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系统性红斑狼疮患者外周血未成熟单核细胞来源树突状细胞诱导调节性T细胞分化的体外实验研究

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中国医药 2015年第11期10卷 1630-1633页

作者：林小军蔡小燕叶静华李芳菲唐莼李伟念何志翔李欣颖卢勤燕广州市第一人民医院风湿免疫科 510180

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血未成熟单核细胞来源树突状细胞（MDDC）在体外诱导CD4＋调节性T细胞（Treg）向人叉头框蛋白P3（FOXP3）＋CD4＋ CD25＋ Treg细胞分化的能力.方法抽取SLE患者（SLE组）及健康人群（对照组）的... 详细信息

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血未成熟单核细胞来源树突状细胞（MDDC）在体外诱导CD4＋调节性T细胞（Treg）向人叉头框蛋白P3（FOXP3）＋CD4＋ CD25＋ Treg细胞分化的能力.方法抽取SLE患者（SLE组）及健康人群（对照组）的外周血,于体外分离培养未成熟MDDC;将未成熟MDDC与CD4＋ T细胞共育,采用流式细胞术检测FOXP3＋ CD4＋ CD25＋ Treg细胞的比例.结果 SLE组外周血CD4＋ T细胞中FOXP3＋CD4＋CD25＋ Treg细胞比例明显低于对照组[（2.83±0.30）％比（5.38±0.63）％]（P＜0.05）;CD4＋ T细胞与未成熟MDDC共育后,SLE组FOXP3＋ CD4＋ CD25＋ Treg细胞比例为（3.28±0.27）％,与共育前比较无明显增加（P＞0.05）,对照组FOXP3 ＋CD4＋ CD25＋ Treg细胞比例为（8.12±0.70）％,较共育前明显增加（P＜0.05）,2组间比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 SLE患者未成熟MDDC诱导自体CD4＋ Treg细胞向FOXP3 ＋CD4＋ CD25＋ Treg细胞分化能力缺陷。

关键词：红斑狼疮,系统性单核细胞来源树突细胞诱导调节性T细胞

3-O-C_(12)-HSL阻碍Mo-DCs成熟过程中lncRNA表达谱的变化

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重庆医科大学学报 2018年第1期43卷 117-121页

作者：李有强张云燕陈茶徐建华罗燕芬肖倩李沫李启伟广州中医药大学第二临床医学院检验医学部广州501180 广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心口腔科广州501180

目的:观察铜绿假单胞菌(Pseudomonas aerltginosa,PA)分泌的信号分子N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(N-3-oxododecanoy1-L-homoserine lactone,3-O-C12-HSL)阻碍单核细胞来源的树突细胞(monocytes derived-dendritic cells,Mo-DCs)成熟过程中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)表达谱的变化情况。方法:采用免疫磁珠法分选人外周血CD14+单核细胞,经重组人粒-单核细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4诱导分化为Mo-DCs。不同因素处理Mo-DCs,实验组加入终浓度0.1μg/m L的LPS和终浓度为40μmol/L的3-O-C12-HSL,对照组加入相应体积的含0.1%DMSO的PBS,模型组加入终浓度0.1μg/m L的LPS。利用lnc RNA芯片技术检测对照组、模型组和实验组间lnc RNA表达谱的差异。对筛选数据进行分析处理,利用散点图分析2倍以上差异lnc RNA在各处理因素间的总体变异情况,利用聚类分析研究表达差异5倍以上lnc RNA的聚类情况。结果:与对照组和模型组相比较,实验组筛选出2倍以上表达差异的lnc RNA为1 386条,其中上调表达的548条,下调表达的838条。筛选出具有5倍以上表达差异的lnc RNA共153条,占2倍表达差异lnc RNA的11.04%,其中上调表达的22条,下调表达的131条。散点图发现2倍表达差异的lnc RNA总体分布呈集中趋势,存在特征性改变。聚类分析发现5倍表达差异的lnc RNA能根据处理因素进行有效的分层聚类。结合GO分析和m RNA通路分析,差异lnc RNA的相关基因可富集至PPAR信号通路、钙信号通路和NF-κB信号通路中。结论:3-O-C12-HSL作用于Mo-DCs后,lnc RNA表达谱发生了特征性变化,表达差异的lnc RNA可能参与了3-O-C12-HSL阻碍Mo-DCs成熟过程。

