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金匮肾气汤对单侧输尿管梗阻大鼠肾纤维化缺氧的影响及作用机制

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北京中医药大学学报 2019年第9期42卷 753-759页

作者：刘春燕梁承谦谷依红易纯唐群湖南中医药大学

目的探讨金匮肾气汤对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化缺氧的影响及作用机制。方法雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组、模型组、金匮肾气汤组、依那普利组,每组6只,采用左侧输尿管结扎术造模,UUO术后第1天开始灌胃,金匮肾气汤1.8 g/... 详细信息

目的探讨金匮肾气汤对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化缺氧的影响及作用机制。方法雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组、模型组、金匮肾气汤组、依那普利组,每组6只,采用左侧输尿管结扎术造模,UUO术后第1天开始灌胃,金匮肾气汤1.8 g/kg,依那普利10 mg/kg,每日1次。第21天处死大鼠,取梗阻肾组织,HE和Masson染色观察肾组织病理改变,免疫荧光检测Tomato Lectin、Hypoxyprobe-1和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在肾组织的表达, Western Blot检测转化生长因子-β1 (TGF-β1)、骨形态发生蛋白(BMP-7)和HIF-1α在肾组织的表达。结果与模型组比较,金匮肾气汤治疗后,HE和Masson染色结果提示梗阻肾肾盂扩张减轻、肾实质变厚,间质胶原阳性面积减少,Western Blot检测梗阻肾组织中TGF-β1蛋白表达下调、BMP-7蛋白表达上调(P梗阻肾组织中血管密度增加、缺氧改善,HIF-1α表达下调(P大鼠梗阻肾组织纤维化,其作用机制可能与其改善肾间质缺氧有关。

关键词：金匮肾气汤肾纤维化单侧输尿管梗阻大鼠缺氧缺氧诱导因子-1α

复方金钱草颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

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中药药理与临床 2015年第1期31卷 305-307页

作者：赵慧上海第二军医大学附属长海医院肾内科上海200433

目的:探讨复方金钱草颗粒对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾间质纤维化的影响。方法:将20只雄性SD大鼠随机分为对照组与治疗组,建立UUO模型,治疗组每天早、中、晚各给予复方金钱草颗粒1次,1周为1疗程;对照组则给予生理盐水。1周后处死大... 详细信息

目的:探讨复方金钱草颗粒对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾间质纤维化的影响。方法:将20只雄性SD大鼠随机分为对照组与治疗组,建立UUO模型,治疗组每天早、中、晚各给予复方金钱草颗粒1次,1周为1疗程;对照组则给予生理盐水。1周后处死大鼠,处死前留取大鼠的血液,取对侧肾脏行HE染色,观察肾脏组织的病理改变,并用免疫组化的方法检测大鼠肾脏组织中TGF-β1、III型胶原的表达,并检测大鼠血清中血肌酐、血尿酸的变化。结果:治疗组治疗后TGF-β1和III型胶原水平(0.39±0.06 ng/ml、15.3±4.8μg/L)均显著低于对照组(0.81±0.11 ng/ml、61.5±15.8μg/L)。治疗组治疗后尿素氮水平和肌酐水平(6.1±1.1 mmol/L、46.8±9.8μmol/L)均显著低于对照组(13.5±2.6 mmol/L、118.5±26.1μmol/L)。结论:复方金钱草在改善UUO大鼠中肾组织纤维化及改善肾功能有一定作用。

关键词：复方金钱草颗粒单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化

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地龙组分对单侧输尿管梗阻大鼠的保护作用

中华中医药学刊 2015年第9期33卷 2278-2280,I0026页

作者：郑敏敏蔡旭东钟光辉宁波市中医院肾内科浙江宁波315000

目的:研究地龙组分对单侧输尿管梗阻大鼠的保护作用。方法:健康雄性Wistar大鼠60只,随机分组:假手术组+模型组+地龙低剂量组+地龙高剂量组。采用单侧输尿管结扎法复制肾间质纤维化大鼠模型,分别于术后2周、4周处死各组的6只大鼠,检测大... 详细信息

