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抗人表皮生长因子受体2单克隆抗体在乳腺癌治疗中的心脏毒性

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肿瘤研究与临床 2022年第6期34卷 466-469页

作者：常方悦张永强中国医学科学院北京协和医学院研究生院北京100730 北京医院肿瘤科国家老年医学中心中国医学科学院老年医学研究院北京100730

靶向治疗具有高特异性和低毒性, 是人表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌重要治疗手段, 能延长HER2阳性早期乳腺癌患者的无病生存时间和总生存时间, 明显延长HER2阳性晚期乳腺癌患者的无进展生存时间和总生存时间。但靶向药物也可阻断... 详细信息

靶向治疗具有高特异性和低毒性, 是人表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌重要治疗手段, 能延长HER2阳性早期乳腺癌患者的无病生存时间和总生存时间, 明显延长HER2阳性晚期乳腺癌患者的无进展生存时间和总生存时间。但靶向药物也可阻断靶器官外正常信号通路, 部分患者出现治疗相关不良反应, 导致剂量降低、治疗延迟和中断, 甚至危及患者生命。不良反应中心脏毒性是靶向HER2药物潜在的严重不良反应之一。目前应用于HER2阳性乳腺癌临床治疗的靶向药物有大分子单克隆抗体类药物(如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗)、抗体-药物偶联物(如T-DM1、T-DXd)以及小分子酪氨酸激酶抑制剂等。文章就包括抗体-药物偶联物的单克隆抗体类药物的HER2靶向药物在乳腺癌靶向治疗中的心脏毒性进行综述, 为临床用药提供参考。

关键词：乳腺肿瘤受体 erbB-2 抗体单克隆分子靶向治疗心脏毒性

单克隆靶向转移人肝癌细胞株和裸鼠移植模型的建立

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中华肝脏病杂志 2012年第7期20卷 532-536页

作者：万金良陶中华吴伟忠唐俊孙惠川王鲁任正刚樊嘉复旦大学附属中山医院肝癌研究所上海200032

目的建立具有器官转移亲嗜性的单克隆人肝癌细胞株和相应的裸鼠移植模型。方法取肺和淋巴结转移亲嗜性人肝癌荧光细胞株HCCLM3-R-LMI及HCCLM3-R-LnM1，通过极限稀释法进行单细胞培养，获得8个HCCLM3-R-LMI来源的单克隆细胞株（LMI-S2，... 详细信息

目的建立具有器官转移亲嗜性的单克隆人肝癌细胞株和相应的裸鼠移植模型。方法取肺和淋巴结转移亲嗜性人肝癌荧光细胞株HCCLM3-R-LMI及HCCLM3-R-LnM1，通过极限稀释法进行单细胞培养，获得8个HCCLM3-R-LMI来源的单克隆细胞株（LMI-S2，-S3，-S4，-S5，-S11，-S15，-S21，-S23）和5个HCCLM3-R-LnMI来源的单克隆细胞株（LnM1-S7，-S11，-S13，-S17，-S20）;将上述人肝癌单克隆细胞分别接种于4周龄的裸鼠皮下，3周后皮下瘤组织移植至裸鼠的肝脏，6周后观察裸鼠肺和腹腔淋巴结转移灶荧光面积，并与肺组织连续切片中的转移灶数目进行比较。同一株细胞的肺和淋巴结转移情况比较用Wilcoxon秩和检验，单克隆细胞株之间的肺、淋巴结转移隋况比较用Kruskal-Wallis检验。结果在13株人肝癌单克隆细胞中，有6株细胞形成皮下瘤，移植至裸鼠肝脏后表现出不同的转移潜能和器官靶向特性。其中LM1-S3，LM1-S4，LM1-S5和LM1-S11单克隆细胞的肺转移积分吸光度值分别为80923±10162、1506000±297064、36140±8210和508448±1342729（P〈0．01），但不发生淋巴结转移。LnM1-S11单克隆细胞的肺与淋巴结转移灶积分吸光度值分别为435062±206620和1254000±225171。结论成功建成了不同转移潜能和器官亲嗜性的人肝癌单克隆细胞株和裸鼠移植模型，其中LM1-S3，LM1-S4，LM1-S5和LM1-S11为肺特异亲嗜性的人肝癌单克隆细胞株，而LnM1-S11细胞为肺和淋巴结双重亲嗜性的人肝癌单克隆细胞株，为肝癌转移器官靶向性研究提供了理想的体内外模型。

关键词：癌肝细胞肿瘤转移单克隆器官倾向性模型动物荧光抗体技术

环鸟苷酸兔单克隆抗体的制备和竞争酶联免疫吸附测定方法的建立

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浙江大学学报（医学版） 2015年第4期44卷 423-428页

