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辽宁省2021—2022年食品中单核细胞增生李斯特氏菌分子血清分型及耐药性分析

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中国热带医学 2024年第4期24卷 468-471,498页

作者：孙婷婷李雪王伟杰魏彤竹刁文丽辽宁省疾病预防控制中心辽宁沈阳110005

目的分析辽宁省食品监测网中食源性单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM)分离株分子血清分型及耐药性,为食源性疾病的暴发识别和溯源提供参考依据。方法对采自我省2021—2022年15个监测点2797份食品中检出的67株LM进行分... 详细信息

目的分析辽宁省食品监测网中食源性单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM)分离株分子血清分型及耐药性,为食源性疾病的暴发识别和溯源提供参考依据。方法对采自我省2021—2022年15个监测点2797份食品中检出的67株LM进行分离株鉴定;应用VITEK生化鉴定仪进行生化鉴定;采用PCR扩增技术进行分子血清分型,并按照血清诊断使用说明书进行验证操作。采用微量肉汤稀释法测定试验菌株对氨苄西林、青霉素、美罗培南、复方磺胺甲恶唑、红霉素等的药物敏感性。结果辽宁省2021—2022年食品中LM携带分子血清分型为1/2a(3a)、1/2b(3b,7)、1/2c(3c)和4b(4d,4e),主要血清型为1/2a型(62.7%,42/67)和1/2b型(28.4%,19/67),其中4b型分离到3株(4.5%,3/67)。辽宁省2021年和2022年LM的优势菌株都是1/2a(3a)型和1/2b(3b,7)型,其中肉及肉制品携带的分型最多。67株LM中,对复方磺胺甲恶唑和红霉素双重耐药有8株(11.9%),只对复方磺胺甲恶唑耐药有6株(9.0%)。结论辽宁省2021—2022年食品中LM存在具有致病性的血清型1/2a(3a)、1/2b(3b,7)、1/2c(3c)和4b(4d,4e),并具有一种及双重耐药菌株,说明我省食品中存在LM引起的食品安全问题,可能存在引起LM感染风险,应该优化溯源检测方法并加强LM的暴发确认。

关键词：单核细胞增生李斯特氏菌分子血清分型耐药性辽宁

食品中单核细胞增生李斯特氏菌检验方法应用分析

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食品安全导刊 2024年第18期 47-49页

作者：朱诗语任冠达郭旭赵梓怡沈阳市市场监管事务服务中心(沈阳产品质量监督检验院) 辽宁沈阳110022

目的:对熟肉制品、速冻调理肉、速冻水产制品、即食果蔬制品、冷冻饮品和乳制品6类食品开展单核细胞增生李斯特氏菌检测,总结试验注意事项,评估病原菌污染风险,为食品质量监控提供依据。方法:依据国家标准对样品进行增菌、分离、初筛、... 详细信息

目的:对熟肉制品、速冻调理肉、速冻水产制品、即食果蔬制品、冷冻饮品和乳制品6类食品开展单核细胞增生李斯特氏菌检测,总结试验注意事项,评估病原菌污染风险,为食品质量监控提供依据。方法:依据国家标准对样品进行增菌、分离、初筛、鉴定,计算检出率。结果:速冻调理肉、速冻水产制品、冷冻饮品3类食品均检出单核细胞增生李斯特氏菌,其中冷冻饮品检出率最高。结论:冷冻食品有单核细胞增生李斯特氏菌污染风险;选择合适的检测方法监控病原菌,可降低单核细胞增生李斯特氏菌食品污染发生概率,保障食品安全。

关键词：单核细胞增生李斯特氏菌培养检测检出率

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进出境大中动物中单核细胞增生李斯特氏菌检验方法的研究

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现代畜牧科技 2024年第6期 1-4页

作者：彭菲马玲杨东来张鹏刘振伟刘贺陈超刘丹丹满洲里海关技术中心内蒙古满洲里021400 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052

为快速检测进出境大中动物中的单核细胞增生李斯特氏菌,将细菌学方法和实时荧光PCR检测方法相结,利用叠氮溴化丙锭(PMA)抑制死菌核酸扩增的特性,对样品进行前处理,构建一套针对进出境大中动物中具有传染性的单核细胞增生李斯特氏菌PMA-q... 详细信息

为快速检测进出境大中动物中的单核细胞增生李斯特氏菌,将细菌学方法和实时荧光PCR检测方法相结,利用叠氮溴化丙锭(PMA)抑制死菌核酸扩增的特性,对样品进行前处理,构建一套针对进出境大中动物中具有传染性的单核细胞增生李斯特氏菌PMA-qPCR实时荧光快速检测方法。

