检索结果-南通市图书馆

供体细胞、去核方法以及TSA处理对巴马小型猪手工克隆胚胎发育的影响

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基因组学与应用生物学 2013年第3期32卷 296-302页

作者：苏克同燕志光孙如玉卢晟盛亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西大学动物科技学院南宁530005 广东湛江久和医院湛江524094

本文用不同的供体细胞、去核方法以及TSA处理浓度研究其对巴马小型猪手工克隆胚发育的影响,试验结果发现:克隆胚的发育率在相同代次的不同供体细胞之间,极体定向和化学辅助去核法之间均无显著性差异(p>0.05);TSA浓度为40nmol/L时克隆胚... 详细信息

本文用不同的供体细胞、去核方法以及TSA处理浓度研究其对巴马小型猪手工克隆胚发育的影响,试验结果发现:克隆胚的发育率在相同代次的不同供体细胞之间,极体定向和化学辅助去核法之间均无显著性差异(p>0.05);TSA浓度为40nmol/L时克隆胚的囊胚率最高,但与对照组相比无显著性差异(p>0.05)。这说明三种供体细胞均能支持巴马小型猪克隆胚的早期发育,化学辅助和极体定向去核法均为较好的去核方法。

关键词：供体类型去核方法 TSA 手工核移植巴马小型猪

不同去核方法对猪手工克隆重构胚发育效果的影响

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中国畜牧杂志 2015年第9期51卷 16-20页

作者：吕玲燕陆杏蓉孙俊铭潘翠玲崔奎青谢炳坤广西壮族自治区畜牧研究所广西家畜遗传改良重点实验室广西南宁530001 广西大学亚热带生物资源保护利用国家重点实验室广西南宁530005

为探讨不同去核方法对猪手工克隆(HMC)重构胚发育效果的影响,本研究比较了盲切法,第一极体(Pb1)定位法及脱羰秋水仙碱(DM)辅助去核法3种不同的去核方法的去核效率及HMC胚胎发育的影响。结果表明:第一极体定位法和DM辅助去核法的整体去... 详细信息

为探讨不同去核方法对猪手工克隆(HMC)重构胚发育效果的影响,本研究比较了盲切法,第一极体(Pb1)定位法及脱羰秋水仙碱(DM)辅助去核法3种不同的去核方法的去核效率及HMC胚胎发育的影响。结果表明:第一极体定位法和DM辅助去核法的整体去核效率显著高于盲切法去核法(P去核效率显著高于其他浓度和时间处理组(P去核与pb1定位去核法2种不同去核方法对HMC重构胚的发育效果的影响差异不显著。本研究表明,添加适量的DM可以提高徒手克隆去核效率,且对后期重构胚发育没有显著影响。

关键词：去核方法猪手工克隆发育效果

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水牛卵母细胞去核方法的摸索

草食家畜 2003年第4期 19-22页

作者：杨素芳石德顺韦精卫陆凤花广西大学动物繁殖研究所广西南宁530005

本研究对水牛卵母细胞的去核方法进行了摸索。首先通过盲吸法去核,摸索水牛卵母细胞在体外成熟不同时间的成熟率和去核率;其次采用spindle-View系统去核,摸索用这种系统去核的最佳时间。水牛卵母细胞IVM16-18h与IVM 19-21h的成熟率之间... 详细信息

本研究对水牛卵母细胞的去核方法进行了摸索。首先通过盲吸法去核,摸索水牛卵母细胞在体外成熟不同时间的成熟率和去核率;其次采用spindle-View系统去核,摸索用这种系统去核的最佳时间。水牛卵母细胞IVM16-18h与IVM 19-21h的成熟率之间有显著差别(43.0％vs58.2％,P去核率的情况刚好相反。随着卵母细胞成熟时间的延长,卵细胞的核与PB1的相对距离增大。在体外成熟18h,20h,22h,有较大比例(分别为72.6％、67.9％、64.0％)的卵母细胞中的核与PB1的位置较近,但当成熟时间增加到24h时,这一比例下降到57.6％(72.6％vs 57.6％,P去核则可消除成熟时间对去核率的影响,这些结果表明:1.水牛卵母细胞的成熟时间的延长不断提高,而去核率呈下降趋势;2.水牛卵母细胞成熟时间的延长会增加核与PB1的相对距离;利用Spindle-View系统可提高成熟时间较长的卵母细胞的去核率。

