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紫皮石斛寡糖的酶法制备及单糖组成分析

微生物学杂志 2022年第3期42卷 54-60页

作者：蒋明星易梦镯李翠赵云洁李欢蔡胤殷根深昆明学院农学与生命科学学院云南昆明650214

从多糖提取后的紫皮石斛(Dendrobium devonianum Paxt.)渣上分离到一株能够水解石斛多糖的菌株,为丰富寡糖食品新原料种类,对该菌株的发酵产酶活性进行分析。利用酶法制备紫皮石斛寡糖,并进行小试和中试,采用硅胶柱色谱对寡糖进行初步分... 详细信息

从多糖提取后的紫皮石斛(Dendrobium devonianum Paxt.)渣上分离到一株能够水解石斛多糖的菌株,为丰富寡糖食品新原料种类,对该菌株的发酵产酶活性进行分析。利用酶法制备紫皮石斛寡糖,并进行小试和中试,采用硅胶柱色谱对寡糖进行初步分离,PMP衍生化后通过HPLC分析单糖组成。结果表明,水解石斛多糖的菌株为粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)。该菌株液态发酵至第4天酶活最高,为0.1 U/μL,最佳酶解时间为24 h,粗酶液能够耐受30%的乙醇。通过粗酶液生物转化石斛多糖的小试和中试成功制备了大量的石斛寡糖,并对各组分进行了初步分离,单糖组成分析表明其主要由甘露糖组成,并含有少量的葡萄糖或果糖。通过粗糙脉孢菌酶法制备得到的紫皮石斛寡糖主要为甘露寡糖。

关键词：紫皮石斛寡糖粗糙脉孢菌酶法制备单糖组成分析

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色谱技术在肝素结构分析中的研究进展

色谱 2023年第2期41卷 107-121页

作者：欧阳艺兰易琳邱露允张真庆苏州大学医学院药学院江苏苏州215127

肝素(heparin,Hp)是目前临床应用最为广泛的抗凝剂,是由重复二糖单元组成的多硫酸化酸性直链多糖。低分子量肝素(LMWHs)是以肝素为原料,经过化学或酶降解获得的相对分子质量相对较小的肝素衍生物,相对肝素,它们的出血副作用和免疫原性更... 详细信息

肝素(heparin,Hp)是目前临床应用最为广泛的抗凝剂,是由重复二糖单元组成的多硫酸化酸性直链多糖。低分子量肝素(LMWHs)是以肝素为原料,经过化学或酶降解获得的相对分子质量相对较小的肝素衍生物,相对肝素,它们的出血副作用和免疫原性更小,皮下注射时生物利用度更高。肝素及低分子量肝素具有一系列结构特点,如相对分子质量偏大且有一定分布,多种糖残基同时存在,硫酸酯位置和数量呈现多样化,以及不同工艺产生的特殊残基的种类和含量不一等。该类药物结构的复杂性对分析方法提出了巨大的挑战,也限制了其质量控制提升、工艺优化、临床用药安全和新适应证拓展等。该文以色谱分析方法为中心,从结构分析的不同角度,包括单糖、二糖、寡糖、多糖的识别、组成分析和不同层次,系统地梳理和阐述近年来肝素类药物在色谱分析方法上的进展,并对这些方法的应用范畴、创新性、局限性等进行总结。该文将为肝素类药物的结构分析、质量控制提供较系统的方法学参考,为更多新方法开发提供思路,为更深入地研究肝素类药物结构、拓展其应用提供有力支撑。

关键词：色谱单糖组成分析二糖组成分析寡糖分析多糖分析肝素低分子量肝素综述

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气相色谱法分析方格星虫多糖的单糖组成

药物分析杂志 2012年第8期32卷 1362-1364,1369页

作者：刘玉明钱甜甜李珂娴何颖沈先荣江叔奇海军医学研究所上海200433 浙江中医药大学杭州310053

目的:研究方格星虫多糖的单糖组成。方法:采用3 mol.L-1三氟乙酸将方格星虫多糖水解成单糖,然后与盐酸羟胺进行衍生化反应,采用气相色谱法对其单糖组成进行分析。结果:方格星虫多糖的单糖组成主要为阿拉伯糖和葡萄糖,其质量分数分别为7.... 详细信息

目的:研究方格星虫多糖的单糖组成。方法:采用3 mol.L-1三氟乙酸将方格星虫多糖水解成单糖,然后与盐酸羟胺进行衍生化反应,采用气相色谱法对其单糖组成进行分析。结果:方格星虫多糖的单糖组成主要为阿拉伯糖和葡萄糖,其质量分数分别为7.91%和79.32%。结论:此法简单、快速,重现性好,可用于方格星虫多糖的单糖组成分析。

关键词：气相色谱法方格星虫多糖单糖组成分析海洋星虫提取物

万寿菊多糖的纯化、组成分析及其体外抗氧化和抗肿瘤活性研究

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食品与发酵工业 2020年第15期46卷 216-223页

