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cD34与cD117在人肝癌组织中的表达及其临床意义

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中华肝脏病杂志 2011年第8期19卷 588-593页

作者：闫伟伟黄昂李永纲王松山戴广海解放军第三0二医院肝脏肿瘤诊疗与研究中心北京100039 解放军第三0二医院肝病研究中心北京100039 解放军总医院肿瘤内科北京

目的研究肝细胞肝癌组织中cD34与cD117的表达情况，探讨其与临床病理的关系及其对肝细胞肝癌（Hcc）患者预后的评价。方法应用免疫组织化学PV-9000二步法检测55例Hcc组织标本中cD34和cD117的表达，并与临床病理学指标和术后无瘤生存期... 详细信息

目的研究肝细胞肝癌组织中cD34与cD117的表达情况，探讨其与临床病理的关系及其对肝细胞肝癌（Hcc）患者预后的评价。方法应用免疫组织化学PV-9000二步法检测55例Hcc组织标本中cD34和cD117的表达，并与临床病理学指标和术后无瘤生存期进行比较分析，对照组为肝硬化组织10例，正常肝组织6例。采用SPSS16．0统计分析软件对cD34和cD117表达结果及与临床病理参数的关系进行Fisher精确检验，Pearson χ^2检验，Kaplan-Meier生存分析，LogRank检验，cox回归模型分析等检验。结果cD34在Hcc组、肝硬化组和正常肝组织组表达阳性率分别为65．4％、20．0％和16．7％，Hcc组织中的阳性率大于肝硬化组织（P=0．012）及正常肝组织组（P=0．031），差异有统计学意义。但正常肝组织组与肝硬化组比较，差异无统计学意义。cD34表达在Hcc组中与脉管瘤栓、肿瘤分化程度有密切相关性，χ^2值分别为4．000和11．008，P值分别为0．046和0．001。cD117在Hcc组、肝硬化组和正常肝组织组表达阳性率分别为47．3％、10％和0，Hcc组阳性率大于肝硬化组（P=0．037）及正常肝组织（P=0．033），差异无统计学意义。但正常肝组织与肝硬化组比较，差异无统计学意义。cD117表达在Hcc组中与肿瘤分化程度、肿瘤分期有相关性，χ^2值分别为5．115和15．459，P值分别为0．024和0．000。Hcc组cD34阳性组及cD34阴性组的中位无瘤生存时间分别为17个月和19个月，cD34阳性组较cD34阴性组无瘤生存时间缩短，χ^2=4．105，P=0．043，差异有统计学意义。cD117阳性组及cD117阴性组的中位无瘤生存时间分别为12个月和19个月，cD117阳性组的无瘤生存时间较cD117阴性组也明显缩短，χ^2=28．023，P=0．000，差异有统计学意义。cOX多因素分析显示cD117表达、血清甲胎蛋白水平及肿瘤大小是Hcc患者术后2年无瘤生存时间的独立预后因素。结论cD34与cD117可能在Hcc发生、发展过程中具有重要作用，有望成为判断预后的指标。

关键词：癌肝细胞抗原 cD34 原癌基因蛋白质c-kit 预后

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大鼠精原细胞的分离纯化及免疫化学研究

中华医学杂志 2006年第20期86卷 1371-1375页

作者：马良宏丁强王翔汪洋张元芳复旦大学附属华山医院泌尿外科上海200040 复旦大学上海医学院解剖组胚系

目的探讨大鼠精原细胞的分离纯化方法及纯化后的细胞特性。方法应用复合酶消化法制备10d龄SD大鼠的睾丸单细胞悬液,采用差速贴壁结合非连续性Percoll密度梯度离心的方法纯化精原细胞。分别以c-kit和α6-整合素作为细胞标记,观察睾丸组... 详细信息

