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氧化应激与卵巢老化

中国实用妇科与产科杂志 2015年第8期31卷 774-778页

作者：李红真乔杰北京大学第三医院妇产科生殖医学中心北京100191

老化是复杂的生物现象,在机体老化过程中,营养状态不足、慢性炎症和氧化应激（oxidativestress）参与了许多与年龄相关的疾病的发生。近年研究发现,在人体器官老化的各个方面都涉及到氧化应激。本文希望从人体器官老化的相关机制出发,... 详细信息

老化是复杂的生物现象,在机体老化过程中,营养状态不足、慢性炎症和氧化应激（oxidativestress）参与了许多与年龄相关的疾病的发生。近年研究发现,在人体器官老化的各个方面都涉及到氧化应激。本文希望从人体器官老化的相关机制出发,分析卵巢老化的机制,探讨是否能够通过饮食调整控制卵巢老化的速度。1氧化应激的概念已知人类每天的活动都会产生自由基,自由基活性高,是非常不稳定的分子,

关键词：活性氧抗氧化剂氧化应激卵巢老化

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ROS与卵巢老化的相关研究

ROS与卵巢老化的相关研究

作者：李欣萌大连医科大学

学位级别：硕士

目的:随着生育年龄的推迟,高龄女性不孕率明显升高。卵巢功能逐渐下降是影响妊娠结局的关键。卵巢功能下降包括卵巢储备功能下降、卵巢低反应（poor ovarian response,POR）等。卵巢储备功能下降指原始卵泡数减少,使卵泡生长、发育、形... 详细信息

目的:随着生育年龄的推迟,高龄女性不孕率明显升高。卵巢功能逐渐下降是影响妊娠结局的关键。卵巢功能下降包括卵巢储备功能下降、卵巢低反应（poor ovarian response,POR）等。卵巢储备功能下降指原始卵泡数减少,使卵泡生长、发育、形成受精卵的能力下降,影响卵子质量,也可引起POR;POR是指卵巢对促性腺激素（Gn）刺激反应不良,使获卵率低、妊娠率降低,目前尚无统一诊断标准。目前认为氧化应激可能是卵巢衰老的主要机制,活性氧种类（reactive oxygen species,ROS）是反应机体内氧化应激的主要指标。本研究依据2016年提出的波塞冬（POSEIDON）标准将POR人群进行分类,探讨POR人群的临床及实验室特征,并通过测定不同卵巢响应程度所含卵泡液氧化应激水平来探讨ROS与卵巢老化之间是否具有明显的相关性,同时以小鼠为研究对象,探究缺氧是否是引起卵巢老化的重要因素。方法:临床研究:招募自2018年1月份至2019年12月份在大连市妇女儿童医疗中心不孕不育门诊行体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transplantation,IIVF-ET）治疗的患者100名,参照波塞冬低反应分类标准,设置实验组（A、B、C、D组）80名（年龄25～43岁,获卵数＜10枚）;对照组（E组）20名（年龄23～34岁,获卵数≥10枚）。拮抗剂方案促排卵,知情同意后,在取卵当天收集部分卵泡液,测定卵泡液ROS水平,分析ROS含量与卵巢老化的相关性。动物实验:选实验组取SPF级雌性小鼠11只置于氧浓度10%的低氧环境中饲养4周,另选对照组取10只SPF级雌性小鼠于常氧环境下饲养4周,随后与雄鼠交配,记录产仔数量及质量。第二次缺氧实验饲养环境同第一次缺氧实验,4周后予小鼠促排、取卵,对卵细胞内的ROS水平进行检测,分析缺氧对生育力的影响。结果:临床研究:1.各组临床特征及IVF结局的比较。D组Gn天数明显少于其他四组（P＜0.05）;B组Gn用量明显多于波塞冬A组、D组、对照组（P＜0.05）;对照组的获卵数、2PN受精数、卵裂数、优质胚胎数、优质胚胎形成率均显著高于其他四组（P＜0.05）;A组、B组的获卵数、2PN受精数、卵裂数均明显高于C组、D组（P＜0.05）,优质胚胎数略高于C组、D组,结果无统计学差异;A组、C组的卵裂率、优质胚胎形成率略高于B组、D组,结果无统计学差异。四组间优质胚胎数和优质胚胎形成率无明显差异;五组间未成熟卵（GV）数、卵裂率无明显差异。2.各组卵泡液ROS含量的比较。各组卵泡液中ROS的含量呈:对照组＜A组＜C组＜B组＜D组,其中对照组、A组卵泡液ROS含量明显少于其他三组（P＜0.05）,但两组之间比较无统计学差异;B组、C组、D组之间比较无统计学差异。3.卵泡液ROS与IVF治疗结局的相关性。卵泡液ROS含量与获卵数、2PN受精数、卵裂数呈明显负相关（P＜0.05）,与Gn用量呈正相关趋势,与获卵数、2PN受精率、卵裂率、优质胚胎数、优质胚胎形成率呈负相关趋势,但无统计学差异。动物实验:1.实验组小鼠产仔数量略高于对照组（13.63±3.35只vs 11.90±4.56只）,平均鼠仔质量略高于对照组（24.30±6.37g vs 20.85±7.71g）,差异无统计学意义。2.小鼠卵子内ROS含量的检测。经量化缺氧组小鼠体内ROS相对含量略低于对照组（15.92±0.62vs16.74±0.72）,差异无统计学意义。结论:1.年龄对卵巢功能的评价可能更有意义。对于年轻女性来说,尽管卵巢储备储备功能可能下降,但卵子质量仍然可能比年龄较高、卵巢储备功能正常的女性更高。2.高龄、卵巢储备功能低下、POR的女性卵泡液ROS含量明显升高,对于年龄＜35岁的患者,AMH更高、AFC更多的女性卵泡液ROS明显更低,ROS含量和获卵数、2PN受精数、卵裂数等呈明显负相关。3.短期低氧饲养并未明显降低小鼠的生育力,小鼠卵子内ROS含量也没有明显变化。