作者：谭兴梅胡海峰陈枢青浙江大学药学院药理毒理与生化药学研究所浙江杭州310058 宜康(杭州)生物技术有限公司浙江杭州310015

目的：研制环鸟苷酸（cGMP）兔单克隆抗体，并建立测定cGMP浓度的竞争ELISA方法。方法：用人工合成的环鸟苷酸一钥孔血蓝蛋白（cGMP-KLH）免疫新西兰大白兔，采用Epitomics公司的兔单克隆抗体技术制备针对cGMP的兔单克隆抗体；应用cGMP... 详细信息

目的：研制环鸟苷酸（cGMP）兔单克隆抗体，并建立测定cGMP浓度的竞争ELISA方法。方法：用人工合成的环鸟苷酸一钥孔血蓝蛋白（cGMP-KLH）免疫新西兰大白兔，采用Epitomics公司的兔单克隆抗体技术制备针对cGMP的兔单克隆抗体；应用cGMP兔单克隆抗体建立竞争ELISA方法，并对该方法的特异性、精密度和回收率进行测定。结果：所制备的cGMP兔单克隆抗体的效价为3．1．g／mL，50％抑制浓度（IC50）为12．57ng／mL。与环磷酸肌苷的交叉反应率为33．1％，与其他结构类似的化合物无交叉反应。所建立的cGMP竞争ELISA方法的检测范围为0～120ng／mL，最低检测限为1．95ng／mL，回收率为89％～103％，批次内和批次间的精密度分别小于11．68％和13．85％。结论：成功制备高效价、高特异性的cGMP兔单克隆抗体，并建立了测定cGMP浓度的竞争ELISA方法。

关键词：环GMP 抗体单克隆酶联免疫吸附测定兔

靶向上皮特异性抗原阳性肝癌干细胞单克隆抗体联合顺铂治疗肝癌的实验研究

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中华肿瘤杂志 2016年第5期38卷 333-339页

作者：何永燕遇珑容雁孙立新孙力超杨治华冉宇靓李力广西医科大学医学科学实验中心南宁530021 国家癌症中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室 100021 广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科南宁530021

目的探讨靶向肝癌干细胞单克隆抗体的生物学特征及其联合顺铂治疗肝癌的疗效。方法采用无血清悬浮培养法和PKH26染色法确定肝癌Bel7402-V3细胞中存在肿瘤干细胞。细胞免疫荧光法检测单克隆抗体15D2识别的抗原蛋白与PKH26阳性细胞及上皮... 详细信息

目的探讨靶向肝癌干细胞单克隆抗体的生物学特征及其联合顺铂治疗肝癌的疗效。方法采用无血清悬浮培养法和PKH26染色法确定肝癌Bel7402-V3细胞中存在肿瘤干细胞。细胞免疫荧光法检测单克隆抗体15D2识别的抗原蛋白与PKH26阳性细胞及上皮特异性抗原（ESA）在Bel7402-V3细胞中的表达情况。无血清悬浮培养法检测流式细胞术分选出的15D2阳性细胞的自我更新能力以及15D2对Bel7402．V3细胞自我更新能力的影响。CCK8法检测15D2对细胞顺铂耐药能力的影响。裸鼠体内治疗实验分析15D2联合顺铂对Bel7402．V3移植瘤生长的抑制作用。结果Bel7402-V3细胞无血清悬浮培养11d后形成的细胞球体中存在单个PKH26阳性细胞。细胞免疫荧光显示，单克隆抗体15D2识别的抗原分子能与PKH26和ESA在Bel7402-V3细胞上共定位。15D2阳性细胞和15D2阴性细胞的体外成球率分别为（30．4±3．4）％和（8．8±1．8）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。15D2阳性细胞具有更高的顺铂耐药性，15D2阳性细胞和15D2阴性细胞的半数抑制浓度（IC50）分别为1．014和0．365μmol／L。单克隆抗体15D2能够显著抑制Bel7402．V3细胞的无血清成球，抑制率为37．5％。经15D2处理后的Bel7402-V3细胞，顺铂耐药能力明显下降，其Ic50为0．211μg／ml，而对照组的IC50为0．325μg／ml。抗体体内治疗实验结果显示，50、25、12．5mg／kg15D2组的肿瘤生长抑制率分别为82．6％、71．4％和60．0％，50mg／kg15D2＋顺铂组的肿瘤生长抑制率为91．0％，顺铂组的肿瘤生长抑制率为56．7％。结论单克隆抗体15D2是抗肝癌干细胞的功能性单克隆抗体，为肝癌干细胞靶向治疗的候选抗体药物。

