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华北大黄中非类成分的研究

中草药 2003年第8期34卷 685-687页

作者：王爱芹李军林吴祖泽北京中医药学校中药教研组北京100053 军事医学科学院放射医学研究所北京100850

目的　对华北大黄中非类成分进行研究。方法　色谱和光谱分析法分离和鉴定化学成分。结果　从 95 %乙醇提取物中分得 13个非类化合物 ,分别鉴定为 :大黄酚、大黄素甲醚、β-谷甾醇、大黄素、胡萝卜苷、大黄酸、大黄素甲醚 -8-O-β-D... 详细信息

目的　对华北大黄中非类成分进行研究。方法　色谱和光谱分析法分离和鉴定化学成分。结果　从 95 %乙醇提取物中分得 13个非类化合物 ,分别鉴定为 :大黄酚、大黄素甲醚、β-谷甾醇、大黄素、胡萝卜苷、大黄酸、大黄素甲醚 -8-O-β-D-葡萄糖苷、rheumin、没食子酸、d-儿茶素、蔗糖、1,6-二没食子酰 -O-β-D-吡喃葡萄糖、1-O-β-D-没食子酰吡喃葡萄糖。结论　首次证明华北大黄含有少量大黄酸 ;除大黄酚、大黄素甲醚、大黄素外。

关键词：华北大黄非Di类成分大黄酸

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华北大黄愈伤组织培养及土大黄苷含量研究

河北大学学报（自然科学版） 2011年第2期31卷 195-199页

作者：王俊丽陆远刘坤许东婷刘名飞中央民族大学生命与环境科学学院北京100081 河北经贸大学生物科学与工程学院河北石家庄050061

为有效保护和利用华北大黄野生资源,以野生华北大黄为材料,探讨了不同种类、不同质量浓度的植物生长调节剂对其愈伤组织诱导及增殖效应,并采用高效液相色谱对愈伤组织及野生植株中土大黄苷含量进行了分析.结果表明：MS培养基中单独添加... 详细信息

为有效保护和利用华北大黄野生资源,以野生华北大黄为材料,探讨了不同种类、不同质量浓度的植物生长调节剂对其愈伤组织诱导及增殖效应,并采用高效液相色谱对愈伤组织及野生植株中土大黄苷含量进行了分析.结果表明：MS培养基中单独添加不同质量浓度的6-BA,不利于愈伤组织的增殖;培养基中单独添加不同质量浓度的NAA和2,4-D,对愈伤组织的增殖有一定作用;6-BA分别与低质量浓度NAA及2,4-D配合使用时,对愈伤组织的增殖效应十分明显.3种不同类型的愈伤组织中均检出土大黄苷,其中2种愈伤组织土大黄苷的质量分数高达1.45%~1.54%,为野生植株的3.63~3.85倍.

关键词：华北大黄愈伤组织土大黄苷

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华北大黄细胞悬浮培养及抗氧化活性研究

华北大黄细胞悬浮培养及抗氧化活性研究

作者：刘名飞中央民族大学

学位级别：硕士

华北大黄（Rheum franzenbachii Munt.）为蓼科大黄属（Rheum Linn.）植物,其根及根茎入药,味苦,性寒,有泻热、通便、破积、行瘀的功能,用于治疗热结便秘、湿热黄疸、痈肿疔毒、烫火伤等。此外,有抗菌、消炎、收敛、止血等作用。本... 详细信息

