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紫锥菊中菊苣酸和单咖啡酰酒石酸纯化工艺及菊苣酸性质研究

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紫锥菊中菊苣酸和单咖啡酰酒石酸纯化工艺及菊苣酸性质研究

作者：郭建伟湖南师范大学

学位级别：硕士

紫锥菊(Echinacea purpurea)是原产美洲的一类菊科植物,因其具有显著的免疫调节功效,是目前国际上普遍关注的一种免疫促进剂和免疫调节剂。目前药理研究表明,其中有免疫活性的物质是:咖啡酸衍生物、多糖、烷基酰胺类物质。菊苣酸为咖啡... 详细信息

紫锥菊(Echinacea purpurea)是原产美洲的一类菊科植物,因其具有显著的免疫调节功效,是目前国际上普遍关注的一种免疫促进剂和免疫调节剂。目前药理研究表明,其中有免疫活性的物质是:咖啡酸衍生物、多糖、烷基酰胺类物质。菊苣酸为咖啡酸衍生物,是紫锥菊中最重要的免疫活性成分之一。目前研究制备的菊苣酸含量还只能用来制作标准品,这严重限制了菊苣酸在药理药效等方面的研究。为此,本论文研究了较大规模纯化菊苣酸的方法,并在此基础上初步对菊苣酸在模拟胃肠道环境中的稳定性进行了研究,同时建立了一种在线抗氧化活性筛选的方法,本文做了如下工作:1.建立了大孔吸附树脂pH梯度洗脱同时分离纯化单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的方法。该方法有如下优点:1)样品前处理简单;2)洗脱剂为含少量酸的水溶液,绿色环保;3)所用试剂能够回收利用,有效的节约生产成本。2.研究了紫锥菊提取物中菊苣酸及菊苣酸单体在模拟胃肠道环境下的稳定性。本实验利用高效液相色谱研究菊苣酸在人工胃液、人工肠液环境中的稳定性,为菊苣酸的体内代谢过程提供基础性研究。结果表明,菊苣酸在模拟胃肠道环境下性质稳定,从稳定性角度考虑,菊苣酸适合开发为口服制剂。3.建立了HPLC-DPPH在线研究紫锥菊提取物抗氧化活性筛选的方法。本方法具体过程如下:用高效液相色谱将紫锥菊提取物的组分进行分离,然后通过柱后衍生的方法,泵入DPPH溶液,在517 nm处检测,如分离出来的成分有DPPH自由基清除作用,就会产生负峰,从而可以说明该成分具有抗氧化活性。该方法能够快速筛选天然产物中具有活性的成分。

关键词：紫锥菊菊苣酸单咖啡酰酒石酸 pH梯度模拟胃肠道稳定性在线筛选

市售蒲公英片HPLC特征图谱建立及其单咖啡酰酒石酸、菊苣酸含量测定

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中国民族民间医药 2018年第8期27卷 37-42页

作者：余正勇张艳刘彬桑苗杨志斌刘衡赵昱许传坤云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000 药用特种昆虫开发国家地方联合工程研究中心云南大理671000 中国西南药用昆虫及蛛形类资源开发利用协同创新中心云南大理671000 四川好医生药业集团四川成都610000 云南民族大学南亚东南亚辐射研究中心云南昆明650504

目的:建立市售蒲公英片的HPLC特征图谱并测定7个厂家蒲公英片中菊苣酸和单咖啡酰酒石酸的含量。方法:采用Sepax Gp-C_(18)色谱柱(4.6×250 mm,5μm),0.1%三氟乙酸-乙腈和0.1%三氟乙酸-水为流动系梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温40℃,检测... 详细信息

目的:建立市售蒲公英片的HPLC特征图谱并测定7个厂家蒲公英片中菊苣酸和单咖啡酰酒石酸的含量。方法:采用Sepax Gp-C_(18)色谱柱(4.6×250 mm,5μm),0.1%三氟乙酸-乙腈和0.1%三氟乙酸-水为流动系梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温40℃,检测波长323 nm。建立蒲公英片的特征图谱,进行相关性分析,并测定其单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的含量。结果:单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的线性范围分别为10.2~204.0μg(R^2=0.9999)和10.0~200.0μg(R^2=0.9999),回收率分别为100.11%和99.53%。建立了蒲公英片的特征图谱,蒲公英片中9个共有峰在7个厂家中得到追踪,并测定菊苣酸和单咖啡酰酒石酸的含量。结论:实验所建立的蒲公英片中菊苣酸和单咖啡酰酒石酸含量测定及特征图谱方法稳定性、重复性良好,可为蒲公英片的质量控制和评价提供参考。

