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辣椒素对脑缺血再灌注损伤大鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体表达的影响

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中国临床药理学杂志 2021年第12期37卷 1558-1561页

作者：娄方丽苏诗涵解放军联勤保障部队第九二〇医院神经内科云南昆明650032

目的探讨辣椒素对脑缺血再灌注损伤大鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体表达及下游炎性通路激活的影响。方法用大脑中动脉闭塞法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。将24只大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组,每组8只... 详细信息

目的探讨辣椒素对脑缺血再灌注损伤大鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体表达及下游炎性通路激活的影响。方法用大脑中动脉闭塞法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。将24只大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组,每组8只。实验组术前3 h给予腹腔注射辣椒素0.2mg·kg^(-1);模型组和假手术组术前3 h腹腔注射等量二甲基亚砜。用Longa 5分法检测神经功能评分,用2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色测定脑梗死面积,用酶联免疫吸附法检测脑组织白细胞介素-1β(IL^(-1)β)和IL^(-1)8水平,用蛋白质印迹法检测脑组织NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、B细胞淋巴瘤因子-2相关X蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)蛋白的表达水平。结果脑缺血再灌注24 h后,实验组、模型组和假手术组的神经功能评分分别为(2.46±0.40),(4.02±0.54)和0分;脑缺血再灌注48 h后,实验组、模型组和假手术组的神经功能评分分别为(2.30±0.52),(3.89±0.61)和0分,脑梗死面积分别为(14.22±4.46)%,(30.13±5.88)%和0,IL^(-1)β分别为(27.25±3.45),(35.17±4.40)和(22.12±3.76)pg·m L^(-1),IL^(-1)8分别为(31.30±4.80),(37.22±5.18)和(26.24±4.14)pg·m L^(-1),NLRP3蛋白相对表达量分别为1.31±0.19,2.20±0.33和1.02±0.10,Caspase-1蛋白相对表达量分别为1.26±0.18,2.10±0.24和1.06±0.14,Bax蛋白相对表达量分别为1.23±0.20,2.60±0.52和1.03±0.12,Bcl-2蛋白相对表达量分别为0.99±0.07,0.39±0.12和1.04±0.14。实验组和假手术组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论辣椒素对急性脑缺血再灌注损伤大鼠有一定的保护作用,其机制可能与抑制脑组织NLRP3炎性小体表达及下游炎性通路激活有关。

关键词：辣椒素核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 脑缺血再灌注损伤半胱氨酸蛋白酶1

NLRC5和Caspase-1在胎膜早破合并组织学绒毛膜羊膜炎患者中的表达及临床意义

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实用妇产科杂志 2022年第12期38卷 943-947页

作者：郭一恒朱锦明彭凤云李颖慧马春玲栾晓梅徐州医科大学研究生院江苏徐州221004 徐州医科大学附属徐州妇幼保健院产科江苏徐州221006 阜宁县人民医院

目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体5(NLRC5)和半胱天冬梅-1(Caspase-1)在胎膜早破(PROM)合并组织学绒毛膜羊膜炎(HCA)患者中的表达及临床意义。方法:选取2021年8月至2022年1月徐州医科大学附属徐州妇幼保健院就诊的PROM患者和同期... 详细信息

