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稻白叶枯病菌不同毒力单细胞系互作关系及田间自然群体毒力组成初析

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植物病理学报 2002年第1期32卷 37-42页

作者：于大胜成国英华中农业大学植保系武汉430070

稻白叶枯病菌不同毒力的单细胞系混合组配后的致病力随着不同毒力菌所占的比例、彼此之间及与寄主之间的相互作用而发生相应变化 ;同一病田不同病株分离菌以及同一叶片不同叶位段分离菌 ,均存在致病力的分化 ;表明稻白叶枯菌在同一块田... 详细信息

稻白叶枯病菌不同毒力的单细胞系混合组配后的致病力随着不同毒力菌所占的比例、彼此之间及与寄主之间的相互作用而发生相应变化 ;同一病田不同病株分离菌以及同一叶片不同叶位段分离菌 ,均存在致病力的分化 ;表明稻白叶枯菌在同一块田、甚至同一病叶上都存在不同的毒力细胞。稻株发病程度 ,是在一定生态条件下 ,不同毒力的多细胞入侵和协同互作的结果。所以采用“段叶沙培切口取菌胶”法所得的分离株 ,是含不同毒力细胞的混合体。测定一定数量的此类菌株的致病型分化 ,即是对田间病菌自然群体毒力组成的表型反应。来自同一田块的 36株分离菌的致病型测定结果与从 4 8县采集的 2 0 8个菌株所测定的结果非常一致 ,因此 ,对一块稻田的病菌的毒力分化测定 ,可以作为对相似生态条件下的广大稻区病菌自然群体毒力组成监测的参考。

关键词：毒力单细胞系稻白叶枯菌互作关系自然群体毒力组成致病力

水稻白叶枯病菌的母株与单细胞系的遗传与致病性差异的分析

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微生物学通报 2008年第12期35卷 1999-1999页

作者：邱并生 <微生物学通报>编委会北京100101

由水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae ***）引发的稻白叶枯病是水稻生产上的重要病害。水稻白叶枯菌自然群体是由包括基本无毒性的弱毒菌在内的不同致病型组成的混合群体，代表自然群体的原始菌株的致病力与其毒力结构紧密相关。常规... 详细信息

由水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae ***）引发的稻白叶枯病是水稻生产上的重要病害。水稻白叶枯菌自然群体是由包括基本无毒性的弱毒菌在内的不同致病型组成的混合群体，代表自然群体的原始菌株的致病力与其毒力结构紧密相关。常规划分的致病型，是田间病菌群体毒力结构的表型反应；稻株发病程度，是在一定生态条件下，不同毒力的多细胞入侵和协同互作的结果。遗传分群与菌株的致病性之间及地理来源具有一定的相关性。

关键词：水稻白叶枯病原菌单细胞系遗传变异毒力分化

拟南芥愈伤组织启动子甲基化图谱及干细胞转录组分析

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拟南芥愈伤组织启动子甲基化图谱及干细胞转录组分析

作者：李强山东大学

学位级别：硕士

植物离体器官发生(in vitro organogenesis)是指植物由组织或者细胞团(愈伤组织)再分化成根、芽等器官或者离体苗的过程。其理论基础是植物细胞的全能性。DNA甲基化在植物离体器官发生中起重要作用,主要研究集中中全基因组DNA水平的甲... 详细信息

