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中国修复重建外科杂志 2019年第5期33卷 555-562页

作者：位付涛王振中国人民解放军联勤保障部队第九八八医院关节外科郑州450000 中国人民解放军联勤保障部队第九八八医院骨外科郑州450000

目的探讨去白细胞富血小板血浆(pure platelet-rich plasma,P-PRP)对距骨骨软骨损伤的治疗效果及机制。方法将2014年1月—2017年10月收治的符合选择标准的36例距骨骨软骨损伤患者,按随机数字表法随机分为对照组(A组)、富白细胞PRP(leuko... 详细信息

目的探讨去白细胞富血小板血浆(pure platelet-rich plasma,P-PRP)对距骨骨软骨损伤的治疗效果及机制。方法将2014年1月—2017年10月收治的符合选择标准的36例距骨骨软骨损伤患者,按随机数字表法随机分为对照组(A组)、富白细胞PRP(leukocyte PRP,L-PRP)组(B组)、P-PRP组(C组),每组12例。3组患者性别、年龄、病程、Hepple分型等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。B、C组分别于植骨处注射2.5 mL L-PRP和P-PRP,A组不注射任何药物。术前和术后3、6、12个月采用美国矫形足踝协会(AOFAS)踝-后足评分和疼痛视觉模拟评分(VAS)评价疗效。P-PRP治疗机制研究:将MC3T3-E1细胞随机分为对照组(A组)、L-PRP组(B组)、P-PRP组(C组),B、C组分别用含5%L-PRP或P-PRP的培养液进行培养,A组用相同含量PBS培养。采用MTT法检测细胞增殖情况,ELISA法检测上清液基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein 9,MMP-9)蛋白含量,测定细胞ALP活性,实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)检测细胞中骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、Ⅰ型胶原和MMP-9 mRNA的表达,Western blot检测上清液MMP-9和细胞中磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,pAKT)、磷酸化c-Jun(phosphorylated c-Jun,p-c-Jun)蛋白表达。结果各组患者均获随访,随访时间13～25个月,平均18个月。无伤口感染、内固定失效等并发症发生。MRI检查示,术前各组损伤程度相似,术后6个月各组均获康复,且C组优于A、B组。术后各时间点各组AOFAS评分和VAS评分均较术前显著改善(P0.05)。P-PRP治疗机制研究:C组细胞增殖吸光度(A)值、ALP活性、OPN和Ⅰ型胶原mRNA相对表达量显著大于A、B组,B组大于A组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 P-PRP对距骨骨软骨损伤的治疗效果优于L-PRP,可能与抑制成骨细胞中PI3K/AKT/AP-1信号通路的激活,从而降低MMP-9的分泌有关。

关键词：去白细胞富血小板血浆富白细胞富血小板血浆距骨骨软骨损伤成骨细胞

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去白细胞富血小板血浆联合切开复位内固定术治疗下颌骨正中骨折的疗效分析

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广西医学 2023年第7期45卷 769-772页

作者：王莹李谊胡浩磊新乡医学院研究生处河南省新乡市453000 中国人民解放军联勤保障部队第九八八医院耳鼻喉科河南省郑州市450042

目的观察去白细胞富血小板血浆(PRP)联合切开复位内固定术治疗下颌骨正中骨折的疗效。方法选取30例下颌骨正中骨折患者,根据治疗方法将其分为观察组(n=15)和对照组(n=15)。观察组给予去白细胞PRP联合切开复位内固定术治疗,对照组给予切... 详细信息

目的观察去白细胞富血小板血浆(PRP)联合切开复位内固定术治疗下颌骨正中骨折的疗效。方法选取30例下颌骨正中骨折患者,根据治疗方法将其分为观察组(n=15)和对照组(n=15)。观察组给予去白细胞PRP联合切开复位内固定术治疗,对照组给予切开复位内固定术治疗。比较两组患者的手术时间、术中失血量、术后拆线时间、术后消肿时间、术后满意度,以及术前1 d、术后2 d、术后7 d疼痛视觉模拟量表(VAS)评分。结果两组患者的手术时间、术中失血量差异均无统计学意义(均P>0.05)。观察组术后拆线时间、消肿时间均短于对照组,术后满意度评分高于对照组(均P去白细胞PRP联合切开复位内固定术治疗下颌骨正中骨折有利于创面愈合,缓解术后疼痛,提高患者满意度,值得临床推广。

