检索结果-南通市图书馆

酿酒科技 2010年第6期 35-38页

作者：郝欣肖冬光申童李月强工业微生物教育部重点实验室天津科技大学生物工程学院天津300457

通过比较7株酿酒酵母菌株的发酵性能和高级醇生成量,筛选出发酵周期短、发酵速度快、酒精度最高和总高级醇含量较低的菌株AY-15。以AY-15为出发菌株制作单倍体,经过杜氏管发酵实验和酒精浓醪发酵实验,最终获得a-8和α-222株单倍体菌株,... 详细信息

通过比较7株酿酒酵母菌株的发酵性能和高级醇生成量,筛选出发酵周期短、发酵速度快、酒精度最高和总高级醇含量较低的菌株AY-15。以AY-15为出发菌株制作单倍体,经过杜氏管发酵实验和酒精浓醪发酵实验,最终获得a-8和α-222株单倍体菌株,其发酵性能与AY-15基本相当,酒精度分别为15.6%vol和15.5%vol;高级醇含量均比AY-15高级醇生成量低,分别为302.268mg/L和298.446mg/L。a-8和α-22可为后续分子育种降低高级醇生成量奠定良好基础。

关键词：浓醪发酵高级醇发酵性能单倍体制备

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酿酒酵母W5单倍体的制备及其代谢水平分析

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食品科学 2018年第8期39卷 57-63页

作者：王长丽佟天奇刘文娟张云野宋刚葛菁萍黑龙江大学生命科学学院微生物学黑龙江省高校重点实验室黑龙江哈尔滨150080 黑龙江大学农业微生物技术教育部工程研究中心黑龙江哈尔滨150500

为获得遗传稳定的单倍体酵母菌株,本实验以二倍体酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae W5为出发菌株,优化单倍体制备和分离的条件,获得单倍体细胞;利用随机孢子分析法和MAT-聚合酶链式反应法对单倍体菌株进行分离和鉴定,通过连续传代培养... 详细信息

为获得遗传稳定的单倍体酵母菌株,本实验以二倍体酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae W5为出发菌株,优化单倍体制备和分离的条件,获得单倍体细胞;利用随机孢子分析法和MAT-聚合酶链式反应法对单倍体菌株进行分离和鉴定,通过连续传代培养的方式验证单倍体菌株的稳定性,并从代谢水平分析单倍体菌株的发酵性能。研究表明:*** W5在改良SPM培养基中30℃条件下培养8d,产孢率最高为(35.57±0.82)%。经30mg/m L蜗牛酶液处理2h后,菌悬液的孢子释放率达到(47.06±0.23)%。本实验共分离出7株单倍体菌株,其中菌株*** H14(MAT-a)遗传性能最稳定。当以葡萄糖为底物,30℃、150 r/min发酵30h,乙醇质量浓度达到最大,为(40.46±1.06)g/L,较*** W5发酵24h乙醇最大质量浓度(51.65±2.39)g/L下降了21.67%,乙酸、乙偶姻的产量分别提高了12.7%和57.14%,获得理想的单倍体菌株。本实验为***单倍体的制备提供了一定研究经验,也丰富了酵母遗传学研究的理论基础。

关键词：酿酒酵母单倍体制备验证代谢分析

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MAT-α型单倍体酿酒酵母Z5的制备及其发酵特性分析

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中国酿造 2020年第11期39卷 92-96页

作者：尹紫良王长丽葛菁萍黑龙江大学农业微生物技术教育部工程研究中心黑龙江哈尔滨150080 黑龙江大学生命科学学院黑龙江省普通高校微生物重点实验室黑龙江哈尔滨150080

为制备一株具有明显代谢特征的MAT-α型单倍体酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株,该研究采用随机孢子分离、MAT-聚合酶链式反应(MAT-PCR)、倍性杂交实验和连续传代培养等方法对二倍体*** W5(MATa/α)进行单倍体菌株的分离鉴定和制... 详细信息