植物离体器官发生(in vitro organogenesis)是指植物由组织或者细胞团(愈伤组织)再分化成根、芽等器官或者离体苗的过程。其理论基础是植物细胞的全能性。DNA甲基化在植物离体器官发生中起重要作用,主要研究集中中全基因组DNA水平的甲基化特征上,而有关基因启动子DNA甲基化研究尚刚刚开始。植物干细胞是一类未分化的细胞,具有维持自身干细胞的特性并进行自我更新,为形成组织器官提供先导细胞的能力。近年来,动物离体干细胞维持与分化相关研究已多有报道,但有关植物干细胞在离体培养下如何维持与分化的研究尚未见报道。离体干细胞与非干细胞分离及其转录组差异比较研究为揭示植物干细胞基本的特征提供了一个新的研究路线。本研究建立了胚性愈伤组织(NC)与单细胞来源的非胚性愈伤组织(S-NRC)的启动子DNA甲基化图谱,比较了二者的甲基化水平差异,并结合二者的转录组信息,筛选了受DNA甲基化调控的离体苗再生相关候选基因,分析了部分候选基因的甲基化水平和表达水平,发现了候选基因PRF的甲基化水平与表达水平呈负相关,且参与了离体苗再生。另一方面,利用拟南芥pCLV3::GFP::GUS转基因植株,建立了干细胞(带有CLV3的GFP荧光信号)和非干细胞(不具有荧光信号)的转录组图谱,筛选了在干细胞特异表达的候选基因,为进一步的深入研究它们在干细胞维持与分化中作用奠定了基础。主要研究过程和成果如下:1拟南芥DNA启动子甲基化对离体苗再生作用研究1.1拟南芥胚性与非胚性愈伤组织的获得拟南芥Col-0种子经愈伤组织诱导、继代培养,获得具有高频率植株再生能力的胚性愈伤组织(RC);实验室已有的非胚性愈伤组织(NRC)经液体悬浮及原生质体培养,形成了多个单细胞克隆,分化培养后发现,每个单细胞克隆均不能再生植株,为单细胞来源的非胚性愈伤组织(S-NRC)。1.2.拟南芥RC与S-NRC的启动子DNA甲基化图谱的建立及其差异比较1.2.1 RC与S-NRC启动子甲基化水平差异比较建立了 RC与S-NRC的启动子甲基化图谱,比较了两者之间启动子甲基化水平差异,发现它们在全基因组水平上有34%的基因启动子甲基化水平存在明显差异。RC和NRC中存在6379个甲基化水平存在差异的基因,其中3150个基因在RC中发生高度甲基化,3229个基因在NRC中发生高度甲基化。1.2.2 DNA甲基化水平差异显著且参与离体苗再生的候选基因筛选筛选出额212个在RC及NRC中DNA甲基化水平差异明显,且可能参与离体苗再生(包括:细胞分化与增殖、植物发育、分生组织建立、细胞周期与分裂、生长素及细胞分裂素响应等信号转导相关基因)的候选基因。1.2.3DNA甲基化图谱与基因表达谱比较及甲基化与基因表达的关系分析利用实验室已建立的RN和S-NRC基因表达谱,结合甲基化图谱,分析了启动子甲基化和基因表达之间的对应关系,筛选出234个启动子甲基化水平与表达水平负相关的基因,其中153个在RC中高度甲基化且表达下调,81个在S-NRC中高度甲基化且表达下调。结合功能注释,发现它们中自有24个基因为发生甲基化且可能参与离体苗再生的候选基因。1.2.4候选基因PRF在离体苗再生中的作用选取在RC中高度甲基化且表达下调的候选基因PRF(Plant Regeneration Factor)进行功能鉴定。对PRF的去甲基化突变体(prf-1、prf-2)的离体苗再生能力分析表明,prf-1、prf-2的离体苗再生能力明显低于Col-0,表明PRF的去甲基化降低了离体苗的再生能力。1.2.5 PRF在愈伤组织继代培养过程中的表达模式为了确定PRF表达水平与愈伤组织的胚性保持的相关性,从拟南芥成熟种子来源的愈伤组织中筛选生长缓慢、松散的愈伤组织(分化能力弱),经连续多代的选择和培养,其分化能力逐渐丧失。对PRF表达模式分析发现,随着愈伤组织分化能力的减弱,PRF的表达水平不断提高,推测愈伤组织的胚性丧失与PRF的高表达相关。1.2.5 PRF沉默表达在NRC恢复再生能力中的作用分析将PRFRNAi载体转入不分化愈伤组织NRC中,转基因愈伤组织经分化培养,发现在其松散结构表面上形成了绿色苗状突起,推测其获得了一定程度的分化能力,表明PRF沉默表达可部分恢复NRC的再生能力。2.拟南芥干细胞分选及转录组分析2.1 拟南芥 pCLV3::GFP::GUS、pWUS::GFP::GUS 和 pSTM::GFP::GUS 胚性愈伤组织的获得建立了拟南芥 pCLV3:GFP::GUS、pWUS::GFP::GUS 和 pSTM::GFP::GUS转基因植株的细胞培养体系。GUS活性分析发现,GLUS信号在pCLV3::GFP::GUS细胞系中表达水平最高,选择pCLV3::GFP::GUS系进行干细胞分选及其转录组测序。

