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中国农业大学学报 2019年第12期24卷 53-61页

作者：章英才苏伟东曹金霞柴雅红宁夏大学生命科学学院银川750021 宁夏红枣工程技术研究中心宁夏灵武750400

为分析大果型、枣刺退化型、早熟型和普通型4种不同类型灵武长枣完熟期果实多糖中单糖成分的差异,经水提醇沉法提取、采用DEAE-cellulose52和HW-55S分离纯化,利用GC-MS等分别对果实进行多糖的单糖成分分析研究。结果表明:1)不同类型果... 详细信息

为分析大果型、枣刺退化型、早熟型和普通型4种不同类型灵武长枣完熟期果实多糖中单糖成分的差异,经水提醇沉法提取、采用DEAE-cellulose52和HW-55S分离纯化,利用GC-MS等分别对果实进行多糖的单糖成分分析研究。结果表明:1)不同类型果实粗多糖得率分别为:普通型1.795%,大果型1.504%,早熟型0.999%,枣刺退化型0.956%,粗多糖含量从高到低依次为:普通型>早熟型>大果型>枣刺退化型。2)不同类型果实粗多糖经DEAE-52柱层析,均得到1个中性级分(Ju-0)和3个酸性级分(Ju-1、Ju-2、Ju-3),其中Ju-2含量均为最高,表明果实多糖的主要形式为酸性多糖,但4个多糖级分的质量和得率差异显著。3)不同类型果实精制多糖含量因级分不同而差异较大,Ju-0和Ju-3级分均为普通型中最高,Ju-1级分在大果型中最高,Ju-2级分在早熟型中最高。4)不同类型果实精制多糖均以阿拉伯糖、半乳糖和鼠李糖含量较高,葡萄糖含量次之,甘露糖和木糖含量较低,均不含有果糖;NIST谱库显示,果实精制多糖中还含有核糖、岩藻糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。因此,不同类型灵武长枣果实多糖中单糖成分相似,但其成分和含量因级分不同而差异较大。

关键词：枣不同类型多糖单糖成分

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黄丝菌多糖的单糖成分及抗氧化活性探析

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南方农业 2016年第12期10卷 184-185页

作者：赵大群丁祥刘露钱叶侯怡铃西华师范大学生命科学学院西南野生动植物资源保护教育部重点实验室四川南充637009

实验采用黄丝菌（Canthar-ellus cibarius Fr）子实体，经热水提取、乙醇沉淀、柱层析以及透析处理，得到黄丝菌多糖（CC-1），采用三氟乙酸水解黄丝菌多糖样品形成单糖，结合高效液相色谱分析法（HPLC法）分析了其单糖成分；同时，研... 详细信息

实验采用黄丝菌（Canthar-ellus cibarius Fr）子实体，经热水提取、乙醇沉淀、柱层析以及透析处理，得到黄丝菌多糖（CC-1），采用三氟乙酸水解黄丝菌多糖样品形成单糖，结合高效液相色谱分析法（HPLC法）分析了其单糖成分；同时，研究了低浓度黄丝菌多糖的抗氧化活性。结果表明，黄丝菌多糖由甘露糖与木糖组成，比例为7∶1。抗氧化实验表明，黄丝菌多糖对ABTS＋自由基的清除能力在0.5～5.0 mg/mL质量浓度范围内呈正相关，对DPPH-自由基也有一定清除作用。

关键词：黄丝菌多糖高效液相色谱法单糖成分抗氧化活性

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HPLC-CAD法测定3种药用石斛中3种糖类成分的含量

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中国药房 2020年第10期31卷 1185-1189页

作者：郑晓倩金传山张亚中刘军玲俞年军欧金梅安徽中医药大学药学院合肥230012 安徽省食品药品检验研究院合肥230051

目的:建立测定3种药用石斛中3种单/双糖成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱-电喷雾式检测器法。色谱柱为Shodex Asahipak NH2P-504E,流动相为乙腈-水(75∶25,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL,数据采集频率为5 Hz,... 详细信息

目的:建立测定3种药用石斛中3种单/双糖成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱-电喷雾式检测器法。色谱柱为Shodex Asahipak NH2P-504E,流动相为乙腈-水(75∶25,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL,数据采集频率为5 Hz,过滤常数为5 s,雾化器温度为35℃,气源为氮气,压力为4.012×105Pa。结果:果糖、D-无水葡萄糖、蔗糖检测质量浓度的线性范围分别为0.1562~1.8738 mg/mL(r=0.9995)、0.0127~0.1524 mg/mL(r=0.9997)、0.2776~3.3312 mg/mL(r=0.9998);定量限分别为0.00261、0.00424、0.00512 mg/mL,检测限分别为0.00078、0.00127、0.00154 mg/mL;精密度、稳定性、重复性、耐用性试验的RSD均小于3%,加样回收率分别95.98%~98.15%(RSD=0.83%,n=6)、95.64%~98.62%(RSD=1.10%,n=6)、97.53%~98.94%(RSD=0.53%,n=6);含量分别为0.28%~1.12%、0.02%~0.13%、0.76%~2.67%;总含量为1.38%~3.10%。3种石斛中糖类成分含量高低依次为蔗糖>果糖>D-无水葡萄糖,其中蔗糖含量及总含量高低依次均为霍山石斛>铜皮石斛>铁皮石斛,D-无水葡萄糖含量高低依次为霍山石斛>铁皮石斛>铜皮石斛,果糖含量高低依次为铜皮石斛>铁皮石斛>霍山石斛。结论:所建方法灵敏度高、重复性好、操作简单,可用于测定3种药用石斛中3种糖类成分的含量;3种药用石斛中糖类成分的含量存在差异。

