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α1，3-半乳糖基转移酶基因沉默对NK细胞介导的异种细胞毒作用的影响

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中华器官移植杂志 2008年第8期29卷 460-463页

作者：朱珉祁洪刚曹荣华王璐黄亚冰刘斌林正斌陈知水陈刚陈实华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所国家教育部、卫生部器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨α1，3-半乳糖基转移酶（α1，3-GT）基因沉默对人自然杀伤（NK）细胞介导的异种细胞毒作用的影响。方法将培养的永生化猪血管内皮细胞系细胞株PED分为3组。转染组：PED转染了特异性α1，3-GT核糖核酸干扰分子（siRNA-1）；错... 详细信息

目的探讨α1，3-半乳糖基转移酶（α1，3-GT）基因沉默对人自然杀伤（NK）细胞介导的异种细胞毒作用的影响。方法将培养的永生化猪血管内皮细胞系细胞株PED分为3组。转染组：PED转染了特异性α1，3-GT核糖核酸干扰分子（siRNA-1）；错配组：PED转染了错配的SiRNA；空转染组：PED未转染SiRNA。观察各组PED与人NK细胞系细胞株NK92在静止和流动状态下的粘附作用、不同效靶比下的NK92细胞毒作用以及PED和NK92混和培养上清液中γ干扰素（IFN-γ）的水平。结果PED转染后48h，转染组、错配组和空转染组在静止状态下粘附NK92的数量（个）分别为262±26、275±24和252±23；流动状态下分别为132±12、125±15和110±20，无论是静止还是流动状态下，各组PED对NK92的粘附能力的比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。无论PED是否被活化，在相同效靶比下NK92对各组PED的杀伤率的比较，差异均无统计学意义（P〉0．05），但杀伤率与效靶比呈正相关。NK92与PED共孵育早期即有反应性IFN-γ分泌，其分泌水平[（366．9±28．7）ng／L]较其自发分泌水平[（60．1±6．4）ng／L]增加了5倍，在共孵育后12h分泌值最高，但各组间不同时段IFN-γ分泌值的比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论利用RNA干扰技术下调PED上的α1，3-半乳糖残基（reGal）的表达，未引起NK92和PED相互作用的明显改变。α-Gal可能并非是NK细胞作用的靶位点，其表达量的高低对NK细胞的活化、粘附及杀伤能力未产生负性影响。

关键词： RNA干扰杀伤细胞,天然内皮细胞半乳糖转移酶类

Bel亚型与α1，3半乳糖基转移酶基因G952A多态性关系的研究

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中华检验医学杂志 2008年第4期31卷 425-428页

作者：邓志辉喻琼梁延连苏宇清王大明魏天莉李茜深圳市血液中心 518035 深圳市输血医学研究所 518035

目的研究红细胞ABO血型系统中B放散型的ABO基因分子遗传基础。方法通过标准血型血清学试验鉴定了3例Bel亚型及15例对照B型样本，采用ABO基因分型PCR序列特异性引物、ABO基因第6及第7外显子PCR产物直接测序及克隆测序等方法进行ABO基因... 详细信息

目的研究红细胞ABO血型系统中B放散型的ABO基因分子遗传基础。方法通过标准血型血清学试验鉴定了3例Bel亚型及15例对照B型样本，采用ABO基因分型PCR序列特异性引物、ABO基因第6及第7外显子PCR产物直接测序及克隆测序等方法进行ABO基因及亚型的定型。结果在1例血型血清学检测为Bel亚型标本中，发现一个新的B等位基因。该等位基因与B101标准等位基因相比，差异仅在于ABO基因的第7外显子上nt952位G〉A突变，导致多肽链Va1318Met，定为B放散型（Bel）新基因，GenBank注册号为EF117687。而其余2例Bel型样本及15例对照B型样本含正常标准B基因。结论首次在ABO基因编码区核苷酸930位后的错义突变中发现并报道了新B等位基因，表明1，3半乳糖基转移酶基因G952A多态性可能是Bel分子遗传机制之一。