目的探讨大鼠精原细胞的分离纯化方法及纯化后的细胞特性。方法应用复合酶消化法制备10d龄SD大鼠的睾丸单细胞悬液,采用差速贴壁结合非连续性Percoll密度梯度离心的方法纯化精原细胞。分别以c-kit和α6-整合素作为细胞标记,观察睾丸组织中的精原细胞与纯化后细胞的免疫化学特征。通过流式细胞仪分别检测纯化后细胞表达c-kit和α6-整合素的阳性率。结果在睾丸组织中精原细胞特异表达c-kit和α6-整合素。纯化后的单细胞中有c-kit和α6-整合素的阳性表达。流式细胞仪检测:以c-kit作为细胞标记,未纯化组的阳性表达率为1·59%±0·04%,纯化组为68·33%±2·45%,两组差异非常显著(P95%。结论c-kit、α6-整合素可作为特定时期精原细胞的表面标志。采用复合酶消化、差速贴壁结合非连续性Percoll密度梯度离心的方法纯化精原细胞,能获得纯度和活性较高的精原细胞。

关键词：精原细胞细胞分离纯化原癌基因蛋白质c-kit 整合素

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涎腺乳腺样分泌癌的临床病理分析

中华病理学杂志 2017年第1期46卷 34-37页

作者：张学平倪皓王璇陈辉时姗姗余波周晓军饶秋南京军区南京总医院病理科 210002 江苏省宿迁市泗阳县人民医院病理科

目的：探讨涎腺乳腺样分泌癌（ MASc）的临床病理特征、诊断及鉴别诊断方法。方法收集南京军区南京总医院1997—2014年17例涎腺MASc（10例为会诊病例），另选取9例腺泡细胞癌及18例腺样囊性癌作为对照。采用免疫组织化学EnVision法检测S... 详细信息

目的：探讨涎腺乳腺样分泌癌（ MASc）的临床病理特征、诊断及鉴别诊断方法。方法收集南京军区南京总医院1997—2014年17例涎腺MASc（10例为会诊病例），另选取9例腺泡细胞癌及18例腺样囊性癌作为对照。采用免疫组织化学EnVision法检测S-100蛋白、SOX10、GATA3和cD117的表达情况，并应用荧光原位杂交技术检测ETV6-NTRK3融合基因。结果患者年龄27～74岁，平均年龄47岁。肿瘤组织镜下均呈浸润性生长，可见分叶状、囊性乳头状、微囊、腺管状和实性巢状结构；肿瘤组织管腔和微囊内充满过碘酸-雪夫染色阳性分泌物，部分类似甲状腺滤泡；未观察到坏死、神经或血管侵犯。涎腺MASc的S-100蛋白、SOX10均弥漫性强阳性（17／17），GATA3（3／17）和cD117（4／17）部分阳性。17例涎腺MASc中12例成功检测ETV6-NTRK3融合基因，其中10例阳性，2例阴性。结论综合考虑S-100蛋白、SOX10和cD117表达水平对MASc的诊断及鉴别诊断有较大价值，ETV6-NTRK3基因融合亦可作为重要的诊断参考。

关键词：涎腺肿瘤 SOX转录因子 S100蛋白质类原癌基因蛋白质c-kit 免疫组织化学

165例胃肠道间质瘤中c-kit和PDGFRA基因突变的检测和临床诊断意义

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中华病理学杂志 2006年第5期35卷 262-266页

作者：贺慧颖方伟岗钟镐镐李燕郑杰杜娟衡万杰吴秉铨北京大学医学部病理学系 100083

目的探讨在中国较大样本的胃肠道问质瘤（GIST）中c-kit基因和PDGFRA基因的突变状况，为进一步的生物靶向治疗提供依据。方法用免疫组织化学EnVision法、聚合酶链反应（PcR）扩增和直接测序的方法，检测165例GIST c-kit基因9、11、13和1... 详细信息