目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体5(NLRC5)和半胱天冬梅-1(Caspase-1)在胎膜早破(PROM)合并组织学绒毛膜羊膜炎(HCA)患者中的表达及临床意义。方法:选取2021年8月至2022年1月徐州医科大学附属徐州妇幼保健院就诊的PROM患者和同期足月正常剖宫产孕妇作为研究对象。根据是否诊断PROM、胎膜破裂时间、胎膜组织病理检查结果分为5组:未足月胎膜早破(PPROM)合并HCA组(PPROM+HCA组,(印)n(正)=30)、足月胎膜早破(TPROM)合并HCA组(TPROM+HCA组,(印)n(正)=32)、PPROM未合并HCA组(PPROM组,(印)n(正)=30)、TPROM未合并HCA(TPROM组,(印)n(正)=28)、足月正常剖宫产孕妇(对照组,(印)n(正)=30)。收集入院时孕妇的血清样本以及分娩时新鲜胎膜组织标本,用酶联免疫吸附(ELISA)法、免疫组化法、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测NLRC5及Caspase-1表达水平和定位,用线性相关分析NLRC5和Caspase-1之间的相关性。结果:PPROM+HCA组、TPROM+HCA组孕妇血清和胎膜组织中NLRC5、Caspase-1的含量较其他3组显著增加((印)P(正)0.05)。PPROM+HCA组、TPROM+HCA组胎膜组织中NLRC5和Caspase-1的蛋白及mRNA的表达较其他3组显著增加((印)P(正)0.05)。PPROM+HCA组、TPROM+HCA组孕妇血清NLRC5、Caspase-1水平与胎膜组织中NLRC5 mRNA、Caspase-1 mRNA相对表达量呈正相关(r>0,(印)P(正)<0.05)。结论:血清中NLRC5与Caspase-1的浓度及胎膜组织中两者的mRNA表达呈一致性变化,NLRC5和Caspase-1参与了PROM合并HCA的发生。

关键词：胎膜早破核苷酸结合寡聚化结构域样受体5 组织学绒毛膜羊膜炎半胱氨酸蛋白酶1

NLRP3、Caspase-1、IL-6、TNF-α与突发性聋疗效的关系

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听力学及言语疾病杂志 2022年第4期30卷 406-409页

作者：王胜张兆玉甘肃省武威市中医医院康复中心武威733000 甘肃省武威职业学院护理系

目的探讨Nod样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)与突发性聋治疗效果的关系。方法选取2017年5月至2019年12月收治的92例(99耳)突发性聋患者作为研究对象,其中,低频下降型11例11耳,... 详细信息

目的探讨Nod样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)与突发性聋治疗效果的关系。方法选取2017年5月至2019年12月收治的92例(99耳)突发性聋患者作为研究对象,其中,低频下降型11例11耳,高频下降型22例24耳,平坦型52例56耳,全聋型7例8耳,检测患者治疗前后的NLRP3炎症小体、Caspase-1、TNF-α、IL-6表达水平,分析不同听阈曲线类型患者的差异及其与患者治疗效果的相关性。结果平坦型、低频下降型、高频下降型、全聋型患者治疗前的血清NLRP3、Caspase-1、TNF-α、IL-6水平依次升高,且组间两两比较,差异有统计学意义(P0.05);治疗后的NLRP3、Caspase-1、TNF-α、IL-6表达水平组间两两比较,痊愈组低于显效组,显效组低于有效组,有效组低于无效组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析显示:NLRP3、Caspase-1、TNF-α及IL-6表达水平均与突发性聋疗效呈负相关,r值分别为-0.723、-0.658、-0.543、-0.479(P<0.001)。结论突聋患者血清NLRP3炎症小体、Caspase-1、TNF-α、IL-6水平均与疗效呈负相关。

关键词：突发性聋 NLRP3炎症小体肿瘤坏死因子α 白介素6 半胱氨酸蛋白酶1

NLRP6在未足月胎膜早破合并HCA孕妇血清及胎膜组织中的表达及临床意义

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现代妇产科进展 2022年第3期31卷 180-185页

作者：李亚楠朱锦明栾晓梅彭凤云李青杜长江徐州医科大学研究生院徐州221006 徐州医科大学附属徐州妇幼保健院徐州221009

目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体6(NLRP6)在未足月胎膜早破(PPROM)患者合并组织学绒毛膜羊膜炎(HCA)诊断中的临床价值。方法:选取2020年12月至2021年6月于徐州医科大学附属徐州妇幼保健院住院分娩的PPROM患者60例,其中未合并HCA... 详细信息

