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宁夏枸杞雄性不育花药中胼胝质动态变化特征

西北植物学报 2024年第1期44卷 105-111页

作者：周婷魏雅茹孙旭冉管翠萍梁文裕杨淑娟宁夏大学生命科学学院银川750021 西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室银川750021

【目的】胼胝质是以β-1,3键结合的葡聚糖,其形成的壁结构只发生在特定组织。当其提前或延迟降解时,会导致花粉败育,明确胼胝质的沉积动态规律对探究雄性不育机理及利用枸杞雄性不育具有重要意义。【方法】研究以宁夏枸杞(Lycium barbar... 详细信息

【目的】胼胝质是以β-1,3键结合的葡聚糖,其形成的壁结构只发生在特定组织。当其提前或延迟降解时,会导致花粉败育,明确胼胝质的沉积动态规律对探究雄性不育机理及利用枸杞雄性不育具有重要意义。【方法】研究以宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)可育系‘宁杞1号’与不育系‘宁杞5号’为试验材料,采用半薄切片技术,并利用苯胺蓝标记胼胝质的方法和高碘酸-希夫反应(periodic acid-Schiff stain,PAS),在光学显微镜下对比观察不同发育时期的宁夏枸杞可育和不育花药中胼胝质的动态变化特征,分析胼胝质对不育系花药败育的影响。【结果】结果显示,小孢子母细胞时期,可育和不育花药小孢子母细胞外沉积形成厚薄不均的胼胝质壁,荧光反应显示减数分裂形成四分体后,胼胝质壁逐渐增厚,随着花药进一步发育,可育花药中四分体外胼胝质壁逐渐解体、消失,释放出4个小孢子。而不育花药中四分体外的胼胝质壁不断增厚,并没有出现降解迹象,直至开花,药室中小孢子仍以四分体状态存在,已经变形、解体的四分体外仍包裹着胼胝质壁。胼胝质降解异常是导致宁夏枸杞花粉败育的结构原因。【结论】文章进一步对不育系四分体胼胝质壁未发生降解的原因进行了分析,为解析宁夏枸杞雄性不育机理提供理论基础。

关键词：宁夏枸杞胼胝质雄性不育花药发育半薄切片

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半薄切片制作的技术细节

临床与实验病理学杂志 1989年第3期5卷 179-180页

作者：严庆汉石海光北京铁路总医院

电镜在病理领域的应用日趋广泛,而半薄切片是进行电镜观察前的必要环节,本文就半薄切片制作中的一些技术细节作一介绍。1 水槽(Trough) 可用LKB公司生产的黑塑料“Tr-uf”。它所形成的水面大,易于操作,个别包装,没有污染。比较简便的方... 详细信息

电镜在病理领域的应用日趋广泛,而半薄切片是进行电镜观察前的必要环节,本文就半薄切片制作中的一些技术细节作一介绍。1 水槽(Trough) 可用LKB公司生产的黑塑料“Tr-uf”。它所形成的水面大,易于操作,个别包装,没有污染。比较简便的方法可以用胶带围成槽后用蜡封而成。

关键词：半薄切片制作技术电镜

MTG-DAPI双染色法观察黄瓜花粉细胞半薄切片中线粒体DNA的研究

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南京农业大学学报 2015年第1期38卷 27-32页

作者：赵娟沈佳李海梅娄群峰李季陈劲枫南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/园艺学院江苏南京210095

[目的]MTG(Mito Tracker Green)是一种线粒体特异绿色荧光探针,但是目前还没有研究将MTG应用于细胞的树脂半薄切片中线粒体的荧光染色。分子生物学研究证明黄瓜线粒体是父系遗传但是还没有在细胞学观察中得到进一步证实,因此我们选择MTG... 详细信息

[目的]MTG(Mito Tracker Green)是一种线粒体特异绿色荧光探针,但是目前还没有研究将MTG应用于细胞的树脂半薄切片中线粒体的荧光染色。分子生物学研究证明黄瓜线粒体是父系遗传但是还没有在细胞学观察中得到进一步证实,因此我们选择MTG和DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)2种染料建立适用于黄瓜花粉细胞的树脂半薄切片荧光双染色技术。[方法]树脂半薄切片厚度为0.3μm,切片首先经20 nmol·L-1的MTG染色液处理30 min,然后用0.1μg·m L-1的DAPI溶液染色6 min,即可在荧光显微镜下清楚地显示出线粒体结构及DNA的存在情况。[结果]观察显示:黄瓜贴壁期花粉细胞中生殖细胞内存在线粒体结构及线粒体DNA,表明黄瓜小孢子第一次有丝分裂时没有将线粒体排除在生殖细胞之外,而是被分配到了生殖细胞中,并且此时的线粒体细胞器携带有基因信息。[结论]MTG-DAPI双染色技术可以有效地对黄瓜花粉细胞中生殖细胞核周围的线粒体进行定位,为探索黄瓜线粒体基因父系遗传现象提供技术支持。同时研究也证实了MTG可以对固定后并进行树脂半薄切片的细胞中的线粒体进行着色,扩展了MTG的应用范围。