目的探讨在中国较大样本的胃肠道问质瘤（GIST）中c-kit基因和PDGFRA基因的突变状况，为进一步的生物靶向治疗提供依据。方法用免疫组织化学EnVision法、聚合酶链反应（PcR）扩增和直接测序的方法，检测165例GIST c-kit基因9、11、13和17号外显子突变以及PDGFRA基因12和18号外显子突变。结果病理组织学诊断的165例GIST病例中有155例（94％）免疫组织化学显示cD117阳性。在cD117阳性的GIST中，c-kit基因总突变率为76．1％（118／155）：分别为11号外显子67．1％（104／155）、9号外显子7．1％（11／155）、13号外显子1．3％（2／155）和17号外显子0．6％（1／155）。绝大多数为杂合性突变，少数为纯合性突变。11号外显子的突变位点多集中在5’端的经典热点，其次为3’端的框内串联重复。后者主要以核分裂象少的老年女性胃部病例多见。9号外显子突变代表一类发生在年轻男性体积较大的小肠病变。13号外显子发现一处新的突变点L641P。PDGFRA基因突变见于50％（5／10）cD117阴性病例，均为18号外显子突变，包括常见的D842V点突变和一个框内843-846处IMHD缺失伴有S847T的新突变。PDGFRA基因突变多见于发生在后腹膜／网膜的具有高度侵袭危险性的病例。结论中国GIST病例大多数存在c-kit基因和PDGFRA基因的突变，且在基因突变类型和肿瘤原发部位问有非随机的联系。除了发现几个新的突变形式外，国人的GIST似乎和西方国家有些不同的突变特点。靶向治疗需要基因突变分型的启示和指导。

关键词：胃肠肿瘤原癌基因蛋白质c-kit 受体血小板源生长因子序列分析 DNA

cD117阴性胃肠道间质瘤的临床病理及免疫组织化学研究

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中华病理学杂志 2011年第5期40卷 310-314页

作者：史景丽常晓燕陈杰中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院病理科 100730

目的探讨免疫组织化学在形态学典型、免疫组织化学cD117阴性胃肠道间质瘤（GIST）诊断中的意义.方法对10例cD117阴性、形态学典型的GIST进行c-kit基因第9、11、13、17号外显子及血小板源性生长因子受体α（PDGFRA）基因第12和18号外... 详细信息

目的探讨免疫组织化学在形态学典型、免疫组织化学cD117阴性胃肠道间质瘤（GIST）诊断中的意义.方法对10例cD117阴性、形态学典型的GIST进行c-kit基因第9、11、13、17号外显子及血小板源性生长因子受体α（PDGFRA）基因第12和18号外显子的基因检测,同时所有病例均进行cD117、cD34、平滑肌肌动蛋白（SMA）、结蛋白、S-100蛋白、WT-1、DOG-1 的免疫组织化学染色（EnVision法）.结果 10例中8例完成c-kit及PDGFRA基因的检测,仅1例有c-kit基因第9号外显子突变,余未发现基因突变.10例cD117阴性的病例9例cD34阳性,2例SMA局灶阳性.结蛋白和S-100蛋白均阴性.DOG1弥漫阳性者5例,1例弥漫弱阳性,2例局灶阳性,2例阴性.4例WT-1弥漫阳性,2例局灶阳性,1例有散在肿瘤细胞阳性,3例阴性.结论对胃肠道及胃肠道外形态学典型、但cD117阴性的GIST病例,联合应用多种免疫组织化学标记有助于诊断.DOG-1和WT-1可作为补充加入到cD117阴性GIST的诊断中.

