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中国比较医学杂志 2022年第1期32卷 57-61页

作者：王雅欣郭姗姗高英杰图娅崔晓兰中国中医科学院中药研究所北京100700 北京中医药大学针灸推拿学院北京100029

目的探索参味宁郁片对三种药物诱发动物模型的抗抑郁机制。方法建立了三种药物诱发的动物模型,均在给药1周后进行造模,在加强单胺作用试验中,各组动物进行腹腔注射盐酸帕吉林(pargyline hydrochloride),再尾静脉注射5-羟色胺酸(5-hydrox... 详细信息

目的探索参味宁郁片对三种药物诱发动物模型的抗抑郁机制。方法建立了三种药物诱发的动物模型,均在给药1周后进行造模,在加强单胺作用试验中,各组动物进行腹腔注射盐酸帕吉林(pargyline hydrochloride),再尾静脉注射5-羟色胺酸(5-hydroxytryptophan,5-HTP),观察25 min内的甩头次数。在抑制去甲肾上腺素(noradrenaline,NE)重吸收实验中,各给药组皮下注射NE后统计死亡率。在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)抑制实验中,各给药组尾静脉注射盐酸色胺并逐只观察大鼠"蹬踩"运动。结果加强单胺作用实验:各给药组的甩头次数较模型组明显增多,并具有显著性差异。抑制NE重吸收实验:与模型组比较,各给药组小鼠的死亡率均明显增加,其中低剂量组与模型组比较有显著性差异(P参味宁郁片的抗抑郁作用可能与增强NE神经功能及五羟色胺(5-HT)两个方面有关。

关键词：抑郁症参味宁郁片加强单胺作用抑制去甲肾上腺素重吸收单胺氧化酶抑制作用

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基于孤养—慢性束缚应激抑郁模型探讨参味宁郁片治疗抑郁症的机制

基于孤养—慢性束缚应激抑郁模型探讨参味宁郁片治疗抑郁症的机制

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作者：王雅欣中国中医科学院

学位级别：硕士

抑郁症是一种高患病率、高致残率和高病死率的疾病,目前是全世界致残的主要负担之一。其发病机制主要有单胺神经递质假说、神经可塑性假说、炎症反应等。有研究证实小胶质细胞和星形胶质细胞是控制神经生长及传导的重要成分。然而在应... 详细信息