华北大黄（Rheum franzenbachii Munt.）为蓼科大黄属（Rheum Linn.）植物,其根及根茎入药,味苦,性寒,有泻热、通便、破积、行瘀的功能,用于治疗热结便秘、湿热黄疸、痈肿疔毒、烫火伤等。此外,有抗菌、消炎、收敛、止血等作用。本研究以华北大黄愈伤组织为材料,探讨了不同种类、不同浓度的植物生长调节剂对华北大黄细胞悬浮培养的增殖效应,并借助高效液相色谱法（HPLC）对其有效成分——土大黄苷含量进行了测定,采用DPPH自由基清除法研究了不同种样品醇提物的抗氧化活性,为华北大黄的进一步开发利用奠定了基础。主要研究结果如下： 1.华北大黄细胞悬浮培养中,单一生长调节剂对其增殖效果不明显,单一生长素的增殖效果比单一细胞分裂素好,与对照组相比细胞显著增长,几乎无褐化现象,其中MS+2,4-D2.0mg/L是单因素的最佳培养基,细胞培养物鲜重为9.43g,增殖3.14倍,干重0.60g,增殖2.00倍。 2.不同浓度6-BA （0.5、1.0、2.0、4.0mg/L）和2,4-D （0.5、1.0、2.0、4.0mg/L）组合,MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D2.0mg/L培养基中悬浮培养的细胞呈淡黄色,增殖效果最好,鲜重12.05g,增殖4.02倍,十重0.73g,增殖2.43倍。 3.不同浓度的TDZ和NAA组合,不适于华北大黄细胞悬浮培养,增殖产生的细胞部分褐化并且分散性不好。 4.将愈伤组织接种于MS+6-BA2.0mg/L+NAA1.0mg/L液体培养基中,生长周期为30d,干重和鲜重生长曲线为“S”型,并明显地分为3个时期：延迟生长期、指数生长期和静止期。 5.用HPLC测定了土大黄苷含量,选取的9种样品中,3种细胞培养物（培养基类型为MS+TDZ0.5mg/L+NAA0.2mg/L、 MS+6-BA2.0mg/L+NAA1.0mg/L、MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D2.0mg/L）土大黄苷的含量高于野生植株根（4.36mg/g）,其中最高者（培养基类型为MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D2.0mg/L）土大黄苷的含量（17.64mg/g）为野生植株根的4.05倍。 6.9种样品的醇提物对DPPH自由基均具有一定的清除活性MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D2.0mg/L液体培养基中悬浮细胞醇提物的IC50最小（15.644μg/ml）。野生植株根醇提物的IC50为2.477μg/ml低于Vc （2.502μg/ml）。

关键词：华北大黄悬浮培养土大黄苷抗氧化

用HPLC法测定华北大黄中的Desoxyrhaponticin含量

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江西农业学报 2008年第5期20卷 59-60,62页

作者：王娟娟陈志强王顺喜中国农业大学工学院北京100083 天津科技大学食品工程与生物技术学院天津市食品营养与安全重点实验室

以华北大黄分离纯化出的多羟基茋类化合物Desoxyrhaponticin作为标准品,利用KromasilTMC18（250 mm×4.6mm,5μm）反相色谱柱,以甲醇-乙腈-水（35∶5∶60）为流动相,以320 nm为检测波长,对华北大黄中的Desoxyrhaponticin含量进行了测定... 详细信息

以华北大黄分离纯化出的多羟基茋类化合物Desoxyrhaponticin作为标准品,利用KromasilTMC18（250 mm×4.6mm,5μm）反相色谱柱,以甲醇-乙腈-水（35∶5∶60）为流动相,以320 nm为检测波长,对华北大黄中的Desoxyrhaponticin含量进行了测定。结果表明自制的Desoxyrhaponticin纯度达到了98%以上,能够作为标准品使用;Desoxyrhaponticin的出峰时间为26.532 min,进样量在0.245-2.356μg范围内峰面积与进样量呈良好线性关系;平均回收率为100.2%。

关键词：华北大黄 Desoxyrhaponticin含量高效液相色谱

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真伪大黄的二维相关红外光谱

分析化学 2003年第9期31卷 1058-1061页

作者：周群李静刘军黄昊孙素琴清华大学化学系北京100084 吉林省中医院清华大学化学系

采用红外光谱法并结合二维相关光谱 (two dimensionalcorrelationspectroscopy)分析技术 ,对药用西宁大黄和伪品华北大黄进行了无损快速鉴别研究。西宁大黄和华北大黄在一维谱图上差别不显著 ,而在二维谱图上显示出较大的差别。在 1 2 ... 详细信息

