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小鼠骨髓源半成熟树突状细胞的培养与初步鉴定

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中国医学科学院学报 2008年第4期30卷 430-435页

作者：付必莽何晓顺余思胡安斌马毅黄洁夫中山大学附属第一医院器官移植中心广州510080

目的探索培养与鉴定小鼠骨髓来源半成熟树突状细胞（smDC）的可行方法。方法分离、纯化6周龄C57BL/6小鼠骨髓单核细胞,以含10%胎牛血清、2 ng/ml重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和20ng/ml重组小鼠白细胞介素（IL）-4的RP... 详细信息

目的探索培养与鉴定小鼠骨髓来源半成熟树突状细胞（smDC）的可行方法。方法分离、纯化6周龄C57BL/6小鼠骨髓单核细胞,以含10%胎牛血清、2 ng/ml重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和20ng/ml重组小鼠白细胞介素（IL）-4的RPMI-1640培养基培养9 d;再以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）（40 ng/ml）刺激24 h获得smDC,同时以脂多糖（1μg/ml）刺激和不加刺激培养24 h获得成熟DC（mDC）和未成熟DC（iDC）。扫描电子显微镜、流式细胞术、ELISA检测iDC、smDC和mDC的形态、细胞表面标志及细胞因子的表达。建立体外淋巴细胞反应模型,采用细胞计数试剂盒检测smDC对异基因淋巴细胞的活化作用。结果smDC的体积介于iDC和mDC之间、多呈类圆形或圆形,胞体直径约为15μm,树突长度多在5-10μm。smDC、iDC与mDC均高表达CD11c,smDC表达CD40、CD80、CD86及MHC-Ⅱ介于iDC和mDC之间。smDC分泌IL-1β、IL-6和IL-12显著低于mDC（P〈0.01）、分泌IL-12显著低于iDC（P〈0.05）,分泌IL-1β、IL-6与iDC比较差异无显著性（P〉0.05）;smDC、iDC与mDC分泌IL-10差异无显著性（P〉0.05）。smDC对异基因淋巴细胞激活作用显著低于mDC和阳性对照（P〈0.01）,而与阴性对照和iDC差异无显著性（P〉0.05）。结论smDC可能是一个功能和形态上相对独立的DC亚群,体外利用GM-CSF、IL-4和TNF-α诱导骨髓单核细胞是获得smDC的有效方法。

关键词：半成熟树突状细胞培养鉴定

供体来源半成熟树突状细胞诱导大鼠肝移植术后免疫低反应的实验研究

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中国现代医学杂志 2017年第16期27卷 18-23页

作者：李春满王伟张捷唐波李刚董丽英朱磊付必莽昆明医科大学第二附属医院肝胆胰外科四病区云南昆明650101 昆明医科大学第二附属医院泌尿外科一病区云南昆明650101 昆明医科大学第二附属医院肝胆胰研究所云南昆明650101 昆明医科大学第二附属医院甲状腺乳腺外科云南昆明650101 昆明医科大学第二附属医院肝胆胰外科一病区云南昆明650101

目的研究供体来源半成熟树突状细胞(smDC)诱导大鼠肝移植术后免疫低反应的效果,初步分析其作用机制。方法该实验在成功完成大鼠树突状细胞(DC)培养和鉴定的基础上,进行大鼠肝移植术前输注供体来源DC、术后使用雷帕霉素灌胃,观察大鼠术... 详细信息

目的研究供体来源半成熟树突状细胞(smDC)诱导大鼠肝移植术后免疫低反应的效果,初步分析其作用机制。方法该实验在成功完成大鼠树突状细胞(DC)培养和鉴定的基础上,进行大鼠肝移植术前输注供体来源DC、术后使用雷帕霉素灌胃,观察大鼠术后血清白细胞介素10(IL-10)和γ干扰素(IFN-γ)、CD4^+CD25^+Treg的变化,并评估急性免疫排斥病理改变。结果使用雷帕霉素后,可以改变血清细胞因子的分泌水平、促进Lewis→BN大鼠肝移植术后CD4^+CD25^+Treg的增殖,减轻术后免疫排斥反应,从而延长Lewis→BN大鼠肝移植术后生存时间。结合术前输注未成熟树突状细胞(imDC)或smDC,可以增强雷帕霉素的相应作用,进一步诱导大鼠肝移植术后免疫低反应,且smDC的作用强于imDC。结论 smDC可以诱导Lewis→BN大鼠肝移植术后免疫低反应。

关键词：肝移植半成熟树突状细胞免疫排斥调节性T细胞

半成熟树突状细胞和CD_4^+CD_(25)^+Tr在移植免疫耐受中的关系

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医学综述 2012年第14期18卷 2165-2167页

作者：董丽英张捷付必莽昆明医学院第二附属医院肝胆胰外科一病区云南省肝胆胰外科研究所昆明650101

半成熟树突状细胞(smDC)缺乏炎性细胞因子作为炎性递质,抗原呈递时不引起T细胞向产生干扰素γ的效应性T细胞(Th1)极化,而是激活CD4+CD25+Tr细胞,诱导抗原特异性免疫耐受;同时其高表达主要组织相容性复合体Ⅱ、CD80和CD86等分子,利于抗... 详细信息

半成熟树突状细胞(smDC)缺乏炎性细胞因子作为炎性递质,抗原呈递时不引起T细胞向产生干扰素γ的效应性T细胞(Th1)极化,而是激活CD4+CD25+Tr细胞,诱导抗原特异性免疫耐受;同时其高表达主要组织相容性复合体Ⅱ、CD80和CD86等分子,利于抗原呈递和激活Tr细胞诱导免疫耐受。CD4+CD25+Tr细胞通过表面转化生长因子β/转化生长因子β受体、协同刺激分子,抑制细胞表面分子和免疫调节性细胞因子的表达,抑制免疫反应。

关键词：半成熟树突状细胞 CD4+CD25+Tr 移植免疫耐受

半成熟树突状细胞与调节性树突状细胞在减轻ESCs分化的肝细胞移植小鼠模型免疫损伤的共同机制研究

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半成熟树突状细胞与调节性树突状细胞在减轻ESCs分化的肝细胞移植...