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神经生长因子/原肌球蛋白受体激酶a信号通路与骨折疼痛和骨折愈合的关系研究进展

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中医正骨 2023年第3期35卷 50-54,64页

作者：毛俊杰徐涛涛童培建浙江中医药大学第一临床医学院浙江杭州310053 浙江省中医院浙江杭州310006

骨折是骨科最常见的一类疾病。疼痛是骨折患者的首发症状,且较剧烈。临床上常用的止痛药物——非甾体抗炎药(non-steroidal anti-inflammatory drug,NSAID)和麻醉性镇痛药均能有效缓解骨折疼痛,但是症状容易反复,而且上述药物具有一定... 详细信息

骨折是骨科最常见的一类疾病。疼痛是骨折患者的首发症状,且较剧烈。临床上常用的止痛药物——非甾体抗炎药(non-steroidal anti-inflammatory drug,NSAID)和麻醉性镇痛药均能有效缓解骨折疼痛,但是症状容易反复,而且上述药物具有一定程度的不良反应。近年来的研究显示,神经生长因子(nerve growth factor,NGF)/原肌球蛋白受体激酶a(tropomyosin receptor kinase A,TRKA)信号通路与骨折疼痛的产生与传导密切相关,阻断或抑制该信号通路能明显缓解骨折疼痛,但该信号通路与骨折愈合的关系尚不明确。目前针对NGF/TRKA信号通路研发的药物表现出较好的缓解骨折疼痛的作用,有望成为临床上治疗骨折疼痛的新选择。本文就NGF/TRKA信号通路与骨折疼痛和骨折愈合之间关系的研究进展进行了综述。

关键词：骨折疼痛骨折愈合神经生长因子原肌球蛋白受体激酶a 综述

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治疗疼痛的抗体药物的临床进展

药学进展 2024年第1期48卷 31-40页

作者：王永梅彭凯婷王琪王桂凤王春河中国科学院上海药物研究所上海201203

疼痛是一种与实际或潜在组织损伤相关的,或类似的不愉快的感觉和情感体验,它极大地影响着人们的生活质量。临床应用发现,传统的非甾体、阿片类小分子镇痛药存在不同程度的不良反应甚至诱发成瘾性,因此,开发新型无成瘾性的镇痛药物具有... 详细信息

疼痛是一种与实际或潜在组织损伤相关的,或类似的不愉快的感觉和情感体验,它极大地影响着人们的生活质量。临床应用发现,传统的非甾体、阿片类小分子镇痛药存在不同程度的不良反应甚至诱发成瘾性,因此,开发新型无成瘾性的镇痛药物具有迫切的临床需求。作为镇痛药物开发的新方向,抗体类药物可以特异性地阻断疼痛信号传导、降低神经敏化,且无阿片类药物的成瘾性问题,具有更好的安全性。对目前在疼痛治疗领域的抗体类药物的最新应用和临床进展进行总结,主要包括靶向神经生长因子、原肌球蛋白受体激酶a、降钙素基因相关肽、降钙素基因相关肽受体、垂体腺苷酸环化酶激活肽38、垂体腺苷酸环化酶激活肽受体1等的单克隆抗体,可用于治疗类风湿性关节炎、骨关节炎、慢性腰痛、偏头痛等疾病。以期为抗体药物在疼痛治疗中的进一步研发和应用提供思路和指导。

关键词：疼痛神经生长因子原肌球蛋白受体激酶a 降钙素基因相关肽降钙素基因相关肽受体垂体腺苷酸环化酶激活肽38 垂体腺苷酸环化酶激活肽受体1

基于对背根神经节中神经生长因子的调控探究华蟾素治疗骨癌痛的机制

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中草药 2022年第17期53卷 5427-5432页

作者：刘亚丽刘丹张文陈涛胡卫三峡大学医学院湖北宜昌443003 黄冈市中医医院湖北黄冈438000 上海中医药大学附属龙华医院上海200032 三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443003

目的基于对骨癌痛大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的调控,探讨中药华蟾素治疗骨癌痛的机制。方法筛选痛阈值满足条件的SD雌性大鼠构建骨癌痛模型,随机分为正常组、假手术组、模型... 详细信息