关键词：胃肠道间质肿瘤 DNA突变分析原癌基因蛋白质c-kit 免疫组织化学

DOG-1在胃肠道间质瘤中的表达及其临床意义

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中华病理学杂志 2011年第5期40卷 315-318页

作者：姜兴莲杨红李科董丹丹胥颖李芳华四川省医学科学院四川省人民医院病理科成都610072

目的探讨DOG-1在胃肠道间质瘤（GIST）中的表达及其临床意义.方法应用免疫组织化学EnVision法检测DOG-1在84例GIST患者肿瘤组织中的表达,并与cD117、cD34标记进行比较观察.结果 GIST患者手术切除肿瘤组织主要由数量不等的梭形细胞和... 详细信息

目的探讨DOG-1在胃肠道间质瘤（GIST）中的表达及其临床意义.方法应用免疫组织化学EnVision法检测DOG-1在84例GIST患者肿瘤组织中的表达,并与cD117、cD34标记进行比较观察.结果 GIST患者手术切除肿瘤组织主要由数量不等的梭形细胞和上皮样细胞组成,两种细胞可按不同比例混合性或单一性组成肿瘤的实体.DOG-1、cD117和cD34在极低度及低度危险性GIST组织中阳性表达率分别为91.3%（42/46）、95.7%（44/46）和82.6%（38/46）,在中度及高度危险性GIST组织中其阳性表达率分别为100%（38/38）、100%（38/38）和78.9%（30/38）,对照组真性平滑肌瘤、神经鞘瘤、纤维瘤病及正常胃肠道黏膜组织中DOG-1、cD117、cD34均无表达,DOG-1标记GIST的敏感性及特异性与cD117相似,差异无统计学意义（P＞0.05）,而标记中度及高度危险性GIST的敏感性与特异性明显高于cD34,其表达差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 DOG-1是一种新的诊断GIST比较特异的标记,尤其是对中度及高度危险性GIST比cD34有更高的敏感性和特异性.与cD117联合应用将有利于进一步提高GIST的诊断水平.

关键词：胃肠道间质肿瘤原癌基因蛋白质c-kit 抗原 cD34 免疫组织化学 DOG-1

74例胃肠道间质瘤临床病理与生物学行为评价

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中华病理学杂志 2005年第1期34卷 6-10页

作者：杨其昌季晓华沈屹韩枋张晓娟刘宏斌南通医学院附属第二医院病理科 226001 南通市肿瘤医院病理科

目的探讨在胃肠道间质瘤(GIST)的病理诊断和预后分析上采用一种简单实用且重复性好的病理学'标准',以利于GIST的日常病理诊断和生物学行为评价及指导治疗,并对Fletcher等推荐的GIST生物学行为评价表进行评估.方法 85例消化道间叶组织肿... 详细信息

目的探讨在胃肠道间质瘤(GIST)的病理诊断和预后分析上采用一种简单实用且重复性好的病理学'标准',以利于GIST的日常病理诊断和生物学行为评价及指导治疗,并对Fletcher等推荐的GIST生物学行为评价表进行评估.方法 85例消化道间叶组织肿瘤,复习其病理形态学并应用cD117、cD34、平滑肌肌动蛋白(SMA)、结蛋白、S-100等进行免疫组织化学标记,结合31例随访资料进行分析.结果 85例消化道间叶组织肿瘤中,GIST 74例,平滑肌瘤和交界性平滑肌瘤8例(食管),平滑肌肉瘤1例(直肠),神经鞘瘤1例(胃),恶性纤维组织细胞瘤1例(肠系膜).74例GIST中,发生在胃和小肠的分别为34例和30例,占86.5%,食管3例,胃肠道外(肠系膜、网膜、后腹膜)7例.年龄23～80岁,平均52.5岁,40岁以上者占85%,男性45例,女性29例.镜下观察:梭型细胞型48例,上皮样细胞型10例,混合细胞型16例.瘤细胞呈长、短梭形和圆形,胞质丰富弱嗜酸性,排列呈旋涡状、栅栏状或弥漫巢状.免疫组织化学:85例消化道间叶组织肿瘤波形蛋白均阳性,其中74例表达cD117,诊断为GIST,表达形式有弥漫胞膜/胞质强阳性、散在阳性、胞质点状着色等,其中54例同时表达cD34(阳性率72.9%),25例表达SMA,5例表达结蛋白,5例表达S-100蛋白.在85例消化道间叶组织肿瘤中,有9例SMA和结蛋白阳性,而cD117和cD34均无表达,诊断为平滑肌肿瘤;1例S-100蛋白阳性,cD117和cD34阴性,诊断为神经鞘瘤.1例除波形蛋白和溶菌酶阳性外,其他抗体都阴性的多形性肉瘤诊断为恶性纤维组织细胞瘤.74例GIST生物学行为评价分为:极低度侵袭危险性3例,低度侵袭危险性15例,中度侵袭危险性36例,高度侵袭危险性20例.31例GIST有随访资料,随访率41.9%,随访时间18～72个月,不同侵袭危险性病例各组以随访结果做出 Kaplan-Meier生存曲线,log-rank检验进行组间生存率比较,P＜0.01,显示生物学行为的病理学参数评价与随访结果有很好的相关性,侵袭危险性极低、低、中、高各组间生存曲线差异明显.结论 GIST主要见于中老年人,男性多于女性.cD117阳性对诊断有确定作用.cD34表达对诊断也有重要意义.Fletcher等推荐的GIST生物学行为评价表与随访结果有很好的相关性,其实用、简单,重复性好.