关键词：卵巢反应性活性氧卵巢老化波塞冬

卵巢老化相关基因筛选及针刺“肾俞”的干预作用

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安徽中医学院学报 2006年第2期25卷 18-22页

作者：沈晓明安徽中医学院针灸骨伤临床学院安徽合肥230038

目的:筛选卵巢老化及针刺“肾俞”干预的相关基因。方法:建立自然的更年期大鼠模型,实验动物包括青年组、更年组、针刺组,采用mRNA差异显示PCR技术,筛选卵巢中差异表达的基因,其中部分进行克隆、测序,并与NCB I相关数据库进行同源性比... 详细信息

目的:筛选卵巢老化及针刺“肾俞”干预的相关基因。方法:建立自然的更年期大鼠模型,实验动物包括青年组、更年组、针刺组,采用mRNA差异显示PCR技术,筛选卵巢中差异表达的基因,其中部分进行克隆、测序,并与NCB I相关数据库进行同源性比较。结果:获得16条差异表达明显的cDNA片段,其中已测序的6条均为未知功能基因。结论:卵巢老化及针刺“肾俞”的干预效应可能是多基因参与作用的结果,对分离到的cDNA进一步研究有助于揭示其分子机制。

关键词：卵巢老化针刺肾俞基因表达 mRNA差异显示

正常月经周期在IVF超促排卵时反应差妇女的卵泡期特征提示卵巢老化

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国外医学（计划生育分册） 2003年第4期22卷 248-248页

作者：徐凤琴

卵巢老化在出生前便开始直到绝经期,当始基卵泡池枯竭时。卵泡丢失以每月1 000个的速度进行,35岁以后这一过程加速,卵泡池的枯竭表现在:B超下窦卵泡数量减少;血浆E2、FSH、抑制与B水平改变;月经周期缩短。在周期出现异常前,卵泡早期FSH... 详细信息

