检索结果-南通市图书馆

作者：刘占燕华南理工大学

学位级别：硕士

肿瘤免疫治疗通过激活机体免疫系统杀伤肿瘤细胞,成为一种有前景的治疗策略,疫苗的创新和研发为肿瘤免疫治疗带来新的机遇与发展。抗原是疫苗的核心组分,有效的抗原靶点是开发具有临床价值的肿瘤疫苗的先决条件,但是,某些肿瘤抗原难以... 详细信息

肿瘤免疫治疗通过激活机体免疫系统杀伤肿瘤细胞,成为一种有前景的治疗策略,疫苗的创新和研发为肿瘤免疫治疗带来新的机遇与发展。抗原是疫苗的核心组分,有效的抗原靶点是开发具有临床价值的肿瘤疫苗的先决条件,但是,某些肿瘤抗原难以筛选或纯化限制了疫苗研发进程。为解决这一问题,本课题构建并优化了能够诱导免疫原性细胞死亡(Immunogenic cell death,ICD)产生原位肿瘤疫苗(In-situ vaccine,ISV)样效应的新型疫苗——NP-PIC纳米颗粒和NP-PIC/mTOR纳米颗粒,该纳米颗粒瘤内注射可触发肿瘤细胞免疫原性死亡,引起肿瘤细胞释放和暴露内源性肿瘤相关抗原,促进免疫细胞浸润,改善免疫抑制微环境,增强抗肿瘤免疫应答;由此产生的原位肿瘤疫苗避免了抗原筛选和纯化过程,能够产生强烈的抗肿瘤免疫反应和持久的抗肿瘤免疫记忆,延长小鼠生存期。论文具体研究内容如下:(1)合成胍基改性壳聚糖,对其结构进行鉴定并验证其生物学功能。结果表明,通过壳聚糖与双氰胺的加成反应成功合成胍基改性壳聚糖,通过细胞实验证明胍基改性壳聚糖具有诱导免疫原性细胞死亡、诱导肿瘤细胞自噬、抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路相关蛋白等功能。(2)基于胍基改性壳聚糖制备负载聚肌胞苷酸(Polyinosinic-polycytidylin acid,PIC)的纳米颗粒(简称NP-PIC纳米颗粒),并对其生物学功能进行验证。本课题通过逐级筛选的方式对NP-PIC纳米颗粒进行优化,并在体内外水平证明NP-PIC纳米颗粒能够激活干扰素信号通路、促进树突状细胞和巨噬细胞等细胞群活化以及诱导ICD。此外,本课题以卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)作为模式抗原证明NP-PIC纳米颗粒能够作为蛋白抗原的佐剂调节适应性免疫。(3)提出一种可行的NP-PIC纳米颗粒优化方案:将PIC部分替换为mTOR小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)制备共递送PIC和mTOR siRNA的纳米颗粒(简称NP-PIC/mTOR纳米颗粒),并对两种纳米颗粒抑制肿瘤生长以及原位肿瘤疫苗样效应进行评价。体内外实验证明NP-PIC/mTOR纳米颗粒能够沉默靶基因、诱导ICD。上述两种纳米颗粒瘤内给药B16F10-OVA荷瘤小鼠后,能够诱导ICD、促进免疫细胞浸润和激活、增强抗肿瘤免疫反应、改善肿瘤免疫抑制微环境而产生原位肿瘤疫苗样效应;原位肿瘤疫苗能够产生抗肿瘤免疫反应和免疫记忆,抑制肿瘤生长并延长小鼠生存期。

关键词：胍基改性壳聚糖 PIC mTOR siRNA 免疫原性细胞死亡原位肿瘤疫苗

基于免疫活性材料的原位肿瘤疫苗的构建及其用于肿瘤治疗的研究

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基于免疫活性材料的原位肿瘤疫苗的构建及其用于肿瘤治疗的研究

