检索结果-南通市图书馆

半夏凝集素蛋白单克隆抗体的制备及双抗夹心ELISA的建立

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中国中药杂志 2022年第22期47卷 6076-6081页

作者：谢雨薇郁红礼吴皓陶兴宝王贺鹏程砚秋王彩霞曾平刘冰冰张萍崔小兵南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 中国食品药品检定研究院北京100050

为测定半夏及其炮制品中内源性毒性物质半夏凝集素蛋白(Pinellia ternata lectin, PTL)的含量,该文采用杂交瘤细胞技术制备PTL特异性单克隆抗体,并建立了PTL抗原定量双抗夹心ELISA检测方法,检测条件为:捕获抗体工作浓度为2.5μg·mL-1,... 详细信息

为测定半夏及其炮制品中内源性毒性物质半夏凝集素蛋白(Pinellia ternata lectin, PTL)的含量,该文采用杂交瘤细胞技术制备PTL特异性单克隆抗体,并建立了PTL抗原定量双抗夹心ELISA检测方法,检测条件为:捕获抗体工作浓度为2.5μg·mL-1,检测抗体稀释倍数为1∶450,包被条件为4℃过夜,封闭时间、抗原及检测抗体孵育时间均为90 min,辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(streptavidin-horseradish peroxidase, SA-HRP)孵育时间为15 min。该方法对PTL抗原的定量限为0.375 ng·mL-1;线性范围为75.000~4 800.000 pg·mL-1,R~2=0.997 1;加样回收率在90.0%~110.0%;试验内和试验间精密性变异系数分别在2.0%~3.0%、2.0%~8.5%。采用该方法测定3批半夏及其炮制品中PTL含量,测得半夏中PTL质量分数均值为35.42 mg·g^(-1),其炮制品清半夏、法半夏、姜半夏中PTL质量分数均值分别为1.15 mg·g^(-1)、16.53μg·g^(-1)和122.63 ng·g^(-1),表明炮制后PTL含量显著下降。该文建立的PTL抗原定量双抗夹心ELISA检测方法线性较好,反应灵敏,准确度高,为半夏炮制过程中PTL含量检测提供一种简便有效的监测方法。

关键词：半夏凝集素蛋白单克隆抗体双抗夹心ELISA

半夏不同炮制品刺激性毒性变化及凝集素蛋白检测研究

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中国中药杂志 2022年第17期47卷 4627-4633页

作者：程砚秋郁红礼吴皓陶兴宝谢雨薇陈盛君张萍李松王彩霞王贺鹏曾平刘冰冰南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 江阴天江药业有限公司江苏江阴214400 中国食品药品检定研究院北京100050

为研究半夏不同炮制品炮制过程中刺激性毒性与凝集素蛋白含量变化的相关性,考察Western blot法作为凝集素蛋白检查方法的可行性。自制不同炮制程度的清半夏、法半夏和姜半夏,采用家兔眼结膜刺激模型考察不同炮制程度的半夏炮制品的刺激... 详细信息

为研究半夏不同炮制品炮制过程中刺激性毒性与凝集素蛋白含量变化的相关性,考察Western blot法作为凝集素蛋白检查方法的可行性。自制不同炮制程度的清半夏、法半夏和姜半夏,采用家兔眼结膜刺激模型考察不同炮制程度的半夏炮制品的刺激性毒性变化,采用Western blot法研究半夏不同炮制品中凝集素蛋白的含量变化,分析炮制过程中刺激性毒性变化与凝集素蛋白含量变化的相关性,收集多批次半夏不同炮制品饮片,检测其中的凝集素蛋白含量。结果显示,随着炮制时间的延长,3种半夏炮制品刺激性毒性逐渐降低,凝集素蛋白含量逐渐下降。清半夏浸泡4 d、法半夏浸泡2 d及姜半夏煮制0.5 h后刺激性毒性显著降低,凝集素蛋白含量显著下降。炮制过程中凝集素蛋白含量下降趋势与刺激性毒性变化趋势一致,表明凝集素蛋白含量变化能够反映刺激性毒性的变化。在清半夏、法半夏及姜半夏供试品免疫印迹图中,均未检出活性凝集素蛋白条带,表明以Western blot法检测凝集素蛋白可作为半夏炮制品中毒性凝集素蛋白检测方法。半夏按药典方法炮制合格后不应检测出凝集素蛋白。

