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第三军医大学学报 2012年第11期34卷 1075-1078页

作者：刘一鸣何勇张艳赖星李金政龚建平重庆医科大学附属第二医院肝胆外科重庆400010

目的通过观察半乳凝集素-9(Galectin-9)在大鼠肝移植急性排斥模型中的作用,探讨其在诱导肝移植免疫耐受中的机制。方法建立Lewis到BN大鼠肝移植急性排斥反应模型(n=30),受体分为3组,每组10只。转染组于肝移植冷缺血期经门静脉转染重组ga... 详细信息

目的通过观察半乳凝集素-9(Galectin-9)在大鼠肝移植急性排斥模型中的作用,探讨其在诱导肝移植免疫耐受中的机制。方法建立Lewis到BN大鼠肝移植急性排斥反应模型(n=30),受体分为3组,每组10只。转染组于肝移植冷缺血期经门静脉转染重组galectin-9腺病毒质粒2 ml,空质粒组灌注2 ml空腺病毒载体,对照组灌注2 ml生理盐水。术后7 d各组处死5只大鼠,余观察生存率,采用Banff分级观察移植物排斥程度;实时荧光定量PCR检查肝组织Galectin-9、T-bet、RORγt mRNA表达水平;Western blot检测肝组织IFN-γ及IL-17蛋白表达水平。结果术后7 d转染组Banff评分Ⅰ～Ⅱ级,空质粒组及对照组为Ⅲ级;转染组、空质粒组及对照组Galectin-9 mRNA水平依次为(1.14±0.05)、(0.46±0.03)、(0.49±0.07),转染组Galectin-9 mRNA水平较其余2组明显增加(P9)、(1.58±0.07),转染组T-bet及RORγt mRNA表达水平明显低于其余2组(P9±0.06)、(1.28±0.11)、(1.47±0.05)和(0.64±0.07)、(1.52±0.05)、(1.67±0.04),转染组IFN-γ及IL-17蛋白表达水平低于空质粒组及对照组(P9通过清除Th1/Th17细胞诱导肝移植免疫耐受形成。

关键词：半乳凝集素-9 肝移植免疫耐受大鼠

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半乳凝集素-9在诱导大鼠肝移植免疫耐受中的作用

半乳凝集素-9在诱导大鼠肝移植免疫耐受中的作用

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作者：刘一鸣重庆医科大学

学位级别：硕士

目的通过上调半乳凝集素-9(Galectin-9)在大鼠肝脏移植急性排斥反应模型中的表达，探寻其在诱导大鼠肝脏移植免疫耐受中的可能作用机制。方法(1)运用改良Kamada“二袖套法”建立Lewis大鼠到BN大鼠的原位肝脏移植(OrthotopicLiverTransp... 详细信息