卵巢老化在出生前便开始直到绝经期,当始基卵泡池枯竭时。卵泡丢失以每月1 000个的速度进行,35岁以后这一过程加速,卵泡池的枯竭表现在:B超下窦卵泡数量减少;血浆E2、FSH、抑制与B水平改变;月经周期缩短。在周期出现异常前,卵泡早期FSH、E2、抑制与水平等内分泌指标分析,提示已经有卵巢老化的改变。

关键词：月经周期 IVF 超促排卵卵泡期特征卵巢老化

卵巢衰老和盆底功能障碍性疾病的相关性研究进展

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中华生殖与避孕杂志 2023年第5期43卷 519-522页

作者：王雨李志英三峡大学附属仁和医院妇产科宜昌443001

盆底功能障碍性疾病(pelvic floor dysfunction,PFD)是女性最常见的疾病之一,随着人口老龄化严重及国家"三孩政策"的放开,发病率呈逐年上升的趋势,不仅影响了患者的身体健康,也严重影响了患者的生活和心理健康。目前PFD的发病机制不完... 详细信息

盆底功能障碍性疾病(pelvic floor dysfunction,PFD)是女性最常见的疾病之一,随着人口老龄化严重及国家"三孩政策"的放开,发病率呈逐年上升的趋势,不仅影响了患者的身体健康,也严重影响了患者的生活和心理健康。目前PFD的发病机制不完全明确,绝经是导致PFD的主要危险因素之一,卵巢衰老主要表现为绝经,绝经后卵巢功能逐渐衰退,且内分泌水平失调,并影响全身多器官系统,最终导致一系列相关疾病的发生。本文讨论遗传、雌激素及线粒体功能异常、氧化应激等对卵巢及盆底功能的影响,从而寻找出卵巢衰老和PFD之间的相关性。

关键词：衰老盆底功能障碍盆腔器官脱垂卵巢老化

性激素、年龄、月经模式变化对卵巢储备功能的预测价值

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中国实用妇科与产科杂志 2010年第9期26卷 717-719页

作者：赖爱鸾孙艳格张李松金巧凤王丽芳朱海燕首都医科大学附属复兴医院妇产科北京100038

目的探讨性激素、年龄、月经模式变化对卵巢储备功能的预测价值。方法 2005年6月至2008年9月在首都医科大学附属复兴医院就诊的162例妇女作为研究对象,根据年龄及月经模式不同进行分组及性激素检测,对其中的84例进行卵巢卵泡密度计数。... 详细信息

目的探讨性激素、年龄、月经模式变化对卵巢储备功能的预测价值。方法 2005年6月至2008年9月在首都医科大学附属复兴医院就诊的162例妇女作为研究对象,根据年龄及月经模式不同进行分组及性激素检测,对其中的84例进行卵巢卵泡密度计数。结果年龄增加,卵泡密度下降,≤29岁,～39岁,～44岁,～49岁及≥50岁各年龄组间比较,卵泡密度差异有统计学意义(P卵巢储备功能下降,在各性激素变化中,AMH与INHB下降是女性生殖力减退的敏感指标。

关键词：卵巢储备卵巢老化性激素卵泡计数

不同年龄女性卵泡液及颗粒细胞的氧化应激状态对胚胎质量的影响

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中山大学学报（医学科学版） 2020年第3期41卷 465-472页

作者：温灿鑫李瑞岐区颂邦杨冬梓李予中山大学孙逸仙纪念医院生殖中心广东广州510120

【目的】探讨不同生育年龄段女性取卵周期中卵泡液及颗粒细胞的氧化应激状态及其与胚胎质量的关系。【方法】收集2018年9月8日至2019年1月18日在本中心行新鲜体外受精胚胎移植助孕的不孕患者取卵日卵泡液共70例,按照年龄≥35岁及<35岁... 详细信息