关键词： ABO血型系统半乳糖转移酶类多态性单核苷酸

α1,3-半乳糖转移酶及其相关糖基转移酶的研究进展

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军事医学科学院院刊 2008年第5期32卷 478-481页

作者：常宏宇章扬培军事医学科学院野战输血研究所北京100850

糖基化作用是最重要的翻译后修饰之一。多种多样的半乳糖化反应使得生物体可以表达极其多样的寡糖结构。α1,3-半乳糖转移酶(GGTA1)、ABO血型抗原合成酶及异红细胞糖苷酯合成酶(iGb3 s)均催化半乳糖在α1,3糖苷键之间的转移。前两者合... 详细信息

糖基化作用是最重要的翻译后修饰之一。多种多样的半乳糖化反应使得生物体可以表达极其多样的寡糖结构。α1,3-半乳糖转移酶(GGTA1)、ABO血型抗原合成酶及异红细胞糖苷酯合成酶(iGb3 s)均催化半乳糖在α1,3糖苷键之间的转移。前两者合成的抗原在异种移植(Galα1,3-Gal抗原,简称αGal)和同种异基因移植(ABO抗原)的免疫排斥反应中发挥重要的作用。本综述主要讨论这些转移酶的特性、其合成的抗原及其在移植中的意义。

关键词：半乳糖转移酶类 ABO血型系统 α1 3-半乳糖转移酶异红细胞糖苷酯合成酶异种移植

β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ在G蛋白介导顶体反应中的作用

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中国病理生理杂志 2005年第7期21卷 1445-1447,1451页

作者：金慧钟文涛龚兴国浙江大学生命科学学院浙江杭州310027

After the first recognition occurs between the activated sperm and zona pellucida of the oocyte from the mammalians, β-1,4-galactosyltransferase I (β 4GalT I) combines the N-GlcNAc terminals by O-ligands on the ZP3 of the zona pellucida, which plays a difunctional role in the fertilization. The G protein signal system on the sperm membrane then is consequently activated by ZP3 via β4GalT I, contributing to the induction of acrosome reaction. It was proved that in the activation of the G protein system, both the BBXB and BBXXB motifs on the N terminal of the long β 4GalT I are necessary.

关键词：半乳糖转移酶类 G蛋白顶体反应

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猪胚胎成纤维细胞αGal表达的鉴定

中华器官移植杂志 2005年第9期26卷 521-523页

作者：王坤庄国华张同琳林爱星周孝思北京大学第三医院器官移植中心 100083 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室

目的确定猪胚胎成纤维细胞是否合成α1,3半乳糖苷,为下一步进行基因工程改造的结果提供鉴定方法。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western免疫印迹法分别在转录和翻译水平确定猪胚胎成纤维细胞是否合成α1,3半乳糖苷。结果通过RT-... 详细信息

目的确定猪胚胎成纤维细胞是否合成α1,3半乳糖苷,为下一步进行基因工程改造的结果提供鉴定方法。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western免疫印迹法分别在转录和翻译水平确定猪胚胎成纤维细胞是否合成α1,3半乳糖苷。结果通过RT-PCR扩增,发现α1,3半乳糖苷转移酶基因在原代和传代培养的猪胚胎成纤维细胞内转录,Western免疫印迹证实,在原代和传代培养的猪胚胎成纤维细胞能合成含有α1,3半乳糖苷残基的糖蛋白。结论猪胚胎成纤维细胞可合成α1,3半乳糖苷;可采用PCR扩增和Western免疫印迹方法对经过基因工程改造的猪胚胎成纤维细胞是否表达α1,3半乳糖苷转移酶进行鉴定。

关键词：猪胚胎成纤维细胞半乳糖转移酶类鉴定方法猪胚胎 Western免疫印迹方法逆转录聚合酶链反应 RT-PCR扩增 Gal