关键词：水牛卵母细胞去核方法盲吸法成熟率去核率 Spindle—View系统细胞核移植克隆

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哺乳动物卵母细胞去核方法的研究进展

安徽农学通报 2007年第21期13卷 32-33,43页

作者：翁凡郑小亮刘哲黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院黑龙江大庆163319

随着"多莉"羊的诞生,体细胞克隆技术近年来发展迅速,并获得了一大批克隆动物。但克隆动物的效率仍然偏低,这与克隆技术各个环节的完善程度有关,卵母细胞的去核就是其中的重要环节之一。本文对近年来常见的几种卵母细胞去核方法作了详尽... 详细信息

随着"多莉"羊的诞生,体细胞克隆技术近年来发展迅速,并获得了一大批克隆动物。但克隆动物的效率仍然偏低,这与克隆技术各个环节的完善程度有关,卵母细胞的去核就是其中的重要环节之一。本文对近年来常见的几种卵母细胞去核方法作了详尽的论述,以期为该领域的科研工作者提供参考。

关键词：体细胞克隆效率卵母细胞去核方法

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卵母细胞去核方法及其对卵母细胞发育的影响

山东畜牧兽医 2007年第6期28卷 42-44页

作者：李清利津县畜牧局 257400

自1938年Spermann为研究不同发育时期细胞核的发育能力而提出的细胞核移植构想以来，核移植技术已经取得了极大的成就，特别是1997年由英国科学家Wilmut等经体细胞核移植克隆出绵羊“多莉”而带来的克隆风暴更是以迅猛之势席卷全球。

关键词：卵母细胞发育去核方法体细胞核移植核移植技术英国科学家发育能力发育时期克隆

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牛卵母细胞显微操作机械去核方法的比较

延边大学农学学报 2009年第4期31卷 238-242页

作者：姜成国林涛尹多李钟淑方南洙延边州畜牧总站延边大学农学院

分别采用挤压去核法、盲吸去核法和点击去核法对延边黄牛卵母细胞进行去核操作,在操作时间、成功率、去核率及重组胚后期发育等方面进行比较.结果表明,去核率上,盲吸法低于其他2种方法;去核成功率上,挤压法和点压法高于盲吸法;操作耗时... 详细信息

分别采用挤压去核法、盲吸去核法和点击去核法对延边黄牛卵母细胞进行去核操作,在操作时间、成功率、去核率及重组胚后期发育等方面进行比较.结果表明,去核率上,盲吸法低于其他2种方法;去核成功率上,挤压法和点压法高于盲吸法;操作耗时上,挤压法和盲吸法耗时较短;3种方法所构建的重组胚卵裂率以及囊胚发育率均差异不显著.因此,挤压去核法是一种较适合延边黄牛卵母细胞去核的有效方法.

关键词：卵母细胞去核方法核移植

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牛体细胞核移植显微操作环节的优化

生物工程学报 2009年第9期25卷 1424-1432页

作者：雷安民马晓玲高志敏胡勇策隋进强黄伟伟昝林森窦忠英西北农林科技大学动物医学院陕西省干细胞工程技术研究中心陕西省农业分子生物学重点实验室杨凌712100 西北农林科技大学动物科技学院杨凌712100

本研究从牛卵母细胞去核方法(纺锤体观测仪法&Hoechst33342染色法)、供体细胞核引入去核卵细胞质的方法(卵细胞质注射法和电融合法)和重构胚胎电融合(3组参数)等3个环节对牛体细胞核移植的显微操作过程及相关参数进行了筛选优化。以核... 详细信息