关键词：下颌骨正中骨折去白细胞富血小板血浆切开复位内固定

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去白细胞富血小板血浆治疗出血性关节炎的实验研究

去白细胞富血小板血浆治疗出血性关节炎的实验研究

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作者：薛禹伦苏州大学

学位级别：硕士

[目的]:出血性关节炎(Hemorrhagic arthritis,HA)是一种与出血相关的滑膜和软骨损伤,在血友病等出凝血疾病患者中更为常见。因其所含细胞因子和生长因子的作用,去白细胞富血小板血浆(Pure platet-rich plasma,P-PRP)被证实具有抗炎和再... 详细信息

[目的]:出血性关节炎(Hemorrhagic arthritis,HA)是一种与出血相关的滑膜和软骨损伤,在血友病等出凝血疾病患者中更为常见。因其所含细胞因子和生长因子的作用,去白细胞富血小板血浆(Pure platet-rich plasma,P-PRP)被证实具有抗炎和再生作用。本研究旨在探讨P-PRP对HA的疗效与否,并且在轻度和重度HA治疗作用中的差异。[研究方法]:新西兰兔膝关节(后肢)内分别注射自体血8周和16周,建立轻度和重度HA模型。将自体P-PRP分别注入轻度HA组和重度HA组的左膝关节,并将等量的生理盐水注入相应的对侧膝(右侧)关节。分别进行双侧膝关节直径测量、MRI检查、H&E和甲苯胺蓝染色,评价P-PRP处理组和未处理组滑膜和软骨的组织学差异。正常膝关节作为对照组进行比较。[结果]:大体观察和MRI检查显示治疗组的膝关节滑膜增生及炎症程度优于未治疗组,滑膜切片H&E染色细胞计数中,轻度HA治疗组与轻度HA未治疗组差异有统计学意义(x=307.40±14.23;95%CI,241.54-343.26;p细胞计数显示轻度HA治疗组细胞形态及数量与正常对照组最接近(x=71.00±9.62;95%CI,48.81-93.19;p<0.001)。膝关节直径的测量显示轻度HA治疗组和轻度HA未治疗组间的直径差明显大于重度HA治疗组和重度HA未治疗组间的直径差(x=1.17±0.32mm;p<0.01)。软骨甲苯胺蓝染色的结果与MRI结果一致,甲苯胺蓝染色显示重度组软骨基质丢失明显,而轻度HA治疗组软骨基质与正常对照组无明显差异。[结论]:P-PRP可抑制HA滑膜炎形成和减缓软骨基质丢失方面的进展,尤其是在早期轻度病变的出血性关节炎中。本项体内动物研究为P-PRP治疗出血性关节病变提供了理论依据和临床应用的可能。

关键词：出血性关节炎去白细胞富血小板血浆滑膜软骨

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带蒂骨膜瓣移植与去白细胞富血小板血浆在距骨缺血性坏死手术中的应用

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中国骨与关节损伤杂志 2020年第6期35卷 659-660页

作者：董新利苏云孙强刘晗大连大学附属中山医院骨科辽宁大连116001

目的总结带血管蒂胫骨远端骨膜瓣移植联合去白细胞富血小板血浆在手术治疗距骨缺血性坏死中应用临床经验。方法回顾性分析自2016-07—2018-06诊治的14例距骨缺血性坏死,术中于胫骨远端前侧切取带血管蒂的骨膜瓣,于胫骨远端前侧凿取骨皮... 详细信息

目的总结带血管蒂胫骨远端骨膜瓣移植联合去白细胞富血小板血浆在手术治疗距骨缺血性坏死中应用临床经验。方法回顾性分析自2016-07—2018-06诊治的14例距骨缺血性坏死,术中于胫骨远端前侧切取带血管蒂的骨膜瓣,于胫骨远端前侧凿取骨皮质备用,将松质骨与提取的去白细胞富血小板血浆充分混合后植入骨隧道,再将骨膜瓣转位植入骨隧道并与周围组织缝合固定。结果14例均获得随访,随访时间平均25.8(12~36)个月。切口均一期愈合,未出现感染及神经血管损伤。采用Kenwright标准对术后疗效进行评价:优5例(术前Ficat-Arlet分期:Ⅱ期3例,Ⅲ期2例;症状完全缓解),良8例(术前Ficat-Arlet分期:Ⅱ期3例,Ⅲ期5例;5例症状完全缓解,3例症状部分缓解),可1例(术前Ficat-Arlet分期为Ⅲ期,症状缓解不明显)。结论带血管蒂胫骨远端骨膜瓣移植联合去白细胞富血小板血浆注入手术治疗距骨缺血性坏死临床疗效满意,为手术治疗距骨缺血性坏死提供了一种新的术式选择。