目的通过上调半乳凝集素-9(Galectin-9)在大鼠肝脏移植急性排斥反应模型中的表达，探寻其在诱导大鼠肝脏移植免疫耐受中的可能作用机制。方法(1)运用改良Kamada“二袖套法”建立Lewis大鼠到BN大鼠的原位肝脏移植(OrthotopicLiverTransplantationOLT)急性排斥动物反应模型。(2)受体随机分为3组，分别为转染组(n=10)、空白质粒对照组(n=10)以及生理盐水对照组(n=10)，转染组于冷缺血期使用无损伤血管夹夹闭供肝肝上下腔静脉、肝下下腔静脉以及门静脉，经由门静脉注入2ml滴度为1×109IU/ml的Galectin-9的腺病毒载体，保存60分钟;空白质粒对照组同样于移植肝脏冷缺血期夹闭三根主要血管，经门静脉灌注2ml滴度为1×109IU/ml空载体，保存60分钟;对照组采用上述同样的方法灌注0.9%生理盐水2ml。(3)术后第7天，三组分别处死5只大鼠，抽取下腔静脉血5ml，并切取肝脏中叶组织备检，余大鼠观察移植术后生存率。(4)肝脏标本经HE染色后在光学显微镜下观察肝脏组织病理学改变，Banff分级评定排斥程度;全自动生化分析仪检测各组总胆红素(TotalBilirubin，TBIL)、谷丙转氨酶(Alanineaminotransferase,ALT)以及谷草转氨酶(AspartateAminotransferase，AST)的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应法检测肝脏组织中半乳凝集素-9、T-bet以及RORγt基因表达水平;蛋白免疫印迹法测量肝组织中干扰素γ(IFN-γ)和白介素-17(IL-17)的蛋白表达水平;酶联免疫吸附法检测血清IFN-γ及IL-17的含量。结果(1)建立稳定Lewis-BN大鼠肝移植急性排斥模型。(2)术后七天转染组尚有4只大鼠存活，生存率80%，而空白质粒组及对照组均只有1只大鼠存活，生存率20%。转染组大鼠生存率明显改善(P＜0.05)(3)根据Banff评分，转染组肝组织评分为Ⅰ级，其余两组为Ⅲ级。(4)转染组、空白质粒组、对照组血清TBIL含量分别为：21.35±0.47μmol/L、89.46±17.42μmol/L、92.35±15.45μmol/L;ALT含量分别为：216.47±13.62U/L、912.56±44.21U/L、957.71±32.58U/L;AST含量分别为：136.68±21.32U/L、687.93±64.18U/L、697.37±53.42U/L;转染组TBIL、ALT以及AST含量明显低于其余两组(P＜0.05)(5)Real-TimePCR结果提示转染组、空白质粒组及对照组Galectin-9mRNA水平依次为1.14±0.05，0.46±0.03，0.49±0.07，转染组Galectin-9mRNA水平较其余两组明显增加(P9，1.58±0.07，转染组T-bet及RORγtmRNA表达水平明显低于其余2组(P9±0.06、1.28±0.11、1.47±0.05和0.64±0.07、1.52±0.05、1.67±0.04，转染组IFN-γ及IL-17蛋白表达水平降低显著(P9±9.72、121.32±12.77、134.54±16.35和18.25±7.16、87.53±9.28、91.62±7.36。转染组IFN-γ及IL-17水平下降显著(P9在体内的表达，可明显改善移植肝脏组织病理改变，并通过清除效应Th1以及Th17细胞及其相关细胞因子的分泌，促使免疫平衡向Th2/Treg偏移，有助于诱导免疫耐受。

关键词：半乳凝集素-9 大鼠肝移植免疫耐受

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Galectin-9缺失在小鼠肿瘤免疫中对CD8+T细胞及调节性T细胞功能的影响

Galectin-9缺失在小鼠肿瘤免疫中对CD8+T细胞及调节性T细胞功能的...

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作者：苟娟重庆医科大学

学位级别：硕士

目的：在小鼠肿瘤模型中探讨Galectin-9缺失对肿瘤生长和转移的影响，并且分析Galectin-9缺失对CD8+T细胞频率、表型和功能影响以及对Treg细胞频率影响，探讨Galectin-9在肿瘤免疫中的作用。方法：分别建立B16F10黑色素瘤G9KO-/-C57BL/... 详细信息

目的：在小鼠肿瘤模型中探讨Galectin-9缺失对肿瘤生长和转移的影响，并且分析Galectin-9缺失对CD8+T细胞频率、表型和功能影响以及对Treg细胞频率影响，探讨Galectin-9在肿瘤免疫中的作用。方法：分别建立B16F10黑色素瘤G9KO-/-C57BL/6小鼠右后肢外侧皮下注射模型和EG7-OVA淋巴瘤G9KO-/-C57BL/6小鼠右后肢外侧皮下注射模型，待体内出现荷瘤开始，每2天监测肿瘤体积，3周后分别绘制两种肿瘤生长曲线并且比较G9KO-/-C57BL/6两组小鼠肿瘤生成差异;建立B16F10黑色素瘤G9KO-/-C57BL/6小鼠尾静脉注射模型，密切观察肺部肿瘤转移情况，2周后统计肺部黑色素瘤结节数量，观察G9KO-/-C57BL/6两组小鼠在肿瘤转移的差异;取B16F10黑色素瘤G9KO-/-C57BL/6小鼠右后肢皮下实体瘤模型，分别完全分离出肿瘤瘤体，用酶消化法提取肿瘤浸润淋巴细胞，并且制备成单细胞悬液，流式细胞术检测TIL中的CD8+T淋巴细胞频率以及表型，用佛波酯刺激CD8+T细胞4-6h，检测细胞分泌INF-量，分析CD8+T淋巴细胞功能。同时也检测TIL中CD4+Foxp3+Treg细胞的频率，分析CD8+T细胞频率与Treg细胞频率的比值。结果：在小鼠实体荷瘤模型中，G9KO小鼠相对于WT小鼠能明显抵制B16F10(P9KO小鼠能显著抑制黑色素瘤向肺部的转移（P9KO小鼠相对于WT小鼠，在CD8+T淋巴细胞数量上没有差异，但G9KO小鼠能上调肿瘤局部CD8+T淋巴细胞频率（P9KO小鼠能明显下调功能耗竭CD8+T淋巴细胞表型（Tim-3+，PD-1+Tim-3+）的频率(P9KO小鼠能促进CD8+T细胞分泌INF-(P9KO小鼠相对于WT小鼠，能明显下调肿瘤局部的CD4+Foxp3+Treg细胞频率（P9KO小鼠增加了肿瘤局部CD8+T细胞数量降低Treg细胞数量，使得CD8/Tregs比值上升（P9的缺失能延缓肿瘤在机体内的生长，抑制肿瘤的转移，减轻肿瘤特异性CD8+T细胞耗竭，并且能减弱肿瘤局部Treg细胞免疫抑制功能，进而增强机体抗肿瘤免疫。

