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卷叶贝母环阿屯醇合成酶基因的克隆及表达分析

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中草药 2018年第18期49卷 4380-4385页

作者：陈晓仪张甜甜赵琦成都大学药学与生物工程学院四川成都610106

目的对卷叶贝母Fritillaria cirrhosa中参与生物碱合成的关键酶环阿屯醇合成酶(cycloartenol synthase,CAS)基因进行克隆,并对其进行生物信息学和表达分析。方法基于转录组测序结果,通过PCR技术克隆卷叶贝母CAS基因(FcCAS)开放阅读框(op... 详细信息

目的对卷叶贝母Fritillaria cirrhosa中参与生物碱合成的关键酶环阿屯醇合成酶(cycloartenol synthase,CAS)基因进行克隆,并对其进行生物信息学和表达分析。方法基于转录组测序结果,通过PCR技术克隆卷叶贝母CAS基因(FcCAS)开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,并基于在线工具对cDNA序列进行生物信息学分析。通过荧光定量(q RT-PCR)手段检测FcCAS在野生鳞茎与愈伤组织(通过激素组合刺激获得的组织培养物)中的表达情况并测定总生物碱的含量。结果 FcCAS编码区ORF长为2 271 bp,编码756个氨基酸,并与NCBI上公布的天门冬、芭蕉、油棕等植物CAS蛋白的相似性达80%以上;qRT-PCR与总生物碱含量测定实验表明FcCAS的表达水平与总生物碱含量的变化趋势一致,都是愈伤组织高于野生鳞茎。结论 FcCAS在不同组织状态下表达量差异较大,FcCAS是一个有生物学功能的蛋白质,受激素组合诱导表达,为进一步研究CAS对卷叶贝母生物碱含量的影响和表达调控奠定基础。

关键词：卷叶贝母环阿屯醇合成酶克隆生物信息学表达分析

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卷叶贝母种子胚后熟的温度条件

中国中药杂志 1993年第5期18卷 270-272页

作者：陈瑛张军李先恩中国医学科学院药用植物资源开发研究所北京100094

经不同温度试验证明卷叶贝母种胚形态发育早期以15℃较好,后期以10℃左右为好。5℃左右时种胚生理后熟需73～91天。

关键词：卷叶贝母胚后熟温度贝母

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卷叶贝母种子萌发和多倍体诱导研究

中药材 2010年第8期33卷 1201-1204页

作者：王跃华代勇胡胜铃闫胜杰何宗晟王晓蓉成都大学生物产业学院四川成都610016 成都恩威集团(投资)有限公司四川成都610041

目的:改良卷叶贝母现有品种,增加其药用成分含量,丰富遗传育种资源。方法:本研究通过使用低温沙藏层积处理卷叶贝母种子,使其完成生理和形态后熟,再采用不同浓度的秋水仙素溶液对卷叶贝母种子进行不同时间的诱导处理。结果:经植物形态... 详细信息

目的:改良卷叶贝母现有品种,增加其药用成分含量,丰富遗传育种资源。方法:本研究通过使用低温沙藏层积处理卷叶贝母种子,使其完成生理和形态后熟,再采用不同浓度的秋水仙素溶液对卷叶贝母种子进行不同时间的诱导处理。结果:经植物形态学和染色体数检测,诱导后的材料具有明显的多倍体特征。结论:卷叶贝母种子用30 mg/L的GA3处理32 h,再经沙藏70 d,其种子萌发率为67.0%;沙藏处理成熟后的种子用0.1%的秋水仙素溶液处理48 h,其多倍体诱导率为85.7%。