本研究从牛卵母细胞去核方法(纺锤体观测仪法&Hoechst33342染色法)、供体细胞核引入去核卵细胞质的方法(卵细胞质注射法和电融合法)和重构胚胎电融合(3组参数)等3个环节对牛体细胞核移植的显微操作过程及相关参数进行了筛选优化。以核移植胚胎的卵裂率、囊胚发育率作为检测指标,对不同的方法所获得的克隆胚胎的卵分裂率与囊胚发育率进行比较,最后筛选获得1个优化的牛体细胞核移植操作程序,即采用Spindle view系统对牛卵母细胞进行去核操作,将供核体细胞注射到卵周隙,然后通过电融合法将供体核引入去核卵细胞质(电融合参数为1.9kV/cm,脉冲时程10μs,方波2次间隔2s)。以此核移植程序进行牛体细胞核移植实验,自获得克隆胚胎中筛选80枚优质囊胚移植到33头受体牛子宫内,最后2头母牛产下2头克隆牛犊,结果表明利用该优化的显微操作环节进行牛体细胞核移植可以获得体细胞克隆牛犊。

关键词：去核方法 spindle—view系统电融合

挤压去核法和盲吸去核法在延边黄牛体细胞核移植中的对比研究

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江苏农业科学 2009年第2期37卷 178-180页

作者：林涛方南洙宋君博孙焕林李钟淑延边大学农学院吉林龙井133400

分别采用挤压去核法和盲吸去核法对延边黄牛卵母细胞进行去核处理,之后进行核移植,培养观察,比较两种去核方法对延边黄牛体细胞核移植效率的影响。挤压法的操作成功率和去核率明显高于盲吸法,盲吸法操作程序耗时比挤压法长,但是差异不... 详细信息

分别采用挤压去核法和盲吸去核法对延边黄牛卵母细胞进行去核处理,之后进行核移植,培养观察,比较两种去核方法对延边黄牛体细胞核移植效率的影响。挤压法的操作成功率和去核率明显高于盲吸法,盲吸法操作程序耗时比挤压法长,但是差异不显著。两种方法获得了相近的卵裂率和囊胚率,但挤压法构建的重组胚在囊胚数上高于盲吸法。挤压法在延边黄牛体细胞核移植上比盲吸法更有效。

关键词：核移植卵母细胞去核方法延边黄牛

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小鼠卵母细胞去核方案的优化

农业生物技术学报 2007年第2期15卷 212-216页

作者：刘军王勇胜刘凤军李学家张涌西北农林科技大学生物工程研究所西北农林科技大学生物工程研究所杨凌712100

研究对比了透明带磨口刺入和透明带直接刺入两种去核方法、蔗糖处理、细胞松弛素B(CB)浓度去核针内径对小鼠卵母细胞去核效率,及CB浓度对去除部分胞质的孤雌胚早期发育的影响。结果:(1)添加3%蔗糖与对照组之间的去核效率无影响(P>0.05);... 详细信息

研究对比了透明带磨口刺入和透明带直接刺入两种去核方法、蔗糖处理、细胞松弛素B(CB)浓度去核针内径对小鼠卵母细胞去核效率,及CB浓度对去除部分胞质的孤雌胚早期发育的影响。结果:(1)添加3%蔗糖与对照组之间的去核效率无影响(P>0.05);(2)CB浓度为5、10和20μg/mL时,磨口法的去核成功率差异不显著(P>0.05),刺入法在CB浓度为5和10μg/mL时去核成功率显著高于20μg/mL组(P去核成功率显著高于刺入法(P0.05),20μg/mLCB处理组囊胚率显著低于其它处理组(P去核针内径为10、15和20μm时,磨口法去核成功率差异不显著(P>0.05),刺入法应用20μm去核针的去核成功率显著低于其它组(P去核针条件下提高了去核效率(成功率为90.8%,速度为50s/个),且不影响孤雌胚的体外发育率。

关键词：小鼠卵母细胞去核方法蔗糖处理细胞松弛素B 去核针