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南京椴群体遗传多样性和遗传结构分析

南京林业大学学报（自然科学版） 2023年第1期47卷 145-153页

作者：王欢利严灵君黄犀王仲伟汤诗杰江苏省中国科学院植物研究所江苏省植物资源研究与利用重点实验室江苏南京210014

【目的】南京椴(Tilia miqueliana)为江苏省重要的乡土树种,野外资源稀缺。南京椴野外群体遗传多样性和遗传结构的探索,可为资源保护、品种选育及遗传改良提供依据。【方法】以南京椴5个天然群体[江苏宝华山(P1)、牛首山(P2)、安徽皇藏... 详细信息

【目的】南京椴(Tilia miqueliana)为江苏省重要的乡土树种,野外资源稀缺。南京椴野外群体遗传多样性和遗传结构的探索,可为资源保护、品种选育及遗传改良提供依据。【方法】以南京椴5个天然群体[江苏宝华山(P1)、牛首山(P2)、安徽皇藏峪(P3)、安徽蜀山(P4)和浙江天台山(P5)]93个体为实验材料,选用15对多态性EST-SSR引物,进行遗传多样性及群体遗传结构分析。【结果】(1)用15对引物共检测等位基因数(A)总和为96,平均值为6.4,四倍体基因型(G)和四倍体特异基因型(Gi)总和分别为441和251,特异基因型比率(R1)和种质鉴别率(R^(2))均值分别为45.73%和17.99%。(2)在5个群体中,每个位点等位基因数(Aloc)和四倍体基因型丰富度均值(Gloc)分别为5.50±2.43和9.41±4.29;平均观测杂合度(Ho)和平均期望杂合度(He)为0.61±1.43和0.62±0.14。参考各群体Gloc和He值,确定遗传多样性较高的群体为P1和P3。(3)群体间遗传分化较小,遗传分化系数(Gst)仅为0.030;AMOVA分子变异分析显示,群体多样性水平变异来自于群体内(96%)。(4)聚类和遗传结构Structure分析显示,5个群体可划分为2组(组1包括P1、P2和P5;组2包括P3和P4)。Mental检验结果表明遗传距离与地理距离之间无显著相关。【结论】南京椴群体均具有丰富的遗传多样性,其中宝华山群体和皇藏峪群体多样性较高,群体扩张可能是以这两个种群为中心,经人类活动迁移至其他区域。但南京椴群体间未形成明显分化,主要是由于植株寿命长,群体缺乏自然更新,加之群体间存在人为种子传播。因此,本研究提出通过建立隔离区,明确优先保护群体、加大植株异交,并采用人工繁育及种质回迁的方式保护南京椴野外群体。

关键词：南京椴 SSR标记遗传结构遗传多样性

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南京椴嫩枝扦插生根过程中植物激素的变化

中南林业科技大学学报 2019年第2期39卷 21-26页

作者：史锋厚赵瑞罗帅郑晨沈永宝南京林业大学林学院江苏南京210037 南京林业大学南方现代林业协同创新中心江苏南京210037 浙江省浦江县郑家坞镇政府浙江浦江322206

以南京椴嫩枝插穗为研究对象,采用1 000 mg·kg-1 IBA粉剂处理插穗基部,对扦插生根过程中插穗皮部生长素IAA、玉米素核苷ZR、赤霉素GA3、脱落酸ABA含量以及IAA/ABA和IAA/ZR比值进行动态测定,探究嫩枝扦插生根过程中植物激素变化特点及... 详细信息