为制备一株具有明显代谢特征的MAT-α型单倍体酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株,该研究采用随机孢子分离、MAT-聚合酶链式反应(MAT-PCR)、倍性杂交实验和连续传代培养等方法对二倍体*** W5(MATa/α)进行单倍体菌株的分离鉴定和制备,并从其代谢产物和代谢关键酶活性水平分析了该菌株的发酵性能。结果表明,在相同发酵条件下单倍体菌株Z5(MAT-α)的乙醇最大质量浓度为(37.66±1.34)g/L,较菌株W5的乙醇最大质量浓度(48.65±2.39)g/L下降了22.59%,但乙酸和乙偶姻的质量浓度却分别提高了57.89%和66.67%。虽然菌株Z5较W5的乙醇脱氢酶(ADH)酶活性明显下调了12.12%,但菌株ILV2和BDH1的酶活性却分别提高了25.0%和33.33%,获得了理想的单倍体菌株。

关键词：酿酒酵母单倍体制备代谢分析关键酶活性

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毕赤酵母Pichia anomala SRF对苹果采后青霉病的生防机制研究

毕赤酵母Pichia anomala SRF对苹果采后青霉病的生防机制研究

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作者：李慧玲广东海洋大学

学位级别：硕士

由Penicillium expansum引起苹果、梨等水果的青霉病，是水果采摘后的重要病害之一，严重影响了果实的食用价值和市场价值。生物拮抗菌能有效防治果实采摘后腐烂，降低化学杀菌剂的用量，从而增加食品的安全性，降低了潜在的环境危害，... 详细信息

由Penicillium expansum引起苹果、梨等水果的青霉病，是水果采摘后的重要病害之一，严重影响了果实的食用价值和市场价值。生物拮抗菌能有效防治果实采摘后腐烂，降低化学杀菌剂的用量，从而增加食品的安全性，降低了潜在的环境危害，然而人们对酵母拮抗菌的作用机理还没有具体的相关报道，拮抗菌的抑菌机理的研究是增强拮抗菌的生防效果以及进行菌株筛选的重要前提。近年来，尽管不少研究者在生防模式方面做了不少工作，但由于目前研究方法和手段的有限性，拮抗酵母菌的生防模式目前还不是非常清楚。目前的研究结果表明拮抗酵母菌的主要抑菌模式包括营养竞争、空间位点竞争、寄生、分泌几丁质酶和葡聚糖酶。本文主要从异常毕赤酵母SRF对苹果采摘后青霉病的防治效果，单倍体的获得以及酵母拮抗菌P. anomala SRF外切葡聚糖酶基因的克隆与表达，外切葡聚糖酶基因敲除载体的构建等四个部分进行了研究，主要结果如下：1.异常毕赤酵母SRF能够有效地抑制苹果青霉病的发生，拮抗菌的抑菌效果与使用浓度呈正相关，酵母拮抗菌的使用浓度越高，苹果青霉病的发病率越低，病斑直径也就越小。2.根据已报道的P. anomala外切葡聚糖酶基因设计引物，克隆了SRF外切葡聚糖酶基因，命名为PaExg（GenBank: AJ222862.1）。基因和氨基酸序列分析表明，PaExg开放阅读框（ORF）长1284bp，编码427个氨基酸，分子量为49.469kD，等电点为4.72。序列比对和同源性分析表明，该序列与GenBank登录的P. anomala strain K的同源性高达100%，PaExg的保守结构域分析表明，PaExg属于GH15家族。构建了SRF外切葡聚糖酶基因原核表达载体，并在IPTG诱导下在大肠杆菌中获得了成功表达，表达的转化子表现出明显的葡聚糖酶活性，验证了该菌株葡聚糖酶基因的克隆。3.通过对预培养时间、温度、盐离子及其梯度浓度培养条件进行了研究。确定了异常毕赤酵母SRF野生型二倍体细胞的最佳产孢条件，在YPD培养基上预培养24h，连续传代2次后，于最佳诱导培养基上（葡萄糖1%，乙酸钠1.4%，氯化钾0.4%，琼脂2%），28℃诱导培养7d，其产孢率能达80%以上。K+和Ac-对异常毕赤酵母SRF孢子的产生起到关键作用。4.通过分析SRF外切葡聚糖酶基因序列和PUG6载体上的多克隆位点上的酶切位点关系，设计了三对引物进行PCR扩增，构建出带有SRF外切葡聚糖酶基因上下臂的敲除载体，通过单酶切切出一段长度为2500bp的葡聚糖酶基因敲除组件。

关键词：毕赤酵母SRF 苹果采后青霉病生物防治机制基因克隆单倍体制备

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