关键词：肝肿瘤细胞系肿瘤肿瘤干细胞抗体单克隆顺铂上皮特异性抗原抗药性

CD20单克隆抗体在重症系统性红斑狼疮患儿治疗中的应用

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中华儿科杂志 2012年第9期50卷 697-704页

作者：苏改秀吴凤岐王芳周志轩黄小兰鲁杰首都儿科研究所附属儿童医院风湿免疫科北京100020 首都儿科研究所附属儿童医院分子免疫室北京100020 首都儿科研究所附属儿童医院临床中心实验室北京100020

目的探讨CD20单克隆抗体（利妥昔单抗）治疗重症儿童系统性红斑狼疮（SLE）的有效性和安全性。方法诊断依据1997年美国风湿病学会SLE的分类标准。纳入标准：年龄≤16岁，至少1个以上重要器官受累，SLEDAI评分〉10分，常规治疗反应欠佳... 详细信息

目的探讨CD20单克隆抗体（利妥昔单抗）治疗重症儿童系统性红斑狼疮（SLE）的有效性和安全性。方法诊断依据1997年美国风湿病学会SLE的分类标准。纳入标准：年龄≤16岁，至少1个以上重要器官受累，SLEDAI评分〉10分，常规治疗反应欠佳。治疗方法：抗CD20单抗剂量375mg／（m^2次），于第0、14天分次静脉输注。于CD20单抗治疗前及治疗后2周、1、3、6、12个月评估疗效，并监测不良反应。结果共20例SLE患儿，男女比1：3，年龄5～16岁，病程（3．0±2．5）年，平均随访（27．0±7．8）个月。10例狼疮脑病患儿谵妄、认知障碍等在1个月内明显改善；15例狼疮肾炎患儿中14例用药2～3个月后改善，1例无明显缓解；4例狼疮肺炎患儿用药1个月内症状减轻；18例血细胞减少患儿中16例在1个月内恢复。95％患儿（19／20）2周内B细胞清除，90％患儿（18／20）B淋巴细胞计数于1年内恢复。SLEDAI评分用药后明显降低，用药1年泼尼松剂量从（45．0±4．7）mg／m^2降至（12．0±2．7）mg／m^2（P〈0．001）。用药半年内5例患儿出现肺炎，其中2例重症肺炎分别为曲霉菌肺炎及卡氏肺囊虫肺炎，均治疗后好转，无死亡病例。随B细胞恢复，2例患儿分别于治疗15、18个月后病情反复，给予第2疗程抗CD20单抗后，1例病情再次缓解，另外1例病情缓解不明显。结论抗CD20单抗治疗重症儿童SLE疗效肯定，耐受性较好，部分病例可能发生严重感染。

关键词：抗原 CD20 抗体单克隆红斑狼疮系统性治疗结果儿童

GCET2兔单克隆抗体的制备及其在弥漫性大B细胞淋巴瘤中初步应用

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中华病理学杂志 2016年第12期45卷 844-849页

作者：潘红阳张昕霞翁媛媛周韧浙江大学病理学与法医研究所浙江大学病理学与病理生理学系杭州310058 宜康(杭州)生物技术有限公司

目的开发制备GCET2兔单克隆抗体，研究其在弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）诊断中的应用。方法采用兔单克隆抗体技术制备GCET2兔单克隆抗体；经免疫印迹、免疫组织化学（IHC）、免疫细胞化学和流式细胞术等方法鉴定其特异性；并用IHC法，... 详细信息

目的开发制备GCET2兔单克隆抗体，研究其在弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）诊断中的应用。方法采用兔单克隆抗体技术制备GCET2兔单克隆抗体；经免疫印迹、免疫组织化学（IHC）、免疫细胞化学和流式细胞术等方法鉴定其特异性；并用IHC法，检测GCET2与其他DLBCL诊断相关标志物（CD10、bcl-6、MUM1、GCET1、FOXP1、Ki-67和CMYC）在81例DLBCL、5例滤泡细胞淋巴瘤和2例Burkitt淋巴瘤临床样本组织中的表达。结果GCET2（EP316）抗体能特异性识别生发中心B细胞及其来源的肿瘤组织和细胞系（Raji、Daudi和Ramos）中的GCET2蛋白；对81例DLBCL进行检测，GCET2的阳性率达到43.2%（35/81），明显高于其他生发中心标志物的阳性检出率。此外，CMYC高表达DLBCL样本在GCET2阴性表达和阳性表达样本中所占比例分别为15.2%（7/46）和2.8%（1/35）。结论本研究制备的GCET2（EP316）抗体具有良好的特异性，是一种敏感的生发中心B细胞标记抗体。GCET2与其他分子标志物联用，可能有助于提高对生发中心B细胞型DLBCL的检测敏感性。

关键词：淋巴瘤大B-细胞弥漫性生发中心抗体单克隆

抗狂犬病病毒CVS-11株单克隆抗体的制备及鉴定

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中华实验和临床病毒学杂志 2009年第1期23卷 68-70页