以南京椴嫩枝插穗为研究对象,采用1 000 mg·kg-1 IBA粉剂处理插穗基部,对扦插生根过程中插穗皮部生长素IAA、玉米素核苷ZR、赤霉素GA3、脱落酸ABA含量以及IAA/ABA和IAA/ZR比值进行动态测定,探究嫩枝扦插生根过程中植物激素变化特点及其对生根的影响。结果表明:1)IBA处理可以显著促进南京椴嫩枝插穗生根,生根率接近67%;其生根过程可划分为愈伤组织形成期、根原基诱导期、不定根形成期和不定根生长期,各自对应时间约为10 d。2)IBA处理可以提高嫩枝插穗中IAA含量,IAA对于根原基的诱导和不定根的发生具有较为直接的影响作用,其含量升高有利于生根;GA3含量增加有利于根原基形成,而低水平GA3则更有利于不定根的生长;ABA和ZR含量升高不利于插穗生根,对于根原基的诱导和不定根的发生具有抑制作用;IAA、ABA在插穗根原基诱导和不定根形成过程中具有相互协调作用,IAA/ABA可作为衡量南京椴嫩枝扦插生根能力的指标。3)外源IBA处理可以促进插穗内IAA含量升高,调节ABA、ZR、GA3含量降低,促使IAA/ABA在诱导生根期快速增大,通过相关激素的调控,使插穗向有利于促进生根的生理状态转变。

关键词：南京椴嫩枝扦插生根 IBA 植物激素

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南京椴HMGR基因的克隆和功能验证

植物研究 2012年第2期32卷 198-203页

作者：郑竹君曹小迎刘群李长根卢芳蒋继宏徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室徐州221116 徐州师范大学生命科学学院徐州221116

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR)是植物萜类代谢中甲羟戊酸途径的关键酶,本研究运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,首次从珍稀植物南京椴中克隆出HMGR的全长基因TmiHMGR,其长度为2160 bp... 详细信息

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR)是植物萜类代谢中甲羟戊酸途径的关键酶,本研究运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,首次从珍稀植物南京椴中克隆出HMGR的全长基因TmiHMGR,其长度为2160 bp,包含一个1758 bp的开放阅读框,其推导蛋白TmiHMGR编码585个氨基酸残基,相对分子量为62.9 kD,pI为6.11。将TmiHMGR与其他植物HMGR氨基酸序列构建进化树,结果显示Tmi-HMGR与苹果的HMGR聚为一枝。采用半定量RT-PCR分析TmiHMGR在根、茎和叶中的表达情况,结果表明该基因在茎中的表达量最高,根和叶中的表达量相对较弱。验证功能的颜色互补实验结果显示,TmiHMGR能够使代谢流明显朝类胡萝卜素合成的方向进行,说明TmiHMGR在萜类产物生物合成中是一个重要因子。

关键词：南京椴 3-羟基.3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因克隆功能验证

南京椴花化学成分鉴定及不同发育时期黄酮类化合物差异分析

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西北植物学报 2024年第2期44卷 270-279页

作者：原晓王欢利王奇志黄犀严灵君汤诗杰南京中医药大学南京210023 江苏省中国科学院植物研究所南京210014 江苏省植物资源研究与利用重点实验室南京210014

【目的】研究南京椴花化学成分及其主要成分黄酮类化合物在不同发育时期的变化规律,为后续采用多组学手段探究椴树花中重要药用化合物的代谢通路及调控机制解析奠定基础,同时为椴树花的采收提供理论依据。【方法】以10年生南京椴为试验... 详细信息

【目的】研究南京椴花化学成分及其主要成分黄酮类化合物在不同发育时期的变化规律,为后续采用多组学手段探究椴树花中重要药用化合物的代谢通路及调控机制解析奠定基础,同时为椴树花的采收提供理论依据。【方法】以10年生南京椴为试验材料,用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)技术分析南京椴花中代谢物组分及类黄酮含量差异。【结果】(1)南京椴花中共鉴定得到46种化合物,其中有机酸及其衍生物13种、香豆素及其衍生物4种、酯1种、类黄酮28种。(2)盛花期是南京椴花中代谢物发生显著变化的分界点,与蕾期相比,开花期间代谢物变化更明显。(3)多重比较分析显示:26种黄酮类化合物在不同时期花中含量差异显著(P南京椴花中次级代谢物含量的重要因素,末蕾期的标志性化合物是原花青素A2,盛花期的标志性化合物是芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸,末蕾期和盛花期均具有采收价值。