作者：何念武曹思娟张咪商洛学院生物医药与食品工程学院陕西商洛726000 陕西秦岭特色生物资源产业技术研究院(商洛学院) 陕西商洛726000

对万寿菊多糖(Tagetes erecta L.polysaccharides,TEPs)提取工艺进行优化并对粗多糖进行分离纯化,对得到的多糖组分进行单糖组成及体外抗氧化和抗肿瘤活性分析。响应面法优化万寿菊多糖最佳提取工艺为:提取温度80℃、提取时间2 h、料液... 详细信息

对万寿菊多糖(Tagetes erecta L.polysaccharides,TEPs)提取工艺进行优化并对粗多糖进行分离纯化,对得到的多糖组分进行单糖组成及体外抗氧化和抗肿瘤活性分析。响应面法优化万寿菊多糖最佳提取工艺为:提取温度80℃、提取时间2 h、料液比1∶21(g∶mL),此条件下提取率为3.7%。利用DEAE-52纤维素和Sephadex G-150柱层析分离纯化TEPs得2种均一多糖(TEPs-1和TEPs-2);利用高效体积排阻色谱法测定2种均一多糖重均分子量分别为4.69和5.73 kDa;利用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)-柱前衍生HPLC法测定其单糖组成,TEPs两种组分均由7种单糖组成,其中甘露糖、半乳糖、葡萄糖和阿拉伯糖4种单糖含量较高。1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟基自由基、超氧阴离子、2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2′-azino-bis 3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate acid,ABTS)自由基清除实验结果表明,TEPs-1和TEPs-2均有明显的抗氧化活性,且呈现良好的浓度依赖关系,质量浓度越大清除率越高。MTT实验结果表明,TEPs两个组分对MCF-7细胞均有一定生长抑制作用,TEPs-1和TEPs-2对MCF-7细胞的IC 50分别为319.76和134.04μg/mL。万寿菊多糖具有良好的体外抗氧化和抑瘤活性,可为万寿菊多糖产品开发提供参考。

关键词：万寿菊多糖分离纯化单糖组成分析抗氧化活性抑瘤活性

HPLC-ELSD法快速测定枸杞多糖的单糖组成及含量

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广州化工 2023年第2期51卷 154-156页

作者：王琳琳惠人杰江南大学生命科学与健康工程学院江苏无锡214000

采用热水提取法对枸杞中的多糖成分进行提取,并用三氟乙酸对多糖提取液进行水解。利用蒸发光高效液相色谱(HPLC-ELSD)技术,使用单标葡萄糖溶液进行液相方法的优化,并对糖单标以及混标进样分析,确定标准品出峰时间。对多糖提取液以及水... 详细信息

采用热水提取法对枸杞中的多糖成分进行提取,并用三氟乙酸对多糖提取液进行水解。利用蒸发光高效液相色谱(HPLC-ELSD)技术,使用单标葡萄糖溶液进行液相方法的优化,并对糖单标以及混标进样分析,确定标准品出峰时间。对多糖提取液以及水解液进样分析,根据标准品出峰情况,确定了水解液中枸杞多糖的单糖组成主要为葡萄糖、果糖,含量分别为8.15%、4.75%。

关键词： HPLC-ELSD 枸杞多糖单糖组成分析

罗汉果根多糖的分离纯化、结构鉴定及抗肿瘤活性研究

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广西植物 2012年第1期32卷 138-142,76页

作者：颜小捷卢凤来陈换莹李典鹏广西植物功能物质研究与利用重点实验室(广西植物研究所) 广西桂林541006 广西师范大学生命科学学院广西桂林541004

采用水提醇沉法提取、DEAE-52纤维素柱粗分离罗汉果根粗多糖(CPS),纸层析结合高效液相色谱分析CPS的单糖组成;同时研究CPS对小鼠H22皮下种植性肿瘤的影响。结果表明:采用DEAE-52纤维素柱粗分离得到5个多糖组分;CPS的单糖组成为:葡萄糖... 详细信息

采用水提醇沉法提取、DEAE-52纤维素柱粗分离罗汉果根粗多糖(CPS),纸层析结合高效液相色谱分析CPS的单糖组成;同时研究CPS对小鼠H22皮下种植性肿瘤的影响。结果表明:采用DEAE-52纤维素柱粗分离得到5个多糖组分;CPS的单糖组成为:葡萄糖、阿拉伯糖、木糖,其中以葡萄糖为主;与模型对照组比较,CPS各剂量组无明显的抑制肿瘤生长作用(抑瘤率均低于50%);与模型对照组比较,CPS各剂量组小鼠的胸腺指数显著提高,差异极显著(P<0.01);而脾脏指数显著降低,差异极显著(P<0.01)。

