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HPLC法测定不同防风炮制品中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

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临床医学研究与实践 2024年第22期9卷 9-13页

作者：李丽张毛毛安徽省利辛县中医院药剂科安徽亳州236700 安徽省亳州市食品药品检验中心安徽亳州236800

目的建立防风不同炮制品中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定方法并进行比较。方法采用高效液相色谱法(HPLC),使用Hitachi Lachrom-C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水溶液(40:60)作为流动相,设定检测波长为254 nm、... 详细信息

目的建立防风不同炮制品中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量测定方法并进行比较。方法采用高效液相色谱法(HPLC),使用Hitachi Lachrom-C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水溶液(40:60)作为流动相,设定检测波长为254 nm、柱温为30℃、流速为1.0 m L/min,进样量3μL。同时,采用快速水分测定仪测定不同炮制品的水分含量。结果升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷分别在14.75~118.00μg/mL和24.00~192.00μg/mL范围内有良好的线性关系。升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷精密度的相对标准偏差(RSD)分别为0.68%、1.13%,重现性的RSD分别为0.64%、1.74%,平均回收率分别为100.80%,95.65%。防风炮制后升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量均有不同程度的下降,虽然微波炮制炒防风的5-O-甲基维斯阿米醇苷含量要低于传统炮制品,但是微波炮制品含量整体高于传统炮制品,炮制后水分含量明显降低,微波炮制品水分含量整体略高于传统炮制品。结论HPLC法快捷、简便、准确、重复性好,可用于防风不同炮制品的质量控制;防风的微波炮制品有效成分含量较高,水分含量略低。

关键词：防风炮制品微波炮制升麻素苷 5-O-甲基维斯阿米醇苷高效液相色谱

高速逆流色谱分离纯化防风中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷

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分析化学 2009年第11期37卷 1679-1682页

作者：韩忠明王云贺韩梅赵淑杰杨利民吉林农业大学中药材学院

建立了高速逆流色谱分离制备防风中有效成分升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的方法。防风根的粉末经甲醇浸泡提取和减压蒸馏,得粗提浸膏。以V(乙酸乙酯)∶V(正丁醇)∶V(水)=2∶7∶9为溶剂,上相为固定相,下相为流动相,流速2.0mL/min。从3... 详细信息

建立了高速逆流色谱分离制备防风中有效成分升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的方法。防风根的粉末经甲醇浸泡提取和减压蒸馏,得粗提浸膏。以V(乙酸乙酯)∶V(正丁醇)∶V(水)=2∶7∶9为溶剂,上相为固定相,下相为流动相,流速2.0mL/min。从316mg防风粗提物中一步分离得到13.9mg升麻素苷和25mg5-O-甲基维斯阿米醇苷,纯度分别为98.1%和99.2%。采用ESI-MS,1H NMR和13C NMR对目标化合物的结构进行了鉴定。

关键词：高速逆流色谱防风升麻素苷 5-O-甲基维斯阿米醇苷

高效液相色谱法测定腰痛丸中蛇床子素、升麻素苷和橙皮苷的含量

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药学与临床研究 2022年第2期30卷 116-118页

作者：仇其原张卓朱干红盐城市食品药品监督检验中心盐城224000 盐城市中医院盐城224000

目的:腰痛丸(Ⅰ)是盐城市中医院的院内中药复方制剂,具有良好的临床治疗效果。利用高效液相色谱法(HPLC),建立同时测定腰痛丸(Ⅰ)中蛇床子素、升麻素苷及橙皮苷含量的方法。方法:采用Waters CAPCELL PAK C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)... 详细信息