关键词：南京椴椴花代谢组学黄酮类化合物 UPLC-MS/MS

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南京椴花粉贮藏寿命的研究

南京林业大学学报（自然科学版） 2009年第2期33卷 141-144页

作者：高芬沈永宝南京林业大学风景园林学院江苏南京210037 南京林业大学森林资源与环境学院江苏南京210037

采用TTC法对不同贮藏条件下的南京椴花粉生活力进行测定。结果表明:南京椴花粉的寿命相对较短,临界含水量为8.99%。在此含水量下,贮藏温度为-25℃时,经过8 d贮藏,花粉生活力从75%下降到56%,经过180 d贮藏,花粉生活力仅有25%。此外,新采... 详细信息

采用TTC法对不同贮藏条件下的南京椴花粉生活力进行测定。结果表明:南京椴花粉的寿命相对较短,临界含水量为8.99%。在此含水量下,贮藏温度为-25℃时,经过8 d贮藏,花粉生活力从75%下降到56%,经过180 d贮藏,花粉生活力仅有25%。此外,新采集南京椴花粉的含水量为9.55%,可以不经干燥,直接在-18℃下保存。

关键词：南京椴花粉贮藏花粉寿命

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南京椴和心叶椴苗期光合特性比较

南京林业大学学报（自然科学版） 2010年第2期34卷 133-136页

作者：尹中明戴晓港沈永宝上海市林业总站上海200072 南京林业大学森林资源与环境学院江苏南京210037

利用Li-6400便携式光合作用测定仪,分别测定南京椴(Tilia miqueliana)和心叶椴(***-data)2年生苗木叶片的净光合速率(Pn)、气孔导度(Cond)、蒸腾速率(Tr)和胞间CO2浓度(Ci)等指标的日变化,对两树种光合特性进行对比分析。结果表明:8月... 详细信息

利用Li-6400便携式光合作用测定仪,分别测定南京椴(Tilia miqueliana)和心叶椴(***-data)2年生苗木叶片的净光合速率(Pn)、气孔导度(Cond)、蒸腾速率(Tr)和胞间CO2浓度(Ci)等指标的日变化,对两树种光合特性进行对比分析。结果表明:8月中旬天气晴朗时,两种椴树净光合速率、气孔导度和蒸腾速率均呈双峰曲线,胞间CO2浓度变化呈单谷曲线;两树种的光补偿点分别为36.2μmol/(m2.s)和22.8μmol/(m2.s),光饱和点分别为1384.8μmol/(m2.s)和1216.5μmol/(m2.s),CO2补偿点分别为76.4μmol/mol和80.9μmol/mol,CO2饱和点则分别为1872.5μmol/mol和1655μmol/mol。基于对这两个树种净光合作用的分析,笔者发现南京椴净光合速率日均值大于心叶椴。

关键词：南京椴心叶椴光合特性苗木

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南京椴组织培养快繁体系的优化

分子植物育种 2019年第5期17卷 1605-1610页

作者：束晓春汤诗杰李乃伟秦亚龙王欢利王仲伟江苏省中国科学院植物研究所南京210014

为优化南京椴腋芽途径的再生快繁体系,本研究以南京椴无菌苗带腋芽茎段为外植体,探索不同继代周期、光照强度以及激素条件对南京椴继代繁殖系数的影响。结果表明南京椴组培苗在继代周期28 d条件下繁殖倍数优于21 d、35 d和40 d;2 500 l... 详细信息

为优化南京椴腋芽途径的再生快繁体系,本研究以南京椴无菌苗带腋芽茎段为外植体,探索不同继代周期、光照强度以及激素条件对南京椴继代繁殖系数的影响。结果表明南京椴组培苗在继代周期28 d条件下繁殖倍数优于21 d、35 d和40 d;2 500 lx的光照强度优于2 000 lx和3 000 lx,可以有效防止南京椴继代苗玻璃化现象,显著提高萌发率和增加有效腋芽数;添加0.5 mg/L BA+0.01 mg/L IBA的MS培养基,可使繁殖系数达7.53。本研究优化了南京椴腋芽途径的再生体系,为种苗繁育和遗传转化提供了技术支持。

