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可卡因-苯丙胺调节转录肽对缺血性脑损伤及其神经元半胱天冬氨酸蛋白酶活性的影响

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临床神经病学杂志 2008年第2期21卷 136-138页

作者：陈雪梅贾佳徐运南京大学医学院附属鼓楼医院神经内科 210008 南京大学医药生物技术国家重点实验室

目的探讨可卡因-苯丙胺调节转录(CART)肽对缺血性脑损伤及其半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)活性的影响。方法将12只小鼠随机分为CART组与对照组,CART组小鼠侧脑室注射CART多肽,对照组注射生理盐水,然后制作脑缺血模型,2,3,5-氯化三苯基四... 详细信息

目的探讨可卡因-苯丙胺调节转录(CART)肽对缺血性脑损伤及其半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)活性的影响。方法将12只小鼠随机分为CART组与对照组,CART组小鼠侧脑室注射CART多肽,对照组注射生理盐水,然后制作脑缺血模型,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测量梗死体积。体外培养小鼠皮质神经元,制作缺糖缺氧神经元模型,加入CART多肽或生理盐水,用噻唑蓝染色测细胞生存率,酶联法检测Caspase-3活性。结果CART组脑梗死体积[(0.225±0.044)mm3]显著小于对照组[(0.389±0.055)mm3](P348±0.174)(P3活性(45674±9780)显著低于对照组(51172±2776)(P3活性。

关键词：可卡因-苯丙胺调节转录肽脑缺血半胱天冬氨酸蛋白酶-3

过氧化氢体外诱导细粒棘球蚴原头节细胞Caspase-3表达及超微结构改变的影响

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中国人兽共患病学报 2009年第4期25卷 318-321页

作者：胡汉华康金凤陈蓉白山别克艾赛提汤建安谢风莲新疆医科大学乌鲁木齐830054 乌鲁木齐动物卫生监督站乌鲁木齐

目的探讨过氧化氢(H2O2)体外诱导细粒棘球蚴原头节细胞凋亡、Caspase-3表达和细胞超微结构的影响。方法RPMI1640添加谷氨酰胺组即体外培养细粒棘球蚴原头节,用5mmol/L H2O2诱导8h,使其发生细胞凋亡。用原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标... 详细信息

目的探讨过氧化氢(H2O2)体外诱导细粒棘球蚴原头节细胞凋亡、Caspase-3表达和细胞超微结构的影响。方法RPMI1640添加谷氨酰胺组即体外培养细粒棘球蚴原头节,用5mmol/L H2O2诱导8h,使其发生细胞凋亡。用原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标记技术(TUNEL法)检测原头节细胞凋亡情况,用过氧化物酶标记链霉卵白素(SP)染色半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)。在透射电镜下观察原头节细胞超微结构的变化。结果过氧化氢诱导原头节细胞凋亡细胞增加,caspase-3表达增加,电镜观察原头节细胞异染色质增加,部分细胞染色质异常浓缩呈现凋亡细胞征象。结论H2O2可诱导细粒棘球蚴原头节细胞凋亡,且caspase-3参与原头节细胞的凋亡。

关键词：细粒棘球蚴原头节过氧化氢细胞凋亡半胱天冬氨酸蛋白酶-3

葡萄籽原花青素可能通过AKT-Caspase-3途径对深低温缺血再灌注脑起保护作用

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中华实验外科杂志 2011年第12期28卷 2177-2179页

作者：王怡悦莫绪明马志飞张永生何晓敏戚继荣彭卫南京大学医学院儿科 210093 南京医科大学附属南京儿童医院心胸外科

目的探讨葡萄籽原花青素（GSPE）预处理对小鼠脑缺血再灌注（I／R）损伤的保护作用机制。方法将60只4周龄C57／BL6小鼠随机平均分为假手术组、模型组和GSPE组建立深低温I／R模型，再灌注24h后处死小鼠取脑，Westernblot检测丝氨酸．苏... 详细信息