关键词：蒲公英片特征图谱菊苣酸单咖啡酰酒石酸含量测定

超高效液相色谱法测定紫锥菊根末中单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的含量

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中国兽药杂志 2019年第12期53卷 31-37页

作者：魏秀丽张志民张传津李有志李美娣山东省兽药质量检验所济南250022 山东省畜产品质量安全监测与风险评估重点实验室济南250022 广州华农大实验兽药有限公司广州510642

为了快速测定紫锥菊根末中主成分单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的含量建立了超高效液相色谱法(UPLC).采用ACQUITY UPLCTM C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为分离柱,柱温:35℃;以乙腈-0.4%磷酸水溶液进行梯度洗脱;流速:0.35 mL/min;进样量:1... 详细信息

为了快速测定紫锥菊根末中主成分单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的含量建立了超高效液相色谱法(UPLC).采用ACQUITY UPLCTM C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为分离柱,柱温:35℃;以乙腈-0.4%磷酸水溶液进行梯度洗脱;流速:0.35 mL/min;进样量:1μL;检测波长330 nm.通过光谱图、保留时间和峰面积参数对单咖啡酰酒石酸和菊苣酸进行定性定量检测.单咖啡酰酒石酸在0.5~25μg/mL的范围内线性关系良好(R2>0.999);方法检出限为0.5μg/mL,定量限为1μg/mL;菊苣酸在1~50μg/mL的范围内线性良好(R2>0.999);检出限为1μg/mL,定量限为2μg/mL,完全满足检测需求.该方法色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于紫锥菊根末中单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的定性定量检测.

关键词：紫锥菊根末单咖啡酰酒石酸菊苣酸超高效液相色谱法

毛菊苣不同部位中菊苣酸、绿原酸、单咖啡酰酒石酸的含量测定

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新疆医科大学学报 2020年第6期43卷 792-795页

作者：杨建何倩吴娜阿吉艾克拜尔·艾萨马晓丽新疆医科大学药学院乌鲁木齐830011 中国科学院新疆理化技术研究所中科院植物资源化学重点实验室新疆医科大学附属中医医院药学部乌鲁木齐830011

目的测定毛菊苣不同部位(根、茎、种子)中菊苣酸、绿原酸和单咖啡酰酒石酸的含量。方法采用依利特Hypersil ODS柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.3%磷酸为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为328 nm,柱温为35℃,进样量为10μ... 详细信息

目的测定毛菊苣不同部位(根、茎、种子)中菊苣酸、绿原酸和单咖啡酰酒石酸的含量。方法采用依利特Hypersil ODS柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.3%磷酸为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为328 nm,柱温为35℃,进样量为10μL。结果菊苣酸、绿原酸、单咖啡酰酒石酸分别在3.22~51.60、1.33~42.56、0.256~8.208μg/mL浓度范围内线性关系良好;平均回收率分别为93.0%、101.3%、105.6%,RSD分别为3.0%、3.6%、2.6%。毛菊苣根中单咖啡酰酒石酸、绿原酸、菊苣酸的含量分别为0.024、0.092、0.143 mg/g;茎中单咖啡酰酒石酸、绿原酸、菊苣酸的含量分别为0.032、0.058、0.287 mg/g;种子中单咖啡酰酒石酸、绿原酸、菊苣酸的含量分别为0.197、1.714、1.247 mg/g。结论本法简单方便、重复性好、准确可靠,可用于毛菊苣的质量控制。

关键词：毛菊苣绿原酸单咖啡酰酒石酸菊苣酸含量测定

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紫锥菊单咖啡酰酒石酸和菊苣酸提取工艺优化

亚热带植物科学 2016年第4期45卷 321-324页

作者：苏婷婷吴翠礼覃淑仪刘金兰邱敏唐铁鑫肇庆医学高等专科学校广东肇庆526020

采用正交试验设计,选取乙醇体积浓度百分比、提取温度、提取时间、抗氧化剂用量等因素,优化紫锥菊Echinacea purpurea单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的加热回流提取工艺,并考察加入抗氧化剂对提取效果的影响。结果表明,优化的提取条件是以25%乙... 详细信息

采用正交试验设计,选取乙醇体积浓度百分比、提取温度、提取时间、抗氧化剂用量等因素,优化紫锥菊Echinacea purpurea单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的加热回流提取工艺,并考察加入抗氧化剂对提取效果的影响。结果表明,优化的提取条件是以25%乙醇,在80℃回流提取90 min。抗氧化剂用量对提取效果影响不显著。优化后的加热回流提取条件对紫锥菊单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的提取均适用,提取中无需加入抗氧化剂。

关键词：紫锥菊单咖啡酰酒石酸菊苣酸提取工艺

HPLC同时测定蒲公英颗粒中的单咖啡酰酒石酸和菊苣酸

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华西药学杂志 2018年第2期33卷 197-199页

作者：兰瑞容刘燕苏英四川省宜宾市食品药品检验检测中心

目的采用HPLC法同时测定蒲公英颗粒中单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的含量。方法采用Inertsil ODS-SP色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 m L·min^-1,检测波长330 nm,柱温40℃。结果单咖啡酰酒... 详细信息