目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体6(NLRP6)在未足月胎膜早破(PPROM)患者合并组织学绒毛膜羊膜炎(HCA)诊断中的临床价值。方法:选取2020年12月至2021年6月于徐州医科大学附属徐州妇幼保健院住院分娩的PPROM患者60例,其中未合并HCA的PPROM组33例、合并HCA的PPROM组27例;另选取50例足月正常分娩孕妇未合并HCA作为对照组。收集入院时孕妇的血清样本、分娩时新鲜胎膜组织标本、入院时血液中C反应蛋白(CRP)及白细胞计数的表达情况。ELISA法检测血清NLRP6、caspase-1水平,免疫组化法及Western blot法检测胎膜组织中NLRP6蛋白表达,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测胎膜组织中NLRP6及caspase-1 mRNA表达水平。结果:3组孕妇血液中CRP及白细胞计数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。免疫组化法检测显示,NLRP6主要表达于胎膜上皮细胞、间充质细胞的细胞质,部分表达于细胞核中。Western blot法及RT-qPCR法检测结果均显示,3组孕妇胎膜中NLRP6及caspase-1蛋白及mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P1表达水平比较,差异有统计学意义(P1),PPROM组孕妇血清NLRP6及caspase-1水平呈正相关(r=0.8395,P1)。结论:NLRP6、caspase-1在孕妇体内表达水平升高可能与HCA的发生发展有关。

关键词：胎膜早破,未足月核苷酸结合寡聚化结构域样受体6 组织学绒毛膜羊膜炎半胱氨酸蛋白酶1

滋阴明目丸含药血清对视网膜色素上皮细胞光损伤模型细胞凋亡率及Caspase-1、Caspase-3蛋白表达的影响

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中医杂志 2018年第24期59卷 2133-2137页

作者：颜家朝李传课李波朱惠安喻京生龙辉陈向东龙达吴权龙易妙湖南中医药大学第一附属医院湖南省长沙市韶山中路95号410007 湖南中医药大学

目的探讨滋阴明目丸对视网膜色素上皮(RPE)细胞光损伤后的保护作用及可能机制。方法60只SD大鼠分为滋阴明目丸低、中、高剂量组和空白组,每组15只。滋阴明目丸各剂量组分别予以滋阴明目丸浓度为0. 39、0. 78、1. 56 g/ml的混悬液灌胃,... 详细信息

目的探讨滋阴明目丸对视网膜色素上皮(RPE)细胞光损伤后的保护作用及可能机制。方法60只SD大鼠分为滋阴明目丸低、中、高剂量组和空白组,每组15只。滋阴明目丸各剂量组分别予以滋阴明目丸浓度为0. 39、0. 78、1. 56 g/ml的混悬液灌胃,灌胃量均为34 ml/(kg·d),空白组予以生理盐水34 ml/(kg·d)灌胃,各组均给药7天。灌胃结束后制备含药血清,并采用MTT法筛选后续实验的含药血清浓度。实验分为空白组(不加含药血清)、血清组(加含药血清)、模型组(光损伤造模、不加含药血清)及中药组(光损伤造模、加含药血清)。培养24 h后模型组和中药组建立体外RPE细胞光损伤模型。检测各组细胞凋亡率,测定半胱氨酸蛋白酶1 (Caspase-1)、半胱氨酸蛋白酶3 (Caspase-3)蛋白及mRNA表达。结果中剂量血清为最佳给药剂量并用于后续实验。与空白组比较,血清组细胞凋亡率、Caspase-1和Caspase-3蛋白及mRNA表达差异均无统计学意义(P> 0. 05),模型组细胞凋亡率、Caspase-1和Caspase-3蛋白及mRNA表达显著上升(P 蛋白及mRNA表达显著下降(P 蛋白及mRNA表达有关。

关键词：视网膜色素上皮光损伤滋阴明目丸半胱氨酸蛋白酶1 半胱氨酸蛋白酶3 细胞凋亡

外周血单核细胞NLRP3炎性小体对脓毒症急性肺损伤患者病情严重程度的诊断价值

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实用医学杂志 2020年第3期36卷 380-384页

作者：欧海燕段娅娟陈兰重庆市红十字会医院(江北区人民医院)呼吸内科重庆400020 重庆医科大学附属第三医院呼吸与危重症医学科重庆400010

目的探讨外周血单核细胞中NLRP3炎性小体对脓毒症急性肺损伤患者病情严重程度的诊断价值。方法采用qRT⁃PCR、Western⁃Blot检测脓毒症急性肺损伤患者外周血单核细胞中NLRP3、Caspase⁃1的mRNA及蛋白表达;酶联免疫吸附法检测相关细胞因子(I... 详细信息

