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大豆幼荚子叶原生质体培养及植株再生

作物学报 1994年第6期20卷 665-669,T001页

作者：肖文言王连铮中国农业科学院北京100081

本文研究了13个栽培大豆(Glvcine max L.)品种原生质体培养的再生能力。从大豆幼荚子叶酶解游离原生质体,用Gellan Gum进行珠状包埋,悬浮在含2,4-D 0.1-0.2mg/L,BA0.5-1.0mg/L的改良MS液体培养基中,原生质体培养3天后开始第一次分裂,以... 详细信息

本文研究了13个栽培大豆(Glvcine max L.)品种原生质体培养的再生能力。从大豆幼荚子叶酶解游离原生质体,用Gellan Gum进行珠状包埋,悬浮在含2,4-D 0.1-0.2mg/L,BA0.5-1.0mg/L的改良MS液体培养基中,原生质体培养3天后开始第一次分裂,以后持续分裂。供试基因型间的10天植板率差异显著,变幅为33-67％。30天内形成大量的细胞团,各供试基因型50-60天内都能形成1-2mm大小的愈伤组织。把这种小愈伤组织转到含2,4-D 0.3mg/L,BA0.5mg/L的MSB固体培养基上,促使其进一步生长。再转入附加NAA 5.0mg/L,BA0.5mg/L,KT0.5mg/L和3％蔗糖的MSB分化培养基上,在黄色脆硬的瘤状愈伤组织表面可分化出胚状体,胚状体在含NAA 1.0mg/L和KT0.5mg/L的MSB培养基上可发育成再生植株。供试品种泗豆11号和铁丰8号都已得到再生植株。

关键词：大豆培养基原生质体培养植株再生

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旱稻原生质体培养和植株再生的研究

作物学报 1994年第4期20卷 419-425,T001页

作者：鲁雪华刘中柱林永烈林大添丁舒敏福建省农业科学院福建福州350003

旱稻仿野87-707品系具有多年生趋势,是我院研究多年生旱稻的一个材料。我们用它进行原生质体培养,想为研究多年生旱稻基因改良打下基础。现用该品系的成熟胚诱导的愈伤组织,在含有氨基酸丰富的AA培养基中进行细胞悬浮培养。取该细胞悬... 详细信息

旱稻仿野87-707品系具有多年生趋势,是我院研究多年生旱稻的一个材料。我们用它进行原生质体培养,想为研究多年生旱稻基因改良打下基础。现用该品系的成熟胚诱导的愈伤组织,在含有氨基酸丰富的AA培养基中进行细胞悬浮培养。取该细胞悬浮培养物游离的原生质体,用琼脂糖包埋于改良的KM8P培养基中,发生了持续分裂。经一系列变换不同分化培养基的培养再生成完整植株并移栽成活。对游离和培养方法做了如下改进:1)悬浮细胞培养基中加入ABA有利于原生质体的存活和分裂;2)掌握好原生质体游离前悬浮细胞的状态是游离成功的关键;3)琼脂糖包理培养可大大提高植板率;4)用较高渗透压的培养基培养原生质体再生的细胞团及愈伤组织,有利于提高植株再生能力;5)变换使用不同的分化培养基可明显提高植株的再生频率。这是迄今国内外第一个由旱稻原生质体再生植株的报道。

关键词：旱稻原生质体培养植株再生

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南蛇藤原生质体培养及植株再生

植物研究 2011年第3期31卷 300-305页

作者：范小峰李东波刘灵霞刘秀丽杨颖丽甘肃省高校陇东生物资源保护与利用省级重点实验室陇东学院庆阳745000 西北师范大学生命科学院兰州730070

以4℃低温暗处理24 h的南蛇藤胚性愈伤组织为分离原生质体的原材料,用MS培养基进行液体浅层静置、固液双层以及琼脂糖包埋培养原生质体,获得再生愈伤组织并分化成苗,建立了原生质体培养体系。结果表明,低温暗处理利于高产率高质量原生... 详细信息

以4℃低温暗处理24 h的南蛇藤胚性愈伤组织为分离原生质体的原材料,用MS培养基进行液体浅层静置、固液双层以及琼脂糖包埋培养原生质体,获得再生愈伤组织并分化成苗,建立了原生质体培养体系。结果表明,低温暗处理利于高产率高质量原生质体的获得;0.5%纤维素酶+0.5%果胶酶+5 mmol.L-1MES为酶的最佳配方;12 h为最佳酶解时间;13%为甘露醇最佳浓度;静置12 h+振荡0.5 h为最佳酶解方式;液体浅层静置培养取得了较好的原生质体培养效果;MS+6-BA2.0 mg.L-1+IBA 0.1 mg.L-1为愈伤组织最佳分化培养基;1/2MS+NAA0.1 mg.L-1为最佳生根培养基。

