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体外重建宫颈癌的三维培养模型:基于人宫颈癌组织的去细胞支架

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南方医科大学学报 2023年第2期43卷 157-165页

作者：毛建英杨文静郭和董瑞丽任丽芳李树斌内蒙古自治区人民医院内蒙古自治区呼和浩特010000

目的利用人宫颈癌组织制备去细胞化细胞外基质(ECM)支架组织,并评估该支架组织对3D培养模型中宫颈癌细胞生物学行为的影响。方法采用十二烷基醚硫酸钠(SLES)溶液作为去细胞溶剂处理人宫颈癌组织,制备去细胞化ECM支架组织。通过病理学... 详细信息

目的利用人宫颈癌组织制备去细胞化细胞外基质(ECM)支架组织,并评估该支架组织对3D培养模型中宫颈癌细胞生物学行为的影响。方法采用十二烷基醚硫酸钠(SLES)溶液作为去细胞溶剂处理人宫颈癌组织,制备去细胞化ECM支架组织。通过病理学染色及生化含量分析等方法分析去细胞ECM支架组织的超微结构和关键成分胶原、糖胺聚糖、弹性蛋白及DNA含量,确定其最佳制备流程。将人宫颈癌SiHa细胞注射至去细胞化ECM支架组织中进行再细胞化,通过HE染色、免疫组织化学染色及分子生物学技术分析评估3D培养模型中及常规二维培养的SiHa细胞的迁移、增殖以及上皮间质转化(EMT),分析该支架组织中对宫颈癌细胞的生物学作用。用5-氟尿嘧啶(5-Fu)处理再细胞化3D培养模型后通过流式细胞术检测细胞凋亡,分析去细胞ECM支架组织对宫颈癌细胞抗药性的作用。结果采用SLES溶液制备的宫颈癌组织去细胞ECM支架组织中,ECM的微环境结构及生物活性被有效地保留。在再细胞化的3D培养模型中,该ECM支架组织具有促进SiHa细胞增殖、迁移、EMT及抗药性的生物学作用。结论本研究成功制备了基于宫颈癌组织的去细胞ECM支架组织,为构建宫颈癌体外3D研究模型奠定了基础。

关键词：细胞外基质去细胞支架宫颈癌肿瘤微环境

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大鼠脊髓去细胞支架化学萃取方法的初步探讨

中华外科杂志 2009年第5期47卷 391-392页

作者：尹文化鲁凯伍邓许勇金大地南方医科大学附属南方医院脊柱骨病外科广州510515

脊髓损伤是脊柱外科常见疾病，制备脊髓去细胞支架，获得天然的脊髓基质和三维结构，构建组织工程化脊髓，可能有助于改变目前脊髓损伤治疗效果不理想的现状。应用化学萃取的方法可有效制备同种异体外周神经去细胞支架，而且不出现宿主... 详细信息

脊髓损伤是脊柱外科常见疾病，制备脊髓去细胞支架，获得天然的脊髓基质和三维结构，构建组织工程化脊髓，可能有助于改变目前脊髓损伤治疗效果不理想的现状。应用化学萃取的方法可有效制备同种异体外周神经去细胞支架，而且不出现宿主免疫排斥反应。本研究采用Sondell等报道的方法萃取大鼠脊髓，观察其形态学变化特点，为制备具有天然脊髓结构的组织工程化脊髓提供理论依据。

关键词：去细胞支架脊髓损伤萃取方法化学萃取大鼠组织工程化免疫排斥反应三维结构

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灌注法制备器官去细胞支架的研究进展

中国临床解剖学杂志 2013年第6期31卷 727-730页

作者：赵丽娜梅劲张建色唐茂林温州医学院解剖学教研室浙江温州325035

在人的生命过程中，组织与器官均有发生异常或不可逆性损伤的可能性，医学界目前主要依靠脏器的移植来重新恢复其功能。但随着器官移植技术的不断发展，供体来源的匮乏，已经成为制约器官移植发展的非技术性瓶颈。故学者们开始寻找异体... 详细信息

在人的生命过程中，组织与器官均有发生异常或不可逆性损伤的可能性，医学界目前主要依靠脏器的移植来重新恢复其功能。但随着器官移植技术的不断发展，供体来源的匮乏，已经成为制约器官移植发展的非技术性瓶颈。故学者们开始寻找异体移植以外的方法，以缓解供体短缺的不足和患者的经济负担，提高患者的生活质量。而近年来去细胞生物支架研究的不断发展为这一难题的解决提供了新思路。