目的基于对骨癌痛大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的调控,探讨中药华蟾素治疗骨癌痛的机制。方法筛选痛阈值满足条件的SD雌性大鼠构建骨癌痛模型,随机分为正常组、假手术组、模型组、华蟾素组、华蟾素+NGF组和anti-NGF组。华蟾素组、华蟾素+NGF组在造模第7天开始ip华蟾素,其余各组ip等体积的生理盐水;华蟾素+NGF组、anti-NGF组在造模第12天鞘内插管给药,造模21 d后处理大鼠。检测大鼠造模前后痛阈值变化;采用Western blotting法检测各组大鼠DRG中原肌球蛋白受体激酶a(tropomyosin receptor kinase A,TrkA)、p75神经营养受体(p75 neurotrophy receptor,p75NTR)、μ阿片受体(μopioid receptor,MOR)和神经递质P物质(substance P,SP)蛋白表达;采用免疫组化法检测各组大鼠DRG中MOR的表达;采用免疫荧光双标检测各组大鼠DRG中MOR与TrkA共表达情况。结果与模型组比较,华蟾素明显提高大鼠机械痛阈值与热痛阈值(P蛋白表达(P蛋白表达(P<0.01)。华蟾素+NGF组激活大鼠DRG中TrkA、p75NTR和SP的表达(P<0.01),抑制MOR的表达(P<0.05)。结论华蟾素可能通过调节内源性NGF抑制TrkA、p75NTR的表达,激活MOR,并能够减少SP的释放,最终参与骨癌痛的镇痛过程。

关键词：华蟾素骨癌痛神经生长因子 μ阿片受体原肌球蛋白受体激酶a p75神经营养受体

基于小分子化合物库筛选协同多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂杀伤卵巢癌细胞的药物

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中国生物化学与分子生物学报 2022年第4期38卷 452-464页

作者：李含笑李小满罗业飞王嘉东北京大学基础医学院放射医学系系统生物医学研究所北京100191

多腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly(ADP-ribose)polymerase,PARP)抑制剂是一类靶向DNA修复缺陷癌细胞的新型药物。早期研究表明PARP抑制剂取得了令人满意的结果,然而药物治疗后出现的耐药机制尚未完全揭露。因此,有必要寻找更多的靶向药物与P... 详细信息

多腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly(ADP-ribose)polymerase,PARP)抑制剂是一类靶向DNA修复缺陷癌细胞的新型药物。早期研究表明PARP抑制剂取得了令人满意的结果,然而药物治疗后出现的耐药机制尚未完全揭露。因此,有必要寻找更多的靶向药物与PARP抑制剂联用,以达到杀伤肿瘤细胞的目的。本文基于379种小分子化合物和PARP抑制剂尼拉帕尼(Niraparib)的联合用药筛选,通过细胞增殖实验、克隆存活实验和免疫荧光染色等方法筛选潜在的具有协同PARP抑制剂杀伤卵巢癌细胞的药物。结果表明,其中有8种小分子化合物具有较好的联合用药效果,包括2种已经报道的与PARP抑制剂具有联用效果的小分子化合物STF-118804和Disulfiram。我们从中选取原肌球蛋白受体激酶a(tropomyosin receptor kinase A,TrKA)的抑制剂GW441756,进行了多种肿瘤细胞的验证以及初步机制的探究。Niraparib和TrKA抑制剂的联合用药显著增加肿瘤细胞对PARP抑制剂的敏感性(P<0.05)。从机制上分析,联合用药组细胞内γH2AX foci的数目显著增加(P<0.05),说明TrKA抑制剂阻碍损伤后细胞的DNA损伤修复能力;同时,联合用药显著降低细胞内同源重组修复(homologous recombination repair,HRR)标志物RAD51 foci(P<0.05)的形成,说明TrKA抑制剂可能通过抑制细胞的HRR效率阻碍细胞的DNA损伤修复。本研究的结果提示,TrKA抑制剂可以作为一种与PARP抑制剂联用杀伤卵巢癌细胞的潜在药物。