目的探讨外周血单核细胞中NLRP3炎性小体对脓毒症急性肺损伤患者病情严重程度的诊断价值。方法采用qRT⁃PCR、Western⁃Blot检测脓毒症急性肺损伤患者外周血单核细胞中NLRP3、Caspase⁃1的mRNA及蛋白表达;酶联免疫吸附法检测相关细胞因子(IL⁃1β、IL⁃18)水平并比较不同严重程度及预后组间的差异,评价NLRP3水平对患者病情严重程度的预测价值。结果不同严重程度APACHEⅡ和LIPS评分、外周血单核细胞NLRP3、Caspase⁃1表达水平及外周血IL⁃1β及IL⁃18水平比较,高危组上述指标水平最高,中危组次之,低危组最低,(P<0.05)。死亡组患者NLRP3和Caspase⁃1 mRNA表达水平和外周血IL⁃1β和IL⁃18水平明显高于存活组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,NLRP3 mRNA水平曲线下面积为0.877(95%CI:0.808~0.946),其最佳工作点为2.68,此时预测脓毒症急性肺损伤患者病情严重程度的敏感性和特异性分别为82.05%和78.87%,均显著优于LIPS评分和APACHEⅡ评分指标。结论NLRP3炎性小体参与了脓毒症急性肺损伤患者的炎症级联放大,对于脓毒症急性肺损伤患者病情严重程度的预测,具有一定的应用价值。

关键词：核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 脓毒症急性肺损伤半胱氨酸蛋白酶1

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中华医院感染学杂志 2021年第16期31卷 2502-2506页

作者：符春丽唐梅林丽慧邓森灵王慧玲海南西部中心医院妇产科海南儋州571799

目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)通路相关蛋白在胎膜早破(PROM)孕妇胎膜组织中的表达改变及其与组织学绒毛膜羊膜炎(CA)的关系。方法选择海南西部中心医院妇产科2019年8月-2020年8月收治的PROM产妇为研究对象,根据是否合... 详细信息

目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)通路相关蛋白在胎膜早破(PROM)孕妇胎膜组织中的表达改变及其与组织学绒毛膜羊膜炎(CA)的关系。方法选择海南西部中心医院妇产科2019年8月-2020年8月收治的PROM产妇为研究对象,根据是否合并CA从中随机选取孕妇各80例,分别纳入CA组和非CA组,选择同期医院进行产检的健康足月分娩孕妇60名作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测NLRP3、Casepase-1基因在mRNA上的相对表达;抽取脐带血标本,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测脐血炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)水平。结果CA组外周血NLRP3、Casepase-1 mRNA及脐血IL-1β、IL-18水平高于非CA组及对照组(P蛋白在PROM合并CA中显著上调,参与炎症进展,且与新生儿不良结局有关。

关键词：核苷酸结合寡聚化结构域样受体3 胎膜早破组织学绒毛膜羊膜炎半胱氨酸蛋白酶1 白细胞介素-1β 白细胞介素-18

ZEA通过自噬-NF-κB-NLRP3途径介导INS-1细胞焦亡的研究

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ZEA通过自噬-NF-κB-NLRP3途径介导INS-1细胞焦亡的研究

作者：王雪大连医科大学

学位级别：硕士

目的:玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)又名F-2毒素,由镰刀菌属产生,是一种经常在饲料和食品中可检测到的霉菌毒素。据报道,霉菌毒素与糖尿病的发生发展密切相关。研究表明,ZEA可以诱导细胞炎症反应,上调自噬水平,造成细胞损伤,而胰岛细... 详细信息