关键词：进出境动物检疫单核细胞增生李斯特氏菌实时荧光PCR

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多方法联用对单核细胞增生李斯特氏菌及李斯特菌属的分离鉴定

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食品安全导刊 2024年第16期 66-71页

作者：陈灿灿邢家溧徐晓蓉吴莹莹林津如陈芳梅宁波市产品食品质量检验研究院(宁波市纤维检验所) 浙江宁波315048

目的:准确分离鉴定复杂样品基质中的单核细胞增生李斯特氏菌及李斯特菌属。方法:依据《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌》(GB 4789.30—2016)进行检测,利用病原微生物快速检测系统(BAX System Q7)对能力验证... 详细信息

目的:准确分离鉴定复杂样品基质中的单核细胞增生李斯特氏菌及李斯特菌属。方法:依据《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌》(GB 4789.30—2016)进行检测,利用病原微生物快速检测系统(BAX System Q7)对能力验证中的两份样品进行快速筛选,采用全自动微生物鉴定仪(Phoenix M50)分析鉴定可疑菌株。结果:BAX System Q7法与国标法检测结果一致,编号为A的样品检出伊氏李斯特氏菌,编号为B的样品检出单核细胞增生李斯特氏菌。结论:BAX System Q7法简便快速,Phoenix M50系统操作简单、自动化程度高,因此在检测复杂样品基质时,可以先用国标法检测单核细胞增生李斯特氏菌,再采用BAX System Q7系统和Phoenix M50系统进行双向验证,以确保检测结果的准确性。

关键词：能力验证单核细胞增生李斯特氏菌 BAX System Q7 Phoenix M50

乳粉中沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏菌检验能力验证结果和关键控制点分析

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质量安全与检验检测 2024年第1期34卷 77-83页

作者：贺强廖娜陈丹咸宁市公共检验检测中心湖北咸宁437100 湖北省桂花产品质量检验检测中心

为了有效验证实验室对沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏菌的检验检测能力,保证日常检验检测结果的准确性,本实验室参加了中国检验检疫科学研究院组织的PT1368乳粉中沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌的能力验证计划。采用传统生物学培养... 详细信息

为了有效验证实验室对沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏菌的检验检测能力,保证日常检验检测结果的准确性,本实验室参加了中国检验检疫科学研究院组织的PT1368乳粉中沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌的能力验证计划。采用传统生物学培养及普通生化鉴定的方法,同时运用荧光定量PCR仪对试验结果进行验证,并分析总结检测结果和关键影响因素,2个样品均检出沙门氏菌,2个样品均检出单增李斯特菌,与组织单位结果一致,最终获得满意的结果。

关键词：沙门氏菌单核细胞增生李斯特氏菌能力验证关键因素分析

食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验能力验证结果分析

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中国食品 2024年第2期 142-144页

作者：彭怡许红玉黄厚强张曲资阳市食品药品检验检测中心

单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM),简称为单增李斯特氏菌,是一种需氧兼性厌氧的食源性病原菌、革兰氏阳性短杆菌,广泛存在于自然界中。其中,奶制品、肉制品、水产品、海产品、禽类食品、蔬菜等容易受到该菌污染,误食... 详细信息

单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM),简称为单增李斯特氏菌,是一种需氧兼性厌氧的食源性病原菌、革兰氏阳性短杆菌,广泛存在于自然界中。其中,奶制品、肉制品、水产品、海产品、禽类食品、蔬菜等容易受到该菌污染,误食用含有该菌的新生儿、老年人等免疫力低者易患脑膜炎、败血症,孕妇则易发生早产或流产,致死率高达20%-30%,给食品安全造成严重威胁。

关键词：单核细胞增生李斯特氏菌单增李斯特氏菌食源性病原菌兼性厌氧短杆菌食品安全奶制品致死率

单核细胞增生李斯特氏菌内化素InlJ对噬菌体敏感性及生物被膜形成的影响

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食品科学 2023年第16期44卷 198-204页

作者：刘半红胡梁斌陆睿吴立婷包红朵周艳王冉张辉陕西科技大学食品与生物工程学院陕西西安710021 江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所江苏南京210014 江苏大学食品与生物工程学院江苏镇江212013

为深入探索单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)inlJ基因在噬菌体敏感性和生物被膜中的作用及功能,本研究通过同源重组构建inlJ基因缺失株Lm NJ05-ΔinlJ,鉴定其生长、黏附及侵袭特性,解析其对噬菌体敏感性和生物被膜形... 详细信息

