检索结果-南通市图书馆

毁灭泰泽球虫(Tyzzeria perniciosa)内生发育的超微结构研究 4.大配子发育与卵囊壁形成

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

北京农业大学学报 1989年第1期15卷 107-113页

作者：汪明孔繁瑶

毁灭泰泽球虫的大配子是在含有泡内小管的带虫空泡中发育。成囊颗粒Ⅰ在大配子的细胞基质中发育,而成囊颗粒Ⅰ则形成于内质网之嵴内。少数多膜小体见于年轻大配子的细胞质浅层。成熟大配子含有大量的多糖颗粒、少数电子半透明小泡、内... 详细信息

毁灭泰泽球虫的大配子是在含有泡内小管的带虫空泡中发育。成囊颗粒Ⅰ在大配子的细胞基质中发育,而成囊颗粒Ⅰ则形成于内质网之嵴内。少数多膜小体见于年轻大配子的细胞质浅层。成熟大配子含有大量的多糖颗粒、少数电子半透明小泡、内质网、线粒体和小管。合子外层膜的膨胀和分离标志着卵囊壁形成的开始。成囊颗粒Ⅰ的物质通过分子渗透过程在合子表面沉积,形成外层。当外层从合子表面分离之后,成囊颗粒Ⅱ的内容物在合子限制膜下累积成层。内层的形成可能是要通过多层物质的分泌与融合的连续过程。粗面内质网在成囊颗粒Ⅱ物质的转运,以及新膜的分离和形成中均起着重要的作用。成熟的卵囊壁由三层组成,分别称为外周膜、外层和内层。

关键词：毁灭泰泽球虫大配子发育卵囊壁

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

毒害艾美耳球虫未孢子化卵囊壁的分离与纯化

畜牧与兽医 2016年第2期48卷 94-96页

作者：查夕馨杜彩娟黄晓星刘丹丹陶建平扬州大学兽医学院/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

用毒害艾美耳球虫孢子化卵囊接种50只15日龄无球虫感染的雏鸡,感染后第6～12天,每隔12 h收集1次粪便,按常规方法分离卵囊。未孢子化卵囊经次氯酸钠溶液处理后,用1.1 mol/L蔗糖溶液漂浮法纯化卵囊。采用玻璃珠涡旋法破碎卵囊壁,最后用孔... 详细信息

用毒害艾美耳球虫孢子化卵囊接种50只15日龄无球虫感染的雏鸡,感染后第6～12天,每隔12 h收集1次粪便,按常规方法分离卵囊。未孢子化卵囊经次氯酸钠溶液处理后,用1.1 mol/L蔗糖溶液漂浮法纯化卵囊。采用玻璃珠涡旋法破碎卵囊壁,最后用孔径10.0μm的聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）膜过滤获得纯化的卵囊壁。研究结果为进一步研究毒害艾美耳球虫卵囊壁的结构及其蛋白组成奠定了基础。

关键词：毒害艾美耳球虫卵囊壁分离纯化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

抗微小隐孢子虫卵囊壁单克隆抗体的制备

抗微小隐孢子虫卵囊壁单克隆抗体的制备

作者：武晓东吉林大学

学位级别：硕士

微小隐孢子虫是一种肠道寄生虫,是引起世界范围内腹泻的重要原因。隐孢子虫在环境中以卵囊形式存在,人和动物误食了被卵囊污染的水或食品后感染,至今尚无有效的治疗药物和疫苗。目前,国际上检测隐孢子虫的金标准是免疫学方法EPA 1623,... 详细信息

微小隐孢子虫是一种肠道寄生虫,是引起世界范围内腹泻的重要原因。隐孢子虫在环境中以卵囊形式存在,人和动物误食了被卵囊污染的水或食品后感染,至今尚无有效的治疗药物和疫苗。目前,国际上检测隐孢子虫的金标准是免疫学方法EPA 1623,此方法的关键之处在于需要一个敏感特异的卵囊壁单克隆抗体,而国内并没有研制出相关试剂,因此本研究在于制备针对微小隐孢子虫卵囊壁蛋白单克隆抗体,以弥补国内空白。本研究采用两种免疫策略来制备单克隆抗体。第一种是选取文献报道的和生物学分析可能位于卵囊壁的4个蛋白(Gp15,COWP6,POWP6和MPA2),通过选取高度特异的氨基酸序列设计多肽,将它们分别偶联至载体蛋白KLH和BSA上,分别用于免疫小鼠和ELISA的血清效价检测。另一种是采用传统的卵囊进行免疫。将1?10个微小隐孢子虫卵囊经80℃水浴灭活30min后,与弗氏佐剂乳化后免疫BALB/c小鼠,共免疫四次,每次间隔14天。通过间接免疫荧光来筛选定位于卵囊壁的单抗。经过生物信息学分析,共设计了5个多肽,分别为c-GGKRIEVAVP(Gp15)、c-FYTGANSGTTNG(Gp15)、CESKIHEKHHGKNTRT(COWP6)、c-DENNKKNDNKKSNQN(POWP6)、和c-EEQPDTSKDEENIAN(MPA2),在获得多克隆抗体后,利用IFA检测显示四个蛋白质多克隆抗体均识别卵囊壁。通过传统免疫,我们共获得了2株单克隆抗体2-C11和1-B11,2-C11定位于卵囊壁和子孢子前部,1-B11则定位于卵囊壁和子孢子核的两侧。两个单克隆抗体的亚型均为IgM。在敏感性实验中,我们发现在两株抗体的腹水的IFA效价可达稀释到1:10000以上;特异性实验结果显示该抗体不与艾美耳球虫和大肠杆菌发生交叉反应;Western blot结果显示,2-C11抗体识别大于180 KDa的蛋白质,1-B11识别大约180 KDa的蛋白质。综上,针对Gp15,COWP6,POWP6和MPA2的5个的多肽抗体均识别卵囊壁,通过传统方法成功制备了2株具有良好敏感性和特异性的单克隆抗体,为开发具有自主知识产权的隐孢子虫检测试剂奠定基础。

