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南葶苈子提取物对哮喘大鼠肺组织中CyclinD1、PI3K表达的影响

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中成药 2022年第9期44卷 3037-3040页

作者：林红张玲连云港市中医院药学部江苏连云港222004

目的探讨南葶苈子提取物对哮喘大鼠肺组织中CyclinD1、PI3K表达的影响。方法将100只SD大鼠分随机分为空白组、模型组、地塞米松组、南葶苈子醇提物组、南葶苈子水提物组,每组20只。除空白组外,其余各组均以卵蛋白致敏结合寒冷刺激构建... 详细信息

目的探讨南葶苈子提取物对哮喘大鼠肺组织中CyclinD1、PI3K表达的影响。方法将100只SD大鼠分随机分为空白组、模型组、地塞米松组、南葶苈子醇提物组、南葶苈子水提物组,每组20只。除空白组外,其余各组均以卵蛋白致敏结合寒冷刺激构建哮喘模型,造模第21天灌胃给药,地塞米松组灌胃给予0.4 mg/kg地塞米松片(研碎后溶于生理盐水),南葶苈子水提物、醇提物组灌胃给予南葶苈子水提物、醇提物10 g/kg,空白组和模型组灌胃给予等体积生理盐水,每天1次,连续8周。末次给药后,采用免疫组化法检测肺组织中CyclinD1蛋白表达,实时荧光定量PCR检测各组大鼠肺组织中PI3K mRNA表达。结果给药前,各造模组大鼠肺组织中CyclinD1蛋白、PI3K mRNA表达均高于空白组(P南葶苈子提取物抗哮喘作用可能是通过调节肺组织中CyclinD1蛋白、PI3K mRNA表达起效。

关键词：南葶苈子水提物醇提物哮喘 CyclinD1 PI3K

南葶苈子抑制氧化应激与自噬通路抗H_2O_2诱导的H9c2细胞损伤作用研究

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中草药 2019年第1期50卷 157-165页

作者：郑晓珂杨方方张莉白志尧曾梦楠樊慧冯卫生河南中医药大学药学院河南郑州450046 呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心河南郑州450046

目的探究南葶苈子水提物(DS)对H_2O_2诱导的心肌H9c2细胞损伤的保护作用及潜在机制。方法使用高效液相色谱与质谱联用方法分析鉴定DS中主要成分峰。采用H_2O_2处理制备H9c2细胞损伤模型,分为对照组、模型组、普罗布考组及DS 100、200、... 详细信息

目的探究南葶苈子水提物(DS)对H_2O_2诱导的心肌H9c2细胞损伤的保护作用及潜在机制。方法使用高效液相色谱与质谱联用方法分析鉴定DS中主要成分峰。采用H_2O_2处理制备H9c2细胞损伤模型,分为对照组、模型组、普罗布考组及DS 100、200、400μg/m L组,MTT法检测H9c2细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞自噬水平、线粒体膜电位;试剂盒检测细胞氧化应激相关指标;Incell-Western法检测凋亡通路关键蛋白和自噬标志性蛋白表达水平。结果共分析鉴定了DS中含量最高的7种成分。与模型组比较,DS可以提高H9c2细胞活力(P<0.05、0.01)与细胞存活率(P<0.01),改善线粒体膜电位水平(P<0.01),调节凋亡通路关键蛋白Caspase-3和Bax/Bcl-2蛋白表达(P<0.01),抑制心肌细胞凋亡;并能极显著降低细胞自噬水平(P<0.01),升高自噬标志性蛋白自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)、p62表达水平(P<0.01),抑制心肌细胞自噬;降低心肌活性氧(ROS)水平(P<0.01),调节细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)水平(P<0.01),改善心肌细胞氧化应激。结论 DS可以有效保护由H_2O_2引起的H9c2细胞损伤,其机制可能与改善细胞的氧化应激、抑制细胞凋亡和自噬有关,其物质基础可能与所含的黄酮苷类成分有关。

关键词：南葶苈子心脏疾病氧化应激自噬线粒体凋亡途径

南葶苈子水提物对多柔比星诱导H9c2细胞凋亡和氧化应激的抑制作用

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中国药学杂志 2018年第23期53卷 1999-2007页

作者：冯卫生杨方方张莉杨雁芸白志尧李孟樊慧栗萌萌郑晓珂河南中医药大学药学院郑州450046 呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心郑州450046