目的:玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)又名F-2毒素,由镰刀菌属产生,是一种经常在饲料和食品中可检测到的霉菌毒素。据报道,霉菌毒素与糖尿病的发生发展密切相关。研究表明,ZEA可以诱导细胞炎症反应,上调自噬水平,造成细胞损伤,而胰岛细胞损伤、炎症应答和自噬水平的上调等与糖尿病的发病及疾病进展密切相关。在本研究中,我们将对ZEA造成INS-1细胞炎症性损伤甚至细胞焦亡,以及自噬在其中的作用及相关的分子机制进行探究。方法:研究对象为大鼠胰岛β细胞(INS-1细胞)。MTT和乳酸脱氢酶释放实验用来检测ZEA对INS-1细胞的毒性作用和对生存率的影响;Western blot检测评定ZEA在INS-1细胞中触发NLRP3炎症小体激活及下游蛋白表达的变化;实时荧光定量PCR用于检测ZEA暴露后,INS-1细胞中炎症基因Il-1β和TNF-α转录水平表达及变化。PI/Hoechst、乳酸脱氢酶的释放及Western blot实验(caspase-1表达)检测细胞内焦亡的发生。透射电子显微镜(TEM)检测细胞内自噬囊泡的数量和变化,western blot检测自噬相关蛋白的表达。免疫荧光和Western blot检测NF-κB p65位置转移和活化。乳酸脱氢酶释放检测NF-κB抑制后细胞死亡和内容物释放情况;实时荧光定量PCR检测NF-κB抑制后INS-1细胞中ZEA暴露后炎症基因Il-1β和TNF-α转录水平表达和变化。所有干预剂对细胞预处理后,再施加ZEA作用,检测相关指标的变化。结果:与对照组相比,暴露于ZEA后INS-1细胞存活率下降、LDH释放增加;NLRP3炎症小体介导ZEA诱导INS-1细胞焦亡,caspase-1 p20的活化、Il-1β和TNF-α基因转录水平表达和蛋白表达升高,PI/Hoechst染色PI阳性增加和LDH释放增加,经si NLRP3和MCC950处理后均较单独ZEA处理组下降。ZEA诱导INS-1细胞后,自噬囊泡数量增加,自噬相关蛋白表达上调,并经氯喹验证自噬流。与单独ZEA处理组相比,3MA干预后,自噬囊泡数目增加,3MA显现出相反效果。雷帕霉素干预后,caspase-1 p20,IL-1βp17和TNF-α蛋白表达下调,LDH释放亦减少;3MA干预后上述蛋白出现相反变化趋势,但LDH未显现显著差异。与对照组相比,ZEA处理后全蛋白p-NF-κB p65表达增加,胞浆内NF-κB p65减少和胞核内NF-κB p65增加。PDTC干预显著抑制了NF-κB p65的核转移和活化,NLRP3炎症小体活化和焦亡也受到抑制。3MA和雷帕霉素干预后NF-κB p65的核转移和活化发生改变,证明NF-κB p65的核转移和活化被自噬所调控。结论:ZEA可引起INS-1细胞损伤;NLRP3炎症小体介导ZEA诱导INS-1细胞发生焦亡性死亡;ZEA上调细胞自噬水平并且自噬在ZEA诱导NLRP3炎症小体激活中起保护作用;自噬可通过对NF-κB p65核转移和活化的调节影响NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡。

关键词：玉米赤霉烯酮焦亡自噬 NLRP3 半胱氨酸蛋白酶1 NF-κB

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细胞焦亡对代谢综合征作用的研究进展

中国医药 2023年第5期18卷 773-777页

作者：王瑞楠孙艺樊德慧韩宇博刘莉黑龙江中医药大学哈尔滨150040 黑龙江中医药大学附属第一医院心血管科哈尔滨150040

代谢综合征是机体代谢紊乱的一种病理状态,不仅伴随血糖、血脂等多种代谢异常,还会导致心血管疾病以及其他并发症的出现。细胞焦亡作为一种全新的细胞死亡方式,其过程中伴有炎症反应的发生,依赖半胱氨酸蛋白酶1介导的经典细胞焦亡途径... 详细信息

代谢综合征是机体代谢紊乱的一种病理状态,不仅伴随血糖、血脂等多种代谢异常,还会导致心血管疾病以及其他并发症的出现。细胞焦亡作为一种全新的细胞死亡方式,其过程中伴有炎症反应的发生,依赖半胱氨酸蛋白酶1介导的经典细胞焦亡途径及其他非经典途径都参与代谢综合征的发展。细胞焦亡过程中炎症小体的激活及大量炎症因子的释放是代谢综合征发生发展的主要原因之一。本文就细胞焦亡相关途径以及细胞焦亡在代谢综合征各组分或其他相关代谢性疾病中的作用作一综述。

关键词：代谢综合征细胞焦亡半胱氨酸蛋白酶1