目的:腰痛丸(Ⅰ)是盐城市中医院的院内中药复方制剂,具有良好的临床治疗效果。利用高效液相色谱法(HPLC),建立同时测定腰痛丸(Ⅰ)中蛇床子素、升麻素苷及橙皮苷含量的方法。方法:采用Waters CAPCELL PAK C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以流动相为0.2 mol·L^(-1)醋酸铵溶液(A)-甲醇(B),梯度洗脱;柱温30℃;检测波长284 nm(升麻素苷、橙皮苷)、324 nm(蛇床子素);流速为1.0 mL·min^(-1);进样量为20μL。结果:经方法学验证,在50 min内,腰痛丸(Ⅰ)中蛇床子素、升麻素苷和橙皮苷峰分离度良好;峰面积与其浓度呈良好的线性关系,回收率符合规定,稳定性良好,检测方法可靠。结论:该含量测定方法简便快速、结果精确可靠并且重现性好,可作为腰痛丸(Ⅰ)中蛇床子素、升麻素苷和橙皮苷的质量控制方法。

关键词：腰痛丸(Ⅰ) 蛇床子素升麻素苷橙皮苷 HPLC-PAD法

毛蕊异黄酮葡萄糖苷对升麻素苷及其苷元大鼠体内药代动力学特征的影响研究

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中国中药杂志 2014年第23期39卷 4669-4674页

作者：赵晓莉刘玲狄留庆李俊松康安南京中医药大学药学院江苏南京210046 江苏省中药高效给药系统工程技术研究中心江苏南京210046

为了探索黄芪-防风配伍用药的科学内涵,实验建立了利用UPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中升麻素苷、升麻素的分析方法,研究黄芪中主要活性成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷对防风中主要活性成分升麻素苷及其苷元大鼠体内药代动力学特征的影响。取雄... 详细信息

为了探索黄芪-防风配伍用药的科学内涵,实验建立了利用UPLC-MS/MS同时测定大鼠血浆中升麻素苷、升麻素的分析方法,研究黄芪中主要活性成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷对防风中主要活性成分升麻素苷及其苷元大鼠体内药代动力学特征的影响。取雄性SD大鼠分为2组,每组6只,分别灌胃给药升麻素苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷-升麻素苷,于不同时间点眼眶取血,采用UPLC-MS/MS方法,检测血浆中升麻素苷及其苷元升麻素的含量,使用DAS3.2.4软件处理数据并分析。该实验建立的UPLC-MS/MS方法快速、准确和灵敏,可用于大鼠血浆中升麻素苷、升麻素的同时测定,色谱柱为BEHC18(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速为0.3 m L·min-1,采用电喷雾电离源(ESI),多反应离子监测(MRM)扫描方式。结果表明,与升麻素苷组相比,毛蕊异黄酮葡萄糖苷-升麻素苷组中升麻素苷的AUC0-t,AUC0-∞显著性提高(P升麻素的Cmax显著性提高(P苷能促进升麻素苷及其苷元的吸收,增加生物利用度,初步说明了黄芪-防风配伍用药的合理性。

关键词：升麻素苷升麻素毛蕊异黄酮葡萄糖苷药代动力学

高效液相色谱法同时测定黄芪赤风胶囊中芍药苷、升麻素苷等9种成分的含量

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中国药学杂志 2012年第15期47卷 1246-1249页

作者：姜艳艳朱颖超刘斌北京中医药大学北京100102 国家中医药管理局中药经典名方有效物质发现重点研究室北京100102

目的建立HPLC同时测定黄芪赤风胶囊中9种成分的含量。方法采用Waters Symmetry Shield RP18(4.6 mm×150mm,5μm)色谱柱;以甲醇(A)-水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0～15 min,5%A→20%A;15～55 min,20%A→35%A;55～100 min,35%A→85%A),流速1.0 mL·min-1;检测波长:230 nm(0～25 min,芍药苷),254 nm(25～100 min,毛蕊异黄酮苷等);柱温35℃。结果芍药苷、升麻素苷、毛蕊异黄酮苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、芒柄花苷、亥茅酚苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的线性范围分别为1.51～15.10,0.047～0.94,2.192～10.960,0.052 2～1.044,0.041 4～0.828,1.56～7.80,0.042 2～0.844,0.149～0.744和0.110～0.552μg(r≥0.999 0);平均回收率(n=6)分别为99.48%(RSD=2.59%),103.15%(RSD=1.69%),102.77%(RSD=1.56%),99.27%(RSD=2.72%),101.99%(RSD=2.36%),102.25%(RSD=2.10%),101.49%(RSD=3.00%),100.45%(RSD=1.76%)和97.49%(RSD=2.03%)。结论所建立的方法快速、准确、专属性强、精密度好,可用于黄芪赤风胶囊的质量控制。