关键词：半夏炮制刺激性毒性凝集素蛋白检测

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半夏炮制品相对毒性标示模型的探究

中草药 2022年第6期53卷 1751-1760页

作者：李蒙恩陈天朝马彦江宋晨鸽位玉蝶河南中医药大学河南郑州450008 河南中医药大学第一附属医院河南郑州450000

目的以生品半夏Pinellia ternata毒性大小为标准,寻找标示半夏炮制品相对毒性大小的方法及相对毒性大小与指标成分间的关系。方法按照《中国药典》2020年版一部方法对半夏生品进行质量检查;将影响半夏炮制品毒性的4个因素(白矾用量、生... 详细信息

目的以生品半夏Pinellia ternata毒性大小为标准,寻找标示半夏炮制品相对毒性大小的方法及相对毒性大小与指标成分间的关系。方法按照《中国药典》2020年版一部方法对半夏生品进行质量检查;将影响半夏炮制品毒性的4个因素(白矾用量、生姜用量、蒸煮时间、蒸煮温度)进行混合均匀设计,建立正棱锥降维模型;将上述4个因素降维成用以表征半夏炮制品相对毒性大小的单一因素S_(面),建立其与4个因素之间的回归方程;将得到的S_(面)与德尔菲评价法得出的相对毒性大小表征值进行相关性分析;采用薄层扫描仪、MATLAB软件测量物性分析指标色度(H、S、I),pH测量仪测定pH值,HPLC法测量半夏有机酸,将测得的以上指标成分与S_(面)进行回归分析。结果S_(面)与4个影响因素间的回归模型为S_(面)=1-0.0119 X_(白矾)-0.0058 X_(生姜)-0.0006 X_(时间)-0.0043 X_(温度),r^(2)=0.9838,P半夏炮制品的炮制方法的确定提供数据支持,为研究确定半夏炮制品毒性大小提供新思路。

关键词：半夏毒性成分回归模型色度 pH 有机酸混合均匀设计德尔菲评价法

半夏miR167及其靶基因响应大豆花叶病毒胁迫的表达

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中国生物化学与分子生物学报 2023年第5期39卷 724-733页

作者：王晨燕杜江马振男张丽王德富牛颜冰山西农业大学生命科学学院山西太谷030801 山西农业大学草业学院山西太谷030801

MicroRNAs(miRNAs)是一类小的非编码RNA,在植物逆境及生物胁迫中通过调节靶基因来发挥重要的调控作用。半夏内源miR167是否参与了大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)的胁迫及相互作用关系尚不清楚。本研究利用茎环法扩增半夏内源mi... 详细信息

MicroRNAs(miRNAs)是一类小的非编码RNA,在植物逆境及生物胁迫中通过调节靶基因来发挥重要的调控作用。半夏内源miR167是否参与了大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)的胁迫及相互作用关系尚不清楚。本研究利用茎环法扩增半夏内源miR167基因,命名为pt-miR167,采用生物信息学软件对其进行保守性分析,系统进化性分析及靶基因预测。在此基础上,采用qRT-PCR技术检测病毒积累量、miR167及其潜在的靶基因的表达水平,分析miR167及靶基因响应病毒侵染的表达模式。结果表明,病毒积累量在5~15 d时迅速增加,其中10 d时增加最快,随后呈现缓慢上升趋势。病毒侵染后,pt-miR167相比对照组,表达量呈下调,并且在10 d时表达量最低。进化树分析表明,pt-miR167与番茄(Solanum lycopersicum)中的sly-miR167a聚为一族,高度同源。预测的潜在主要靶基因ARF6表达量与pt-miR167表达量呈现正好相反的趋势,其在10 d时表达量达到最高。本研究表明,miRNA167参与了寄主半夏与病毒SMV的相互作用关系,研究结果有助于揭示SMV与寄主半夏之间的相互作用机制,为今后深入研究病毒与植物提供了参考,为半夏生产提供了研究的基础。