采用红外光谱法并结合二维相关光谱 (two dimensionalcorrelationspectroscopy)分析技术 ,对药用西宁大黄和伪品华北大黄进行了无损快速鉴别研究。西宁大黄和华北大黄在一维谱图上差别不显著 ,而在二维谱图上显示出较大的差别。在 1 2 0 0～1 70 0cm- 1 波段范围内 ,西宁大黄在同步图上有两个较强的自动峰 ,分别在 1 460和1 5 60cm- 1 附近 ,而华北大黄只有一个较强的自动峰 ,在 1 460cm- 1 附近 ;同样在 1 0 3 0～ 1 1 70cm- 1 波段范围内西宁大黄有两个较强的自动峰 ,分别在 1 0 60和 1 0 80cm- 1 附近 ,而伪品大黄也只有一个较强的自动峰 ,在 1 0 80cm- 1 附近。两个波段的异步谱也显示出较大的差别。结果表明 :二维相关谱可以提高谱图的分辨率 ,增加谱图的识别能力 ,可用于药材真伪品的鉴别。该法快速、准确 ,为客观评价中药材的来源提供了一种新的方法。

关键词：二维相关红外光谱西宁大黄华北大黄真伪鉴别

从化学、药效和毒性角度比较认识正品大黄与土大黄

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中国中药杂志 2014年第19期39卷 3876-3880页

作者：严孝金冯天师王玉刚袁梽漪雷帆肖新月邢东明杜力军清华大学蛋白质科学教育部重点实验室/生命科学学院医学院药物药理实验室北京100084 中国食品药品检定研究院北京100050

土大黄与药典收载的正品大黄具有某些功效的相似性,常常被用作大黄替代品应用。究竟土大黄与正品大黄能否简单的替换使用,或者说两者之间有无差异,差异在何处?对此进行研究,对于正确认识土大黄,以及临床与市场上的正确应用等都具有重要... 详细信息

土大黄与药典收载的正品大黄具有某些功效的相似性,常常被用作大黄替代品应用。究竟土大黄与正品大黄能否简单的替换使用,或者说两者之间有无差异,差异在何处?对此进行研究,对于正确认识土大黄,以及临床与市场上的正确应用等都具有重要意义。该文在作者己有的工作基础上,结合相关文献报道,以大黄的主要功效"泻下"为基本点,从化学、药效及其毒性等方面进行了探讨。分析结果表明,华北大黄(土大黄)的泻下作用弱于正品大黄,其原因在于两者间结合型蒽醌类成分的含量差异,同时华北大黄的小鼠急性毒性也强于正品大黄,因此,华北大黄不宜简单的替代正品大黄使用。

关键词：大黄华北大黄化学成分药效毒性

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正品及伪品大黄药效与毒性的比较研究

世界科学技术-中医药现代化 2012年第4期14卷 1863-1870页

作者：冯天师王玉刚柴玉爽肖新月严华魏锋雷帆林瑞超杜力军杜力军清华大学蛋白质科学教育部重点实验室/生命科学学院医学院药物药理研究室北京100084 国家食品药品检定研究院北京100050 清华大学蛋白质科学教育部重点实验室/生命科学学院医学院药物药理研究室北京100084

目的:比较正品大黄与华北大黄的药效和毒性,论证临床上两种药物混用时的可行性。方法:通过整体动物实验观察小鼠排便潜伏期及其总排便量;小肠运动实验观察药物的小肠推进率;纤维蛋白形成实验观察药物对凝血时间的影响;小鼠LD50观察药物... 详细信息