关键词：高效液相色谱法黄芪赤风胶囊黄芪防风赤芍芍药苷升麻素苷

HPLC同时测定正天丸中芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

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中国中药杂志 2013年第13期38卷 2114-2117页

作者：黄澜陈惠玲李玲玲厦门市药品检验所福建厦门361012

该研究以高效液相色谱同时测定正天丸(钩藤、白芍、川芎、当归、防风等)中芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量。试验中采用Insertil ODS-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流... 详细信息

该研究以高效液相色谱同时测定正天丸(钩藤、白芍、川芎、当归、防风等)中芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量。试验中采用Insertil ODS-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ***-1,柱温30℃,检测波长230 nm。由试验结果可知,芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷在11.37～170.5,2.188～32.82,2.896～43.44,3.000～45.00 mg.L-1峰面积与进样量线性关系良好,r分别为0.999 9,0.999 9,1.000 0,1.000 0;回收率(n=6)分别为102.3%(RSD 1.2%),99.71%(RSD 1.9%),101.2%(RSD 1.2%),99.40%(RSD 2.4%)。按所建方法对5批样品中上述4种成分的含量进行测定,结果均令人满意。该方法简便、准确,重复性好,可用于正天丸中芍药苷、阿魏酸、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的质量控制。

关键词：中成药正天丸芍药苷阿魏酸升麻素苷 5-O-甲基维斯阿米醇苷 HPLC

升麻素苷通过靶向MDSCs增强PD-1抑制剂抗肿瘤效果的研究

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升麻素苷通过靶向MDSCs增强PD-1抑制剂抗肿瘤效果的研究

作者：高万丰南开大学

学位级别：硕士

研究背景:髓性抑制细胞(MDSCs)是一种免疫抑制性细胞,其在免疫逃逸、PD-1/PD-L1抑制剂耐受和肿瘤进展中发挥着非常重要的作用。多项研究显示,MDSCs抑制剂可以抑制肿瘤的生长并且提高PD-1抑制剂的敏感性。本研究的目的是从中药单体中筛... 详细信息

研究背景:髓性抑制细胞(MDSCs)是一种免疫抑制性细胞,其在免疫逃逸、PD-1/PD-L1抑制剂耐受和肿瘤进展中发挥着非常重要的作用。多项研究显示,MDSCs抑制剂可以抑制肿瘤的生长并且提高PD-1抑制剂的敏感性。本研究的目的是从中药单体中筛选出有效的MDSCs抑制剂,并评价其与PD-1抑制剂的协同抗肿瘤作用,为进一步的抗肿瘤药物研究提供理论基础。研究方法:本研究首先分析了与正常小鼠体内PMN-MDSCs相比,B16-F10荷瘤小鼠体内PMN-MDSCs的聚集以及活性变化;然后使用蛋白质组学和Cytoscape分析确定其上调的KEGG通路中的10个关键蛋白质,以这10个关键蛋白质作为靶点,利用分子对接和权重计算从中药单体库(20000个中药单体)中筛选PMN-MDSCs抑制剂;进一步通过体外的蛋白质组学、代谢组学、分子实验、多种功能实验以及小鼠黑色素瘤(B16-F10)肿瘤模型阐释其对PMN-MDSCs的抑制作用及抑制机制;最后利用小鼠黑色素瘤(B16-F10)和三阴性乳腺癌(4T1)肿瘤模型验证该抑制剂与PD-1抑制剂的协同抗肿瘤效果。实验结果:本研究发现PMN-MDSCs在B16-F10荷瘤小鼠的脾脏和骨髓中大量积累,并且其免疫抑制能力显著增强;与正常C57BL/6小鼠PMN-MDSCs相比,B16-F10荷瘤C57BL/6小鼠PMN-MDSCs上调的蛋白主要富集在细胞增殖和细胞代谢通路,并且中国传统中药防风提取物升麻素苷可以与筛选出的靶蛋白很好的结合;升麻素苷可以通过抑制Arg-1和i NOS的表达抑制精氨酸代谢和三羧酸循环(TCA循环)进而抑制PMN-MDSCs的增殖、代谢和免疫抑制能力,并且可以改善B16-F10肿瘤的免疫抑制微环境,抑制其生长;升麻素苷可以在B16-F10肿瘤模型和4T1肿瘤模型中增强PD-1抑制剂的抗肿瘤效果。结论:我们成功从中药单体库中筛选出升麻素苷作为PMN-MDSCs的抑制剂。升麻素苷与PD-1抑制剂具有良好的协同抗肿瘤作用。该研究为在临床上提高PD-1抑制剂的抗肿瘤效果提供了潜在的选择。