关键词：距骨缺血性坏死带血管蒂骨膜瓣去白细胞富血小板血浆植骨

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富血小板血浆中白细胞对小鼠肩袖损伤后愈合的影响

富血小板血浆中白细胞对小鼠肩袖损伤后愈合的影响

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第十二届全国体育科学大会

作者：郑成武文霞李晓梅王广兰武汉体育学院医院运动医学科武汉体育学院研究生院武汉体育学院健康科学学院

研究目的:本研究采用去白细胞富血小板血浆（P-PRP）和富白细胞富血小板血浆（L-PRP）对小鼠肩袖损伤后进行干预治疗,并通过组织形态学、酶联免疫吸附测定（ELISA）以及生物力学测试,观察小鼠肩袖损伤后腱-骨结合部（BTI）组织结构特征... 详细信息

研究目的:本研究采用去白细胞富血小板血浆（P-PRP）和富白细胞富血小板血浆（L-PRP）对小鼠肩袖损伤后进行干预治疗,并通过组织形态学、酶联免疫吸附测定（ELISA）以及生物力学测试,观察小鼠肩袖损伤后腱-骨结合部（BTI）组织结构特征、血清相关炎性因子浓度的变化以及生物力学性能的恢复,初步探讨富血小板血浆（PRP）中的白细胞对肩袖损伤后腱-骨结合部愈合的影响,为肩袖损伤后应用富血小板血浆进行修复的临床实践提供有效的理论参考。研究方法:（1）C57BL/6小鼠（8周龄,雄性,20-22g）经摘眼球取血,每5只采血约5ml,用于二次离心法制备PRP。P-PRP:首次以160g离心10min,吸取顶部的血浆层于另一试管中,再次以250g离心15min,丢弃大部分上清液,将剩余的血浆和沉淀物重新悬浮以形成P-PRP。L-PRP:首次以800g离心10min,将最上面的两层转移到新的试管中,并以1100g的速度再次离心10min;丢弃大部分上清液,将剩余的血浆和沉淀物重新悬浮以形成L-PRP。将预先制备好的同种异体P-PRP、L-PRP和全血各取0.2ml进行血液成分分析,剩余部分用于后续干预治疗。（2）54只C57BL/6小鼠右前肢行冈上肌肌腱离断术,并刮除界面处纤维软骨层,建立小鼠肩袖损伤模型。将小鼠随机分为3组:对照组、L-PRP组及P-PRP组,各18只,分别取预先制备的同种异体L-PRP和P-PRP各约0.1ml,并与20μl 10%的Cacl2氯化钙+10U牛凝血酶的溶液混合形成凝胶,填充于冈上肌腱-肱骨界面处（对照组填充等量的生理盐水）;用6-0 PDS线将冈上肌腱缝合至肱骨头上,最后缝合皮肤。（3）分别于术后4周和8周处死动物后取冈上肌-冈上肌肌腱-肱骨头复合体标本,血液标本行ELISA检测相关炎性因子白介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度,复合体标本行HE染色组织学观察肩袖损伤后腱-骨结合部组织结构的恢复情况;并对术后8周小鼠冈上肌-冈上肌肌腱-肱骨头复合体标本行生物力学检测,评估其生物力学性能参数的恢复。研究结果:所有行肩袖损伤模型的小鼠均存活至收取标本时间点,且切口愈合良好。（1）血液成分分析:P-PRP和L-PRP血小板浓度相似（P＞0.05）,且均高于全血（P＜0.01）;L-PRP中白细胞浓度明显高于P-PRP和全血,差异极显著（P＜0.001）,其中P-PRP与全血相比白细胞浓度差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）HE染色:术后4周,L-PRP、P-PRP两组肩袖标本的冈上肌腱-肱骨界面的融合程度优于对照组,可见纤维软骨层形成,且L-PRP组软骨细胞的数量、成熟度以及细胞和肌腱纤维的排列顺序均优于P-PRP组;术后8周,L-PRP、P-PRP两组标本界面处可见明显的四层过渡性结构,其中P-PRP组中融合部位纤维软骨层厚度和融合紧密程度优于L-PRP组,对照组中损伤界面处融合良好,出现纤维软骨层,软骨细胞较为成熟,但排列杂乱。（3）ELISA检测结果:术后8周,各组小鼠血清中IL-1β、TNF-α浓度较4周时均有所降低;L-PRP组小鼠血清中IL-1β浓度在术后4周和8周均显著高于P-PRP组（P＜0.001）和对照组（P＜0.01）,P-PRP组IL-1β浓度低于对照组,差异有极显著性（P＜0.001）;而L-PRP组小鼠血清中TNF-α浓度则显著高于P-PRP组（P＜0.001）和对照组;其中P-PRP组TNF-α浓度明显低于对照组,差异非常显著（P＜0.01）。（4）生物力学测试结果:术后8周,L-PRP、P-PRP两组冈上肌-冈上肌肌腱-肱骨头复合体标本的生物力学性能指标拉断载荷（FL）和极限强度（US）与对照组相比均有显著性提高;与L-PRP组相比,P-PRP组中的FL值增加0.44±0.02 N（P＜0.01）、US值增加0.78±0.28 Mpa（P＜0.05）。研究结论:富血小板血浆可促进小鼠肩袖损伤后腱-骨结合部的愈合,其中去白细胞富血小板血浆在愈合中后期阶段的修复效果优于富白细胞富血小板血浆,而在损伤的早期富白细胞富血小板血浆的治疗效果可能较好。