关键词： N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯单核细胞来源树突细胞长链非编码RNA

血清LncRNA-ENST00000420480在铜绿假单胞菌感染中诊断价值

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实用医学杂志 2019年第21期35卷 3370-3373页

作者：李有强张云燕刘杨张轩蔡雪莹陈茶罗燕芬南方医科大学附属何贤纪念医院检验科广州511400 广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心口腔科广州501180 广州中医药大学第二临床医学院广州510006

目的探讨长链非编码RNAENST00000420480作为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)感染诊断标志物的临床价值。方法采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,免疫磁珠分选人CD14+单核细胞、hIL?4和hGM?CSF诱导分化为单核细胞衍生... 详细信息

目的探讨长链非编码RNAENST00000420480作为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)感染诊断标志物的临床价值。方法采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,免疫磁珠分选人CD14+单核细胞、hIL?4和hGM?CSF诱导分化为单核细胞衍生树突细胞(monocytes derived dendritic cells,Mo?DCs),分PBS组、LPS组和LPS+3?O?C12?HSL组。实时荧光定量PCR检测lncRNA?ENST00000420480表达量。收集临床PA感染患者血清21例,体检表观健康人血清32例,提取血清RNA,逆转录获得cDNA,荧光定量PCR检测lncRNA?ENST00000420480表达量,受试者工作特征曲线评价血清中lncRNA?ENST00000420480对PA感染的诊断效能,计算约登指数(YI)明确PA感染诊断截点(cut?off)。结果与PBS组相比,LPS下调Mo?DCs中lncRNA?ENST00000420480表达水平。与LPS组相比,3?O?C12?HSL上调Mo?DCs中lncRNA?ENST00000420480表达水平。PA感染组血清中lncRNA?ENST00000420480相对表达量为(3.85±4.18),正常人组血清中lncRNA?ENST00000420480相对表达量为(1.30±1.06),差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线中AUC为0.708(P=0.01),YI为0.429,诊断截点值为4.13。结论lncRNA?ENST00000420480可作为PA感染的血清学标志物。

关键词： N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯单核细胞来源树突细胞长链非编码RNA

3-O-C_(12)-HSL通过PPARγ介导Mo-DCs表面CD1d的表达

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广东医学 2017年第22期38卷 3389-3392页

作者：张云燕龙宝军李有强崔颖秋毛喆张栋杰广州市妇女儿童医疗中心口腔医学中心广东广州510623 广州中医药大学第二附属医院检验医学部广东广州510120

目的研究N-3-氧化十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C_(12)-HSL)是否促进人单核细胞衍生树突状细胞(Mo-DCs)表达CD1d,该作用是否通过过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)介导。方法取健康人外周血80 m L,密度梯度离心法获得单个核细胞,免... 详细信息

目的研究N-3-氧化十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C_(12)-HSL)是否促进人单核细胞衍生树突状细胞(Mo-DCs)表达CD1d,该作用是否通过过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)介导。方法取健康人外周血80 m L,密度梯度离心法获得单个核细胞,免疫磁珠法分选CD14+单核细胞,重组人粒-单核细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4诱导5 d,使其分化为Mo-DCs。将Mo-DCs细胞分为4组,阳性对照组加入终浓度为0.1μg/m L的脂多糖(LPS);阴性对照组加入相应体积的含0.1%DMSO的PBS;3-O-C_(12)-HSL实验组分3个浓度水平,在加入LPS的基础上分别加入终浓度为10、20和40μmol/L的3-O-C_(12)-HSL;GW9662实验组为GW9662预处理1 h后分别加入LPS和浓度为10、20、40μmol/L的3-O-C_(12)-HSL。流式细胞术检测Mo-DCs表面CD1d的表达量;使用PPARγ的抑制剂GW9662处理Mo-DCs后,再经LPS和(或)3-O-C_(12)-HSL刺激,流式细胞术检测Mo-DCs表面CD1d的表达量。结果 Mo-DCs经3-O-C_(12)-HSL刺激后,表面分子CD1d表达水平增加,与阴性对照组及阳性对照组差异有统计学意义(P<0.05);Mo-DCs经GW9662处理1 h后,再加入3-O-C_(12)-HSL,Mo-DCs表面CD1d表达量明显降低(P<0.05)。结论 3-O-C_(12)-HSL通过PPARγ促进Mo-DCs表面CD1d的表达。