关键词：多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂尼拉帕尼原肌球蛋白受体激酶a 同源重组修复

基于化合物库筛选协同PARP抑制剂杀伤卵巢癌细胞的药物及机制探究

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基于化合物库筛选协同PARP抑制剂杀伤卵巢癌细胞的药物及机制探究

作者：李含笑北京大学医学部

学位级别：硕士

多腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly(ADP-ribose)polymerase,PARP)抑制剂是一类靶向DNA修复缺陷癌细胞的新型药物。早期试验表明PARP抑制剂在临床中具有良好的治疗效果,然而药物治疗后肿瘤细胞会逐渐产生耐药性。因此,迫切需要寻找与PARP抑制... 详细信息

多腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly(ADP-ribose)polymerase,PARP)抑制剂是一类靶向DNA修复缺陷癌细胞的新型药物。早期试验表明PARP抑制剂在临床中具有良好的治疗效果,然而药物治疗后肿瘤细胞会逐渐产生耐药性。因此,迫切需要寻找与PARP抑制剂具有联用效果的药物。为了寻找更多与PARP抑制剂具有联合杀伤肿瘤细胞效果的靶向药物,本研究进行了379种小分子化合物与PARP抑制剂尼拉帕尼(Niraparib)的联合用药筛选。结果表明,379种小分子化合物中有8种与Niraparib具有较好的联合用药效果,包括2种已经报道的与PARP抑制剂具有合成致死效应的小分子化合物STF-118804和Disulfiram。我们从这8种小分子化合物中选取了原肌球蛋白受体激酶a(tropomyosin receptor kinase a,Tr KA)的抑制剂GW441756和丝氨酸/精氨酸蛋白激酶1(serine/arginine protein kinase 1,SRPK1)的抑制剂SPHINX31进行重点探究。通过细胞增殖实验和克隆存活实验,我们发现,GW441756和SPHINX31均能显著增加肿瘤细胞对Niraparib的敏感性。机制上,通过免疫荧光染色、彗星电泳、细胞周期检测以及同源重组修复(homologous recombination repair,HRR)效率检测等实验方法,我们发现,GW441756和Niraparib联合用药组细胞内γH2AX foci的数目显著增加,且拖尾现象加重,说明Tr KA抑制剂阻碍损伤后细胞的DNA损伤修复能力;GW441756和Niraparib联合用药能够显著降低细胞内HRR标志物RAD51 foci的形成,且HRR效率显著降低,说明Tr KA抑制剂通过抑制细胞的HRR效率阻碍细胞的DNA损伤修复。敲低SRPK1或者使用SPHINX31处理均可以显著降低细胞内HRR关键因子BRCA1的m RNA水平,同时显著降低细胞的HRR效率,且不影响细胞周期,说明SRPK1抑制剂通过降低BRCA1的m RNA水平抑制细胞的HRR效率,从而阻碍细胞的DNA损伤修复。综上所述,本研究的结果表明Tr KA抑制剂GW441756和SRPK1抑制剂SPHINX31均能降低细胞的HRR效率,从而与PARP抑制剂具有合成致死效应,提示GW441756和SPHINX31均可以作为与PARP抑制剂联用杀伤卵巢癌细胞的潜在药物。

关键词：多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂尼拉帕尼原肌球蛋白受体激酶a 丝氨酸/精氨酸蛋白激酶1 DNA损伤修复

“心胃同治”电针对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠NGF、TrkA的影响

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“心胃同治”电针对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠NGF、TrkA的影响

作者：周颖湖北中医药大学

学位级别：硕士

目的精神情志问题是导致肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)发生的主要诱因之一,且为其重要临床特征。故本实验以急性与慢性应激相结合的方法诱导的腹泻型肠易激综合征(Diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)... 详细信息

