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敲低卷曲螺旋结构域蛋白34表达对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

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中华临床医师杂志（电子版） 2017年第3期11卷 452-457页

作者：巩艳青宁向辉李学松周利群郭应禄北京大学第一医院泌尿外科北京大学泌尿外科研究所国家泌尿男生殖系肿瘤研究中心 100034

目的研究应用慢病毒介导的RNA干扰(RNA interference)技术敲低卷曲螺旋结构域蛋白34(CCDC34)的表达,分析其对膀胱癌T24细胞生物学行为的影响。方法选取膀胱癌T24细胞分别同时感染阴性对照si RNA(阴性对照组)和CCDC34-si RNA(CCDC34干扰... 详细信息

目的研究应用慢病毒介导的RNA干扰(RNA interference)技术敲低卷曲螺旋结构域蛋白34(CCDC34)的表达,分析其对膀胱癌T24细胞生物学行为的影响。方法选取膀胱癌T24细胞分别同时感染阴性对照si RNA(阴性对照组)和CCDC34-si RNA(CCDC34干扰组)慢病毒载体,荧光显微镜下观察慢病毒感染效率;实时定量PCR和Western blot验证CCDC34的干扰效率;Brd U掺入实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell小室侵袭实验检测干扰CCDC34表达对T24细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。结果与阴性对照组相比,感染CCDC34-si RNA的T24细胞中CCDC34 m RNA及蛋白表达水平均显著下降。Brd U实验显示CCDC34干扰组的细胞增殖能力较阴性对照组受到显著抑制(P34干扰组的细胞迁移率显著低于阴性对照组(0.40±0.04 vs.0.79±0.01,P34干扰组膀胱癌T24细胞的侵袭率也显著低于阴性对照组(1.44±0.03 vs.1.63±0.05,P34蛋白在T24细胞中的表达,显著抑制了膀胱癌T24细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进了肿瘤细胞的凋亡。CCDC34有望成为膀胱癌生物标记物和治疗的潜在新靶点。

关键词：膀胱肿瘤卷曲螺旋结构域蛋白34 细胞增殖迁移侵袭

CCDC34在胃肠道间质瘤中的表达及其与血管生成的关系

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中国普通外科杂志 2020年第4期29卷 449-457页

作者：支小飞陈思俊华如衡朱建伟南通大学附属医院普通外科江苏南通226001

背景与目的:卷曲螺旋结构域(CCDC)家族蛋白具有重要生物学功能,其中成员CCDC34在多种癌中过表达,参与肿瘤血管生成,但其在胃肠道间质瘤(GIST)中的表达与作用尚未见报道。本研究探讨GIST组织中CCDC34的表达和及其与血管生成的关系。方法... 详细信息

背景与目的:卷曲螺旋结构域(CCDC)家族蛋白具有重要生物学功能,其中成员CCDC34在多种癌中过表达,参与肿瘤血管生成,但其在胃肠道间质瘤(GIST)中的表达与作用尚未见报道。本研究探讨GIST组织中CCDC34的表达和及其与血管生成的关系。方法:用免疫组化法检测84例GIST组织标本及30例正常胃肠道黏膜组织标本中CCDC34的表达与微血管密度(MVD)(以CD34标记),分析CCDC34表达与GIST患者临床病理特征及MVD计数与的关系;用慢病毒转染方法分别将CCDC34过表达载体与CCDC34干扰载体转染人GIST细胞系GIST882,建立CCDC34过表达GIST882细胞或CCDC34干扰GIST882细胞;将60只裸鼠随机均分为3组,分别皮下注射无处理的GIST882细胞(模型组)、CCDC34过表达GIST882细胞(过表达组)、CCDC34干扰GIST882细胞(干扰组),建立移植瘤模型。3周后处死各组裸鼠,采用免疫组化法检测各组移植瘤组织MVD,Western blot法检测各组移植瘤组织PI3K、p-Akt、VEGF-C蛋白的表达。结果:CCDC34在GIST组织中的阳性表达率明显高于正常胃肠道黏膜组织(90.16% vs.27.5%,χ~2=10.295,P=0.001)。CCDC34表达与患者性别、年龄、肿瘤部位等无关(均P>0.05),而与肿瘤的危险度分级、肿瘤大小、肿瘤细胞核分裂象和局部侵犯、坏死及转移明显有关(均P34蛋白表达与MVD计数呈明显正相关(r=0.695,P蛋白表达明显升高,而干扰组以上指标则呈明显的反向变化(均P34在GIST中表达升高,CCDC34过表达可以促进的血管生成,从而致GIST进展,其机制与激活PI3K/Akt信号通路有关,故该通路可望成为GIST治疗的新靶点。

关键词：胃肠道间质肿瘤卷曲螺旋结构域蛋白34 新生血管化,病理性

基于TCGA数据库分析CCDC34基因在肝细胞癌中的表达及意义

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临床肝胆病杂志 2020年第5期36卷 1050-1054页