关键词：黄瓜线粒体 MTG-DAPI双染色半薄切片

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半薄切片的碱性美蓝-品红染色法

中国细胞生物学学报 1993年第2期15卷 96-97+101页

作者：孟珊珊岳焕勋吴珂成都计划生育技术干部培训中心 610041 成都计划生育技术干部培训中心

本文介绍一种半薄切片的碱性美蓝-品红染色法。该方法可清晰地显示光镜水平的组织结构和细胞内部细微结构,且操作简便、省时,便于电镜观察前的组织定位。

关键词：半薄切片胞质染色法细胞美蓝亚甲蓝

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环氧树脂半薄切片制备技术改良

解剖学研究 2022年第3期44卷 269-270页

作者：黄静彭彬川北医学院形态学研究所电镜结构研究室南充637000

半薄切片观察视野比超薄切片广,比石蜡切片图像更加清晰,能够清楚看到细胞组织之间的界限等优点,因此成为了形态学观察结构不可缺少的实验方法。但是在制作半薄切片的过程中,会有一些技术难点需要突破,本文从染液的改良、染色时间温度... 详细信息

半薄切片观察视野比超薄切片广,比石蜡切片图像更加清晰,能够清楚看到细胞组织之间的界限等优点,因此成为了形态学观察结构不可缺少的实验方法。但是在制作半薄切片的过程中,会有一些技术难点需要突破,本文从染液的改良、染色时间温度方面探讨;同时重点进行脱水和封片进行新的探索,期望找到最佳的半薄切片制备和保存方法,期望能够清晰的观察到组织结构。

关键词：半薄切片环氧树脂制备技术保存技术形态结构

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塑料半薄切片法观察豆科植物根表面传递细胞

南京林业大学学报（自然科学版） 2003年第2期27卷 65-68页

作者：吴均章韩素芬南京林业大学森林资源与环境学院江苏南京210037

豆科植物合欢、紫云英、苜蓿等在接种根瘤菌后,部分根毛密集生长稍有膨大的根段,经FAA固定,GMA包埋,半薄切片(3μm),PAS反应染色,在光学显微镜油镜下观察根的横切面发现,其表皮细胞或外皮层细胞的外切向壁上有明显的壁内突结构,属典型... 详细信息

豆科植物合欢、紫云英、苜蓿等在接种根瘤菌后,部分根毛密集生长稍有膨大的根段,经FAA固定,GMA包埋,半薄切片(3μm),PAS反应染色,在光学显微镜油镜下观察根的横切面发现,其表皮细胞或外皮层细胞的外切向壁上有明显的壁内突结构,属典型的根表面传递细胞。采用半薄切片,不仅操作简单,费用较少,且较易确定传递细胞发生的部位。

关键词：传递细胞 GMA 半薄切片油镜

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电镜半薄切片美蓝-天青Ⅰ快速染色法

第三军医大学学报 1992年第4期14卷 384-385页

作者：刘平王仁鹏曾范利施同舟第三军医大学训练部电镜室 630038

为了提高透射电镜对组织观察的准确性,在进行电镜样品超薄切片前,对大多数研究样品以及临床外检的标本,需做半薄切片进行光镜定位。为缩短整个定位程序的时间,提高电镜观察效率,我们以Field氏染法为基础,改进了半薄切片染色方法,应用于... 详细信息

为了提高透射电镜对组织观察的准确性,在进行电镜样品超薄切片前,对大多数研究样品以及临床外检的标本,需做半薄切片进行光镜定位。为缩短整个定位程序的时间,提高电镜观察效率,我们以Field氏染法为基础,改进了半薄切片染色方法,应用于国产环氧树脂618包埋组织的半薄切片染色。通过对肾、肺、胃、皮肤、十二指肠、支气管、骨、神经、耳蜗、角膜等组织染色,均获得较满意的效果。

关键词：电镜半薄切片染色技术

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JB—4包埋半薄切片与石蜡切片的比较

临床与实验病理学杂志 1991年第3期7卷 64-65页

作者：李曼黄敏温冰安劬四川省计划生育科研所生殖病理研究室

半薄切片是基于电镜的发明及对细胞学亚细胞结构的研究而发展起来的一种制片技术,特别是近20余年来,随着乙烯系高分子化合物的研究成功,大大推动了半薄切片在光学显微镜中的应用。目前,

关键词：石蜡切片包埋法半薄切片

乌拉尔甘草愈伤组织石蜡切片与半薄切片的对比

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湖北农业科学 2011年第12期50卷 2487-2489页

作者：张欣曹君迈刘建利张焱郑素娇北方民族大学生物科学与工程学院银川750021 宁夏医科大学电镜实验室银川750021

以乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fich.)不同来源愈伤组织为材料,采用石蜡切片和半薄切片技术,对乌拉尔甘草不同来源愈伤组织细胞进行了观察,结果表明,半薄切片在制作不同来源愈伤组织装片时优于石蜡切片,其清晰度高,分辨率更为精... 详细信息

以乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fich.)不同来源愈伤组织为材料,采用石蜡切片和半薄切片技术,对乌拉尔甘草不同来源愈伤组织细胞进行了观察,结果表明,半薄切片在制作不同来源愈伤组织装片时优于石蜡切片,其清晰度高,分辨率更为精确。石蜡切片中,根源愈伤组织有核细胞较少,而且细胞出现解体现象;半薄切片中观察到了叶源愈伤组织细胞中的着色颗粒、线粒体和圆球体,可为透射电镜制样提供有效的材料。

关键词：乌拉尔甘草愈伤组织石蜡切片半薄切片