目的精神情志问题是导致肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)发生的主要诱因之一,且为其重要临床特征。故本实验以急性与慢性应激相结合的方法诱导的腹泻型肠易激综合征(Diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)模型大鼠为研究对象,以纽蛋白(vinculin)及NGF-Trk A信号通路为切入点,从中医心与脾胃的联系出发,选择电针内关、公孙配穴对IBS-D模型大鼠进行治疗,探索心胃同治指导下的配穴对伴情志障碍的IBS-D的疗效及可能的效应机制,丰富IBS-D的中医理论内涵,为针灸临床治疗IBS-D提供实验依据。方法选用12周龄SPF级SD雄性大鼠40只,体重在180-200g之间。对大鼠进行1周的适应性喂养后,采用随机数字表法将大鼠分为4组:空白组、模型组、西药组、心胃同治组,每组各10只。以临床IBS患者病因病理研究为基础,本实验采用急性与慢性应激相结合的方法制备IBS-D大鼠模型,实验周期为28天。所有大鼠饲喂普通饲料。空白组不作任何处理;模型组大鼠建立IBS-D模型,每日作抓取、鼠衣穿戴、悬挂训练;西药组大鼠建立IBS-D模型的同时,予0.3 mg/m L匹维溴铵混悬液灌胃,药量比例为15 mg/kg,qd;心胃同治组大鼠建立IBS-D模型的同时,采用电针双侧内关、公孙穴治疗,接电针连续波,频率2HZ,电流强度1m A,每次15min。对大鼠的一般情况、行为学变化、排便习惯进行观察和记录,运用HE染色观察结肠组织形态变化、采用ELISA检测血清中vinculin抗体和Cdt B抗体水平、运用Western blotting检测结肠组织中的NGF、Trk A的表达水平。结果1.大鼠一般情况、行为学及腹泻情况的观察:空白组大鼠实验全程精神状况佳,反应敏捷、活动自在,皮毛光滑白净,爪甲干爽,官窍无异常分泌物,粪便色褐黑、呈颗粒状,干湿适中,数量正常。模型组大鼠实验全程精神状况、反应灵敏度、毛发爪甲光洁度持续变差,官窍逐渐出现分泌物,粪便稀溏化,甚则出现大小便失禁情况,体重增长情况差,失去糖水偏爱,结肠敏感性增高。心胃同治组大鼠造模干预前两周一般情况同模型组,从第3周开始,大鼠的一般情况好转,体重增长率增加。西药组一般情况略差于空白组,在前两周明显优于模型组及心胃同治组,实验结束时,与心胃同治组无明显差异。各组大鼠PS值的结果显示,造模及干预结束后,空白组与适应性喂养阶段相比未见明显差异(P>0.05),模型组较空白组显著降低,且差异有统计学意义(P0.05);西药组较心胃同治组稍低,差异无统计学意义(P>0.05)。AWR结果显示,给各组大鼠结肠施加的压力为20mm Hg或40mm Hg时,模型组AWR评分较空白组显著升高,差异有统计学意义(P0.05);给各组大鼠结肠施加的压力为60mm Hg或80mm Hg时,空白组AWR评分较模型组、心胃同治组及西药组低,只与模型组有统计学差异(P0.05),但心胃同治组的AWR评分均较西药组稍低。2.各组大鼠结肠组织细胞结构观察:模型组大鼠结肠组织可见明显损伤现象,肠上皮结构破坏明显,肠绒毛排列紊乱,平滑肌肌层变薄,在肠黏膜的下层未见水肿现象发生。心胃同治组及西药组较模型组而言,结肠黏膜结构较为完整,偶见少量绒毛脱落及轻微断裂现象,固有层可见平滑肌层存在,黏膜下肌层厚度增加。各组均无炎性细胞浸润及水肿现象。3.大鼠血清vinculin抗体及Cdt B抗体的表达:空白组大鼠血清vinculin抗体OD值明显低于模型组和心胃同治组,差异有统计学意义(P0.05);心胃同治组和西药组血清vinculin抗体均较模型组低,差异均有统计学意义(P0.05)。对各组大鼠血清Cdt B抗体光密度值的检测显示,空白组明显低于模型组、心胃同治组及西药组,差异均有统计学意义(P<0.

关键词：腹泻型肠易激综合征内关公孙神经生长因子原肌球蛋白受体激酶a

“化痰开窍”电针法对高脂血症合并脑缺血大鼠大脑TrkA信号通路的影响

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“化痰开窍”电针法对高脂血症合并脑缺血大鼠大脑TrkA信号通路的...