关键词：器官移植技术去细胞支架灌注法制备生命过程不可逆性供体来源异体移植

大鼠环杓后肌与腓肠肌去细胞支架的制备和比较研究

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2018年第5期32卷 360-364页

作者：李术芹刘鹏飞崔鹏程第四军医大学唐都医院耳鼻咽喉头颈外科西安710038

目的:制备大鼠环杓后肌和腓肠肌的去细胞支架并比较二者的差异,为构建组织工程环杓后肌提供依据。方法:选取SD大鼠60只,随机分为6个组,包括5个实验组和1个对照组,每组10只。实验组分别为去细胞处理后2、4、6、8和10d组。经1%SDS溶液去... 详细信息

目的:制备大鼠环杓后肌和腓肠肌的去细胞支架并比较二者的差异,为构建组织工程环杓后肌提供依据。方法:选取SD大鼠60只,随机分为6个组,包括5个实验组和1个对照组,每组10只。实验组分别为去细胞处理后2、4、6、8和10d组。经1%SDS溶液去细胞后,作大体观察、组织切片及苏木精-伊红、胶原纤维染色、扫描电镜观察并测量孔隙直径及面积,提取和检测DNA。对照组不作去细胞处理。结果:实验组大体上呈白色半透明状,对照组则色泽红润。实验4d组环杓后肌和8d组腓肠肌的肌纤维完全消失,细胞外基质结构保留良好,未检测出DNA。扫描电镜发现环杓后肌和腓肠肌的孔隙形态不同,且2组的孔隙直径差异有统计学意义(P支架的孔隙直径大于8d组腓肠肌支架。结论:与腓肠肌相比,环杓后肌去细胞支架具有孔隙形态及直径方面的优势,更适合作为组织工程环杓后肌的支架材料。

关键词：组织工程环杓后肌去细胞支架

骨膜去细胞支架联合载药微球治疗体外抑制骨肉瘤细胞

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骨膜去细胞支架联合载药微球治疗体外抑制骨肉瘤细胞

作者：陈川宁波大学

学位级别：硕士

本研究的目的是提供一个结合局部药物释放以及潜在组织再生能力的去细胞支架,目的是来治疗治疗骨肉瘤。我们设计了化疗药物阿霉素的缓释微球(ADM),和携带这些微球的脱细胞骨膜支架。脱细胞骨膜(去细胞骨膜支架)是通过物理和化学的方法... 详细信息

本研究的目的是提供一个结合局部药物释放以及潜在组织再生能力的去细胞支架,目的是来治疗治疗骨肉瘤。我们设计了化疗药物阿霉素的缓释微球(ADM),和携带这些微球的脱细胞骨膜支架。脱细胞骨膜(去细胞骨膜支架)是通过物理和化学的方法获得的。组织学结果表明,细胞成分被有效地去除。骨膜去细胞支架具有良好的细胞相容性,能促进成纤维细胞的粘附和生长。研究中制备了两种缓释微球,阿霉素明胶微球(ADMGMS)和阿霉素聚乳酸聚羟基乙酸明胶微球的制备(阿霉素聚乳酸羟基乙酸明胶微球)并且将这两种微球与骨膜去细胞支架连接。研究中对这两个支架的潜在治疗效果进行了测试,体外将人骨肉瘤细胞与该复合支架共同培养来检测其药物效力。总之,该研究发明了一个可以局部释放化疗药物的生物支架。

关键词：骨肉瘤化疗去细胞支架微球交联

去细胞支架改性及其在组织工程中应用的研究进展

同方学位论文库评论

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去细胞支架改性及其在组织工程中应用的研究进展

去细胞支架携带骨髓间充质干细胞和嗅鞘细胞的联合移植对大鼠脊髓损伤恢复的研究

中国生物工程学会第十一届学术年会暨2017年全国生物技术大会

作者：许洁田福荣徐荷林赵应征温州医科大学药学院

去细胞支架,由全器官经化学或物理脱细胞后形成的组织工程材料。与合成的高分子材料相比,去细胞支架在组织工程领域展现出其特有的生物优势。但单纯去细胞支架材料存在如生物力学性能差、抗酶解能力弱以及细胞粘附性差等缺陷。近年来,... 详细信息

去细胞支架,由全器官经化学或物理脱细胞后形成的组织工程材料。与合成的高分子材料相比,去细胞支架在组织工程领域展现出其特有的生物优势。但单纯去细胞支架材料存在如生物力学性能差、抗酶解能力弱以及细胞粘附性差等缺陷。近年来,有研究报道通过物理或化学交联方法对去细胞支架材料进行修饰,以改善其性能,且改性后的血管、神经、心脏瓣膜等生物支架材料在器官移植、修复实验研究中取到了良好的应用效果。本文就去细胞支架的改性方法进行归纳并总结,对目前国内外常用的改性交联剂在组织工程及再生医学中的应用进行回顾与分析。

关键词：去细胞支架改性组织工程

来源： cnki会议评论

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去细胞支架携带骨髓间充质干细胞和嗅鞘细胞的联合移植对大鼠脊髓...