目的探明南葶苈子水提物对多柔比星(doxorubicine,Dox)引起的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及潜在机制。方法应用5μg·m L^(-1)Dox处理H9c2细胞诱导建立心肌细胞损伤模型,分为对照组、模型组、阳性组、南葶苈子水提物不同剂量给药组,检... 详细信息

目的探明南葶苈子水提物对多柔比星(doxorubicine,Dox)引起的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及潜在机制。方法应用5μg·m L^(-1)Dox处理H9c2细胞诱导建立心肌细胞损伤模型,分为对照组、模型组、阳性组、南葶苈子水提物不同剂量给药组,检测细胞活力,凋亡率,线粒体膜电位,细胞活性氧(ROS)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平,凋亡通路关键蛋白p53、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达水平,使用UPLC-MS联用的方法分析鉴定南葶苈子水提物中主要成分峰。结果南葶苈子水提物能提高H9c2细胞活力(P 南葶苈子水提物中7种含量最高的成分。结论南葶苈子水提物可以有效保护由Dox引起的H9c2细胞损伤,其机制可能与改善细胞的氧化应激,抑制内源性凋亡通路,而抑制细胞凋亡的发生有关。

关键词：南葶苈子 H9c2细胞凋亡氧化应激

南葶苈子中的指标成分槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺部免疫功能调节机制研究

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中草药 2019年第4期50卷 910-917页

作者：张桐茂刘炜孔德颖天津医科大学第二医院中医科天津300210

目的研究南葶苈子中的指标成分槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(QGG)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺部免疫功能调节机制,阐释南葶苈子止咳平喘功效的物质基础与科学内涵。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组及QGG高(QGGH... 详细信息

目的研究南葶苈子中的指标成分槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(QGG)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺部免疫功能调节机制,阐释南葶苈子止咳平喘功效的物质基础与科学内涵。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组及QGG高(QGGH)、中(QGGM)、低(QGGL)剂量(0.20、0.15、0.10 g/kg)组和阳性对照氨茶碱(0.09 g/kg)组,连续8周采用香烟熏暴露联合细菌感染的方法制备COPD稳定期大鼠模型。各给药组大鼠于烟熏5周后开始ig给药,连续28 d。采用荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测大鼠肺组织中Th17和Treg细胞特异性转录因子RORγt和FOXP3 mRNA表达水平;流式细胞仪检测Th17/Treg细胞比例;TUNEL法观察QGG对大鼠肺组织细胞凋亡的影响;Western blotting法检测大鼠肺组织蛋白提取液中凋亡相关蛋白(cytoC、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2)及胞质转录因子-κBp65(NF-κBp65)和胞核NF-κBp65的表达。结果对照组大鼠体质量增长率随周龄增长而明显增加,模型组大鼠体质量在第1～8周增长率变化缓慢。与模型组比较,QGGH和氨茶碱组大鼠体质量增长率从第5周开始呈增长趋势,而QGGM、QGGL组大鼠体质量增长缓慢。q RT-PCR检测结果显示,与对照组比较,模型组大鼠肺组织中Treg和Th17细胞相关转录因子FOXP3和RORγt的表达水平显著增高(P<0.05),FOXP3与RORγt比值显著升高。与模型组比较,QGGH组和阳性对照组大鼠FOXP3和RORγt的表达均显著降低(P<0.05),且QGGH组效果优于氨茶碱组。流式细胞仪检测结果表明,与模型组比较,QGGH组大鼠外周血中CD4^+IL-17^+/CD4^+和CD4^+FOXP3+/CD4^+的表达均显著下调(P<0.05);CD4^+IL-17^+/CD4^+FOXP3+显著降低(P<0.05)。氨茶碱组大鼠外周血中Th17和Treg细胞相关的表达与QGGH组相近,但是CD4^+IL-17^+/CD4^+FOXP3+无明显差异。与对照组比较,模型组大鼠肺组织细胞凋亡显著增加。与模型组比较,QGGH组和氨茶碱组大鼠肺组织细胞凋亡显著减少(P<0.05),QGGM、QGGL组改变不明显。与对照组比较,模型组大鼠肺组织Bax、cytoC、Caspase-9、Caspase-3、胞核NF-κBp65表达水平显著升高(P<0.05),而Bcl-2、胞质NF-κBp65表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,QGGH组和氨茶碱组大鼠肺组织Bax、cytoC、Caspase-9、Caspase-3、胞核NF-κBp65表达水平显著降低(P<0.05),而Bcl-2、胞质NF-κBp65表达水平显著升高(P<0.05)。结论 QGG可以显著改善COPD模型大鼠的生存状态、体质量,降低外周血CD4^+IL-17^+/FOXP3+CD4^+,调控Treg和Th17特征性转录因子FOXP3和RORγt的基因表达,平衡外周血中Th17与Treg比例,抑制肺组织细胞凋亡,修复损伤的组织,维持器官功能的完整性。