作者：舒娜华南理工大学

学位级别：硕士

肿瘤免疫治疗虽取得了突破性进展,但肿瘤疫苗的研究进展却不佳。这主要是因为肿瘤组织低免疫原性、佐剂数量及效应的有限性、肿瘤微环境的免疫抑制性等影响因素限制了其疗效。肿瘤原位疫苗因无需筛选抗原和受众、能够突破动态免疫耐受... 详细信息

肿瘤免疫治疗虽取得了突破性进展,但肿瘤疫苗的研究进展却不佳。这主要是因为肿瘤组织低免疫原性、佐剂数量及效应的有限性、肿瘤微环境的免疫抑制性等影响因素限制了其疗效。肿瘤原位疫苗因无需筛选抗原和受众、能够突破动态免疫耐受、集个性化普适性于一体等特点而具有诸多优势。因此,本论文发展了一种基于免疫活性材料的原位肿瘤疫苗构建策略。通过生物活性材料D47键合TLR7/8激动剂R848,制备了D47-R848材料。其通过D47引起肿瘤细胞免疫原性死亡(immunogenic cell death,ICD),释放原位个性化抗原,增强肿瘤部位的免疫原性;同时利用R848的佐剂效应激活抗原提呈细胞(antigen presenting cells,APCs),获得原位肿瘤疫苗;R848还能够重极化肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs),进一步逆转肿瘤免疫抑制性微环境,提高抗肿瘤免疫疗效。具体研究内容如下:(1)成功合成了D47-R848,并初步探究D47-R848在细胞水平上的生物学功能。我们在体外实验中验证了经过化学修饰后,D47-R848仍然能有效地诱导肿瘤细胞发生ICD,包括诱导肿瘤细胞内质网上钙网蛋白(calreticulin,CALR)外翻至细胞表面、释放高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)、分泌三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)等,并通过ICD效应促进骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs)对肿瘤细胞的吞噬,激活BMDCs。此外,D47-R848仍然保留R848的活性,能够直接激活APCs,并将M2型巨噬细胞重极化为M1表型。(2)探究了D47-R848的体内抗肿瘤效果以及免疫相关机制,评估其作为原位肿瘤疫苗的潜力。一方面,我们采用了4T1原位乳腺癌模型和MC38皮下结直肠癌模型以评估其抑制肿瘤生长的能力。在两种肿瘤模型中,D47-R848均显示出较强的肿瘤生长抑制能力,并诱导保护性免疫记忆生成。此外,通过原发性肺转移模型,我们证明了D47-R848能够有效地抑制肿瘤细胞转移。另一方面,对肿瘤组织中浸润的免疫细胞分析表明,D47-R848治疗后增加了肿瘤组织中CD8T细胞的浸润、促进了小鼠肿瘤组织中TAMs重新极化为杀肿瘤的M1型,并减少了骨髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSCs)在肿瘤组织中的浸润,在一定程度上缓解了肿瘤免疫微环境的抑制性。更重要的是,实验结果表明D47-R848能够诱导更强的抗原特异性T细胞反应。

关键词：原位肿瘤疫苗免疫原性细胞死亡肿瘤微环境肿瘤相关巨噬细胞重极化肿瘤免疫治疗

可降解纳米复合物共递送光敏剂和TLR7/8激动剂作为原位肿瘤疫苗的研究

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可降解纳米复合物共递送光敏剂和TLR7/8激动剂作为原位肿瘤疫苗的...

作者：刘昱彤山东大学

学位级别：硕士

免疫疗法已经彻底改变了癌症治疗,成为肿瘤治疗最热门的领域之一。近年来,旨在治疗现有肿瘤或预防肿瘤复发的治疗性肿瘤疫苗作为诱导有效免疫反应的一种直接方法,已被广泛应用于肿瘤免疫治疗领域。而成功的肿瘤疫苗需要肿瘤抗原和适当... 详细信息