关键词：南京椴腋芽继代系数

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南京椴花芽分化研究

南京林业大学学报（自然科学版） 2008年第4期32卷 55-58页

作者：高芬沈永宝南京林业大学风景园林学院江苏南京210037 南京林业大学森林资源与环境学院江苏南京210037

利用石蜡切片法观察南京椴花芽分化过程。结果表明：南京椴越冬休眠芽为混合芽，萌发后叶腋处形成花芽。花芽分化时期为当年3月底至5月初，历时35～40d，具有分化时间短、速度快的特点。花芽分化包括花序分化和小花分化两个过程，可划... 详细信息

利用石蜡切片法观察南京椴花芽分化过程。结果表明：南京椴越冬休眠芽为混合芽，萌发后叶腋处形成花芽。花芽分化时期为当年3月底至5月初，历时35～40d，具有分化时间短、速度快的特点。花芽分化包括花序分化和小花分化两个过程，可划分为花芽分化始期、花序原基分化期、小花原基分化期、花萼原基分化期、花瓣原基分化期、雄蕊原基分化期、雌蕊原基分化期等7个时期。

关键词：南京椴花芽分化石蜡切片法

基于RAPD标记的5个南京椴居群遗传多样性分析

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植物资源与环境学报 2013年第3期22卷 70-74页

作者：汤诗杰郑玉红汤庚国江苏省.中国科学院植物研究所(南京中山植物园) 江苏南京210014 南京林业大学森林资源与环境学院江苏南京210037

采用RAPD标记技术，对分布于江苏省（紫金山、牛首山和宝华山）及安徽省（皇藏峪和琅琊山）的5个南京椴（Tili amiqueliana Maxim．）居群的遗传多样性进行了分析，并采用UPGMA聚类方法研究了5个居群的遗传关系。结果表明：使用10条多... 详细信息

采用RAPD标记技术，对分布于江苏省（紫金山、牛首山和宝华山）及安徽省（皇藏峪和琅琊山）的5个南京椴（Tili amiqueliana Maxim．）居群的遗传多样性进行了分析，并采用UPGMA聚类方法研究了5个居群的遗传关系。结果表明：使用10条多态性引物从5个居群的总DNA中扩增出169条带，其中多态性条带151条，多态性条带百分率达89．34％。各居群的多态性条带百分率（PPB）、有效等位基因数（Ne）、Nei’S基因多样度（h）和Shannon’S多样性指数（，）均有明显差异，其中，宝华山居群的各项指标均最高，紫金山和牛首山居群的PPB值最低，琅琊山居群的舭值最低，紫金山居群的h和，值均最低。5个居群的，、h和舭值分别为0．2430～0．3351、0．1544～0．2182和1．2489～1．3627；在种水平上的，h和，ve值分别为0．3594、0．2236和1．3529。居群内变异占总变异的75．95％，居群间变异占总变异的24．05％。居群内和居群间的基因多样度分别为0．2185和0．1732，物种水平上的基因分化系数为0．2075，居群间的基因流为1．9093。各居群问的遗传距离差异较大；其中，皇藏峪与牛首山居群的遗传距离最近，仅为0．0265；宝华山与紫金山居群的遗传距离最远，为0．1344。通过聚类分析可将5个南京椴居群分为3支，宝华山和琅琊山居群各自独立为2支，皇藏峪、紫金山和牛首山居群聚为1支，且可进一步分为2个亚支，皇藏峪居群为1个亚支、紫金山和牛首山居群聚为1个亚支。研究结果表明：南京椴居群内的遗传多样性较高，但居群内的变异占主导地位，居群问存在明显的遗传分化。

关键词：南京椴 RAPD标记居群变异遗传多样性基因分化聚类分析