目的采用HPLC法同时测定蒲公英颗粒中单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的含量。方法采用Inertsil ODS-SP色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 m L·min^-1,检测波长330 nm,柱温40℃。结果单咖啡酰酒石酸8.504170.100μg·m L^-1（r=0.9999）、菊苣酸2.73854.750μg·m L^-1（r=0.9996）与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为106.5%、96.39%,RSD分别为2.05%、2.62%（n=9）。结论所用方法简便、结果准确、重复性好,可用于该制剂的质量控制。

关键词：高效液相色谱法蒲公英颗粒单咖啡酰酒石酸菊苣酸含量测定质量控制

HPLC法同时测定蒲公英中单咖啡酰酒石酸、绿原酸、咖啡酸、菊苣酸的含量

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中国药师 2017年第9期20卷 1677-1679页

作者：刘燕兰瑞容兑靖冬苏英宜宾市食品药品检验检测中心四川宜宾644002

目的:建立HPLC法同时测定蒲公英中4种有机酸类成分含量。方法:采用Thermo C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长为328 nm,流速为1.0 ml·min^(-1),柱温为35℃。结果:单咖啡酰酒石酸、绿原酸、咖... 详细信息

目的:建立HPLC法同时测定蒲公英中4种有机酸类成分含量。方法:采用Thermo C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长为328 nm,流速为1.0 ml·min^(-1),柱温为35℃。结果:单咖啡酰酒石酸、绿原酸、咖啡酸、菊苣酸分别在11.59~115.90(r=0.999 9),2.50~24.96(r=0.999 8),2.27~22.70(r=0.999 5),12.44~124.4(r=0.999 8)μg·ml^(-1)范围内线性关系良好,平均回收率分别为102.50%,99.29%,96.71%,95.36%,RSD分别为2.30%,0.43%,0.78%,1.30%。结论:该法简单方便、重复性好、准确可靠,可用于蒲公英的质量控制。

关键词：高效液相色谱法蒲公英单咖啡酰酒石酸咖啡酸绿原酸菊苣酸含量测定

超高效液相色谱法测定紫锥菊根末中单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的含量

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超高效液相色谱法测定紫锥菊根末中单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的含量

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：魏秀丽张志民张传津李有志李美娣山东省兽药质量检验所山东省畜产品质量安全监测与风险评估重点实验室广州华农大实验兽药有限公司

[目的]紫锥菊(Echinacea purpurea)是原产美洲的一类菊科植物,因其具有显著的免疫刺激功效,是目前国际上普遍关注的一种免疫促进剂和免疫调节剂。紫锥菊根末为国家二类新中兽药,是由紫锥菊的根,经拣选洗净干燥粉碎过筛制备的粉末,药理... 详细信息

[目的]紫锥菊(Echinacea purpurea)是原产美洲的一类菊科植物,因其具有显著的免疫刺激功效,是目前国际上普遍关注的一种免疫促进剂和免疫调节剂。紫锥菊根末为国家二类新中兽药,是由紫锥菊的根,经拣选洗净干燥粉碎过筛制备的粉末,药理研究表明,其活性物质主要包括咖啡酸衍生物、多糖、烷基酰胺类成分,根据新兽药相关技术要求对其进行了药学、药理毒理和临床研究,证明其安全、有效,在提高猪、鸡免疫功能方面具有显著的临床效果,并对肉质和口感具有一定的改善作用。紫锥菊根末中活性成分主要包括单咖啡酰酒石酸、菊苣酸,还有少量的绿原酸和咖啡酸,在猪、鸡临床上经饲料拌匀的方式给药,安全有效。美国、英国、欧洲药典和农业农村部2171号公告关于紫锥菊根末含量测定均采用普通高效液相色谱方法,检测时间长。本研究建立超高效液相色谱(UPLC)测定紫锥菊根末中主成分单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的含量。[方法]采用反相超高效液相色谱法对紫锥菊根末中主要活性成分单咖啡酰酒石酸和菊苣酸进行了色谱分离、线性关系、重复性试验和精密度试验、检测限和定量限的测定、不同色谱条件试验,以及稳定性试验。以ACQUITY UPLC C色谱柱(2.1mm×100mm,1.7μm)为分离柱,柱温:35℃;以乙腈-0.4%磷酸水溶液,进行梯度洗脱;流速:0.35mL/min;进样量:1μL;检测波长为330nm。通过光谱图、保留时间和峰面积参数对单咖啡酰酒石酸和菊苣酸进行定性定量检测。[结果]在优化的色谱条件下,测得单咖啡酰酒石酸、菊苣酸色谱峰峰形良好,且均达到基线分离,菊苣酸、单咖啡酰酒石酸对照品和紫锥菊根末样品待测液,色谱保留时间为2.02min、6.92min左右,分离度均满足要求。在选定的色谱条件下,使用梯度洗脱的方法,可以有效地分离目的峰,菊苣酸在1-50μg/mL的范围内标准曲线:y=1.938706e3+1.281296e4,R>0.999。单咖啡酰酒石酸在0.5-25μg/mL的范围内标准曲线:y=8.392668e2+8.83837e3,R2>0.999。理论塔板数:菊苣酸83000-87000,单咖啡酰酒石酸51000-54000,分离度3.9-4.8,对称因子1.18-1.27,拖尾因子1.10-1.13;方法检出限为1μg/mL,方法定量限为2μg/mL,完全满足检测需求;使用waters超高效液相色谱仪和高效液相色谱仪,对同一样品中两主成分单咖啡酰酒石酸、菊苣酸的含量分别进行了比较,高效液相色谱运行条件按照中华人民共和国农业部公告第2171号紫锥菊根末质量标准进行检测,流速:1.5mL·min;进样量:10μL;从样品噪音和峰形分离度等方面来看,优选超高效液相色谱仪条件,背景更干净,与杂质峰的分离度更好。按照实验方法,将对照品溶液贮存一段时间后,进样,所得到的图谱中单咖啡酰酒石酸、菊苣酸峰面积RSD分别为0.47%、0.58%,说明样品稳定,满足实验要求。[结论]建立的超高效液相色谱方法用于检测紫锥菊根末主要活性成分菊苣酸和单咖啡酰酒石酸含量,色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于紫锥菊根末中单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的定性定量检测。

