNOS对NSCs的保护作用。结论：血管性痴呆发病急性期或波动期的基本病机特点是痰瘀互阻,热毒内盛;清毒活血化痰是治疗血管性痴呆的基本大法。双根清脑颗粒可改善血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力,清除“毒”性产物,促进神经干细胞的增殖,对脑组织具有保护作用。

关键词：清毒活血化痰法血管性痴呆双根清脑颗粒微观相关蛋白神经干细胞