抑郁症是一种高患病率、高致残率和高病死率的疾病,目前是全世界致残的主要负担之一。其发病机制主要有单胺神经递质假说、神经可塑性假说、炎症反应等。有研究证实小胶质细胞和星形胶质细胞是控制神经生长及传导的重要成分。然而在应激刺激下,星形胶质细胞和小胶质细胞都转换为促炎状态,通常会激活神经炎症反应,释放大量的促炎细胞因子。这一过程会损害神经传导及突触间的连接,使神经可塑性功能降低。慢性应激模型会导致神经元树突的长度及分支损伤,以及内侧PFC锥体神经元棘突触的数量和功能下降。目前临床上经常使用的治疗抑郁症的药物多具有起效慢、缓解率低、易复发、不良反应较多等缺点。参味宁郁片作为国内首个批准进入临床试验的治疗抑郁症的纯中药小复方制剂,可以调节慢性束缚应激大鼠模型的免疫炎性反应。临床试验证实该药对于治疗气阴两虚型抑郁症有显著疗效。因此,本研究通过对孤养结合慢性束缚应激大鼠抑郁模型的建立,在评价其抗抑郁药效的基础上对该药的抗抑郁机制进行深入研究。本研究主要包括两部分:基于孤养结合慢性束缚应激抑郁模型验证参味宁郁片的抗抑郁药效;基于孤养结合慢性束缚应激抑郁模型探讨参味宁郁片的抗抑郁机制。第一部分:基于孤养-慢性束缚应激抑郁模型验证参味宁郁片的抗抑郁药效目的:建立经典的孤养结合慢性束缚应激抑郁模型,通过体重检测、糖水偏好和旷场实验来整体评价参味宁郁片的抗抑郁药效,为进一步的机制研究奠定基础。方法:在实验开始前先进行旷场实验,选出行为学合格的实验大鼠,分为正常、模型组、盐酸氟西汀组及参味宁郁高、中、低三个剂量组,除正常组外,其余各组均建立孤养结合慢性束缚应激抑郁模型并在造模期间持续给药,在实验的第0天、7天、14天、21天分别进行体重检测、糖水偏好、旷场实验。评价参味宁郁片对该模型引发抑郁行为的药效作用。结果:1、在体重检测方面,造模前各组动物体重并无明显差异,在造模第21天时与正常组相比,模型组动物体重出现显著性差异(P参味宁郁高、中、低剂量组均具有显著性差异(P参味宁郁低剂量组体现出显著性差异(P参味宁郁高剂量组和模型组比较,在总路程、中央区域停留时间及站立次数三个指标均有不同程度的升高,且具有显著性差异(P参味宁郁片能够显著改善由孤养结合慢性束缚应激抑郁模型引起的体重减轻、快感缺失及运动量降低等抑郁症状,具有较好的抗抑郁药效。第二部分:基于孤养-慢性束缚应激抑郁模型探讨参味宁郁片的抗抑郁机制目的:以胶质细胞激活-神经元损伤为切入点,研究参味宁郁片对过度激活的胶质细胞及其诱导的神经炎症的抑制作用以及对神经元结构的保护作用,以此探索其治疗抑郁症的作用机制。方法:1、通过对大鼠海马区小胶质细胞标记物Iba-1的免疫组化实验、A1型星形胶质细胞标记物C3/GFAP免疫荧光双标、神经炎性指标NF-κB p65、TNF-α、IL-1β的Western blot实验,共同探索参味宁郁片对胶质细胞过度激活及神经炎症反应的抑制作用。2、通过对大鼠海马区进行组织病理学观察并对神经元细胞核标记物Neun、神经突触结构稳定性指标MAP2、突触密度指标PSD95的免疫荧光单标实验,共同探索参味宁郁片对神经元结构的保护作用。结果:1、在小胶质细胞标记物Iba-1免疫组化实验中,模型组与正常组比较,阳性细胞数目有所增加,与模型组相比,各给药组阳性细胞数均呈降低趋势,其中参味宁郁高剂量组降低较为明显,但并未表现出显著性差异。2、在A1型星形胶质细胞标记物C3/GFAP免疫荧光双标实验中,正常组的C3/GFAP共表达较弱,与正常组相比,模型组的共表达较强(红绿荧光叠加,图像上呈黄色,P参味宁郁高、中剂量组具有显著性差异(P参味宁郁高、中剂量组均明显降低,并具有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。4、在大鼠海马区组织病理

关键词：参味宁郁片孤养结合慢性束缚应激抑郁模型小胶质细胞 A1型星形胶质细胞神经元

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参味宁郁片对慢性束缚应激大鼠海马TLR4/My D88信号通路介导免疫炎症的影响

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中国实验方剂学杂志 2021年第15期27卷 8-15页

作者：姜会梨王雅欣图娅曾美桦曾锦标崔晓兰李亚欢高兴州孙阳郭姗姗北京中医药大学针灸推拿学院北京100029 中国中医科学院中药研究所北京100700 北京中医药大学国际精神疾患研究中心北京100029 广东思济药业有限公司广东汕头515041

目的:探究治疗抑郁症中药新药参味宁郁片对抑郁模型大鼠行为学及海马Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)信号通路介导免疫炎症的影响。方法:将44只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾司西酞普兰组和参味宁郁片组。除正常组外,... 详细信息