作者：向晓辉毛骏李海天津市西青医院消化内科天津300380 天津市肝脏胰腺纤维化与分子诊疗重点实验室天津300162 武警后勤学院天津300309

目的研究卷曲螺旋结构域蛋白34(CCDC34)基因在肝细胞癌中的表达以及临床价值,预测CCDC34基因在肝细胞癌发生发展中的作用。方法从癌症基因组图谱(TCGA)下载肝细胞癌数据集,获得CCDC34基因表达谱和临床信息。利用生物信息学方法,分析CCD... 详细信息

目的研究卷曲螺旋结构域蛋白34(CCDC34)基因在肝细胞癌中的表达以及临床价值,预测CCDC34基因在肝细胞癌发生发展中的作用。方法从癌症基因组图谱(TCGA)下载肝细胞癌数据集,获得CCDC34基因表达谱和临床信息。利用生物信息学方法,分析CCDC34基因在肝细胞癌中的表达水平与临床病理指标的相关性以及对预后的影响。用基因集富集分析(GSEA)预测CCDC34基因在肝细胞癌中调控的可能通路。计量资料2组间比较分别采用独立样本t检验及配对t检验。生存分析采用Kaplan-Meier法及log-rank检验;并运用Cox比例风险回归模型分析影响患者预后的危险因素。GSEA判断显著性富集的标准为P34基因在肿瘤组织中高表达,其表达水平在TNM分期和肿瘤分级之间差异均有统计学意义(t值分别为2.118、3.622,P值分别为0.035、34基因高表达的患者总生存期明显低于CCDC34基因低表达的患者(χ2=21.716,P34基因的表达水平(HR=2.287,95%CI:1.312~3.987)和TNM分期(HR=1.943,95%CI:1.101~3.429)是影响肝细胞癌患者总生存期的独立危险因素(P值均34基因高表达的样本存在碱基切除修复和剪接体等8个通路基因集的富集(P值均34基因可能在肝细胞癌的发生发展中发挥重要作用,有望成为判断肝细胞癌预后的指标和潜在的新治疗靶点。

关键词：癌,肝细胞卷曲螺旋结构域蛋白34 基因表达计算生物学

CCDC34在食管鳞癌中的过表达并与血管生成的关系

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CCDC34在食管鳞癌中的过表达并与血管生成的关系

作者：胡丹丹安徽医科大学

学位级别：硕士

背景和目的食管癌的死亡率排名世界癌症相关死亡率的第六位,是一种非常常见并且预后不佳的肿瘤,其组织类型中以鳞癌最为常见。尽管食管癌的治疗包括手术、放化疗及新辅助化疗在内已经取得了很大程度上的进步,但是食管癌病人的诊断及预... 详细信息

背景和目的食管癌的死亡率排名世界癌症相关死亡率的第六位,是一种非常常见并且预后不佳的肿瘤,其组织类型中以鳞癌最为常见。尽管食管癌的治疗包括手术、放化疗及新辅助化疗在内已经取得了很大程度上的进步,但是食管癌病人的诊断及预后仍不理想,因此探寻能够预测食管鳞癌复发、进展和评估预后的新型分子标志物,可能会为食管鳞癌的治疗带来新突破。卷曲螺旋结构域(CCDC)存在于许多蛋白质的序列结构中,因其α螺旋相互盘绕如绳索而得名,包含这种特定结构的蛋白统一称为卷曲螺旋结构域蛋白。CCDC蛋白已经被证实有一系列的生物学功能。最新的研究发现卷曲螺旋结构域蛋白34(CCDC34)在膀胱癌中呈现高表达,但是其潜在的分子生物学机制仍需进一步探究。因此,我们研究了在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中CCDC34的表达情况,并且也探索了CCDC34的表达的与临床病理学参数、肿瘤血管生成及患者生存预后之间的联系。方法采用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)方法测定样本组织中CCDC34,VEGF及CD34三种蛋白分别在100例ESCC组织和80例癌旁正常组织中的表达水平,其中CD34蛋白标记肿瘤微血管的密度(MVD)。利用Western Blot进一步检验CCDC34在新鲜冰冻癌组织及癌旁正常组织中的表达情况。通过统计学方法来探究CCDC34的表达与临床病理学参数、肿瘤血管生成及患者生存预后之间的关系。结果CCDC34蛋白在ESCC组织中的表达水平明显增高,并且与性别(P=0.038),TNM分期(P=0.003)及淋巴结转移(P=0.024)具有显著的相关性。另外,我们也发现了CCDC34是ESCC病人的独立预后因素。CCDC34的过表达与肿瘤的进展,血管生成及生存预后具有紧密的联系。蛋白质印迹实验结果表明,CCDC34的表达量在癌组织中明显高于癌旁正常组织,这与免疫组化的结果具有一致性。结论我们的研究结果显示了CCDC34在ESCC组织中呈现高表达水平,并且能被用作为判断ESCC病人不良预后的独立参考因素。研究结果表明了CCDC34在不远的将来可能会成为ESCC病人治疗的全新的潜在的治疗靶点。

关键词：食管鳞状细胞癌卷曲螺旋结构域蛋白34 血管内皮生长因子微血管密度生存预后