关键词： MDSCs 升麻素苷 PD-1抑制剂

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升麻素苷抗炎及抗小鼠肺损伤作用的研究

升麻素苷抗炎及抗小鼠肺损伤作用的研究

作者：陈娜吉林大学

学位级别：硕士

炎症是机体对于组织损伤所做出的快速响应，并且以血流量和血管通透性增加使白细胞和炎症介质如细胞因子等的积累为特征。炎症发生的主要目的是阻止损伤，消灭入侵的微生物并清除毒素，使组织或器官得以恢复。脂多糖（Lipopolysaccharid... 详细信息

炎症是机体对于组织损伤所做出的快速响应，并且以血流量和血管通透性增加使白细胞和炎症介质如细胞因子等的积累为特征。炎症发生的主要目的是阻止损伤，消灭入侵的微生物并清除毒素，使组织或器官得以恢复。脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）是革兰氏阴性细菌细胞壁上的主要成分，普遍认为LPS在对革兰氏阴性菌诱导的细胞反应过程中发挥着至关重要的作用，这是因为LPS能够导致免疫干扰和炎症反应，同时也会引起发热，低血压，组织损伤，感染性休克，甚至是死亡。虽然炎症反应的发生对于机体具有积极意义，但是它也会引起各种急、慢性炎症疾病，而急、慢性炎症通常被认为是很多疾病发病的中心环节，如全身炎性反应综合征（Systemic Inflammatory Response Syndrome，SIRS）、急性呼吸窘迫综合征（Acute Respiratory Distress Syndrome，ARDS）、哮喘、类风湿性关节炎、慢性阻塞性肺病（Chronic Obstructive Pulmonary Disease，COPD）等。急性肺损伤（Acute Lung Injury，ALI）是临床上一种较为常见的危重病症，它也是SIRS在肺部的主要表现形式，ALI是在多器官功能障碍综合征中最先表现出来的，当ALI不断发展并加重时则会发展成为ARDS，LPS是引发ALI的主要因素，而导致ALI的根本原因实际是过度并失控的炎症反应。升麻素苷属于色原酮类，它是从中药防风中提取出来的中药单体。研究表明升麻素苷具有解热、镇静、抗凝血等多种药理作用。本研究首先建立了LPS诱导的小鼠单核-巨噬细胞（RAW264.7）体外炎症模型，进而进行体外实验，从而初步研究升麻素苷所具有的抗炎作用。利用酶联免疫吸附试验（Enzyme-linkedimmunosorbent assay，ELISA）检测炎症相关细胞因子，如肿瘤坏死因子-α（tumornecrosis factor-α，TNF-α），白细胞介素-1β（Interleukin，IL-1β），白细胞介素-6（IL-6）以及白细胞介素-10（IL-10）的表达量在不同浓度的升麻素苷的作用下的变化。随后，运用免疫蛋白印迹（Western blot）的方法，测定升麻素苷对于MAPKs（丝裂原激活的蛋白激酶，Mitogen-activated protein kinases）和NF-κB（核转录因子-κB，Nuclear factor-κB）这两条通路的影响。另外，通过构建LPS诱导的小鼠急性肺损伤模型，再次研究升麻素苷在体内炎症模型下的抗炎作用。利用ELISA方法测定小鼠支气管肺泡灌洗液（Bronchoalveolar Lavage Fluid，BALF）中炎症相关各细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）的水平。并观察小鼠肺部病理组织变化，测定其肺组织内髓过氧化物酶（Myeloperoxidase，MPO）以及肺部干湿重比变化，多方面证明升麻素苷对于急性肺损伤小鼠的保护作用。体外研究结果显示：升麻素苷有效的抑制了TNF-α、IL-1β和IL-6的合成，升高了IL-10的合成，同时，升麻素苷抑制了因LPS介导所引起的ERK1/2，JNK，p38的活化和IκB的降解，初步证明了升麻素苷的抗炎作用。体内研究结果表明：对于急性肺损伤的小鼠，升麻素苷预处理可以有效的抑制小鼠的肺泡灌洗液内细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的合成，同时，升麻素苷药物组小鼠的肺泡灌洗液内总细胞、中性粒细胞以及巨噬细胞的数量较阳性对照组都有显著降低;另外，急性肺损伤小鼠的肺组织干湿重比以及MPO含量因升麻素苷的预处理而较阳性对照组有明显下降;最后，肺部病理组织切片显示升麻素苷能够减弱LPS刺激导致的肺部病理变化。通过上述实验，我们发现升麻素苷具有一定的抗炎作用并对LPS诱导的急性肺损伤小鼠有一定的保护作用，这为其将来作为新的抗炎药物治疗各种炎症提供了一定的理论基础。