关键词：半夏大豆花叶病毒 miR167 靶基因表达模式

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半夏

长江文艺 2019年第1期 62-78页

作者：张维芬不详

五月了,天还忽冷忽热。往年这个时候,早就是短衣短裤了,今年大街上看看,有些二八月的光景,有的人身上依然裹着棉衣,有的穿着春装,年轻的、爱美的,则穿上了夏装,露着两条大腿,裹着件秋衣,得得瑟瑟的,脸儿冻得青白。家槐倒是照常开了,开... 详细信息

五月了,天还忽冷忽热。往年这个时候,早就是短衣短裤了,今年大街上看看,有些二八月的光景,有的人身上依然裹着棉衣,有的穿着春装,年轻的、爱美的,则穿上了夏装,露着两条大腿,裹着件秋衣,得得瑟瑟的,脸儿冻得青白。家槐倒是照常开了,开得不是那么热烈,犹犹豫豫的,满怀心思一般。老八站在街门前,对着村南那一片庄稼地,一口一口抽着烟。

关键词：半夏

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半夏连作障碍成因及防治研究进展

应用与环境生物学报 2022年第4期28卷 1102-1108页

作者：赵源邓蓉黄钧中国科学院成都生物研究所中国科学院环境与应用微生物重点实验室四川省环境微生物重点实验室成都610041 中国科学院大学北京100049

半夏是一味传统常用中药材,但连作障碍导致其产量和品质下降,从而严重制约产业可持续发展.究其成因,半夏连作导致土壤酸化、酶活下降和营养失衡,特别是酚酸类、醌类、醛类和酮类化合物等化感物质积累,抑制半夏种子萌发和幼苗生长,并造... 详细信息

半夏是一味传统常用中药材,但连作障碍导致其产量和品质下降,从而严重制约产业可持续发展.究其成因,半夏连作导致土壤酸化、酶活下降和营养失衡,特别是酚酸类、醌类、醛类和酮类化合物等化感物质积累,抑制半夏种子萌发和幼苗生长,并造成根际镰孢霉(Fusarium)、产酸克雷伯氏杆菌(Klebsiella oxytoca)和胡萝卜软腐果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum)等致病菌增加,而土壤微生物多样性降低.目前半夏连作障碍的防治措施主要包括轮作与间作、土壤和块茎灭菌以及施用微生物制剂和有机物料等,但这些措施存在运转周期长、成本高、操作困难等缺点或机制不清、效果不稳定等问题.因此建议将半夏植株-根系分泌物(如化感物质等)-根际土壤-根际微生物群落视为一个整体,系统研究其互作关系,并拓展半夏连作障碍防治技术及原理研究,为保障和促进半夏种植产业的可持续发展提供理论与技术参考.(图1参96)

关键词：半夏连作障碍防治措施微生物制剂

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半夏产地加工方法及质量评价研究进展

中国实验方剂学杂志 2022年第15期28卷 275-282页

作者：张雪丽杨长福李玮林昶贵州中医药大学药学院林下中药材研究中心贵阳550025

通过查阅历代本草、医药典籍及相关现代研究文献,笔者系统梳理了历版《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》)及各地方中药志,对半夏产地加工方法的古代历史沿革、1959—2020年相关的半夏产地加工方法进行归纳总结,发现古代半夏... 详细信息

通过查阅历代本草、医药典籍及相关现代研究文献,笔者系统梳理了历版《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》)及各地方中药志,对半夏产地加工方法的古代历史沿革、1959—2020年相关的半夏产地加工方法进行归纳总结,发现古代半夏产地加工方法主要为去皮、汤洗、石灰裹、晒干;现代各地方中药志中半夏产地加工方法以堆放、去皮、晒干或烘干为主,历版《中国药典》中收录的半夏产地加工方法基本一致为洗净、去皮及须根、晒干。此外不同历史时期半夏药材的质量评价发生了一定变化,古代半夏质量评价中以圆、白者为佳;现代本草中评价指标进一步细化到大小、颜色、质地、粉性、净度及均匀度;而现代研究中则大多以半夏的生物碱、有机酸、多糖、核苷等化学成分含量、指纹图谱及药效学研究评价其质量。现阶段半夏产地加工中净制、干燥阶段正处于传统人工去皮、自然晾晒等方法向现代机械化、规模化生产的过渡阶段,亟需制定出合理可行的现代产地加工方法及指导要求,以规范半夏产地加工、保证药材质量。