目的:研究地龙组分对单侧输尿管梗阻大鼠的保护作用。方法:健康雄性Wistar大鼠60只,随机分组:假手术组+模型组+地龙低剂量组+地龙高剂量组。采用单侧输尿管结扎法复制肾间质纤维化大鼠模型,分别于术后2周、4周处死各组的6只大鼠,检测大鼠24 h尿蛋白定量及血肌酐、尿素氮。取梗阻侧肾组织标本,HE染色后光镜下观察肾脏病理改变。结果:地龙治疗组在对应时间点上较模型组梗阻侧肾脏的肿大及积水程度较轻,色泽较红润。在不同的时间点各组大鼠24 h尿蛋白定量无统计学差异(P﹥0.05);地龙治疗组大鼠的BUN、Scr水平在第2、4周时均低于模型组(P大鼠BUN、Scr水平低于地龙高剂量组。3 HE染色结果显示:在对应的时间点,地龙治疗组较模型组肾纤维化程度轻。结论:地龙组分能够改善单侧输尿管梗阻大鼠的肾功,降低血肌酐、尿素氮水平,并改善单侧输尿管梗阻大鼠的肾脏病理。

关键词：地龙组分单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化

熊果酸对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮-间充质转分化的干预研究

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熊果酸对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮-间充质转分化的干预研究

作者：张鹏程福建医科大学

学位级别：硕士

目的探讨熊果酸干预治疗对单侧输尿管梗阻模型大鼠肾间质损伤过程中梗阻侧肾脏的病理变化和肾小管上皮-间充质转分化标志蛋白E-钙粘蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、成纤维细胞特异性蛋白-1表达的影响，为临床防治肾小管间质纤维化提供实验依... 详细信息

目的探讨熊果酸干预治疗对单侧输尿管梗阻模型大鼠肾间质损伤过程中梗阻侧肾脏的病理变化和肾小管上皮-间充质转分化标志蛋白E-钙粘蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、成纤维细胞特异性蛋白-1表达的影响，为临床防治肾小管间质纤维化提供实验依据。方法24只体质量180-200g清洁级雄性SD大鼠随机分为假手术组（n=6），模型组（n=6），模型+熊果酸干预组（n=6），模型+依那普利干预组（n=6），制备单侧输尿管梗阻模型。于术前1天开始干预组分别予熊果酸和依那普利灌胃，假手术组和模型组予等量生理盐水灌胃。各组大鼠于术后14天取手术侧肾组织。HE染色、Masson染色观察肾小管间质病变，免疫组化法检测E-钙粘蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、成纤维细胞特异性蛋白-1在小管间质中的表达，并进行半定量分析;BCA法测定样品总蛋白含量并用以校正酶联免疫吸附试验定量检测α-平滑肌肌动蛋白的表达量。结果***染色：假手术组大鼠肾组织无明显变化;模型组大鼠肾小管间质病变明显，表现为组织中炎性细胞浸润，肾小管上皮细胞肿胀，肾小管明显扩张/萎缩塌陷，间质形成纤维化病变;熊果酸干预组和依那普利干预组大鼠肾小管间质病变则相对减轻。 ***染色半定量分析：模型组、药物干预组与假手术组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）;熊果酸组、依那普利组、模型组组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。 3.免疫组化染色半定量分析：①与假手术组比，模型组大鼠肾小管上皮细胞E-钙粘蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、成纤维特异性蛋白-1表达差异具有统计学意义（P＜0.05）。②与模型组比，药物干预组E-钙粘蛋白、α-平滑肌肌动蛋白表达差异具有统计学意义（P＜0.05）;成纤维细胞特异性蛋白-1表达差异无统计学意义（P＞0.05）。③与依那普利组比，熊果酸组大鼠E-钙粘蛋白表达差异具有统计学意义（P＜0.05）;α-平滑肌肌动蛋白、成纤维特异性蛋白-1表达差异无统计学意义（P＞0.05）。 4.酶联免疫吸附试验分析：经BCA法测定样品总蛋白含量校正,模型组、药物干预组α-平滑肌肌动蛋白表达与假手术组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）;熊果酸组、依那普利组、模型组组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论单侧输尿管梗阻模型大鼠在其肾损伤过程中，给予熊果酸和依那普利干预治疗可使肾小管上皮-间充质转分化标志蛋白E-钙粘蛋白的表达增加，α-平滑肌肌动蛋白、成纤维细胞特异性蛋白-1的表达减少，从而抑制肾小管上皮-间充质转分化，减轻肾小管间质纤维化。熊果酸和依那普利在抑制肾小管上皮-间充质转分化，减轻梗阻肾纤维化上效果无明显差异。

关键词：熊果酸单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮-间充质转分化肾小管间质纤维化

土茯苓总黄酮抗单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化研究

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浙江中医药大学学报 2017年第12期41卷 944-950页