目的:比较正品大黄与华北大黄的药效和毒性,论证临床上两种药物混用时的可行性。方法:通过整体动物实验观察小鼠排便潜伏期及其总排便量;小肠运动实验观察药物的小肠推进率;纤维蛋白形成实验观察药物对凝血时间的影响;小鼠LD50观察药物急性毒性。体外实验分别观察药物对小肠大肠的收缩影响;MTT法测定药物对肝细胞HepG2细胞的毒性。结果:正品大黄提取物能明显促进小鼠排便,但是对小肠推进无明显作用;口服等量的华北大黄提取物对排便无明显作用,但是能促进小肠的推进。正品大黄大剂量能缩短凝血时间,华北大黄无明显作用。华北大黄的细胞毒性大于正品大黄。华北大黄的急性毒性大于正品大黄,两者不同比例配合的急性毒性显示,毒性大小与华北大黄呈正相关,而与正品大黄呈负相关。土大黄苷未观察到明显的毒性反应。结论:华北大黄与正品大黄在药效与毒性方面有较大不同,不宜混用。

关键词：大黄华北大黄排便肠蠕动急性毒性

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河南产大黄类药材质量分析

中国实验方剂学杂志 2016年第3期22卷 24-27页

作者：王书莉薛淑娟陈随清葛晓瑾河南中医学院药学院郑州450046

目的:比较河南不同产地大黄的质量,为该药材的利用与开发提供参考。方法:检查土大黄苷,利用薄层色谱进行定性鉴别,采用HPLC测定游离蒽醌类成分的含量,流动相甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15),检测波长254 nm。结果:9批药材中4批含有土大黄苷,... 详细信息

目的:比较河南不同产地大黄的质量,为该药材的利用与开发提供参考。方法:检查土大黄苷,利用薄层色谱进行定性鉴别,采用HPLC测定游离蒽醌类成分的含量,流动相甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15),检测波长254 nm。结果:9批药材中4批含有土大黄苷,鉴别为土大黄,来源为波叶组大黄的华北大黄;5批不含土大黄苷,大黄游离蒽醌类成分质量分数均>1.5%,符合《中国药典》2010年版的规定,平顶山鲁山县的大黄中游离蒽醌类成分的含量较高(4.65%),洛阳嵩县次之(4.38%),2种大黄来源分别为药用大黄、掌叶大黄。结论:河南不同产地分布的药用大黄、掌叶大黄药材符合《中国药典》2010年版的规定,具有开发利用前景;华北大黄不能作为大黄药材应用于临床。

关键词：药用大黄掌叶大黄华北大黄芦荟大黄素大黄素甲醚土大黄苷

丹叶大黄素对非酒精性脂肪肝的药理作用及机制研究

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丹叶大黄素对非酒精性脂肪肝的药理作用及机制研究

作者：柯辛格湖北中医药大学

学位级别：硕士

目的:探究丹叶大黄素对非酒精性脂肪肝（Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）的药理作用及作用机制,为其开发应用提供科学依据。方法:建立高脂饮食诱导的C57BL/6小鼠NAFLD模型,灌胃给予不同浓度的丹叶大黄素,考察其在体内的作用... 详细信息