【目的】探讨不同生育年龄段女性取卵周期中卵泡液及颗粒细胞的氧化应激状态及其与胚胎质量的关系。【方法】收集2018年9月8日至2019年1月18日在本中心行新鲜体外受精胚胎移植助孕的不孕患者取卵日卵泡液共70例,按照年龄≥35岁及<35岁分为年长组(n=34)和年轻组(n=36),比较卵泡液中氧化应激3个阶段的7项指标及颗粒细胞抗氧化物的基因表达水平,分析两组氧化应激指标的差异及其与胚胎质量的关系。【结果】年长组卵泡液的过氧化氢(H2O2)水平显著增加[155.84(137.11~199.30)vs.66.94(51.05~95.42)μmol/L,P=0.001],总超氧化物歧化酶(SOD)活性显著降低[0.69(0.55~0.85)vs.0.83(0.76~0.94)U,P=0.005],年长组颗粒细胞的过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽还原酶(GSR)表达量显著下降(P<0.05)。卵泡液总SOD活性在正常受精率≥60%组、囊胚形成率≥60%组均较高[0.82(0.71~0.91)vs.0.67(0.55~0.80)U,P=0.007,0.83(0.78~0.90)vs.0.73(0.60~0.89)U,P=0.049],并且经相关因素校正后卵泡液总SOD活性高对正常受精率(≥60%)及囊胚形成率(≥60%)的影响有统计学意义(OR值分别为5.478、3.383,95%CI分别为1.721~17.433、1.111~10.299,P值分别为0.004、0.032)。【结论】卵泡液和颗粒细胞的氧化应激状态在高龄女性中主要表现为卵泡液ROS增加、总SOD活性降低,颗粒细胞中过氧化氢酶及谷胱甘肽还原酶的水平显著降低,并且卵泡液总SOD活性与正常受精率和囊胚形成率呈正相关,提示其对卵子质量可能存在一定的影响。

关键词：卵泡液超氧化物歧化酶卵巢老化囊胚形成率颗粒细胞

藻蓝蛋白在衰老小鼠中通过抑制ROS途径提高生殖力

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藻蓝蛋白在衰老小鼠中通过抑制ROS途径提高生殖力

作者：李艳蛟内蒙古大学

学位级别：硕士

女性30岁后具有很高的不孕不育率。因为某些原因,比如环境恶化和生活压力,许多女性推迟了生育年龄,该类人群中有一部分发生不孕不育。女性四十岁后,卵子数目普遍减少且卵子质量下降。此外,劣质的卵母细胞出现了诸如纺锤体散乱、染色体... 详细信息

女性30岁后具有很高的不孕不育率。因为某些原因,比如环境恶化和生活压力,许多女性推迟了生育年龄,该类人群中有一部分发生不孕不育。女性四十岁后,卵子数目普遍减少且卵子质量下降。此外,劣质的卵母细胞出现了诸如纺锤体散乱、染色体不对称排列、氧化应激压力、基因表达异常、端粒缩短以及黏连蛋白丢失等一系列异常现象。在正常代谢活动产生的自由基对细胞发生损伤不断的积累,因此而发生氧化应激,该过程被认为是衰老发生的机制之一。在胚胎时期雌性生殖细胞开始进行减数分裂并停滞在第一次减数分裂前期的网系期,这一过程在小鼠体内可维持几周到几个月,女性体内可以持续10-50年。该漫长的过程中,卵巢内的活性氧物质(reactive oxygen species, ROS)不断积累并影响卵母细胞数量和质量。ROS对卵母细胞成熟到受精以及胚胎发育都有负面作用,ROS和高龄产妇生育力降低息息相关。可以通过添加抗氧化剂来减少ROS引起的氧化应激压力,维持卵泡与卵母细胞的数目和质量。藻蓝蛋白是纯顶螺旋藻中的一种胆蛋白质,具有抗氧化性和清除氧自由基的能力。我们的研究结果表明藻蓝蛋白能够阻止D-gal致衰引起的卵母细胞碎裂和异倍性,并维持细胞骨架完整性。此外,藻蓝蛋白还能够恢复某些抗氧化基因的表达、降低MDA含量并提高SOD的活力、恢复线粒体分布状况。藻蓝蛋白通过抑制ROS的产生而减少细胞凋亡。对D-gal致衰小鼠灌胃藻蓝蛋白后小鼠生殖力得到提高。我们的研究第一次证明了连续注射D-gal可以对小鼠生殖器官造成生殖毒性,影响其生殖机能,灌胃藻蓝蛋白后能够通过抑制ROS途径来逆转D-gal对小鼠造成的生殖毒性,提高生殖力。