关键词：紫锥菊根末超高效液相色谱法单咖啡酰酒石酸菊苣酸

来源： cnki会议评论

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不同施肥量和种植密度对紫锥菊质量的影响

山西农业大学学报（自然科学版） 2024年第3期44卷 24-36页

作者：白慧媛张文珍陈凤杨平林穆素杰徐进张跃进杨建东马亚团西北农林科技大学化学与药学院陕西杨凌712100 西安交通大学第二附属医院陕西西安710000 宝鸡市陈仓农业技术推广服务中心陕西宝鸡721000 镇巴县科学技术局陕西镇巴723600 杨凌百川禾美农业有限公司陕西杨凌712100

[目的]探究紫锥菊(Echinacea purpurea(L.)Moench)在陕西省凤县的应用潜力及栽培技术。[方法]于2022-2023年开展大田试验,采用二裂式裂区试验设计,以施肥量为主区,共设5个处理F0~F4(施肥量依次为酵母源烟茎生物有机肥:0、1200、2100、3... 详细信息

[目的]探究紫锥菊(Echinacea purpurea(L.)Moench)在陕西省凤县的应用潜力及栽培技术。[方法]于2022-2023年开展大田试验,采用二裂式裂区试验设计,以施肥量为主区,共设5个处理F0~F4(施肥量依次为酵母源烟茎生物有机肥:0、1200、2100、3000、3900 kg·hm^(-2);酵母源有机无机复混肥:0、360、630、900、1170 kg·hm^(-2));移栽密度为裂区,设置2个水平,D1(63000窝·hm^(-2))和D2(31500窝·hm^(-2)),平均每窝种植3株,分别在2022年10月、2023年7月和2023年10月采样,测定不同处理紫锥菊株高、茎粗、开花枝条数、叶绿素含量、地上部分干重、根干重等生物学性状,以及地上部分和地下部分菊苣酸、单咖啡酰酒石酸、黄酮、多糖含量和紫锥菊药材产量等指标。[结果]在同一施肥条件下,随着种植密度的增加,紫锥菊的各生物学性状指标降低,除多糖含量以外其它有效成分含量及药材产量随种植密度的增加而增加;在同一栽培密度下,随着施肥量的增加,各生物学性状指标、有效成分含量及药材产量呈现先升高后降低的趋势。施肥量、种植密度以及施肥量和种植密度的互作效应对紫锥菊菊苣酸、单咖啡酰酒石酸、黄酮、多糖含量和紫锥菊药材产量有显著影响(P酸、单咖啡酰酒石酸、黄酮含量高于地下部分,而地下部分多糖含量高于地上部分,并且以2023年7月采收的紫锥菊质量及产量最佳。其中F1D1、F2D1处理组有较高的产量及有效成分含量。[结论]推荐紫锥菊种植时施1200~2100kg·hm^(-2)酵母源烟茎生物有机肥和360~630kg·hm^(-2)酵母源有机无机复混肥,种植密度为每公顷63000窝(种植株距为30 cm,行距为60 cm),以获得较高品质和产量的紫锥菊药材。

关键词：紫锥菊种植密度施肥量菊苣酸单咖啡酰酒石酸多糖黄酮

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