关键词：高效液相色谱-电喷雾式检测器法霍山石斛铁皮石斛铜皮石斛单糖成分双糖成分含量测定

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龙眼壳多糖的分离提取及其活性初步研究

龙眼壳多糖的分离提取及其活性初步研究

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作者：秦洁华广西医科大学

学位级别：硕士

目的:从龙眼干果壳中分离、提取龙眼壳多糖,对其进行初步化学分析和初步的免疫活性及抗肿瘤活性研究。方法:通过正交实验来确定龙眼壳多糖最适的提取方法,并以此方法从中提取龙眼壳多糖;借助Sevage法-酶法和H2O2脱色素法分别对龙眼壳多... 详细信息

目的:从龙眼干果壳中分离、提取龙眼壳多糖,对其进行初步化学分析和初步的免疫活性及抗肿瘤活性研究。方法:通过正交实验来确定龙眼壳多糖最适的提取方法,并以此方法从中提取龙眼壳多糖;借助Sevage法-酶法和H2O2脱色素法分别对龙眼壳多糖脱蛋白和脱色素;多糖含量用硫酸-苯酚法进行测定;使用DEAE-纤维素柱层析和丙烯葡聚糖凝胶色谱S-300柱层析对龙眼壳多糖进行分级纯化。采用柱色谱、醋酸薄膜纤维电泳和比旋光度法检测龙眼壳多糖的纯度;通过凝胶色谱法测定龙眼壳多糖的分子量;通过三氟乙酸完全酸水解法测定龙眼壳多糖的单糖的成分。在体外免疫活性的实验中,用MTT法测定龙眼壳多糖已除蛋白样品(LP1-2A)和龙眼壳多糖未除蛋白样品(LP1-2B)对小鼠脾淋巴细胞的增殖能力和ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖能力;酶联免疫吸附反应(ELISA)分析LP1-2A和LP1-2B对小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2和ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2的作用;LDH释放法测定LP1-2A和LP1-2B对NK细胞活性的作用。在体内免疫活性的实验中,通过灌胃给药方式,MTT测定LP1-2A和LP1-2B对小鼠脾淋巴细胞的增殖能力和ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖能力、ELISA分析LP1-2A和LP1-2B对小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2和ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2的作用、LDH释放法测定LP1-2A和LP1-2B对NK细胞活性的作用。在体外抗肿瘤的实验中,用MTT法测定LP1-2A和LP1-2B对肿瘤细胞Bel-7404、SKVO3、MCF-7的抑制作用。在体内抗肿瘤实验中,腹腔接种S180腹水瘤细胞,小鼠灌胃给药LP1-2A和LP1-2B,计算小鼠的生命延长率。结果:龙眼壳多糖的最适热水浸提条件为浸提温度为90℃,浸提时间为3.5h,料液比为1:30,浸提次数为3次。在此条件下提取出的龙眼壳粗多糖的得率为1.31%,其中龙眼壳粗多糖的多糖含量为27.33%。龙眼壳多糖已除蛋白样品(LP1-2A)分子量为1.14×104u。红外光谱显示该龙眼壳多糖为α-D-型端基吡喃葡萄糖。完全酸水解后的龙眼壳多糖的单糖成分为葡萄糖。LP1-2A和LP1-2B的体外免疫活性实验结果显示,体外单独促进正常小鼠脾淋巴细胞增殖作用和体外协同ConA促进正常小鼠脾淋巴细胞增殖作用实验中,浓度在300～4.7mg/L范围内,刺激指数均随着其浓度的增加而增加。体外直接作用对小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2影响和体外对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2影响实验中,浓度在300～4.7mg/L范围内,小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2的量随着其浓度的增加而增加。体外对正常小鼠脾脏NK细胞活性影响的实验中,浓度在300～4.7mg/L范围内,NK细胞活性随着其浓度的增加而增强。LP1-2A和LP1-2B的体内免疫活性结果显示,体内单独促进正常小鼠脾淋巴细胞增殖作用和体内协同ConA促进正常小鼠脾淋巴细胞增殖作用实验中,浓度在250～62.5mg/L范围内,刺激指数随着其浓度的增加而增加。体内直接作用对小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2影响和体内对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2影响的实验中,浓度在250～62.5mg/L范围内,小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2的量随着其浓度的增加而增加。体内对正常小鼠脾脏NK细胞活性影响的实验中,浓度在250～62.5mg/L范围内,NK细胞活性随着其浓度的增加而增强。LP1-2A和LP1-2B的体外抗肿瘤实验结果显示,在400～50mg/L的浓度范围内,随着浓度的增加,对肝癌细胞Bel-7404、卵巢癌细胞SKVO3、乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制率随着浓度的增加逐渐增加。LP1-2A和LP1-2B的体内抗肿瘤结果显示,在320～80mg/L的浓度范围内,当浓度为320mg/L时,LP1-2A和LP1-2B对S180腹水瘤小鼠的生命延长率分别为74.47%和32.98%。结论:龙眼壳多糖已除蛋白样品(LP1-2A)是α-D-型端基吡喃葡萄糖,其水解后的单糖成分是葡萄糖,其分子量为1.14×104u。LP1-2A和LP1-2B在体外和体内均有一定的免疫作用。LP1-2A和LP1-2B体外对肿瘤细胞Bel-7404、SKVO3、MCF-7有一定的抑制作用。LP1-2A和LP1-2B对S180腹水瘤小鼠的生存时间有一定的延长作用。

关键词：龙眼壳多糖分子量单糖成分免疫活性抗肿瘤活性

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