关键词：卵巢老化卵母细胞氧化压力藻蓝蛋白 D-gal

藻蓝蛋白改善自然衰老雌性小鼠生殖力的机理研究

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藻蓝蛋白改善自然衰老雌性小鼠生殖力的机理研究

作者：韩哲内蒙古大学

学位级别：硕士

国家计划生育政策的调整对希望孕育第二个孩子的家庭来说意义重大。但许多符合政策的妈妈年龄已超过最佳生育年龄。女性年龄超过35岁后生育能力显著下降,主要原因是卵泡数目减少和卵子质量明显降低。氧化应激造成的损伤逐渐积累被认为... 详细信息

国家计划生育政策的调整对希望孕育第二个孩子的家庭来说意义重大。但许多符合政策的妈妈年龄已超过最佳生育年龄。女性年龄超过35岁后生育能力显著下降,主要原因是卵泡数目减少和卵子质量明显降低。氧化应激造成的损伤逐渐积累被认为是卵巢发生老化的主要机制之一。卵巢内的活性氧物质(Reactive oxygen species,ROS)随着年龄增加而不断积累并影响卵子的质量。有证据表明通过食用某些抗氧化药物可减少细胞内ROS的积累,阻止卵子质量降低。藻蓝蛋白(C-Phycocyanin,PC)是螺旋藻中一种具有抗氧化、抗炎和清除氧自由基功能的藻胆蛋白。本课题组前期研究结果表明,在D-半乳糖(D-Galactose,D-gal)诱导的致衰小鼠模型中,PC可以显著提高致衰雌鼠的产仔数量。体内实验进一步证明,PC可以显著改善卵子成熟质量,降低ROS水平,改善线粒体分布,抑制细胞凋亡。同时利用转录组学分析实验组与对照组小鼠卵巢组织,发现PC可以在一定程度上恢复因D-gal致衰引起的小鼠卵巢部分基因表达变化。但PC对自然衰老小鼠是否具有同样作用及其作用机理还不明确。本研究以自然衰老ICR雌性小鼠为研究模型,研究PC对其卵巢、卵子质量、产仔能力及幼仔发育的影响,并通过对卵巢抗氧化酶活力、端粒长度、端粒酶活性和卵子ROS水平、线粒体功能、细胞凋亡等的检测,研究PC对生殖能力的作用机理。实验结果显示,PC可以改善由自然衰老引起的卵巢重量和器官系数的降低。PC可以增加卵巢超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性、降低丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量以及阻止端粒缩短。同时,PC可以显著提高生发泡(Germinal vesicle,GV)期卵子生发泡破裂(Germinal vesicle breakdown,GVBD)及第一极体(The first polar body,PB1)排放率、降低DNA双链断裂数目、恢复H3K4me2水平。并且可以增加第二次减数分裂中期(Metaphase II,MII)卵子数目,提高卵子受精率。此外,PC可以恢复由自然衰老引起的纺锤体-染色体复合体异常(Spindle-chromosome complexs,SCCs)。PC还可以改善卵子线粒体分布,抑制ROS水平,减少卵子凋亡,进而提高小鼠生殖能力。综上所述,我们的结果表明PC可能通过ROS途径挽救由自然衰老引起的小鼠生殖能力下降,这些结果为PC在治疗衰老相关生殖缺陷的临床应用提供了依据。

关键词：藻蓝蛋白卵子卵巢老化生殖力氧化压力