关键词：南葶苈子慢性阻塞性肺疾病槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷细胞凋亡辅助性T细胞17 调节性T细胞

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南葶苈子与白芥子寒热药性的细胞学方法评价

中华中医药杂志 2021年第5期36卷 2949-2952页

作者：赵文杰范铭沁姚方圆孙艳妮刘建利张宁西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室西北大学生命科学学院西安710069

目的:用细胞学方法评价南葶苈子与白芥子的寒热药性。方法:用噻唑蓝(MTT)比色法考察南葶苈子与白芥子对HepG2细胞、SMMC7721细胞、HCT116细胞体外增殖的影响,倒置显微镜观察南葶苈子与白芥子对细胞形态的影响,台盼蓝染色法分析南葶苈子... 详细信息

目的:用细胞学方法评价南葶苈子与白芥子的寒热药性。方法:用噻唑蓝(MTT)比色法考察南葶苈子与白芥子对HepG2细胞、SMMC7721细胞、HCT116细胞体外增殖的影响,倒置显微镜观察南葶苈子与白芥子对细胞形态的影响,台盼蓝染色法分析南葶苈子与白芥子的细胞毒作用。结果:南葶苈子在2~800μg/mL浓度范围内对3种细胞的生长增殖表现出抑制作用,随着浓度的增大,抑制率增大,判定为寒性;白芥子在2~800μg/mL浓度范围内对3种细胞的生长增殖表现出低浓度促进、高浓度抑制作用,判定为热性。南葶苈子能使细胞密度减小,固缩变圆;白芥子低浓度下使细胞密度增加,细胞结构致密,生长旺盛,高浓度下使细胞密度降低,固缩变圆。南葶苈子与白芥子对于这3种细胞没有细胞毒作用。结论:南葶苈子和白芥子寒热药性细胞学方法评价结果与文献记载一致;细胞学方法可用于南葶苈子与白芥子寒热药性研究。

关键词：南葶苈子白芥子 MTT法 Hep G2细胞 SMMC7721细胞 HCT116细胞台盼蓝染色寒热药性

基于3种色谱质谱联用技术的南葶苈子和北葶苈子脂质成分分析

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中草药 2023年第2期54卷 484-497页

作者：李萍姚长良张建青姚帅果德安南京中医药大学新中药学院江苏南京210023 中国科学院上海药物研究所中药标准化技术国家工程研究中心上海201200

目的阐明南葶苈子Descurainiae Semen和北葶苈子Lepidii Semen中脂质成分的物质基础,并比较基于反相色谱串联四极杆飞行时间质谱(reverse phase liquid chromatography tandem quadrupole time of flight mass spectrometry,RPLC-Q-TOFMS)、超高效合相色谱串联四极杆飞行时间质谱(ultra performance convergence chromatography-Q-TOF-MS,UPCC-Q-TOFMS)与亲水相互作用色谱串联四极杆飞行时间质谱(hydrophilic interaction liquid chromatography-Q-TOF-MS,HILIC-Q-TOFMS)3种技术对脂质成分的鉴定效果。方法采用RPLC、UPCC与HILIC 3种分离模式分别串联Q-TOF-MS深入解析种子类中药南葶苈子和北葶苈子中的脂质成分。以Waters Acquity HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm)为反相色谱柱,Waters ACQUITY UPCC®TORUS 2-PIC(100 mm×3.0 mm,1.7μm)为合相色谱柱,Waters BEH HILIC(100 mm×2.1 mm,1.7μm)为亲水相互作用色谱柱,在正离子模式下采集南葶苈子和北葶苈子中脂质成分的质谱数据。通过MS Dial软件Lipidomics数据库自动匹配并进行人工确认,实现对南葶苈子和北葶苈子中脂质成分的分析和鉴定。结果共鉴定出191个脂质成分,包括三酰甘油、甘油二酯、磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰胆碱和磷脂酰肌醇。结论阐明了南葶苈子和北葶苈子中脂质成分的物质基础,为南葶苈子和北葶苈子的临床应用、质量控制及制剂开发提供实验依据,也为种子类中药中脂质成分的分析提供参考。