作者：曹蕾李雄张守峰李六斤扈荣良唐青第四军医大学实验动物研究中心西安710032 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心寄生虫病科解放军军事医学科学院军事兽医研究所

目的制备抗狂犬病毒单克隆抗体，为建立快速准确的狂犬病毒抗原检测方法奠定基础。方法将狂犬病病毒CVS-11株纯化浓缩后免疫6～8周龄雌性BALB／c小鼠，取其脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞进行融合，经细胞克隆和间接ELISA筛选，获得稳定分泌... 详细信息

目的制备抗狂犬病毒单克隆抗体，为建立快速准确的狂犬病毒抗原检测方法奠定基础。方法将狂犬病病毒CVS-11株纯化浓缩后免疫6～8周龄雌性BALB／c小鼠，取其脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞进行融合，经细胞克隆和间接ELISA筛选，获得稳定分泌抗狂犬病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。小鼠腹腔注射法制备大量单克隆抗体并测定腹水效价，用G蛋白亲和层析柱进行纯化，间接ELISA法和间接荧光法鉴定单克隆抗体的类型、特异性及敏感性。结果细胞融合率达100％，经克隆筛选获4株稳定分泌抗狂犬病病毒抗体的杂交瘤细胞株，其腹水效价分别为1×10^4，1×10^5，1×10^4和1×10^5；4株单抗均为IgG类型且特异性好。结论制备的单抗具有良好特异性和敏感性。

关键词：狂犬病病毒抗体单克隆检测方法

CCR8在肿瘤免疫抑制微环境中研究与应用进展

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国际生物制品学杂志 2024年第2期47卷 104-109页

作者：王海庭(综述) 梁红远瞿爱东(审校) 上海生物制品研究所有限责任公司第一研究室上海200051

C-C基序趋化因子受体8(C-C motif chemokine receptor 8,CCR8)是一种调控免疫细胞趋化迁移的7次跨膜蛋白,在肿瘤微环境中高表达于Treg表面。由于CCR8^(+)Treg能强烈抑制肿瘤免疫,因此CCR8是一种扭转抑制型肿瘤微环境的理想靶点。目前有... 详细信息

C-C基序趋化因子受体8(C-C motif chemokine receptor 8,CCR8)是一种调控免疫细胞趋化迁移的7次跨膜蛋白,在肿瘤微环境中高表达于Treg表面。由于CCR8^(+)Treg能强烈抑制肿瘤免疫,因此CCR8是一种扭转抑制型肿瘤微环境的理想靶点。目前有多种在研的靶向CCR8抗体药物,可在多种肿瘤模型中特异性清除肿瘤浸润CCR8^(+)Treg、扭转免疫抑制,展现出良好的抗肿瘤活性。此文对CCR8^(+)Treg促进肿瘤进展的基础研究和靶向药物应用进行综述,以期为该靶点肿瘤免疫治疗研究提供参考。

关键词： C-C基序趋化因子受体8 调节性T细胞肿瘤微环境抗体单克隆

卵巢癌抗抗独特型单克隆抗体3D12的制备及初步研究

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北京大学学报（医学版） 2008年第2期40卷 170-173页

作者：张超崔恒李小平叶雪付天云冯捷昌晓红魏丽惠北京大学人民医院妇科肿瘤中心北京100044

目的:制备卵巢癌抗抗独特型单克隆抗体并进行初步鉴定,为深入研究卵巢癌疫苗的主动免疫机制奠定基础。方法:以卵巢癌抗独特型单克隆抗体6B11作为免疫原,采用杂交瘤技术制备抗抗独特型单克隆抗体3D12。经酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫... 详细信息

目的:制备卵巢癌抗抗独特型单克隆抗体并进行初步鉴定,为深入研究卵巢癌疫苗的主动免疫机制奠定基础。方法:以卵巢癌抗独特型单克隆抗体6B11作为免疫原,采用杂交瘤技术制备抗抗独特型单克隆抗体3D12。经酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫组织化学、流式细胞学、免疫印迹杂交等检测其特异性结合抗原的性质;竞争抑制实验鉴定其特异性结合的抗原表位。结果:获得1株稳定分泌3D12的杂交瘤细胞,所分泌的3D12能够特异性结合6B11及卵巢癌初始抗原OC166-9,并能竞争抑制COC166-9(抗OC166-9的单克隆抗体Ab1)与OC166-9的结合。免疫印迹杂交显示,3D12与COC166-9免疫沉淀的蛋白的相对分子质量相同。该抗体为IgM,亲和力约为8.34×107L/mol。结论:卵巢癌抗抗独特型单克隆抗体3D12属Ab1样Ab3,间接证实6B11为抗原内影像型抗独特型抗体。

关键词：卵巢肿瘤抗体抗独特型抗体单克隆