作者：于若凡北京中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨(1)电针对高脂血症合并脑缺血大鼠血脂、行为学、脑梗死体积、脑组织形态学和海马齿状回、缺血半暗带原肌球蛋白受体激酶a(TrkA)表达的影响,以及缺血侧大脑半球TrkA和β-NGF蛋白表达的影响。(2)电针对单纯脑缺血大鼠行为学、... 详细信息

目的:探讨(1)电针对高脂血症合并脑缺血大鼠血脂、行为学、脑梗死体积、脑组织形态学和海马齿状回、缺血半暗带原肌球蛋白受体激酶a(TrkA)表达的影响,以及缺血侧大脑半球TrkA和β-NGF蛋白表达的影响。(2)电针对单纯脑缺血大鼠行为学、脑梗死体积以及缺血侧大脑半球TrkA和β-NGF蛋白表达的影响。方法:实验一:将102只SD大鼠随机分为正常组(n=6)、高脂血症合并脑缺血模型组、假手术组、电针1组、电针2组(每组n=24)。高脂饲料喂养6周造成高脂血症模型后(除正常组),第43天至第49天,电针1组电针双侧“丰隆”穴7天,每天1次。第50天模型组和电针组采用50%FeCl3化学诱导,建立大脑中动脉血栓闭塞模型。术后两个电针组立即电针“百会”穴和双侧“丰隆”穴,每日1次。电针治疗频率2/100 Hz,20分钟/次,每天1次。术后1、7、14天采用生化法检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)水平。术后1天检测神经功能缺损和脑梗死体积。免疫组化法检测缺血侧大脑海马齿状回和缺血半暗带TrkA蛋白表达;免疫印迹法检测缺血侧大脑半球TrkA和β-NGF蛋白表达。实验二:将72只大鼠随机分为假手术组、脑缺血模型组、电针1组、电针2组(每组n=18)。各组均喂养普通饲料,电针1组电针双侧“丰隆”穴7天,每天1次,其他组喂养7天,第8天模型组和电针组采用50%FeCl3化学诱导,建立大脑中动脉血栓闭塞模型。术后两个电针组立即电针“百会”穴和双侧“丰隆”穴,每日1次,连续治疗7天。术后1天检测神经功能缺损和脑梗死体积。术后1、7天免疫印迹法检测单纯脑缺血组大鼠患侧大脑半球TrkA和β-NGF蛋白表达。结果:实验一:(1)术后模型组TC、TG、LDL升高,HDL降低(P电针2组。(2)与模型组比较,术后1天电针1组大鼠NDS降低(P<0.05),电针组脑梗死体积显著减小(P<0.01),且电针1组梗死体积小于电针2组(P<0.05)。(3)模型组缺血半暗带可见大量炎性细胞聚集浸润,神经细胞肿胀,部分细胞核固缩深染,神经元大片消失,神经细胞间质疏松。电针组较模型组神经细胞受损情况相对较轻,存活的神经细胞数量增多、形态较正常,部分核不规则,神经细胞呈轻度肿胀,细胞外间隙较小,炎症浸润较模型组减少,细胞及间质水肿较轻,脑损伤程度均明显轻于模型组,且电针1组轻于电针2组。(4)海马齿状回和缺血半暗带中TrkA阳性细胞数:术后1、7、14天,与假手术组比较,其余各组中TrkA阳性细胞数均显著上升(P<0.01);术后1天,与模型组比较,电针组TrkA阳性细胞数均显著上升(P<0.05,P<0.01),电针1组与电针2组比较,缺血半暗带TrkA阳性细胞数上升具有显著性差异(P<0.05);术后14天,与模型组比较,电针1组TrkA阳性细胞数显著上升(P<0.05)。(5)在缺血侧大脑半球中,术后1天,模型组TrkA和β-NGF表达水平有升高趋势,术后7天恢复至正常;与模型组比较,术后1天和14天电针1组TrkA和β-NGF表达水平有升高趋势。实验二:(1)与模型组比较,术后1天电针1组大鼠NDS降低(P<0.05),电针1组脑梗死体积显著减小(P<0.01),且电针1组梗死体积小于电针2组(P<0.05)。(2)在缺血侧大脑半球中,术后1天,模型组TrkA表达水平与假手术组比较有升高趋势;电针1组β-NGF表达水平与模型组比较有升高趋势。术后7天,模型组TrkA和β-NGF表达水平与假手术组比较有升高趋势;电针1组TrkA和β-NGF表达水平与模型组比较有升高趋势。结论:(1)在高血脂阶段针刺干预,可更有效的调节血脂水平,改善脑缺血后大鼠神经功能,减小脑梗死体积,改善脑组织病理形态学变化,作用优于缺血后治疗,且对大鼠缺血侧大脑TrkA、β-NGF可能有上调作用。(2)早期电针干预可改善脑缺血模型大鼠神经功能缺损症状和减小脑梗死体积,且对大鼠缺血侧大脑TrkA、β-NGF可能有上调作用。(3)脑缺血前电针干预治疗效果较好,“化痰开窍”理论指导的配穴法在临床上具有重要意义。