关键词：半夏采收产地加工历史沿革质量评价《中华人民共和国药典》化学成分

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半夏连作对根际土壤微生物群落的影响研究

中草药 2022年第4期53卷 1148-1155页

作者：刘诗蓉王红兰孙辉杨萍蒋舜媛蒋桂华成都中医药大学药学院四川成都611137 四川省中医药科学院四川成都610041 四川大学环境科学与工程系四川成都610065

目的探明半夏Pinellia ternate连作对根际土壤微生物群落的影响规律,以指导半夏连续高产栽培。方法采用PacBio Sequel测序手段对正茬(CK)、连作一茬(A)、二茬(B)和三茬(C)半夏不同生长时期根际土壤微生物进行测序,对比分析其微生物群落... 详细信息

目的探明半夏Pinellia ternate连作对根际土壤微生物群落的影响规律,以指导半夏连续高产栽培。方法采用PacBio Sequel测序手段对正茬(CK)、连作一茬(A)、二茬(B)和三茬(C)半夏不同生长时期根际土壤微生物进行测序,对比分析其微生物群落结构和多样性差异。结果随着连茬次数的增加,潜在致病细菌如果胶杆菌Pectobacterium aroidearum、真菌如子囊菌门Ascomycota菌群、镰刀菌属真菌Fusarium nematophilum和瓜亡革菌Thanatephorus cucumeris等丰度增加,球黑孢霉Nigrospora_zimmermanii随着连茬次数的增加逐渐成为优势菌群,有益真菌如球囊菌门Glomeromycota菌群丰度减少;随着连茬次数增加,半夏根际土壤中细菌和真菌多样性均降低;根际土壤pH值随着半夏生长周期的延长波动变化,可能导致根际细菌和真菌多样性和功能类群变化,从而使一些致病菌在半夏块茎膨大期和成熟期形成优势种群。结论随着半夏连茬次数的增加,根际土壤有益微生物丰度减少、有害微生物丰度增加,根际土壤微生物群落多样性降低,根际土壤pH值波动变化,是半夏连作障碍形成的重要原因。

关键词：半夏连作障碍根际土壤 PacBio Sequel测序微生物多样性群落结构

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半夏组培苗再生途径优选及驯化移栽

植物生理学报 2022年第1期58卷 214-222页

作者：余孟娟孙婷婷董诚明苏秀红杨林林河南中医药大学药学院郑州450000 呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心郑州450000 河南省道地药材生态种植工程技术研究中心郑州450000

本研究建立了两条半夏组培苗再生途径:外植体直接诱导再生植株和外植体通过愈伤组织诱导再生植株,之后对两条再生途径产生的组培苗进行综合评价,筛选出较佳的再生途径,并进一步构建半夏组培苗驯化移栽体系,为半夏离体培育及扩繁提供技... 详细信息

本研究建立了两条半夏组培苗再生途径:外植体直接诱导再生植株和外植体通过愈伤组织诱导再生植株,之后对两条再生途径产生的组培苗进行综合评价,筛选出较佳的再生途径,并进一步构建半夏组培苗驯化移栽体系,为半夏离体培育及扩繁提供技术支撑。结果表明:通过外植体直接诱导再生植株途径培养的组培苗健壮、次生代谢产物合成能力强、成本较低,更适合农业大规模生产。驯化移栽阶段将半夏组培苗于1/2MS+0.05 mg·L^(-1)IBA培养基中壮苗10 d,之后炼苗4 d移栽于砂质壤土:营养土为1:2的基质中,可显著提高半夏组培苗移栽成活率,且降低了移栽成本,具有良好的实用价值。

关键词：半夏再生途径组培苗次生代谢产物氮代谢合成关键酶驯化移栽