关键词：微小隐孢子虫卵囊壁单克隆抗体多肽

毒害艾美耳球虫成壁体参与卵囊壁形成机制的探析

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

毒害艾美耳球虫成壁体参与卵囊壁形成机制的探析

中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第一届青年科学家学术论坛

作者：刘丹丹王乐乐汪飞燕李文静宿世杰高阳候照峰许金俊陶建平扬州大学兽医学院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

卵囊是球虫类寄生虫在宿主间传播的重要发育阶段,是由球虫在配子生殖时受精后的大配子发育而成。其囊壁是由位于球虫大配子体中的成壁体(WFB)前体蛋白形成,目前仅有极少数蛋白被鉴定和研究。本研究以毒害艾美耳球虫为研究对象,通过外科... 详细信息

卵囊是球虫类寄生虫在宿主间传播的重要发育阶段,是由球虫在配子生殖时受精后的大配子发育而成。其囊壁是由位于球虫大配子体中的成壁体(WFB)前体蛋白形成,目前仅有极少数蛋白被鉴定和研究。本研究以毒害艾美耳球虫为研究对象,通过外科手术法经盲肠接种第二代裂殖子,于30 h后分离纯化盲肠中的配子体,采用超滤法分离纯化成壁体;与此同时,采用蔗糖密度梯度离心法分离纯化未孢子化卵囊的卵囊壁。接着,将分离纯化的成壁体与卵囊壁进行TMT标记蛋白质谱相对定量检测,GO和KEGG Pathway富集分析差异蛋白的主要功能。根据分析结果,应用实验室具备的多抗或单抗,结合免疫荧光定位和扫描电镜技术对筛选的差异蛋白进行初步鉴定。结果显示:在成壁体鉴定到的蛋白种类数为3009个,卵囊壁鉴定到的蛋白种类数为2973个。共鉴定出1002个差异表达蛋白,其中506个上调蛋白,596个下调蛋白。成壁体显著上调蛋白的GO富集条目主要有:辅酶生物合成过程,细胞大分子生物合成,细胞生物合成过程,细胞内细胞器,过氧化物酶体,蛋白酶体复合物,氧化还原酶活性,谷胱甘肽二硫化物还原酶活性,磷酸葡萄糖苷酶活性等;卵囊壁显著上调蛋白的GO富集条目主要有:细胞大分子复合物组装,蛋白质折叠,脂肪酸代谢过程,氧化还原酶复合物,膜结合细胞器,催化复合物,乙酰转移酶活性,醛脱氢酶活性,脂肪酸连接酶活性等。成壁体显著上调蛋白的KEGG Pathway富集条目主要有:淀粉蔗糖代谢,内质网中蛋白质加工,泛醌和其他萜类化合物等;卵囊壁显著上调蛋白的KEGG Pathway富集条目主要有:脂肪酸代谢,氧化磷酸化,磷酸戊糖途径等。最后,选取筛选的差异蛋白EnGAM22、EnGAM56和EnGAM59,用本实验室制备的单抗或多抗进行免疫荧光定位,结合扫描电镜,观察了成壁体在配子体发育中的形态变化,发现随着配子体的生长发育,位于配子体内的成壁体逐渐向周边扩散,逐渐融合形成卵囊壁,其中WFB1形成卵囊壁外层,WFB2形成卵囊壁内层。研究结果为寻找杀灭或抑制卵囊壁形成的分子靶点奠定了基础。

关键词：毒害艾美耳球虫成壁体卵囊壁蛋白质组学机制

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

多雨季节须防鸡的球虫病

山西农业（致富科技版） 1994年第9期 35-35页

作者：王燕平张怀吉杨忠义山西省运城农业技术学校 044000

鸡的球虫病在平均气温达20～30℃时和雨水较多的季节易发生。我省7～10月份有利于球虫卵囊的发育。症状表现:精神沉郁,消瘦。

关键词：多雨季节鸡球虫病卵囊壁雏鸡裂殖体农业技术山西鸡舍拌粉强饲