关键词：脑缺血高脂血症电针原肌球蛋白受体激酶a β-神经生长因子

NGF/TrkA信号通路在膀胱功能障碍疾病中表达的研究进展

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中国医学工程 2023年第4期31卷 59-64页

作者：庞磊边晓东双卫兵山西省人民医院泌尿外科山西太原030012 山西医科大学第一临床医学院山西太原030012 山西医科大学第一附属医院泌尿外科山西太原030012

神经生长因子(NGF)是影响神经的重要营养因子,被靶组织释放,以确保靶标与其神经支配之间的功能接触。NGF/原肌球蛋白受体激酶a (TrkA)信号通路是损伤及炎症的反应感觉传入的复杂调节剂,并且与疼痛、间质性膀胱炎或支气管哮喘等多种病理... 详细信息

神经生长因子(NGF)是影响神经的重要营养因子,被靶组织释放,以确保靶标与其神经支配之间的功能接触。NGF/原肌球蛋白受体激酶a (TrkA)信号通路是损伤及炎症的反应感觉传入的复杂调节剂,并且与疼痛、间质性膀胱炎或支气管哮喘等多种病理有关。目前,NGF/TrkA通路参与排尿通路调节神经元功能,参与多种膀胱病变,可能代表治疗膀胱功能障碍的可行靶点。该综述旨在总结目前NGF/TrkA在膀胱中的作用的实验和临床证据,从而探讨NGF/TrkA信号通路在膀胱功能障碍疾病中的作用。

关键词：神经生长因子原肌球蛋白受体激酶a 膀胱功能障碍膀胱过度活动症间质性膀胱炎

NGF/TrKA信号通路在膝骨关节炎疼痛中的研究进展

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中国医药导报 2022年第5期19卷 36-39,55页

作者：李明超王培民殷松江张力黄正泉邢润麟江苏省昆山市第三人民医院骨科江苏昆山215300 南京中医药大学附属医院骨伤科江苏南京210029

疼痛是膝关节骨关节炎(KOA)的主要症状,慢性疼痛严重影响患者生活质量。KOA疼痛涉及炎症环境、软骨损伤、神经敏化等病理性改变。近期研究显示,阻断神经生长因子(NGF)可成功减轻KOA疼痛,证实NGF是膝关节骨关节炎疼痛的关键机制。本文针... 详细信息

疼痛是膝关节骨关节炎(KOA)的主要症状,慢性疼痛严重影响患者生活质量。KOA疼痛涉及炎症环境、软骨损伤、神经敏化等病理性改变。近期研究显示,阻断神经生长因子(NGF)可成功减轻KOA疼痛,证实NGF是膝关节骨关节炎疼痛的关键机制。本文针对NGF/原肌球蛋白受体激酶a信号通路与KOA疼痛相关病理性改变的研究进展作一综述。

关键词：膝关节骨性关节炎疼痛神经生长因子原肌球蛋白受体激酶a