目的:探究丹叶大黄素对非酒精性脂肪肝（Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）的药理作用及作用机制,为其开发应用提供科学依据。方法:建立高脂饮食诱导的C57BL/6小鼠NAFLD模型,灌胃给予不同浓度的丹叶大黄素,考察其在体内的作用。观察丹叶大黄素对小鼠肝脏外观、脏器系数的影响;苏木精-伊红（Hematoxylin-eosin staining,H＆E）染色和油红O染色判断肝脏组织的病理生理结构变化。采用MTT法检测丹叶大黄素和游离脂肪酸（Free fatty acids,FFA）对L-02细胞活力的影响,筛选有效的给药浓度和造模浓度;以优选的FFA浓度建立脂肪变性L-02细胞模型。生化试剂盒检测小鼠血清和L-02细胞上清液中ALT和AST的含量,小鼠肝组织和L-02细胞中脂质、氧化应激相关酶和产物的含量;免疫组化染色检测小鼠肝脏中的ROS,流式细胞术测定L-02细胞内ROS水平;酶联免疫吸附测定法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）测定小鼠血清和L-02细胞中炎症因子及乙酰辅酶A（Acetyl-Co A,A-Co A）的含量。并设置3-甲基腺嘌呤（3-Methyladenine,3-MA）给药组,考察丹叶大黄素对细胞自噬的影响;Western blot检测给药后细胞内中ACOX1、Atg5、p-m TOR和p-ULK1蛋白的表达。结果:与Control组相比,HFD组小鼠肝脏脏器系数显著升高（P＜0.01）,肝脏肿大,颜色加深,切面有油腻感,谷丙氨酸转氨酶（Alanine aminotransferase,ALT）和谷草氨酸转氨酶（Aspartate aminotransferase,AST）水平均显著升高（P＜0.01）;丹叶大黄素各剂量处理组小鼠的肝组织细胞结构趋于正常,肝组织中脂质积累显著减少,肝脏脏器系数显著降低（P＜0.05）,小鼠血清中ALT和AST水平显著降低（P＜0.05或P＜0.01）;与Control组相比,HFD组小鼠肝脏ROS水平显著上升（P＜0.01）,肝组织中抗氧化酶谷胱甘肽（Glutathione,GSH）和超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）水平明显降低（P＜0.05）,氧化应激副产物丙二醛（Malondialdehyde,MDA）含量有所增加（P＜0.05）;丹叶大黄素各剂量组的ROS水平明显下降（P＜0.01）,丹叶大黄素治疗组呈现剂量依赖性的升高了肝组织中抗氧化酶SOD和GSH的水平（P＜0.05或P＜0.01）,并且降低了MDA水平（P＜0.01）;与Control组相比,HFD组血清中的白介素-6（Interleukin-6,IL-6）和肿瘤坏死因子（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）含量显著升高（P＜0.01）;丹叶大黄素治疗组IL-6和TNF-α水平显著降低（P＜0.05或P＜0.01）。细胞试验:MTT结果显示,当丹叶大黄素浓度在100μM以内时,对L-02细胞活性无明显影响;当FFA浓度在0.3 m M以内时对L-02细胞活性无明显影响。油红O染色结果表明,0.3 m M FFA造模24h可以使L-02细胞积累大量脂肪滴,该浓度为细胞模型最佳造模条件。与Control组相比,Model组细胞中总胆固醇（Total cholesterol,TC）和甘油三脂（Triglyceride,TG）含量显著升高（P＜0.05）;丹叶大黄素给药后显著降低了细胞中TC和TG含量含量（P＜0.05）;与Control组相比,Model组细胞中ALT和AST含量显著升高（P＜0.01）,丹叶大黄素给药后细胞上清液中ALT和AST含量显著减少（P＜0.05）。与Control组相比,Model组细胞ROS水平显著提高（P＜0.01）,细胞中抗氧化酶GSH和SOD含量显著下降（P＜0.05或者P＜0.01）,细胞中MDA含量显著升高（P＜0.01）;丹叶大黄素治疗后显著降低了细胞中ROS水平（P＜0.01）,同时增加了细胞中GSH和SOD含量（P＜0.05）,并显著降低了细胞中MDA含量（P＜0.01）;与Control组相比,Model组细胞中IL-6、TNF-α和A-Co A含量显著升高（P＜0.01或P＜0.001）;丹叶大黄素治疗后可以降低细胞中IL-6、TNF-α和A-Co A含量（P＜0.01或P＜0.001）。然而自噬抑制剂3-MA的加入,逆转丹叶大黄素在体内外治疗作用。Western blot结果显示,与Control组相比,Model组L-02细胞内ACOX1、p-MTOR和p-ULK1蛋白表达显著升高（P＜0.01）,Model组L-02细

关键词：华北大黄丹叶大黄素 NAFLD 自噬 ACOX1