关键词：胃肠道间质瘤临床病理生物学行为评价原癌基因蛋白质c-kit

骨髓增生异常综合征患者骨髓cD34＋细胞亚群及其表面造血因子受体的表达

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中华医学杂志 2011年第4期91卷 234-238页

作者：李丽娟付蓉王化泉岳兰竹刘惠王琚王红蕾阮二宝瞿文梁勇王国锦王晓明刘鸿宋嘉吴玉红邢莉民关晶邵宗鸿天津医科大学总医院血液肿瘤科 300052

目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓cD34＋细胞亚群及其表面干细胞因子受体（ScF－R）、红细胞生成素受体（EpoR）、粒细胞集落刺激因子受体（G－cSFR）及血小板生成素受体（TpoR）的表达情况及其意义。方法采用流式细胞术检测2... 详细信息

目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓cD34＋细胞亚群及其表面干细胞因子受体（ScF－R）、红细胞生成素受体（EpoR）、粒细胞集落刺激因子受体（G－cSFR）及血小板生成素受体（TpoR）的表达情况及其意义。方法采用流式细胞术检测2008年7月至2010年3月天津医科大学总医院新诊断的45例MDS患者（17例低危患者、28例高危患者）及30名对照组原代骨髓cD34＋cD38＋及cD34＋cD38＋细胞亚群及其表面ScF－R、EpoR、***及Tp0R的表达率。结果高危组cD34＋细胞比例[0．53％（0．10％～1．68％）]明显高于对照组[0．13％（0．08％～0．32％），P〈0．01]，其他2组问比较差异无统计学意义。低危组和高危组cD34＋cD38＋细胞比例（86．3％±8．5％、82．6％±11．1％）显著低于对照组（92．3％±3．4％，均P〈0．05），而cD34＋cD38＋细胞比例（13．7％±8．5％、17．4％±11．0％）显著高于对照组（7．7％±3．4％，均P〈0．05）。对照组骨髓cD34＋cD38＋细胞亚群EpoR表达率（18．7％±18．3％）显著低于cD34＋cD38＋细胞亚群（63．6％±20．O％，P〈0．01），两亚群之间ScF－R、G－cSFR及TpoR表达率差异无统计学意义。在cD34＋cD38＋细胞亚群中，3组间ScF－R和TpoR表达率差异无统计学意义，而低危组和高危组EpoR的表达率[9．0％（1．4％～12．7％）、5．2％（1．1％～14．1％）]明显低于对照组[9．6％（5．1％～30．1％），均P〈0．05]，G—cSFR的表达率（29．8％4-19．1％、28．7％±21．1％）明显低于对照组（44．4％4-23．4％，均P〈0．05）；在cD34＋cD38＋细胞亚群中，3组间ScF－R和G－cSFR表达率差异无统计学意义，低危组和高危组EpoR的表达率（42．2％±21．9％、25．7％±15．6％）明显低于对照组（63．6％±20．O％，均P〈0．01），TpoR的表达率（5．4％±4．7％、4．1％±4．0％）明显低于对照组（10．1％±8．3％，均P〈0．05）。MDS患者骨髓cD34＋cD38＋和cD34＋cD38＋细胞亚群表面受体表达率低的患者其外周血血红蛋白水平、中性粒细胞及血小板计数减低的发生率明显高于受体表达率不低的患者（均P〈0．05）。结论MDS患者的原代骨髓cD34’细胞亚群分化异常，膜表面部分造血细胞因子受体表达减低，这可能与MDS患者血细胞减少有关，有望用于辅助诊断MDS。