关键词：卷叶贝母种子萌发多倍体诱导

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卷叶贝母种子的后熟特性研究

中草药 1992年第8期23卷 434-436页

作者：张灿明云南省迪庆州高原生物研究所

短的贮藏时间和培养温度13℃促进卷叶贝母(川贝母)Fritillaria cirrhosa ***种胚的生长;形态胚熟的种子经低温处理才能萌发。

关键词：卷叶贝母种子低温川贝母晚熟

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离体培养条件对卷叶贝母鳞茎再生的影响

中药材 2010年第6期33卷 854-856页

作者：王跃华代勇何宗晟孙雁霞闫胜杰徐世军王晓蓉成都大学生物产业学院四川成都610016 成都恩威集团(投资)有限公司四川成都610041

目的:筛选出卷叶贝母鳞茎再生的最佳离体培养条件。方法:通过对卷叶贝母开花期鳞茎的离体培养,研究了不同光照条件、培养温度、激素配比以及病毒唑用量对卷叶贝母鳞茎再生的影响。结果与结论:卷叶贝母鳞茎外植体进行适当的低温暗处理后... 详细信息

目的:筛选出卷叶贝母鳞茎再生的最佳离体培养条件。方法:通过对卷叶贝母开花期鳞茎的离体培养,研究了不同光照条件、培养温度、激素配比以及病毒唑用量对卷叶贝母鳞茎再生的影响。结果与结论:卷叶贝母鳞茎外植体进行适当的低温暗处理后,再转入光下培养,可明显地减轻外植体的褐化程度;鳞茎再生的最适培养温度为(20±2)℃,激素对鳞茎再生有明显的促进作用,其中以6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.2 mg/L组合为最佳;浓度为10 mg/L的病毒唑最适于鳞茎的再生。

关键词：离体培养条件卷叶贝母鳞茎再生

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不同激素配比对卷叶贝母鳞茎诱导效应的影响

中药材 2014年第6期37卷 931-934页

作者：王跃华郭翠平何诗虹江明殊刘涛王晓蓉成都大学生物产业学院四川成都610016 四川师范大学生命科学院四川成都610101 成都恩威集团(投资)有限公司四川成都610041

目的:研究不同激素配比对卷叶贝母组培苗幼叶诱导产生鳞茎的影响,为扩大川贝母药源提供有效途径。方法:以卷叶贝母组培苗幼叶为外植体,通过正交试验法研究了由6-BA、NAA、2,4-D和KT四种植物激素组成的培养基直接诱导鳞茎产生和增殖的影... 详细信息

目的:研究不同激素配比对卷叶贝母组培苗幼叶诱导产生鳞茎的影响,为扩大川贝母药源提供有效途径。方法:以卷叶贝母组培苗幼叶为外植体,通过正交试验法研究了由6-BA、NAA、2,4-D和KT四种植物激素组成的培养基直接诱导鳞茎产生和增殖的影响;实验以鳞茎的诱导率和平均产生鳞茎数为考核指标,并测定了产生鳞茎的生物碱含量。结果:诱导卷叶贝母组培苗幼叶产生鳞茎的最佳培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0mg/L+KT 1.0 mg/L,其中鳞茎诱导率为83.37%,平均产生的鳞茎数为17.27个;并经测定诱导产生的鳞茎中的生物碱含量为0.389%,是野生川贝母的1.64倍。结论:提供了生产组培川贝母药材的简便快捷方法,为合理开发利用卷叶贝母植物资源和提高药材品质奠定基础。

关键词：卷叶贝母叶正交试验植物激素小鳞茎

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卷叶贝母根高效诱导愈伤组织及快速增殖研究

种子 2019年第4期38卷 107-110页

作者：王跃华张晓捷马涛屈锡梅付雪铃张婕萱任倩成都大学药学与生物工程学院四川成都610106 成都列五中学四川成都610007

以卷叶贝母根为外植体,建立其愈伤组织快速繁殖体系,研究了不同消毒时间和激素配比对卷叶贝母根外植体诱导愈伤组织与增殖的影响。结果表明,卷叶贝母根快速诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2 iP 1.0 mg·L^(-1)+NAA 0.6 mg·L^(-1)+头孢... 详细信息