关键词：半乳凝集素-9 CD8+T细胞 Tim-3 PD-1 调节性T细胞

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Galectin-9在PD-1/PD-L1抑制剂联合化疗非小细胞肺癌患者免疫微环境中的作用

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河北医药 2022年第21期44卷 3221-3224,3229页

作者：廉政君叶红伟石学萍米热古丽·阿不都热合曼新疆医科大学第八附属医院肿瘤内科乌鲁木齐市830000 新疆医科大学第八附属医院病理科乌鲁木齐市830000

目的探讨半乳凝集素-9(Galectin-9)在非小细胞肺癌(NSCLC)程序性细胞死亡受体-1(PD-1)/程序性细胞死亡受体配体-1(PD-L1)抑制剂联合化疗免疫微环境中的作用。方法选取2019年5月至2021年3月收治的NSCLC患者30例,取活检组织标本,检测Galec... 详细信息

目的探讨半乳凝集素-9(Galectin-9)在非小细胞肺癌(NSCLC)程序性细胞死亡受体-1(PD-1)/程序性细胞死亡受体配体-1(PD-L1)抑制剂联合化疗免疫微环境中的作用。方法选取2019年5月至2021年3月收治的NSCLC患者30例,取活检组织标本,检测Galectin-9、PD-1、PD-L1、T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim3)、淋巴细胞活化基因3(LAG3)表达水平,测定血清CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)表达水平,分析Galectin-9与PD-1、PD-L1、TIM3、LAG3及CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)水平的相关性,对比不同疗效患者治疗前后上述指标表达水平,Logistic回归分析疗效影响因素。结果Galectin-9高表达组Ⅳ期、淋巴结转移比例及PD-1、PD-L1、TIM3、LAG3、CD_(8)^(+)表达水平高于低表达组,CD_(4)^(+)表达水平低于低表达组(P9与PD-1、PD-L1、TIM3、LAG3、CD_(8)^(+)呈正相关(P9、PD-1、PD-L1、TIM3、LAG3及血清CD_(8)^(+)表达水平低于治疗前(P9、PD-1、PD-L1、TIM3、LAG3及血清CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);Logistic回归分析显示,治疗前Galectin-9、PD-1、PD-L1、TIM3、LAG3、CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)均为疗效影响因素(P9与免疫检查点PD-1、PD-L1、TIM3、LAG3及血清CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)表达水平相关,可作为NSCLC患者接受PD-1/PD-L1抑制剂治疗时免疫状态及疗效的监测指标。

关键词：非小细胞肺癌半乳凝集素-9 免疫检查点程序性细胞死亡受体-1/程序性细胞死亡受体配体-1抑制剂免疫微环境

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Tim-3／Galectin-9途径——移植免疫耐受中新的信号通路

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医学分子生物学杂志 2012年第5期9卷 403-405页

作者：匡悦龚建平重庆医科大学附属第二医院肝胆外科重庆市400010

T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3（Tim-3）是一种I型膜蛋白分子，属于新近发现的T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子家族的一员。Tim-3分子选择性表达于分化的Th1细胞而不是Th2细胞．可与表达在CD4^＋CD25^＋调节性T细胞和／或抗原提呈细胞上的配... 详细信息

T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3（Tim-3）是一种I型膜蛋白分子，属于新近发现的T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子家族的一员。Tim-3分子选择性表达于分化的Th1细胞而不是Th2细胞．可与表达在CD4^＋CD25^＋调节性T细胞和／或抗原提呈细胞上的配体半乳凝集素-9（galectin-9）相互作用，在免疫效应阶段通过清除效应性Th1细胞而抑制Thl免疫应答并可诱导免疫耐受，为诱导移植物耐受提供了一条新的通路。

关键词： T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3 半乳凝集素-9 Th1细胞免疫耐受

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