目的:探究治疗抑郁症中药新药参味宁郁片对抑郁模型大鼠行为学及海马Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)信号通路介导免疫炎症的影响。方法:将44只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾司西酞普兰组和参味宁郁片组。除正常组外,其余各组大鼠均采用慢性束缚应激(CRS)结合孤养建立抑郁症模型、持续接受21 d CRS刺激;艾司西酞普兰组每日在CRS应激前1 h给予艾司西酞普兰(30 mg·kg^(-1))灌胃给药;参味宁郁片组每日在CRS应激前1 h给予参味宁郁片(18 mg·kg^(-1))灌胃干预。实验前、后通过体质量变化、糖水实验、旷场实验测试,观察各组大鼠体质量、糖水偏好指数、水平运动评分、垂直运动评分变化;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马TLR4,MyD88蛋白表达水平,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量变化。结果:行为学结果显示,实验前,各组大鼠行为学基线水平具有一致性、各组均值差异无统计学意义。随着时间推移应激负荷增加,与正常组比较,模型组大鼠在接受CRS应激21 d后体质量、糖水偏好指数、水平运动评分和垂直运动评分均显著降低(P参味宁郁片组和艾司西酞普兰组大鼠体质量、糖水偏好指数、水平运动评分和垂直运动评分均显著升高(P参味宁郁片表现出明显的抗抑郁效应;Western blot和ELISA结果显示,与正常组比较,模型组大鼠海马TLR4,MyD88蛋白及血清炎性因子IL-1β,TNF-α含量显著升高(P参味宁郁片组和艾司西酞普兰组有效逆转了应激诱导的海马TLR4,MyD88蛋白及血清炎性因子IL-1β含量显著升高、血清IL-10含量降低情况,差异具有统计学意义(P郁症中药新药参味宁郁片对慢性应激诱导抑郁症的抗抑郁作用可能是通过抑制海马TLR4/MyD88信号通路介导的免疫炎性反应途径有关。

关键词：抑郁症慢性束缚应激(CRS) 免疫炎性反应 Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)信号通路参味宁郁片

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抗抑郁新药-参味宁郁片对大鼠慢性应激模型及小鼠悬尾模型的抗抑郁作用研究

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世界中医药 2021年第22期16卷 3326-3330页

作者：王雅欣郭姗姗高英杰图娅崔晓兰中国中医科学院中药研究所北京100700 北京中医药大学针灸推拿学院北京100029

目的:研究抗抑郁症中药新药-参味宁郁片对慢性应激抑郁模型大鼠及小鼠悬尾抑郁模型的抗抑郁作用。方法:大鼠慢性应激模型:除正常组外,其余各组给予相应的慢性应激,并在造模前1 h灌胃给药,共持续21 d。实验前后通过体质量变化、糖水实验... 详细信息

目的:研究抗抑郁症中药新药-参味宁郁片对慢性应激抑郁模型大鼠及小鼠悬尾抑郁模型的抗抑郁作用。方法:大鼠慢性应激模型:除正常组外,其余各组给予相应的慢性应激,并在造模前1 h灌胃给药,共持续21 d。实验前后通过体质量变化、糖水实验、自发活动开场实验测试,观察各组大鼠相应指标的评分变化。采用放射免疫测定法检测相关激素水平。小鼠悬尾抑郁模型:连续给药7 d后用小鼠自主活动记录仪记录活动次数,再将小鼠悬尾后记录小鼠不动时间,探究各给药组对小鼠悬尾不动时间的影响。结果:慢性应激抑郁模型:在造模21 d后,与正常组比较,模型组大鼠在体质量、糖水偏好指数、水平及垂直运动评分等方面均显著降低(P参味宁郁片低剂量组在糖水实验、水平及垂直运动评分与模型组比较差异均有统计学意义(均P参味宁郁片3个剂量组均可有效降低慢性应激模型大鼠CRF的含量,低剂量组可显著降低模型大鼠的ACTH水平(P郁模型:各给药组小鼠悬尾后的不动时间与模型组比较差异均有统计学意义(均P郁症中药新药-参味宁郁片对慢性应激抑郁模型及小鼠悬尾抑郁模型均具有一定的抗抑郁作用。

关键词：抑郁症大鼠慢性应激模型小鼠悬尾模型自发活动开场实验糖水偏好放射免疫测定参味宁郁片

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