关键词： N-3-氧化十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯单核细胞来源树突细胞过氧化物酶增殖物激活受体γ CD1d

3-O-C_(12)-HSL通过PPARγ抑制Mo-DCs表达IL-6

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中国热带医学 2016年第12期16卷 1151-1154页

作者：李有强张云燕陈茶罗燕芬肖倩李沫李启伟广东省中医院检验医学部广东广州501180 广州中医药大学第二临床学院广东广州510405 广州市妇女儿童医疗中心口腔科广东广州501180

目的研究铜绿假单胞菌分泌的N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(N-3-oxododecanoyl-L-homoserine lactone,3-O-C12-HSL)是否通过过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxisome proliferater-activated receptorγ,PPARγ)调节单核细胞来源的树突细胞(monocytes derived-dendritic cells,Mo-DCs)表达白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)。方法 PPARγ配体筛选实验体外检测3-O-C12-HSL是否与PPARγ结合。免疫磁珠法分选人CD14+单核细胞,人白细胞介素4(human Interleukin 4,h IL-4)及人粒单核细胞集落刺激因子(human granulocyte monocyte colony stimulating factor,h GM-CSF)诱导分化为Mo-DCs,不同浓度的3-O-C12-HSL处理Mo-DCs;PPARγ拮抗剂GW9662处理Mo-DCs后,3-O-C12-HSL处理Mo-DCs,电化学发光法检测Mo-DCs培养上清IL-6浓度。结果配体筛选实验显示3-O-C12-HSL>4.60μmol/L时可竞争性结合PPARγ配体结合区。3-O-C12-HSL下调脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的Mo-DCs表达IL-6水平(P<0.05),PPARγ特异性拮抗剂GW9662能部分逆转3-O-C12-HSL介导的IL-6表达下调(P<0.05)。结论 3-O-C12-HSL可与PPARγ相结合,并通过PPARγ调节Mo-DCs分泌表达IL-6。

关键词： N-3-氧代十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯单核细胞来源树突细胞过氧化物酶增殖物激活受体γ 白细胞介素6

3-O-C_(12)-HSL通过PPARγ介导Mo-DCs表达CD40

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广东医学 2018年第S2期39卷 32-35页

作者：张云燕李有强崔颖秋毛喆广州市妇女儿童医疗中心口腔科广东广州510623

目的研究铜绿假单胞菌信号分子N-3-氧化十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C_(12)-HSL)是否促进人单核细胞衍生树突细胞(Mo-DCs)表达CD40,该作用是否通过过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)介导。方法取健康人外周血,密度梯度离心法获得... 详细信息

目的研究铜绿假单胞菌信号分子N-3-氧化十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C_(12)-HSL)是否促进人单核细胞衍生树突细胞(Mo-DCs)表达CD40,该作用是否通过过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)介导。方法取健康人外周血,密度梯度离心法获得单个核细胞,免疫磁珠法分选CD14^+单核细胞,经重组人粒-单核细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4(IL-4)诱导,使其分化为Mo-DCs,MoDCs经脂多糖(LPS)和(或)3-O-C_(12)-HSL刺激后,流式细胞术检测Mo-DCs表面CD40的表达量。使用PPARγ的抑制剂GW9662处理Mo-DCs后,再经LPS和(或)3-O-C_(12)-HSL刺激,流式细胞术检测MoDCs表面CD40的表达量。结果 Mo-DCs经3-O-C_(12)-HSL刺激后,表面分子CD40表达水平降低,与PBS组及LPS组差异有统计学意义(P<0.05);Mo-DCs经GW9662处理后,再加入3-O-C_(12)-HSL,MoDCs表面CD40表达量明显增加(P<0.05)。结论 3-O-C_(12)-HSL通过PPARγ降低Mo-DCs表面CD40表达。

关键词：铜绿假单胞菌单核细胞来源树突细胞 CD40 过氧化物酶增殖物激活受体γ N-3-氧化十二烷酰-L-同型丝氨酸内酯