作者：蔡月琴陈方明方明笋朱科燕王德军浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究所杭州310053

[目的]研究土茯苓总黄酮(smilax glabra flavonoids,SGF)对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠肾功能的影响及相关机制。[方法]将60只雄性SD大鼠分出对照组10只,剩余大鼠建立肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)模型,将造模后大鼠依据体质量分为模型组、SGF低剂量组15mg/(kg·d)、SGF中剂量组30mg/(kg·d)、SGF高剂量组60mg/(kg·d)及厄贝沙坦组10mg/(kg·d),每组10只。各组大鼠均连续灌胃给予对应药物2周。全自动生化仪检测大鼠血清白蛋白(albumin,ALB)、血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血清肌酐(serum creatinine,Scr)的含量,以及24h尿蛋白(urine total protein,U-TP)、尿尿素氮(urine urea nitrogen,UUN)、尿肌酐(creatinine,CREA)的含量,并计算肌酐清除率(creatinine clearance rate,Ccr);HE染色观察肾组织病理变化;Masson染色观察SGF对肾组织纤维化的影响;免疫组化染色观察肾脏转化生长因子-β1(transformation growth factor-β1,TGF-β1)蛋白表达水平的变化。[结果](1)模型组大鼠血清BUN、Scr含量显著高于对照组(P大鼠肾实质萎缩,肾小管基底膜不规则改变或完整性丧失,肾间质大量炎症细胞浸润和成纤维细胞聚集,肾间质重度纤维化,免疫组化结果显示TGF-β1蛋白表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P大鼠的肾功能,并能够减轻RIF,可能与下调TGF-β1蛋白的表达有关。

关键词： SGF 单侧输尿管梗阻大鼠肾功能 RIF

补肾活血方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中HGFmRNA表达变化的影响

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河南中医学院学报 2008年第5期23卷 15-18页

作者：高志卿张宾张俊吕雁李伟明张琳琪河南中医学院第一附属医院泌尿内科河南郑州450000 河南中医学院河南郑州450008 河南中医学院第三附属医院河南郑州450008

目的:建立肾间质纤维化大鼠模型,动态观察模型大鼠肾功能、肾组织中HGF mRNA的表达变化及补肾活血方对其影响,探讨补肾活血方治疗慢性肾功能衰竭的可能作用机制。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、洛汀新组、补肾活血方高剂量组、... 详细信息

目的:建立肾间质纤维化大鼠模型,动态观察模型大鼠肾功能、肾组织中HGF mRNA的表达变化及补肾活血方对其影响,探讨补肾活血方治疗慢性肾功能衰竭的可能作用机制。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、洛汀新组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组,除假手术组外其余大鼠采用单侧输尿管梗阻的方法建立肾间质纤维化大鼠模型;分别于UUO术后3、7、14、21、28d观察造模大鼠血肌酐、尿素氮的动态变化;采用RT-PCR法,观察造模大鼠肾组织中肝细胞生长因子(HGF)mRNA的表达变化及补肾活血方对其影响。结果:与假手术组比较,造模大鼠血清肌酐、尿素氮浓度呈进行性增高,P大鼠肾功能改善,P大鼠肾功能;可以提高肾组织中HGFmRNA的表达,防治肾间质纤维化。

关键词：补肾活血方肾间质纤维化单侧输尿管梗阻大鼠肝细胞生长因子

补肾活血方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中HGFmRNA表达变化的影响

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补肾活血方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中HGFmRNA表达变化的影响

补肾活血方对肾间质纤维化大鼠肾组织中血小板衍生生长因子蛋白表达的影响

中华中医药学会第二届中医方证基础研究与临床应用学术研讨会

作者：张俊周明剑河南中医学院平顶山市飞行化工集团公司职工医院

目的:建立肾间质纤维化大鼠模型,动态观察模型大鼠肾功能、肾组织中HGF mRNA的表达变化及补肾活血方对其影响,探讨补肾活血方治疗慢性肾功能衰竭的可能作用机制。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、洛汀新组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组,除假手术组外其余大鼠采用单侧输尿管梗阻的方法建立肾间质纤维化大鼠模型;分别于UUO术后3、7、14、21、28天观察造模大鼠血肌酐、尿素氮的动态变化;采用RT-PCR法,观察造模大鼠肾组织中肝细胞生长因子(HGF)mRNA的表达变化及补肾活血方对其影响。结果:与假手术组比较,造模大鼠血清肌酐、尿素氮浓度呈进行性增高,P大鼠肾功能改善,P大鼠肾功能;可以提高肾组织中HGF mRNA的表达,防治肾间质纤维化。

