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华蟾素毒基通过JAK2/STAT3途径对人结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

中国临床药理学杂志 2024年第12期40卷 1764-1768页

作者：陈佳夏琪李祎楠何钰洁袁泽婷李悦殷佩浩成都中医药大学医学与生命科学学院四川成都610075 上海中医药大学附属普陀医院中西医结合肿瘤介入研究所上海200062 上海中医药大学附属普陀医院全科医学科上海200062

目的研究华蟾素毒基(CB)对人结肠细胞HCT116增殖、迁移和侵袭能力以及上皮-间质转化(EMT)的影响。方法取对数生长期的HCT116细胞,随机分为空白组以及低、中、高剂量实验组,空白组不做任何处理(0 nmol·L^(-1)),低、中、高剂量实验组... 详细信息

目的研究华蟾素毒基(CB)对人结肠细胞HCT116增殖、迁移和侵袭能力以及上皮-间质转化(EMT)的影响。方法取对数生长期的HCT116细胞,随机分为空白组以及低、中、高剂量实验组,空白组不做任何处理(0 nmol·L^(-1)),低、中、高剂量实验组分别用含17.5、35、70 nmol·L^(-1)华蟾素毒基的1640培养基培养48 h。用细胞计数-8(CCK-8)法检测华蟾素毒基对HCT116细胞存活率的影响;用克隆实验检测华蟾素毒基对HCT116细胞增殖的影响;用细胞划痕实验和Transwell实验检测华蟾素毒基对HCT116细胞迁移和侵袭能力的影响;用蛋白质印迹法检测HCT116细胞中酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT)途径以及EMT相关蛋白表达水平。结果空白组和低、中、高剂量实验组的克隆形成数分别为(122.67±24.42)、(73.67±15.82)、(44.33±4.51)和(21.67±1.53)个,划痕迁移率分别为(44.64±9.15)%、(26.91±2.94)%、(19.28±1.52)%和(6.33±2.30)%,侵袭细胞数分别为(120.33±1.15)、(58.33±9.07)、(33.33±1.53)和(18.33±3.21)个,磷酸化JAK-2(p-JAK-2)/JAK-2的蛋白相对表达水平分别为1.02±0.06、0.94±0.05、0.75±0.22和0.49±0.22,磷酸化STAT3(p-STAT3)/STAT3的蛋白相对表达水平分别为0.89±0.10、0.72±0.04、0.65±0.06和0.52±0.18,E-cadherin蛋白相对表达水平分别为0.30±0.14、0.41±0.13、0.49±0.14和0.69±0.17,N-cadherin的蛋白相对表达水平分别为0.96±0.11、0.78±0.04、0.69±0.12和0.40±0.15,Snail蛋白相对表达水平分别为0.89±0.08、0.62±0.15、0.44±0.15和0.27±0.09,Vimentin蛋白相对表达水平分别为0.92±0.09、0.76±0.13、0.63±0.01和0.43±0.09,高剂量实验组的上述指标与空白组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P华蟾素毒基可以通过JAK2/STAT3通路抑制上皮-间质转化从而抑制人结肠癌细胞HCT116的侵袭与转移。

关键词：华蟾素毒基人结肠癌细胞侵袭转移上皮-间质转化

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高效液相色谱法测定华蟾素片中华蟾素毒基和脂蟾毒配基含量

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中国药业 2010年第10期19卷 36-37页

作者：王卫锋罗红锁李捷陕西省中医药研究院陕西西安710003 陕西省长武县中医医院陕西咸阳713600 陕西中医学院 2007级研究生陕西咸阳712083

目的测定华蟾素片中华蟾素毒基和脂蟾毒配基的含量。方法采用高效液相色谱法,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相为0.5%磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH至3.2)-乙腈(55∶45),流速为0.8mL/min,检测波长为296nm。结果华蟾酥毒基进样量在0.3... 详细信息

目的测定华蟾素片中华蟾素毒基和脂蟾毒配基的含量。方法采用高效液相色谱法,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相为0.5%磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH至3.2)-乙腈(55∶45),流速为0.8mL/min,检测波长为296nm。结果华蟾酥毒基进样量在0.3027～1.009μg范围内、脂蟾毒配基进样量在0.07344～0.2448μg范围内与峰面积值有良好的线性关系,相关系数均为0.9998,平均回收率分别为97.46%和100.52%,RSD分别为1.66%和0.69%(n=6)。结论该方法操作简便、灵敏度高、重现性好。

关键词：高效液相色谱法华蟾素片华蟾素毒基脂蟾毒配基含量测定

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华蟾酥毒基联合顺铂对人骨肉瘤U2OS细胞增殖及凋亡的影响

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中国临床药理学杂志 2019年第18期35卷 2113-2115,2138页

作者：赵迪郑允雄胡钦晓陈友滨许伟才罗绍伟汕头大学医学院第一附属医院骨科

目的观察华蟾素毒基联合顺铂对人骨肉瘤U2OS细胞增殖及凋亡的影响。方法对照1组、对照2组、实验组及空白组U2OS细胞分别以200nmol·L-1华蟾素毒基、4μmol·L-1顺铂、200 nmol·L-1华蟾素毒基+4μmol·L-1顺铂、等量生理盐水处理,各组... 详细信息

目的观察华蟾素毒基联合顺铂对人骨肉瘤U2OS细胞增殖及凋亡的影响。方法对照1组、对照2组、实验组及空白组U2OS细胞分别以200nmol·L-1华蟾素毒基、4μmol·L-1顺铂、200 nmol·L-1华蟾素毒基+4μmol·L-1顺铂、等量生理盐水处理,各组分别处理12,24,48 h。以细胞计数(CCK-8)法及平板克隆形成实验检测U2OS细胞增殖情况,以Hoechst 33258染色观察U2OS细胞细胞核形态及凋亡情况,以蛋白质印迹(WB)法检测U2OS细胞相关蛋白表达情况。结果空白组、对照1组、对照2组及实验组U2OS细胞克隆形成率分别为(59. 34±4. 16)%,(39. 28±5. 03)%,(31. 11±4. 87)%,(15. 23±4. 76)%;凋亡率分别(3. 01±0. 97)%,(21. 46±2. 56)%,(33. 25±3. 87)%,(41. 38±2. 96)%;p53蛋白相对表达量分别为0. 25±0. 06,0. 57±0. 09,0. 68±0. 08,0. 79±0. 06;Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白相对表达量分别为0. 18±0. 03,0. 49±0. 05,0. 98±0. 06,1. 12±0. 07;B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白相对表达量分别为0. 84±0. 07,0. 69±0. 06,0. 51±0. 04,0. 09±0. 02。对照1组、对照2组及实验组上述指标差异均有统计学意义(均P 华蟾素毒基与顺铂具有显著的协同效应,可更有效抑制人骨肉瘤U2OS细胞增殖,诱导其凋亡,其作用机制可能与显著上调p53、Bax表达,下调Bcl-2蛋白表达相关。

关键词：华蟾素毒基顺铂骨肉瘤 U2OS细胞增殖凋亡表达

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