关键词：罗汉果根多糖分离纯化单糖组成分析抗肿瘤

黄精多糖的提取及其对α-葡萄糖苷酶抑制作用

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中成药 2010年第12期32卷 2133-2137页

作者：高英叶小利李学刚朱小康王亮黄文文李平冯平西南大学药学院重庆400716 西南大学生命科学学院重庆400715 北碚区中医院重庆400700

目的:研究黄精Polygonatum sibiricum不同分子量级的多糖组分对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,探究黄精多糖分子量大小、单糖组成、单糖比例和黄精对α-葡萄糖苷酶抑制作用之间的联系。方法:采用DEAE2纤维素柱色谱和透析袋透析等操作对黄精... 详细信息

目的:研究黄精Polygonatum sibiricum不同分子量级的多糖组分对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,探究黄精多糖分子量大小、单糖组成、单糖比例和黄精对α-葡萄糖苷酶抑制作用之间的联系。方法:采用DEAE2纤维素柱色谱和透析袋透析等操作对黄精的醇提物进行分离纯化分段。然后用气相色谱分析多糖不同分子量级组分的组成、单糖比例。结果:黄精中抑制α-葡萄糖苷酶活性的主要成份为黄精多糖。对黄精多糖分离纯化分段,得到4个分子量级别的多糖,对其组成分析:M单糖,分别为阿拉伯糖、葡萄糖,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为44.90%;2 000单糖为葡萄糖,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为68.10%;14 000单糖,分别为甘露糖、葡萄糖、半乳糖,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为55.30%;M>50 000,含有2种单糖,分别为甘露糖、葡萄糖,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为63.80%。结论:单一葡萄糖形成的黄精多糖抑制α-葡萄糖苷酶活性最强,降糖活性也最强。

关键词：黄精多糖 α-葡萄糖苷酶 α-葡萄糖苷酶抑制剂单糖组成分析

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米邦塔仙人掌胶多糖化学组成的检测

西北大学学报（自然科学版） 2010年第2期40卷 273-276页

作者：孙璇王仲孚黄琳娟西北大学生命科学学院/西部资源生物与现代生物技术省部共建教育部重点实验室陕西西安710069

目的研究米邦塔仙人掌胶多糖的物理及化学性质。方法采用水提—醇沉法提取米邦塔仙人掌中的胶多糖,用气相色谱分析其单糖的组成及摩尔比,测定胶多糖的总糖含量及糖醛酸含量,分析其紫外及红外光谱。结果其多糖的单糖组成为:鼠李糖、岩藻... 详细信息

目的研究米邦塔仙人掌胶多糖的物理及化学性质。方法采用水提—醇沉法提取米邦塔仙人掌中的胶多糖,用气相色谱分析其单糖的组成及摩尔比,测定胶多糖的总糖含量及糖醛酸含量,分析其紫外及红外光谱。结果其多糖的单糖组成为:鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、葡萄糖醛酸及半乳糖醛酸,其物质的量比为13.49∶1∶61.83∶26.37∶3.49∶6.70∶66.76∶6.68∶29.81。米邦塔仙人掌的总糖含量为91.10%,糖醛酸含量为18.78%。紫外光谱表明该多糖可能含有糖蛋白,红外光谱表明其具有多糖特征吸收。结论米邦塔仙人掌多糖是一种主要由阿拉伯糖和半乳糖组成,并含有少量的鼠李糖、木糖和半乳糖醛酸以及微量的甘露糖、葡萄糖、岩藻糖和葡萄糖醛酸的胶性多糖,其糖含量测定为91.10%,可能含有少量糖蛋白。

关键词：仙人掌胶多糖糖含量单糖组成分析

高效液相色谱法测定土垅大白蚁菌圃多糖的单糖组成

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药物分析杂志 2013年第6期33卷 989-993页

作者：林葵苏青黄岛平黄瑞松徐慧刘婧广西分析测试研究中心南宁530022 广西壮族自治区民族医药研究院南宁530001

目的:测定土垅大白蚁菌圃多糖中单糖的组成。方法:采用水提醇沉法提取土垅大白蚁菌圃多糖,三氟乙酸水解后,经衍生化试剂1-苯基-3-甲基-吡唑啉酮(PMP)衍生化,高效液相色谱法(HPLC)分析。色谱条件:色谱柱C18(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温25... 详细信息

目的:测定土垅大白蚁菌圃多糖中单糖的组成。方法:采用水提醇沉法提取土垅大白蚁菌圃多糖,三氟乙酸水解后,经衍生化试剂1-苯基-3-甲基-吡唑啉酮(PMP)衍生化,高效液相色谱法(HPLC)分析。色谱条件:色谱柱C18(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温25℃;流动相为0.05 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(pH 6.8)-乙腈,流速1.0 mL.min-1,梯度模式:时间梯度为0→5→10→30→35 min,相应的磷酸盐缓冲溶液梯度为83%→82%→81%→80%→83%;检测波长250 nm;进样体积10μL。结果:土垅大白蚁菌圃多糖中含甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖的摩尔比3.55∶1.00∶1.19∶3.54∶2.54∶4.41∶1.90。结论:该方法具有简单、快速、分离效率高等特点,可用于测定土垅大白蚁菌圃多糖中单糖的组成。

关键词：土垅大白蚁菌圃多糖多糖水解单糖组成分析高效液相色谱法