为深入探索单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)inlJ基因在噬菌体敏感性和生物被膜中的作用及功能,本研究通过同源重组构建inlJ基因缺失株Lm NJ05-ΔinlJ,鉴定其生长、黏附及侵袭特性,解析其对噬菌体敏感性和生物被膜形成中的作用机制。结果表明:与野生型Lm NJ05相比,构建的缺失株Lm NJ05-ΔinlJ对RAW264.7细胞的黏附率和侵袭率分别为20.05%和4.42%,黏附和侵袭能力显著减弱;Lm NJ05-ΔinlJ对李斯特菌噬菌体vB-LmoM-NJ05的成斑率提高至2.72倍;体外裂解分析表明噬菌体vB-LmoM-NJ05对缺失株Lm NJ05-ΔinlJ裂解效果更强;噬菌体效价分别在105PFU/mL和108PFU/mL能够完全抑制和清除Lm NJ05-ΔinlJ生物被膜;生物被膜形成相关基因的转录分析表明,噬菌体作用缺失株Lm NJ05-ΔinlJ后,degU、agrA、agrD、luxS、yneA、recA和hpt基因的转录均下调(表达水平趋向于0)。由此可见,inlJ基因的缺失能够增强Lm对噬菌体敏感性,下调Lm对细胞侵袭力和生物被膜形成能力。因此,内化素基因inlJ不仅具有调控Lm自身的作用,还能够调节其对噬菌体的相互作用,为噬菌体的生物防控技术开发和应用奠定基础。

关键词：单核细胞增生李斯特氏菌内化素InlJ 噬菌体敏感性细胞黏附和侵袭生物被膜

单核细胞增生李斯特氏菌MPN法结果测量不确定度评定

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中国口岸科学技术 2022年第5期4卷 77-81页

作者：赵琪甄珍哈尔滨海关技术中心齐齐哈尔综合实验室齐齐哈尔161000

为真实反映测量审核中单核细胞增生李斯特氏菌结果的精确度,减小结果误差,对测量审核中单核细胞增生李斯特氏菌的结果进行不确定度评定。依据测量审核计划参试作业指导书和GB 4789.30-2016中第三法进行测定,建立数学模型,分析测定结果... 详细信息

为真实反映测量审核中单核细胞增生李斯特氏菌结果的精确度,减小结果误差,对测量审核中单核细胞增生李斯特氏菌的结果进行不确定度评定。依据测量审核计划参试作业指导书和GB 4789.30-2016中第三法进行测定,建立数学模型,分析测定结果的影响因素并进行评定。检验过程中梯度稀释、加样体积、重复性等均会引入不确定度因素,本研究结果的相对合成标准不确定度ucrel为0.071517,扩展不确定度U为0.153046,k=2.14。结果表明,对单核细胞增生李斯特氏菌进行不确定度评定的方法适用于同类样品检验中单核细胞增生李斯特氏菌不确定度的评定。

关键词：测量审核单核细胞增生李斯特氏菌不确定度评定

叶类蔬菜中单核细胞增生李斯特氏菌PCR快速检测方法的建立

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核农学报 2022年第10期36卷 2009-2018页

作者：李晓然张若鸿王纯尹树仁王晓芳杨洋崔生辉郭云昌河北科技师范学院食品科技学院河北秦皇岛066600 中国食品药品检定研究院北京100050 国家食品安全风险评估中心北京100022

为建立一种无需样品前增菌即可快速检测叶类蔬菜中单核细胞增生李斯特氏菌的聚合酶链式反应(PCR)方法,本试验将β-环糊精和牛乳蛋白包被活性炭结合用于去除叶类蔬菜基质中的PCR反应抑制因子,从而促进该菌的回收,随后以iap为靶基因,进行... 详细信息

为建立一种无需样品前增菌即可快速检测叶类蔬菜中单核细胞增生李斯特氏菌的聚合酶链式反应(PCR)方法,本试验将β-环糊精和牛乳蛋白包被活性炭结合用于去除叶类蔬菜基质中的PCR反应抑制因子,从而促进该菌的回收,随后以iap为靶基因,进行PCR检测,确定该方法的特异性、灵敏度和实用性,并评估该方法所用主要试剂在冷冻条件下的稳定性。结果表明,与prfA序列相比,该方法检测78株目标菌和63株非目标菌后,无假阳性或假阴性结果,特异性为100%;该方法无需前增菌,可在4 h内完成检测,灵敏度为10~1 CFU·25g^(-1);该方法与常规培养法在实际叶类蔬菜样品中目标菌的检出率、活体菌检测率均一致(符合率100%);所用的主要试剂在-20℃冰箱中保存至少12个月后仍可正常使用,稳定性较好。综上,该方法可快速、灵敏、特异地检测叶类蔬菜中的单核细胞增生李斯特氏菌,且实用性较好。本研究结果为降低单核细胞增生李斯特氏菌对消费者造成的安全风险提供了技术支持。

关键词：单核细胞增生李斯特氏菌 β-环糊精牛乳蛋白包被活性炭叶类蔬菜 PCR