关键词：补肾活血方肾间质纤维化单侧输尿管梗阻大鼠肝细胞生长因子

来源： cnki会议评论

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中华中医药杂志 2010年第2期25卷 296-298页

作者：高志卿康豪鹏张俊张琳琪河南中医学院第一附属医院泌尿内科郑州450003 河南电力医院内一科郑州450000 河南中医学院基础医学院郑州450008

目的:观察补肾活血方对实验大鼠肾间质纤维化的保护作用并探讨其作用机制。方法:实验采用单侧输尿管梗阻大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、洛汀新组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组,观察了梗阻侧肾脏组织形态学改变,并分... 详细信息

目的:观察补肾活血方对实验大鼠肾间质纤维化的保护作用并探讨其作用机制。方法:实验采用单侧输尿管梗阻大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、洛汀新组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组,观察了梗阻侧肾脏组织形态学改变,并分别于单侧输尿管梗阻术后第3、7、14、21、28d采用法,观察造模大鼠肾组织中血小板衍生生长因子(PDGF-BB)蛋白表达变化。结果:造模各组与假手术组相比均呈不同程度的病理损害,肾组织PDGF-BB蛋白表达3d后开始增加,随时间延长,PDGF-BB蛋白表达逐渐增加。与模型组相比,各给药组大鼠肾功能得以改善,肾组织PDGF-BB蛋白的表达有所降低(P<0.05或P<0.01)。结论:补肾活血方可以降低肾组织中PDGF-BB蛋白的表达,防治肾间质纤维化。

关键词：补肾活血方肾间质纤维化单侧输尿管梗阻大鼠血小板衍生生长因子

8-羟基脱氧鸟苷与肾间质纤维化的相关性研究

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8-羟基脱氧鸟苷与肾间质纤维化的相关性研究

作者：丁奕宁夏医科大学

学位级别：硕士

目的:分析8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHdG)与肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)进展的相关性,初步探讨氧化应激(oxidative stress,OS)在UUO大鼠RIF发生、发展过程中的可能作用。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为UUO模型组(UUO组)和Sham假手术组(Sham组),每组24只。在术后3、7、14、21天时各组分别处死6只,收集血清、24小时尿及肾组织标本。测定血尿素(BUN)、血肌酐(Scr);苏木精/伊红(hematoxylin/eosin,HE)、Masson染色观察肾脏病理改变、酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清、尿液8-OHdG、转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1),分光光度法检测血清总过氧化物歧化酶(total-superoxide dismutase,T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)。结果:(1)与Sham组比较,UUO组大鼠肾小管间质损害明显并随病程延长进行性加重,呈急性肾小管损伤至间质纤维化的典型UUO模型表现。(2)与Sham组比较,UUO组在造模后3天、7天、14天、21天时的左肾重量、血尿素、肌酐均明显升高(P﹤0.05)。(3)纤维化指标变化:与Sham组比较,UUO组造模后各时间点的血清TGF-β1均显著高于Sham组(P﹤0.05)(4)氧化应激指标变化:UUO组在造模后7天时的血T-SOD高于Sham组(P﹤0.05),而在造模后3天、14天、21天时两组间无明显差异;与造模后3天,7天时比较、14天、21天时UUO组血清GPx水平进行性下降,差异有统计学意义(P﹤0.01);。UUO组在造模后21天时的血、尿8-OHdG明显高于Sham组(P﹤0.01),其他时间点两组间的差异无统计学意义;血清MDA、T-SOD及尿液8-0HdG在各时间点间无明显差异。(5)相关分析显示:血清8-OHdG与血清TGF-β1(r=0.485,P=0.016)及血MDA(r=0.419,P=0.042)呈正相关,与肾间质纤维化评分(r=-0.503,P=0.012)呈负相关。结论:1、氧化应激可能通过影响TGF-β1的水平参与了UUO大鼠肾间质纤维化的进展过程。2、血8-OHdG作为氧化应激过程中DNA氧化损伤的主要代谢产物与UUO大鼠肾间质纤维化的进展存在一定的相关性。

关键词： 8-羟基脱氧鸟苷单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化氧化应激活性氧族