目的探讨葡萄籽原花青素（GSPE）预处理对小鼠脑缺血再灌注（I／R）损伤的保护作用机制。方法将60只4周龄C57／BL6小鼠随机平均分为假手术组、模型组和GSPE组建立深低温I／R模型，再灌注24h后处死小鼠取脑，Westernblot检测丝氨酸．苏氨酸蛋白激酶（AKT）的表达，逆转录-聚合酶链反应（1it—PCR）技术检测小鼠脑组织半胱天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-3mRNA，TUNEL法检测小鼠大脑皮层细胞凋亡。结果与假手术组比较模型组和GSPE组于再灌注24h后p-AKT显著激活（P〈0．05），Caspase-mRNA表达明显增加（P〈0．05）并且出现明显的病理凋亡（P〈0．05）；GSPE组p-AKT表达较模型组显著增高[A值（1．90±0．02）〉（1．6±0．01），P〈0．05]，且Caspase-3mRNA、病理凋亡均显著低于模型组[（0．43±0．02）〈（0．86±0．03）；（40．92±3．18）％〈（79．86±4．68）％，P〈0．05]。结论葡萄籽原花青素可能通过AKT-Caspase-3途径对深低温缺血再灌注脑起保护作用。

关键词：葡萄籽原花青素脑缺血再灌注丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶半胱天冬氨酸蛋白酶-3

甘草次酸对SIRT6介导的小鼠肠黏膜更新的影响

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中药药理与临床 2021年第1期37卷 69-73页

作者：柯俊羽陈曦钟启胜宋春晖游弋晖李燕舞广州中医药大学科技创新中心广州510405 广州中医药大学脾胃研究所广州510405 广州中医药大学附属高州中医院高州525200

目的:探讨沉默信息调节因子蛋白-6(SIRT6)介导的肠黏膜更新变化及甘草次酸对其的影响。方法:采用SIRT6抑制剂小鼠模型,HE染色观察小肠黏膜病理变化;Q-PCR和Western-blot检测小肠组织SIRT6、小肠上皮细胞标志物(Ck20、Lyso和Synap)及凋... 详细信息

目的:探讨沉默信息调节因子蛋白-6(SIRT6)介导的肠黏膜更新变化及甘草次酸对其的影响。方法:采用SIRT6抑制剂小鼠模型,HE染色观察小肠黏膜病理变化;Q-PCR和Western-blot检测小肠组织SIRT6、小肠上皮细胞标志物(Ck20、Lyso和Synap)及凋亡蛋白(Caspase3)的基因、蛋白变化。结果:与正常对照组相比,模型对照组小鼠肠绒毛及隐窝高度显著减少(P3的基因及蛋白表达显著上调(P蛋白表达明显下调(P蛋白表达(P蛋白变化(P<0.05或P<0.01)。结论:SIRT6抑制可导致肠黏膜形态受损,甘草次酸可促进肠黏膜修复,其机制与上调SIRT6表达并促进肠黏膜细胞更新有关。

关键词：甘草次酸沉默信息调节因子蛋白-6 肠黏膜更新上皮细胞标志物半胱天冬氨酸蛋白酶-3

稽留流产患者滋养细胞中FoxO3a转录因子的表达

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2017年第6期38卷 504-508页

作者：潘翠娇王玉霞暨南大学附属第一医院生殖医学科广东广州510630

目的:探讨稽留流产滋养细胞中叉头框转录因子3a(FoxO3a)的表达及其与凋亡的关系.方法:选取30例经B超及HCG动态监测证实为稽留流产病例的绒毛组织作为研究组,另选取30例因非意愿妊娠行人工流产的正常妊娠病例的绒毛组织作为对照组.免疫... 详细信息

目的:探讨稽留流产滋养细胞中叉头框转录因子3a(FoxO3a)的表达及其与凋亡的关系.方法:选取30例经B超及HCG动态监测证实为稽留流产病例的绒毛组织作为研究组,另选取30例因非意愿妊娠行人工流产的正常妊娠病例的绒毛组织作为对照组.免疫组织化学法检测两组绒毛组织标本中FoxO3a及Caspase-3的表达并采用图像分析技术对其阳性表达进行半定量分析.结果:FoxO3a的表达位于滋养细胞胞质或胞核,Caspase-3的表达位于绒毛滋养细胞胞质;与正常妊娠组相比,稽留流产组滋养细胞中的FoxO3a表达降低和Caspase-3表达增多;组内FoxO3a及Caspase-3的表达有线性相关(P3a表达降低可能与细胞过度凋亡有关.