关键词：胚性与非胚性愈伤组织离体苗再生启动子甲基化 PRF 单细胞系转录组

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非洲淋巴细胞瘤病毒和胃癌的关系

黑龙江医学 1995年第12期19卷 38-39页

作者：王云丽黑龙江省第二医院

非洲淋巴细胞瘤病毒（EBV）阳性胃癌，在日本人胃癌病例中约占7％。这些非洲淋巴细胞瘤病毒阳性胃癌中，非洲淋巴细胞瘤病毒几乎在所有的肿瘤细胞内存在，并且在非洲淋巴细胞瘤病毒感染肿瘤细胞内有单细胞系的增殖及血清EBV抗体价的上... 详细信息

非洲淋巴细胞瘤病毒（EBV）阳性胃癌，在日本人胃癌病例中约占7％。这些非洲淋巴细胞瘤病毒阳性胃癌中，非洲淋巴细胞瘤病毒几乎在所有的肿瘤细胞内存在，并且在非洲淋巴细胞瘤病毒感染肿瘤细胞内有单细胞系的增殖及血清EBV抗体价的上升等现象，这都提示EBV在这些胃癌的发生发展过程中，可能有着一定关系。EBV有关的胃癌，男性，多在胃的上中部和残留胃好发生，多是中分化型管状腺癌（tub2），充实型低分化腺癌（POr1）和淋巴上皮肿样癌。

关键词：非洲淋巴细胞瘤病毒病毒感染胃上皮细胞组织型淋巴球单细胞系胃癌死亡率腺癌阳性率胃癌细胞

Differential reactivity of mouse monoclonal anti-HBs antibodies with recombinant mutant HBs antigens

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World Journal of Gastroenterology 2006年第33期12卷 5368-5374页

作者： Azam Roohi Yaghoub Yazdani Jalal Khoshnoodi Seyed Mohammad Jazayeri William F Carman Mahmood Chamankhah Manley Rashedan Fazel Shokri Department of Immunology School of Public Health Tehran University of Medical Sciences Tehran Iran Department of Virology School of Public Health Tehran University of Medical Sciences Tehran Iran Division of Virology Institute of Biomedical and Life Science University of Glasgow Glasgow United Kingdom Monoclonal Antibody Research Center Avesina Research Center Tehran Iran

AIM: To investigate the reactivity of a panel of 8 mouse anti-hepatitis B surface antigen (HBsAg) monoclonal antibodies (mAbs) using a collection of 9 recombinant HBsAg mutants with a variety of amino acid substitutions mostly located within the “a” ***: The entire HBs genes previously cloned into a mammalian expression vector were transiently transfected into COS7 cells. Two standard unmutated sequences of the ayw and adw subtypes served as controls. Secreted mutant proteins were collected and measured by three commercial diagnostic immunoassays to assess transfection efficiency. Reactivity of anti-HBs mAbs with mutated HBsAgs was determined by sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).RESULTS: Reactivity of anti-HBs mAbs with mutated HBsAgs revealed different patterns. While three mutants reacted strongly with all mAbs, two mutants reacted weakly with only two mAbs and the remaining proteins displayed variable degrees of reactivity towards different mAbs. Accordingly, four groups of mAbs with different but overlapping reactivity patterns could be envisaged. One group consisting of two mAbs (37C5-S7 and 35C6-S11) was found to recognize stable linear epitopes conserved in all mutants. Mutations outside the “a” determinant at positions 120 (P→S), 123(T→N) and 161(M→T) were found to affect reactivity of these ***: Our findings could have important implications for biophysical studies, vaccination strategies and immunotherapy of hepatitis B virus (HBV) mutants.