关键词：升麻素苷脂多糖细胞因子信号通路小鼠急性肺损伤

九龙化风丸中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、羌活醇、异欧前胡素和细辛脂素的HPLC梯度洗脱法测定

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中成药 2014年第3期36卷 541-547页

作者：高森李正翔王志涛房志仲天津医科大学总医院天津300052 天津医科大学药学院药剂学教研室天津市临床药物关键技术重点实验室天津300070

目的采用高效液相梯度洗脱法测定九龙化风丸（防风、羌活、细辛、大黄、桔梗等）中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、羌活醇、异欧前胡素和细辛脂素的量.方法 Hypersil C18色谱柱（4.6mm×150mm,5μm）,体积流量0.9 mL/min,升麻素苷和5... 详细信息

目的采用高效液相梯度洗脱法测定九龙化风丸（防风、羌活、细辛、大黄、桔梗等）中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、羌活醇、异欧前胡素和细辛脂素的量.方法 Hypersil C18色谱柱（4.6mm×150mm,5μm）,体积流量0.9 mL/min,升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的色谱条件,流动相A为甲醇-乙腈（2∶1）,流动相B为0.5％磷酸溶液,检测波长254 nm.羌活醇和异欧前胡素的色谱条件,流动相A为乙腈,流动相B为0.1％醋酸水溶液,检测波长310 nm,细辛脂素的色谱条件,流动相为乙腈-甲醇（85∶15）,检测波长286 nm.结果升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷分别在0.0146～0.2920μg （r=0.999 1）、0.0108～0.2160μg （r=0.9993）范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.55％、97.73％,RSD （n=6）分别为1.46％、1.18％;羌活醇和异欧前胡素分别在0.017 4 ～0.348 0 μg（r=0.999 3）、0.0128～0.2560 μg （r=0.9997）范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.62％、98.11％,RSD （n=6）分别为1.43％、1.39％;细辛脂素在0.012 4～0.2480 μg （r=0.999 2）范围内进样量与峰面积线性关系良好,平均加样回收率为97.65％,RSD （n=6）为1.24％.结论该方法测定结果准确、灵敏、重复性好.

关键词：九龙化风丸升麻素苷 5-O-甲基维斯阿米醇苷羌活醇异欧前胡素细辛脂素梯度洗脱法