免疫疗法已经彻底改变了癌症治疗,成为肿瘤治疗最热门的领域之一。近年来,旨在治疗现有肿瘤或预防肿瘤复发的治疗性肿瘤疫苗作为诱导有效免疫反应的一种直接方法,已被广泛应用于肿瘤免疫治疗领域。而成功的肿瘤疫苗需要肿瘤抗原和适当的佐剂来刺激DCs成熟才能实现最佳的T细胞活化效果。光热治疗(PTT)、光动治疗(PDT)等传统疗法在直接杀死肿瘤细胞的同时还可以诱导肿瘤细胞发生免疫原性细胞死亡(ICD),其特征是从垂死的肿瘤细胞中释放损伤相关分子模式以及肿瘤相关抗原(TAAs)。这种可在肿瘤部位局部释放TAAs以激活自身DCs的原位疫苗接种策略受到了越来越多的关注。IR780作为一种光敏剂,同时具有光热转换效率以及光动性能,且能够优先聚集在肿瘤细胞内部。因此,IR780可被应用于原位疫苗策略。Toll样受体(TLR)激动剂可促进DCs成熟,是广泛应用的一类免疫佐剂。其中,咪唑喹啉类药物(IMDQ)是TLR7/8的有效小分子激动剂,可诱导激活MyD88依赖的经典TLR信号通路,从而触发免疫反应。因此,本文设计了一种原位疫苗策略,该策略将PTT/PDT诱导的ICD和TAAs释放与TLR7/8激动剂触发的先天性免疫激活相结合,以促进肿瘤特异性免疫反应。使用具有生物可降解性的多肽聚合物——聚天冬氨酸(PASP)作为载体材料,通过酰胺缩合分别连接IMDQ和IR780,可有效防止药物的泄漏。其中,IR780本身具有一定的肿瘤细胞靶向性。为了使IMDQ能够特异性靶向DCs,本课题在PASP-IMDQ(pIM)上连接了甘露糖衍生物,以特异性靶向DCs表面的甘露糖受体。利用PASP中存在的大量羧基,用氯化钙(CaCl2)作为交联剂可将其交联形成具有pH响应特性的纳米复合物(NanopIR/mpIM)。瘤内注射后,NanopIR/mpIM在微酸的肿瘤微环境中逐渐解离,其中,PASP-IR780(pIR)在808 nm近红外激光照射下可发挥光热治疗和光动力治疗作用,直接杀死肿瘤细胞,且引发ICD并释放TAAs;PASP-IMDQ-Man(mpIM)促进DCs的成熟,进而刺激初始T细胞的增殖和分化,从而产生良好的抗肿瘤免疫治疗效果。本文主要研究内容和结果如下:***780及IMDQ含量测定方法的建立采用紫外可见分光光度法(UV-Vis)成功建立了 IR780和IMDQ的含量测定方法,方法学检测结果均符合要求。2.共载IR780和IMDQ纳米复合物的制备及表征成功合成了 IR780-NH2、pIR、mpIM。制备的NanopIR/mpIM具有规整的球形形貌以及pH敏感特性,可在pH6.5环境下解离,且光热、光动性能良好。***纳米复合物的体外抗肿瘤效果评价选用CT26结直肠癌细胞评价了 NanopIR的体外抗肿瘤效果。证明NanopIR可以更好地被肿瘤细胞内化,具有生物相容性以及光治疗杀伤肿瘤细胞的性能,且激光照射后可以引起ICD,为联合免疫佐剂以激活抗肿瘤免疫反应提供了基础。***在体内外靶向和激活DCs能力的评价通过流式细胞仪以及ELISA试剂盒对DCs摄取以及DCs的成熟情况进行表征,在体外和体内水平均证明甘露糖衍生物修饰后提高了 mpIM对DCs的靶向性并促进了 DCs的成熟。***/mpIM纳米复合物的体内抗肿瘤效果评价建立双侧肿瘤模型以评价NanoPIR/mpIM的体内抗肿瘤效果,证明NanopIR/mpIM具有良好的肿瘤蓄积能力和更高的稳定性,可明显抑制小鼠原发肿瘤以及远端肿瘤的生长,且体内初步安全性良好。***/mpIM纳米复合物的体内抗肿瘤机制的研究NanoPIR/mpIM治疗后能够有效地促进DCs的成熟和肿瘤相关巨噬细胞的复极化,进而有效激活T细胞免疫应答,且明显提升了效应记忆T细胞所占的比例,对机体具有长期保护作用。