关键词：稽留流产绒毛叉头框转录因子3a 半胱天冬氨酸蛋白酶-3 凋亡

皮肤血管瘤组织中survivin、Caspase-3的表达及意义

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山东医药 2008年第24期48卷 23-24页

作者：李刚翟晓梅郑州大学第一附属医院河南郑州450052

目的探讨在皮肤血管瘤组织中凋亡相关因子生存素(survivin)、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测60例皮肤血管瘤中的survivin、Caspase-3。结果在血管瘤增生期、退化期和血管畸形中survivin的阳性表... 详细信息

目的探讨在皮肤血管瘤组织中凋亡相关因子生存素(survivin)、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测60例皮肤血管瘤中的survivin、Caspase-3。结果在血管瘤增生期、退化期和血管畸形中survivin的阳性表达率分别为76.9%、35.7%、25.0%,Caspase-3的阳性表达率分别为23.1%、78.6%、0,survivin与Caspase-3的表达呈负相关(r=-0.400,P3在血管瘤增生期、退化期和血管畸形中的表达差异皆具有统计学意义(P3表达下调在皮肤血管瘤的形成中可能起协同作用。

关键词：血管瘤生存素半胱天冬氨酸蛋白酶-3 细胞凋亡

家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽促K562细胞凋亡作用及其机制研究

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中国媒介生物学及控制杂志 2012年第2期23卷 118-121,127页

作者：赵瑞君樊宏英程璟侠冀霞焦丽萍贾琳山西医科大学寄生虫学教研室山西太原030001 湖北省荆州市第一人民医院山西省疾病预防控制中心山西医科大学临床医学院

目的观察家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽对K562细胞核和线粒体膜电位及K562细胞凋亡蛋白半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的影响,进而探讨家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽是否可以影响线粒体膜电位及促进K562细胞凋亡。方法首先采用Hoechst33258荧光标记法,... 详细信息

目的观察家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽对K562细胞核和线粒体膜电位及K562细胞凋亡蛋白半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的影响,进而探讨家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽是否可以影响线粒体膜电位及促进K562细胞凋亡。方法首先采用Hoechst33258荧光标记法,将家蝇3龄幼虫峰5、峰8组分作用于K562细胞,用荧光显微镜检测K562细胞核荧光强度的变化;其次采用荧光探针罗丹明123标记K562细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下观察K562细胞中罗丹明123荧光强度,以细胞内荧光强度表示线粒体膜电位大小;最后用caspase-3检测试剂盒和酶标仪测定K562细胞caspase-3的含量。结果采用Hoechst33258荧光标记法,用荧光显微镜观察到家蝇3龄幼虫峰5、峰8组分作用于K562细胞后部分细胞核的荧光强度增强,说明其可以引起K562细胞发生凋亡;用罗丹明123标记,激光共聚焦显微镜观察发现,家蝇3龄幼虫峰5、峰8组分作用组的K562细胞荧光强度值明显低于对照组(t1=21.30,t2=196.23,P3龄幼虫抗肿瘤肽可以使K562细胞线粒体膜电位降低;峰5、峰8组分作用组caspase-3的含量明显高于对照组(t1=146.92,t2=189.56,P3龄幼虫抗肿瘤肽可以促进K562细胞发生凋亡。结论家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽峰5、峰8组分对K562细胞核具有损伤作用,可以引起K562细胞发生凋亡,作用机制是通过降低K562细胞线粒体膜电位,激活caspase-3,扰乱其生理功能,促使其凋亡。

关键词：抗肿瘤肽荧光标记法线粒体膜电位半胱天冬氨酸蛋白酶-3 凋亡

熊果酸对卵巢癌细胞株增殖、凋亡及顺铂敏感性的影响

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熊果酸对卵巢癌细胞株增殖、凋亡及顺铂敏感性的影响

作者：冯莉苹山东大学

学位级别：硕士

研究背景:肿瘤细胞对以铂类为基础的化疗方案的耐药现象是目前卵巢癌临床治疗的主要障碍。细胞凋亡和抗凋亡的关键途径异常是耐药发生和发展的主要原因之一。耐药肿瘤细胞半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)信号传导通路发生缺陷,使Caspas... 详细信息