关键词：去白细胞富血小板血浆富白细胞富血小板血浆肩袖损伤腱-骨结合部炎性因子

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P-PRP与L-PRP对兔椎间盘髓核来源间充质干细胞生物学特性影响的比较

P-PRP与L-PRP对兔椎间盘髓核来源间充质干细胞生物学特性影响的比...

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作者：贾军东南大学

学位级别：硕士

目的:比较去白细胞富血小板血浆(P-PRP)与含白细胞富血小板血浆(L-PRP)对兔椎间盘髓核来源间充质干细胞(NPMSCs)增殖、分化、细胞外基质和NF-κB信号通路激活的影响。方法:实验选取24只雌性,6-8个月龄,体重3-4kg新西兰大白兔。每只大白... 详细信息

目的:比较去白细胞富血小板血浆(P-PRP)与含白细胞富血小板血浆(L-PRP)对兔椎间盘髓核来源间充质干细胞(NPMSCs)增殖、分化、细胞外基质和NF-κB信号通路激活的影响。方法:实验选取24只雌性,6-8个月龄,体重3-4kg新西兰大白兔。每只大白兔分别抽取30ml动脉血,随机分为对照组、P-PRP组和L-PRP组。随后提取兔椎间盘髓核来源间充质干细胞并鉴定。选取P2 NPMSCs在transwell细胞小室中与对应的不同浓度(0%、5%、10%和20%Vol/Vol)的PRPs(P-PRP或L-PRP)共培养三天后,CCK-8检查各组细胞增殖率。再选取各组P2细胞,分别加入各组对应的培养基(普通培养基、10%P-PRP、10%L-PRP)共培养。14天后,使用实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)测定各组细胞MSCs干性基因(Oct4,Nanog)、髓核细胞相关基因(Collagen II,Aggrecan)、炎症因子(TNF-α,IL-1β)以及基质金属蛋白酶(MMP-1,MMP-13)的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA法)测定TNF-α、IL-1β、MMP-1和MMP-13浓度;Western Blot检测NF-κB/p65、Collagen II以及Aggrecan蛋白表达;免疫荧光实验检测各组细胞Collagen II以及Aggrecan蛋白表达。结果:NPMSCs与PRPs共培养后,其增殖率表现出对PRPs剂量依赖性,其中在PRPs浓度10%时细胞增殖率最大(P细胞形态由纺锤形样细胞逐渐转变成瘦长梭形髓核样细胞,同时,实验组干细胞标志基因(Oct-4,Nanog)的表达是对照组的30%,而髓核细胞胞相关基因(CollagenII,Aggrecan)的表达,是对照组3至4倍(P白细胞和炎症因子浓度(TNF-α,IL-1β)明显高于P-PRP组(P细胞中炎症因子(TNF-α,IL-1β)、基质金属蛋白酶(MMP-1,MMP-13)以及NF-κB p65表达明显增多(P细胞外基质相关蛋白(Collagen II,Aggrecan)表达明显高于L-PRP组(P细胞分化,剔除PRP中白细胞可以减少炎症反应,避免细胞NF-κB信号通路的激活以及抑制细胞分解代谢反应。

关键词：富血小板血浆去白细胞富血小板血浆分解代谢髓核间充质干细胞

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