以卷叶贝母根为外植体,建立其愈伤组织快速繁殖体系,研究了不同消毒时间和激素配比对卷叶贝母根外植体诱导愈伤组织与增殖的影响。结果表明,卷叶贝母根快速诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2 iP 1.0 mg·L^(-1)+NAA 0.6 mg·L^(-1)+头孢曲松钠300 mg·L^(-1)+香蕉汁200 mg·L^(-1),培养30 d愈伤组织诱导率为85.41%;根愈伤组织的最佳增殖培养基为B 5+2,4-D 3.0 mg·L^(-1)+KT 0.5 mg·L^(-1)+多效唑1.0 mg·L^(-1)+活性炭1.5 mg·L^(-1),培养30 d其增殖倍数可达3.26倍。本实验实现了以卷叶贝母根为外植体的愈伤组织快速诱导和增殖培养,有效地提高了卷叶贝母植物器官的利用率,并为保护卷叶贝母植物资源提供了重要的途径。

关键词：卷叶贝母根诱导增殖

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卷叶贝母愈伤组织超低温保存关键技术研究

安徽农业科学 2011年第23期39卷 14023-14024,14026页

作者：王跃华刘益丽林抗雪马良良代勇徐世军王晓蓉成都大学生物产业学院四川成都610016 成都恩威集团(投资)有限公司四川成都610041

[目的]建立一套完整、快速和经济的卷叶贝母超低温保存关键技术。[方法]对卷叶贝母愈伤组织超低温保存技术中的预培养时间、保护剂类型和解冻方式进行了研究。[结果]预培养时间、冷冻保护剂类型和解冻方式均是影响卷叶贝母愈伤组织冷冻... 详细信息

[目的]建立一套完整、快速和经济的卷叶贝母超低温保存关键技术。[方法]对卷叶贝母愈伤组织超低温保存技术中的预培养时间、保护剂类型和解冻方式进行了研究。[结果]预培养时间、冷冻保护剂类型和解冻方式均是影响卷叶贝母愈伤组织冷冻保存过程中的关键因素。经预培养9 d、由10%二甲基亚砜和0.5 mol/L山梨醇组合的复合冷冻保护剂冷冻、在40℃水浴条件下解冻的卷叶贝母愈伤组织其保存效果最佳,保存后细胞的存活率可达87.39%。[结论]为更好地保护卷叶贝母种质资源提供了参考。

关键词：卷叶贝母超低温保存愈伤组织

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卷叶贝母多倍体鳞茎诱导方法研究

安徽农业科学 2011年第7期39卷 3839-3841页

作者：王跃华胡胜铃代勇蒋婷婷付伟杨军成都大学生物产业学院四川成都610016 成都恩威集团投资)有限公司四川成都610041

[目的]利用组织培养技术快速诱导生成卷叶贝母(Fritillaria ***)多倍体鳞茎。[方法]用一定浓度的秋水仙素溶液浸泡经预分化培养的卷叶贝母紧密愈伤组织团块,再经过诱导分化培养获得多倍体鳞茎。[结果]用浓度为1.2 g/L的秋水仙素溶液浸... 详细信息

[目的]利用组织培养技术快速诱导生成卷叶贝母(Fritillaria ***)多倍体鳞茎。[方法]用一定浓度的秋水仙素溶液浸泡经预分化培养的卷叶贝母紧密愈伤组织团块,再经过诱导分化培养获得多倍体鳞茎。[结果]用浓度为1.2 g/L的秋水仙素溶液浸泡处理卷叶贝母紧密愈伤组织团块24 h后,接种在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L的分化培养基上培养,其多倍体鳞茎的诱导率最高为83.3%,细胞染色体数为2n=4x=48,总生物碱含量为0.249%。[结论]用组织培养技术获得优质高产卷叶贝母多倍体鳞茎的方法是可行的。

关键词：卷叶贝母秋水仙素多倍体鳞茎组织培养

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