关键词：南蛇藤愈伤组织原生质体培养植株再生

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冬小麦原生质体培养的胚状体直接发生

生物工程学报 2000年第5期16卷 609-613页

作者：葛台明章荣德秦发兰余毓君谢岳峰湖北民族学院园艺系恩施445000 华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室武汉430070

冬小麦品种“京花一号”胚性愈伤组织在改良的N6培养基 (NBD培养基 )上继代得到易碎型胚性愈伤组织 ,转入改良MS液体培养基 (MSDL培养基 )后得到胚性悬浮系 ,分离的原生质体在改良的MS培养基 (MSDP培养基 )上培养 ,再生细胞直接产生体... 详细信息

冬小麦品种“京花一号”胚性愈伤组织在改良的N6培养基 (NBD培养基 )上继代得到易碎型胚性愈伤组织 ,转入改良MS液体培养基 (MSDL培养基 )后得到胚性悬浮系 ,分离的原生质体在改良的MS培养基 (MSDP培养基 )上培养 ,再生细胞直接产生体细胞胚胎 ,并再生出完整植株。体细胞胚胎形成过程与小麦合子胚的形成过程十分相似。

关键词：冬小麦原生质体培养体细胞胚发生植株再生

小叶杨原生质体培养植株再生及其同工酶的变化

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林业科学 1995年第4期31卷 310-318,T001页

作者：王影黄敏仁陈道明卫志明孙勇如南京林业大学中国科学院上海植物生理研究所中国科学院遗传研究所

从小叶杨（Ｐｏｐｕｌｕｓｓｉｍｏｎｉｉ）胚性悬浮细胞分离得到大量有活力的原生质体，产量高达３．８×１０７ｇ－１ＦＷ。高密度（３×１０６／ｍＬ）液体浅层培养可促进小叶杨原生质体的分裂和生长；以葡萄糖为唯一碳源的Ｋｍ８ｐ... 详细信息

从小叶杨（Ｐｏｐｕｌｕｓｓｉｍｏｎｉｉ）胚性悬浮细胞分离得到大量有活力的原生质体，产量高达３．８×１０７ｇ－１ＦＷ。高密度（３×１０６／ｍＬ）液体浅层培养可促进小叶杨原生质体的分裂和生长；以葡萄糖为唯一碳源的Ｋｍ８ｐ培养基，有利于原生质体的持续分裂；在培养基中添加有机氮，有助于提高原生质体的植板率。原生质体形成细胞团后，逐步降渗和分皿培养，能有效促进细胞团的持续分裂。愈伤组织在不同分化培养基上的分化频率存在着明显的差异，同工酶分析说明，分化能力强的愈伤组织，其ＴＣＡ循环和磷酸戊糖途径较为活跃，ＧＯＴ、ＥＳＴ和ＰＥＲＯＸ的活性比较高。当芽伸长到２—３ｃｍ时，从基部切下转移到无激素的１／２ＭＳ培养基上诱导生根并形成完整植株。移入盒内，在温室生长良好。

关键词：小叶杨原生质体培养植株再生同工酶

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小叶杨原生质体培养中的激素和氨含量变化

林业科学 1995年第1期31卷 1-7页

作者：程淑婉王影李林果南京林业大学

以小叶杨（Ｐｏｐｕｌｕｓｓｉｍｏｎｉｉｃａｒｒ．）原生质体培养的愈伤组织为供试材料，用高压波相色谱法（ＨＰＬＣ），测定它们在四种不同分化培养基上四大类内源激素（ＩＡＡ，ＧＡ３，ＣＴＫ，ＡＢＡ）的含量变化，并检定有关Ｎ... 详细信息