关键词：南葶苈子北葶苈子脂质成分四极杆飞行时间质谱三酰甘油甘油二酯磷脂酰乙醇胺溶血磷脂酰乙醇胺磷脂酰胆碱溶血磷脂酰胆碱磷脂酰肌醇

南葶苈子中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷的稳定性考察

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中华中医药杂志 2020年第11期35卷 5739-5742页

作者：王文平吴慧敏刘曼婷许煜晨尹兴斌倪健北京中医药大学中药学院北京102488

目的:探究南葶苈子药材中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷(槲皮素双糖苷)的稳定性,为南葶苈子在临床上的合理应用提供借鉴和参考。方法:采用经典恒温法考察了该成分在水溶液中的热稳定性,得出了不同温度下的反应速率方程,... 详细信息

目的:探究南葶苈子药材中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷(槲皮素双糖苷)的稳定性,为南葶苈子在临床上的合理应用提供借鉴和参考。方法:采用经典恒温法考察了该成分在水溶液中的热稳定性,得出了不同温度下的反应速率方程,推算出了其有效期和半衰期;以lgK(K为反应速率常数)对1/T进行一元线性回归,得到回归方程;考察该成分在不同pH、不同溶剂以及不同浓度条件下的稳定性情况。结果:该成分在80、100℃条件下加热10h后,含量分别降至初始含量的50.1%、5.4%,热降解规律符合零级反应方程。温度为60、80、100℃时的有效期分别为7.71、2.95、2.39h,半衰期分别为58.29、7.54、5.07h。另外,在pH>6条件下,该成分发生大量降解,为碱催化反应。结论:南葶苈子中的槲皮素双糖苷不稳定,在制剂生产过程中应进行相应条件控制。

关键词：南葶苈子槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷热稳定性 pH值

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南葶苈子清炒炮制工艺研究

中国新药杂志 2016年第1期25卷 98-101,112页

作者：李红伟司金光石延榜孟祥乐匡海学郑晓珂冯卫生河南中医学院药学院郑州450046 呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心郑州450046 河南中医学院第一附属医院郑州450000 黑龙江中医药大学药学院哈尔滨150040

目的:优选南葶苈子清炒炮制的最佳工艺。方法:采用HPLC和UV进行含量测定,以加热火力和加热时间为变量,进行均匀试验设计,以外观性状、水溶性浸出物、总黄酮、脂肪油、芥子碱硫氰酸盐和多糖含量5个方面为考察指标。结果:南葶苈子清炒炮... 详细信息

目的:优选南葶苈子清炒炮制的最佳工艺。方法:采用HPLC和UV进行含量测定,以加热火力和加热时间为变量,进行均匀试验设计,以外观性状、水溶性浸出物、总黄酮、脂肪油、芥子碱硫氰酸盐和多糖含量5个方面为考察指标。结果:南葶苈子清炒炮制的最佳工艺为南葶苈子文火火力200℃,加热4 min。结论:清炒法炮制南葶苈子,炒作工艺简便、稳定、量化可控。

关键词：南葶苈子炮制水溶性浸出物总黄酮脂肪油芥子碱硫氰酸盐

南葶苈子化学成分的UPLC/Q-TOF-MS/MS分析(英文)

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Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2015年第5期24卷 303-309页

作者：孟作环乔莉王宗权马振嗣贾继明常青鲜李文列河北省中西医结合医药研究院河北石家庄050035 河北以岭医药研究院有限公司河北石家庄050035

对南葶苈子标准品建立了UPLC/Q-TOF-MS/MS方法,根据质谱特征指认了14个化学成分,包括9个黄酮类,4个脂肪酸类和1个强心苷类,其中槲皮素-3-O-β-D-[6-O-芥子酰基-2-O-β-D-吡喃葡萄糖基]-吡喃葡萄糖苷为南葶苈子首次报道。

关键词：南葶苈子 UPLC/Q—TOF—MS/MS 化学成分分离鉴定