关键词：微分单细胞系乙型病毒肝炎病毒抗体被膜抗原

同一田块的白叶枯病菌之间以及模式菌株与其单细胞菌系的毒力比较

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同一田块的白叶枯病菌之间以及模式菌株与其单细胞菌系的毒力比较

中国植物病理学会2004年学术年会

作者：刘晓辉成国英林兴华华中农业大学植科院华中农业大学植科院华中农业大学植科院

用IR24、IRBB4（Xa4）、IRBB5（Xa5）、IRBB7（Xa7）、IRBB11（Xa11）、IRBB13（Xa13）、XM5（Xa19）、M41（Xa15）、IRBB21（Xa21）、丰锦（Xa18）)等十个近等基因系水稻品种作鉴别寄主,对来自同一田块的白叶枯病菌、原中国稻白叶枯病... 详细信息

用IR24、IRBB4（Xa4）、IRBB5（Xa5）、IRBB7（Xa7）、IRBB11（Xa11）、IRBB13（Xa13）、XM5（Xa19）、M41（Xa15）、IRBB21（Xa21）、丰锦（Xa18）)等十个近等基因系水稻品种作鉴别寄主,对来自同一田块的白叶枯病菌、原中国稻白叶枯病菌Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ型模式菌株及其单细胞菌系的毒力进行了测试,结果显示,同一病田不同的分离菌株之间、各模式菌株与其单细胞菌系之间、以及同一母株的不同单细胞菌系之间,都存在致病差异性;这表明:田间病菌的自然群体,是由不同毒力的单细胞菌系组成的复合体,采用“断叶沙培,切口取胶”或划线分离法,得到的一定是含不同毒力细胞的复合菌体。为避免不同毒力细胞菌系的相互干扰,探讨小种分子鉴定系统时,应采用不同毒力的单细胞菌系作为试材。

关键词：白叶枯病菌模式菌株单细胞系毒力比较

来源： cnki会议评论

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人化抗体KB-195的临床试验

生物技术通报 1995年第5期11卷 24-24页

作者：孙国凤

钟纺公司宣布明年4月开始在日本进行人化抗体KB-195(从美国Protein Design Laboratories公司(加利福尼亚州,Mountain View,PDL公司)引进的)的临床试验。估计这是继日本欢迎公司的人化抗体“Campath-1H”之后,又一个在日本临床试验的人... 详细信息

钟纺公司宣布明年4月开始在日本进行人化抗体KB-195(从美国Protein Design Laboratories公司(加利福尼亚州,Mountain View,PDL公司)引进的)的临床试验。估计这是继日本欢迎公司的人化抗体“Campath-1H”之后,又一个在日本临床试验的人化抗体。因此,5个公司正在准备明年在日本进行人化抗体的临床试验。一度降低开发热情的单克隆抗体也通过人化技术再次形成开发浪潮。 KB-195是与在分化成巨噬细胞和嗜中性白细胞的单核细胞系白血球细胞表面的CD33抗原结合的人化抗体。利用基因操作技术将抗原结合部位从与CD33结合的小鼠单克隆抗体移植列入抗体分子中的。因此,用小鼠抗体抑制预想的抗小鼠抗体的发生,可以减轻副作用。加之,人化抗体具有人抗体的固定部位(Fc),也能强诱导抗体依存性细胞伤害作用。一旦给患者注射KB-195,ADCC主要破坏单细胞系细胞。不仅是骨髓性白血病细胞。

关键词：临床试验单克隆抗体单细胞系行人化骨髓性白血病抗原结合部位巨噬细胞基因操作技术骨髓干细胞小鼠

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白细胞上sLe^x合成的关键酶的克隆

生物技术通报 1995年第2期11卷 26-26页

作者：孙国凤

协和发酵公司克隆了特异于白细胞上糖链sLe^x生物合成的α-1,3-岩藻糖转移酶(Fuc-TⅦ)。还确认克隆酶的细胞可接合于Selectin。得知在白细胞浸润于炎症部位时,白细胞上的sLe^x糖链和血管内皮细胞上的Selectin结合。sle^x糖链合成时需要... 详细信息

协和发酵公司克隆了特异于白细胞上糖链sLe^x生物合成的α-1,3-岩藻糖转移酶(Fuc-TⅦ)。还确认克隆酶的细胞可接合于Selectin。得知在白细胞浸润于炎症部位时,白细胞上的sLe^x糖链和血管内皮细胞上的Selectin结合。sle^x糖链合成时需要α-1,3-岩藻糖转移酶和α-2,3-二丙烯转移酶。没有使白细胞维持与Selectin的结合能力的酶。另外,α-2,3-二丙烯转移酶在很多种类的细胞中表达,因此。

关键词：白细胞浸润关键酶转移酶细胞株 Namalwa细胞岩藻糖 Select 结合活性生物合成单细胞系