研究背景:肿瘤细胞对以铂类为基础的化疗方案的耐药现象是目前卵巢癌临床治疗的主要障碍。细胞凋亡和抗凋亡的关键途径异常是耐药发生和发展的主要原因之一。耐药肿瘤细胞半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)信号传导通路发生缺陷,使Caspase-3活化受抑,最终导致凋亡减少。熊果酸(ursolic acid,UA)是近年研究发现有着广泛生物学活性的植物提取物,其最突出的作用为抗肿瘤。目前尚未见熊果酸对卵巢癌尤其是铂类耐药卵巢癌作用的相关研究,其能否增加耐药卵巢癌对顺铂的敏感性亦未见相关报道。目的:探讨熊果酸对人卵巢癌顺铂敏感细胞株C0C1及顺铂耐药细胞株C0C1/DDP的增殖和凋亡的影响,并研究其对C0C1/DDP细胞株耐药性的逆转作用,初步探讨其可能的机制。方法:采用MTT法检测单用顺铂或熊果酸及顺铂与熊果酸联合对C0C1及C0C1/DDP细胞株的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率;活细胞荧光染色技术观察细胞凋亡的形态学变化;Caspase-3活性试剂盒检测凋亡相关蛋白Caspase-3的活性;免疫化学法定性检测Caspase-3蛋白的表达情况。结果:熊果酸浓度在5～40μmol/L时对两种细胞株均有明显的增殖抑制作用,且呈时间和浓度依赖性;顺铂浓度在1.25～10μg/mL时加入20μmol/L的熊果酸后C0C1/DDP细胞株的存活率下降明显(P＜0.05);20μmol/L的熊果酸使两种细胞株的凋亡率增加(P＜0.05),细胞出现典型的凋亡形态学特征,Caspase-3的活性增加(P＜0.05);顺铂与熊果酸联合较单用顺铂C0C1/DDP细胞株的凋亡率明显增加(P＜0.05),Caspase-3的活性增加(P＜0.05)。结论:熊果酸能够显著抑制卵巢癌C0C1及C0C1/DDP细胞株的增殖,诱导凋亡,并能增强C0C1/DDP细胞株对顺铂的敏感性,其诱导凋亡及逆转耐药的机制可能与增加Caspase-3的活性有关。熊果酸有望成为一种治疗卵巢癌的新药,其与一线化疗药物顺铂合用可提高后者的疗效,有望与顺铂组成新的联合化疗方案。

关键词：熊果酸卵巢癌化疗耐药 COC1 COC1/DDP 细胞凋亡半胱天冬氨酸蛋白酶-3

鬼臼毒素衍生物YB-1EPN对人口腔鳞状上皮癌细胞系增殖的抑制作用研究

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中国药房 2012年第47期23卷 4422-4424页

作者：毕文超刘世军孙克明刘宪勇张敏武警山东省总队医院药剂科济南250014

目的:研究鬼臼毒素衍生物YB-1EPN对人口腔鳞状上皮癌细胞系(KB)增殖的抑制作用。方法:以KB细胞为研究对象,采用MTT法检测细胞毒作用;荧光染色法观察细胞形态学变化;RT-PCR法检测半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3mRNA的表达;激光共聚焦显... 详细信息

目的:研究鬼臼毒素衍生物YB-1EPN对人口腔鳞状上皮癌细胞系(KB)增殖的抑制作用。方法:以KB细胞为研究对象,采用MTT法检测细胞毒作用;荧光染色法观察细胞形态学变化;RT-PCR法检测半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3mRNA的表达;激光共聚焦显微镜观察药物对细胞微管结构的影响。结果:4μmol·L-1YB-1EPN能够直接抑制和杀伤KB细胞;荧光显微镜观察到4μmol·L-1YB-1EPN干预24h后KB细胞出现凋亡小体;RT-PCR法检测到在1、2、4μmol·L-1YB-1EPN干预下KB细胞促凋亡基因Caspase-3表达上调;激光共聚焦显微镜观察到在2、4μmol·L-1YB-1EPN干预24h后KB细胞微管结构被破坏。结论:YB-1EPN能够直接抑制和杀伤KB细胞株,作用机制可能与促凋亡基因的表达上调和抑制微管蛋白聚合有关。

关键词：鬼臼毒素衍生物微管蛋白半胱天冬氨酸蛋白酶-3 增殖抑制