关键词：原位肿瘤疫苗 toll样受体7/8激动剂光疗法聚合物-药物结合物

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原位膜融合疫苗的构建与抗肿瘤治疗的研究

原位膜融合疫苗的构建与抗肿瘤治疗的研究

作者：熊长昊吉林大学

学位级别：硕士

近几十年来,癌症是导致人类死亡的主要原因,而且死亡率还在不断上升。这说明,目前癌症仍然是世界范围内的一个重大健康问题,降低癌症死亡率是社会、政府、医学界和科学界面临的主要挑战。现代医学的不断发展,使得癌症与免疫系统之间的... 详细信息

近几十年来,癌症是导致人类死亡的主要原因,而且死亡率还在不断上升。这说明,目前癌症仍然是世界范围内的一个重大健康问题,降低癌症死亡率是社会、政府、医学界和科学界面临的主要挑战。现代医学的不断发展,使得癌症与免疫系统之间的相互作用产生了新的治疗方式—免疫疗法。随着基因组学、数据科学和癌症免疫治疗技术的进步使基因组内突变的快速定位以及根据患者个体肿瘤定制的治疗成为可能—肿瘤疫苗。但是对于特异性细胞免疫激活,疫苗往往涉及肿瘤特征抗原肽和佐剂的共同传递,因此临床治疗效果通常受到疫苗免疫原性的缺乏、肿瘤免疫抑制和异质性等因素的影响。此外,肿瘤细胞表达有限或不表达免疫原性抗原,这些不确定因素限制了肿瘤疫苗的发展。近些年,原位肿瘤疫苗的研究提供了新的思路,在进一步的研究中发现,细菌成分可以刺激免疫系统,作为天然佐剂来激活树突状细胞的成熟。细菌外膜已被证实能够通过诱导适应性免疫反应来增强特异性抗肿瘤反应。细菌膜上的病原体相关分子模式（PAMPs）和肿瘤膜上的抗原可被一起纳入纳米疫苗中,以预防术后肿瘤复发。这种杂合膜原位肿瘤疫苗还可以增加纳米颗粒在免疫激活过程中与多个细胞的相互作用,最终提高免疫治疗的效率。然而,能够从单个癌细胞发展到肿瘤组织,这极大程度上依赖于肿瘤细胞的低免疫原性和免疫抑制微环境。这种低免疫原性造成的免疫忽视是肿瘤发生发展的重要原因。因此,即使原位疫苗能够在一定程度上增强肿瘤的免疫原性和改善免疫抑制微环境,但却仍然没有完全解决部分肿瘤细胞因免疫原性低而导致疗效较差的问题。那么如何进一步增强肿瘤细胞的免疫原性才是解决问题的关键。我们都知道肿瘤细胞来源于同源个体的体细胞突变,这意味着即使癌细胞拥有逃脱同源个体免疫清除的能力,但却无法感染异源个体,这是因为癌细胞的低免疫原性只适用于同源个体。这给了我们另外一个思路,将异源个体的抗原整合入杂合膜疫苗可能会提高整体的抗肿瘤免疫治疗的疗效。为了验证这一假设,我们将细菌来源的抗原MPLA与一种特殊的脂质体—膜融合脂质体（MFL）结合,构建一种膜融合原位肿瘤疫苗（MFL-MPLA）。该疫苗能够直接与肿瘤细胞融合,将细菌抗原MPLA嵌入肿瘤细胞膜中,这种策略理论上能够极大增强肿瘤细胞的免疫原性,促进CD8+T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用,进一步促进抗肿瘤治疗疗效,为原位肿瘤疫苗的研发提供新的角度。

关键词：癌症免疫疗法免疫原性原位肿瘤疫苗膜融合脂质体