以小叶杨（Ｐｏｐｕｌｕｓｓｉｍｏｎｉｉｃａｒｒ．）原生质体培养的愈伤组织为供试材料，用高压波相色谱法（ＨＰＬＣ），测定它们在四种不同分化培养基上四大类内源激素（ＩＡＡ，ＧＡ３，ＣＴＫ，ＡＢＡ）的含量变化，并检定有关Ｎ的生化反应。结果表明，不同分化培养基上的愈伤组织中内源激素含量和种类差异很大。导致细胞分裂素（ＣＴＫ）含量高，种类多以及细胞分裂素与生长素的比值（ＣＴＫ／ＩＡＡ）高的处理，有利于愈伤组织分化；但若愈伤组织中含有内源脱落酸（ＡＢＡ），则抑制分化。测定结果还表明，小叶杨原生质体培养的愈伤组织分化过程中，其硝酸还原酶活力与氨基态Ｎ含量互为消长。分化频率高的愈伤组织中，硝酸还原酶活力低，而氨基态Ｎ含量高．

关键词：小叶杨原生质体培养内源激素分化频率

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高效谷子原生质体培养体系的建立

华北农学报 1991年第S1期6卷 53-58页

作者：赵连元纪芸段胜军严丽兰河北省农林科学院谷子研究所石家庄050031

通过变换培养基成份,调控谷子愈伤组织状态,从不能直接用于原生质体培养的致密型愈伤组织中,选出了生长旺盛的松软型愈伤组织,将其用于原生质体培养,获得了高频率的细胞分裂;又从不能直接用于植株分化的松软型再生愈伤组织中,选出了致... 详细信息

通过变换培养基成份,调控谷子愈伤组织状态,从不能直接用于原生质体培养的致密型愈伤组织中,选出了生长旺盛的松软型愈伤组织,将其用于原生质体培养,获得了高频率的细胞分裂;又从不能直接用于植株分化的松软型再生愈伤组织中,选出了致密型愈伤组织并诱导分化出大量原生质体再生植株.

关键词：谷子原生质体培养再生植株

叶片的生理状态及添加物对大麦叶肉原生质体培养的影响

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作物学报 1995年第2期21卷 165-170页

作者：陈季楚王六发陈利萍游树鹏中国科学院上海植物生理研究所上海200032 杭州大学生物系浙江杭州310028

作为原生质体源的叶片的生理状态及培养基中的添加物对大麦叶肉原生质体培养均有明显的影响。试验中观察到叶片中、上段的原生质体比基部的具较强的感应力。叶片经黑暗预处理后,其原生质体培养时呈较好的稳定状态,并观察到添加1.0,2.0m ... 详细信息

作为原生质体源的叶片的生理状态及培养基中的添加物对大麦叶肉原生质体培养均有明显的影响。试验中观察到叶片中、上段的原生质体比基部的具较强的感应力。叶片经黑暗预处理后,其原生质体培养时呈较好的稳定状态,并观察到添加1.0,2.0m mol/L的抗坏血酸能提高原生质体的活力。在添加0.5mg/L2,4-D、1.0mg/LNAA及0.5mg/LZT的RMS培养基中,经微弱光照（150lx）诱导了细胞持续分裂并形成了小细胞团。

关键词：大麦叶肉原生质体原生质体培养小细胞团

结球甘蓝下胚轴原生质体培养再生植株体系的优化研究

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西北植物学报 2012年第12期32卷 2438-2443页

作者：李贵李必元王五宏岳智臣钟新民侯喜林南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室南京210095 浙江省农业科学院蔬菜研究所杭州310021

以结球甘蓝‘新夏50’的无菌苗下胚轴为材料,对影响原生质体分离、纯化与培养的主要因素进行研究,建立适合结球甘蓝原生质体游离、纯化、收集、培养以至再生出完整植株的实用技术体系,为其非对称细胞融合及品种改良与创新等研究奠定基... 详细信息

以结球甘蓝‘新夏50’的无菌苗下胚轴为材料,对影响原生质体分离、纯化与培养的主要因素进行研究,建立适合结球甘蓝原生质体游离、纯化、收集、培养以至再生出完整植株的实用技术体系,为其非对称细胞融合及品种改良与创新等研究奠定基础。结果表明:2.5%纤维素酶R-10+0.05%果胶酶Y-23+9CPW+5mmol/L MES的混合酶液,从4d苗龄的下胚轴上分离出高产率的原生质体。在改良B5+0.5mg/L 2,4-D+0.2mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA的液体培养基上,原生质体分裂旺盛。形成愈伤组织后经芽诱导和生根培养,获得了再生植株。倍性检测结果表明,不同原生质体所获得的24株再生植株中,19株为正常二倍体,4株为嵌合体,1株为四倍体。

关键词：结球甘蓝下胚轴原生质体培养植株再生