关键词：骨髓增生异常综合征抗原 cD34 原癌基因蛋白质c-kit 受体红细胞生成素受体粒细胞集落刺激因子

酶消化法获得成年豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞样细胞的体外原代培养及其特征鉴定

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中国临床康复 2006年第1期10卷 36-38,i0002页

作者：沈文浩熊恩庆李为兵卢根生宋波金锡御解放军第三军医大学西南医院全军泌尿外科中心重庆市400038

目的:建立成年豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞样细胞的原代培养方法,为进一步观察其电生理特性提供目标细胞。方法:实验于2005-04/08在第三军医大学第一附属医院中心实验室完成。①细胞提取:取1～2个月龄成年豚鼠2只,雌雄不限。麻醉状态下处死... 详细信息

目的:建立成年豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞样细胞的原代培养方法,为进一步观察其电生理特性提供目标细胞。方法:实验于2005-04/08在第三军医大学第一附属医院中心实验室完成。①细胞提取:取1～2个月龄成年豚鼠2只,雌雄不限。麻醉状态下处死,下腹部10g/L碘伏消毒后,即刻由腹部正中切口、于膀胱颈处取出膀胱,于解剖显微镜下仔细剔除膀胱外膜,纵行剖开膀胱、去除膀胱黏膜,将膀胱肌层置入含双抗的磷酸盐缓冲溶液中浸泡10min。将上述处理的肌层组织剪成1mm小块,在含双抗的磷酸盐缓冲溶液中漂洗2次;换3入10g/L胶原酶P溶液,盖紧瓶盖,置入37℃培养箱中消化30min,完全消化溶解后,移入离心管中离心。②细胞培养:细胞沉淀中加入新鲜配制的达尔伯克()氏改良培养基溶液(含体积分数为0.1的胎牛血清),吹打后按每瓶(容积25mL)含(25～30)×10活细胞接种在培养瓶4内,37℃,积分数为0.05的cO2孵箱内静置培养;细胞接种第2天,可体见胞体为梭形并有两个细胞突起的细胞贴壁,平滑肌细胞尚未贴壁。将未贴壁的平滑肌细胞转移至另一培养瓶,孵箱内静置3d后,可见平滑肌细胞贴壁。③培养细胞的观察与鉴定:采用相差显微镜观察和免疫细胞化学方法鉴定。结果:①体外培养第2天可见胞体为梭形且胞体两极有两个细长突起的细胞贴壁,该类细胞酪氨酸蛋白激酶受体免疫细胞化学染色阳性,平滑肌肌动蛋白染色阴性,确认为豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞样细胞。②逼尿肌细胞3d后贴壁,呈成纤维形生长,平滑肌肌动蛋白免疫细胞化学染色阳性,酪氨酸蛋白激酶受体染色阴性。结论:用酶消化法可获得成年豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞样细胞,并在体外条件下生长,可用于卡哈尔间质细胞样细胞的电生理特性观察。

关键词：干细胞间质细胞膀胱原癌基因蛋白质c-kit 细胞培养体外原代培养酶消化法膀胱卡哈尔间质细胞样细胞