2016年浙江省手外科暨显微外科学学术年会

作者：朱君毅王健温州医科大学附属第一医院手外科周围神经外科

目的探究去细胞支架携带骨髓间充质干细胞(BMSC)和嗅鞘细胞(OEC)的联合移植对大鼠脊髓损伤恢复的研究。方法取正常大鼠的脊髓,通过振荡法来制备去细胞支架,通过HE染色和扫描电镜检测验证支架是否制备成功。取60只成年SD大鼠,250-300g左... 详细信息

目的探究去细胞支架携带骨髓间充质干细胞(BMSC)和嗅鞘细胞(OEC)的联合移植对大鼠脊髓损伤恢复的研究。方法取正常大鼠的脊髓,通过振荡法来制备去细胞支架,通过HE染色和扫描电镜检测验证支架是否制备成功。取60只成年SD大鼠,250-300g左右,分为空白对照组、单纯去细胞支架组、去细胞联合OEC组、去细胞联合BMSC组、去细胞联合BMSC和OEC组。术后第2周和8周时对大鼠脊髓损伤部位进行取材,通过运动学评分(BBB)、HE染色、免疫荧光、荧光金逆向示踪法等检测手段来探究其对大鼠后肢运动功能和脊髓神经轴突的再生是否有促进作用。结果大鼠的HE染色和电镜检测的结果,去细胞后的脊髓支架,其内无细胞核,但原有的空间结构有所保留。结论:通过振荡法能够制备出具有良好空间结构的去细胞支架。

关键词：去细胞支架脊髓损伤骨髓间充质干细胞嗅鞘细胞

来源： cnki会议评论

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两种不同去污剂制备肺去细胞支架的对比

解剖学杂志 2018年第1期41卷 71-74,F0003页

作者：虞青吴和陈婵徐恩盼叶晓婷王志翊温州医科大学附属第二医院急诊科温州325027 温州医科大学附属第一医院老年医学科温州325027 温州医科大学第二临床医学院临床医学系温州325027

目的:比较离子型洗涤剂十二烷基磺酸钠(SDS)与脱氧胆酸钠针对肺去细胞支架制备的性能,寻找一种合适的肺去细胞方法以得到模拟可以促进细胞附着和分化天然细胞外基质的肺功能架构。方法:SD大鼠随机分成正常对照组、去细胞SDS组、去细胞... 详细信息

目的:比较离子型洗涤剂十二烷基磺酸钠(SDS)与脱氧胆酸钠针对肺去细胞支架制备的性能,寻找一种合适的肺去细胞方法以得到模拟可以促进细胞附着和分化天然细胞外基质的肺功能架构。方法:SD大鼠随机分成正常对照组、去细胞SDS组、去细胞脱氧胆酸钠组,分别取心、肺联合体,两组去细胞组均经右心室置入留置针至肺主动脉。去细胞SDS组使用肝素、Triton X-100、SDS溶液和去离子水依次灌注;去细胞脱氧胆酸钠组使用肝素、Triton X-100、脱氧胆酸钠溶液和去离子水依次灌注。各组分别采用扫描电镜观察支架结构;H-E染色、Masson三色染色观察残留细胞、细胞核成分;免疫荧光染色观察肺组织层黏连蛋白、纤维连接蛋白保留情况,并进行DNA含量测定。结果:扫描电镜显示去细胞SDS组支架肺泡结构较去细胞脱氧胆酸钠组完整;H-E染色显示去细胞SDS组肺支架未见明显细胞及细胞核成分残留,去细胞脱氧胆酸钠组可见少量细胞核成分残留;Masson染色显示去细胞SDS组弹性纤维保留优于去细胞脱氧胆酸钠组;免疫荧光显示去细胞SDS组层黏连蛋白和纤维连接蛋白结构较去细胞脱氧胆酸钠组完整,保留度较高;去细胞SDS组DNA含量为(35.28±8.20)ng/mg,明显低于去细胞脱氧胆酸钠组(52.33±7.67)ng/mg,差异有统计学意义。结论:两种去污剂均可有效清除肺内细胞成分,较好地保留细胞外基质,其中SDS溶液灌注法优于脱氧胆酸钠溶液灌注法。

关键词：肺去细胞支架十二烷基磺酸钠脱氧胆酸钠

脊髓去细胞支架与人脐血间充质干细胞三维复合体的构建

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脊髓去细胞支架与人脐血间充质干细胞三维复合体的构建