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高羊茅提取物对稗草和千金子的化感作用

分子植物育种 2024年

作者：丁莉君张家迪刘双清周成言王立峰杨浩娜湖南农业大学植物保护学院湖南大学生物学院隆平分院湖南省水稻研究所湖南省农业科学院农业生物技术研究所

植物提取物为植物源除草剂的开发提供了丰富的资源，为确定高羊茅草中的化感物质是否具有除草活性，分别以无菌水和无水乙醇为溶剂提取高羊茅草中的活性物质，并对各粗提物进行除草活性鉴定。结果为高羊茅水提取液对稗草和千金子的抑制... 详细信息

植物提取物为植物源除草剂的开发提供了丰富的资源，为确定高羊茅草中的化感物质是否具有除草活性，分别以无菌水和无水乙醇为溶剂提取高羊茅草中的活性物质，并对各粗提物进行除草活性鉴定。结果为高羊茅水提取液对稗草和千金子的抑制效果优于乙醇提取液。在浓度为10 g/L时，高羊茅水提取液和乙醇提取液对稗草的化感效应指数分别为-1和-0.1；对千金子的化感效应指数分别为-1和-0.13。经超高效液相色谱-质谱联用(UHPLC-QE-MS)技术分析，发现该提取物中主要化合物为左旋缬氨酸、丁二酸、水杨醛、壬二酸、L-苯丙氨酸等17种。进一步的除草活性测定结果表明：葫芦巴碱、壬二酸、2’-脱氧鸟苷和二甲基丙二酸4种化合物对稗草表现出一定的除草活性，在500 mg/L时对稗草种子发芽抑制率均在76%以上；二甲基丙二酸对稗草幼苗生长的抑制作用最强，在10 mg/L时，即对稗草幼苗生长起抑制作用，在300 mg/L时对稗草综合化感效应指数最高，为-0.88；对羟基肉桂酸、6-羟基烟酸、N， N-二乙醇十二酰胺、二甲基丙二酸4种化合物对千金子表现出一定的除草活性，在500 mg/L时对千金子种子发芽抑制率均为100%；对羟基肉桂酸对千金子幼苗生长的抑制作用最强，在300 mg/L时，对千金子幼苗生长综合化感效应指数最高，为-0.85。

关键词：高羊茅提取液稗草千金子化感作用

千金子制霜前后提取物对正常及癌性腹水模型小鼠泻下逐水效应与毒性研究

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中国现代中药 2024年第4期26卷 645-652页

作者：马思媛胡宇峰魏晓彤王梦琳石双慧姜明瑞王慧楠张婧秋王英姿北京中医药大学中药学院北京102488

目的:筛选千金子泻下逐水药效部位,探究其制霜前后泻下逐水效应及结肠、肾脏毒性的变化。方法:采用H22癌性腹水模型小鼠,以腹水量、粪便含水量、尿量等生物效应指标筛选千金子药效部位;采用H22癌性腹水模型小鼠,灌胃千金子生品、霜品石... 详细信息

目的:筛选千金子泻下逐水药效部位,探究其制霜前后泻下逐水效应及结肠、肾脏毒性的变化。方法:采用H22癌性腹水模型小鼠,以腹水量、粪便含水量、尿量等生物效应指标筛选千金子药效部位;采用H22癌性腹水模型小鼠,灌胃千金子生品、霜品石油醚部位,结合生物效应指标、脏器指数、肾脏功能指标、氧化应激指标、炎症因子含量及水通道蛋白表达考察千金子的泻下逐水效应;采用正常小鼠,以脏器指数、肾脏功能指标、氧化应激指标、炎症因子含量考察千金子制霜前后的毒性差异。结果:千金子制霜前后石油醚部位能够提高癌性腹水模型小鼠粪便含水量、尿量,降低小鼠腹水量(P千金子制霜前后泻下逐水的药效部位,千金子制霜后毒性显著降低的同时,其泻下逐水功效得以保留,表现为减毒存效。

关键词：千金子制霜泻下逐水药效部位减毒存效

正交试验优选千金子制霜工艺及制霜前后脂肪油成分变化分析

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中国药事 2024年第5期38卷 567-574页

作者：魏晓彤石双慧王梦琳马思媛胡宇峰姜明瑞张婧秋王慧楠梁少国王英姿北京中医药大学北京102488

目的:优选得到千金子最佳机械压榨制霜工艺,明确其工艺参数,并分析制霜前后千金子脂肪油成分的变化情况。方法:以2020年版《中华人民共和国药典》中规定的千金子霜外观性状和脂肪油含量作为评价指标,采用L9(34)正交试验法优选千金子机... 详细信息

目的:优选得到千金子最佳机械压榨制霜工艺,明确其工艺参数,并分析制霜前后千金子脂肪油成分的变化情况。方法:以2020年版《中华人民共和国药典》中规定的千金子霜外观性状和脂肪油含量作为评价指标,采用L9(34)正交试验法优选千金子机械压榨制霜工艺的制霜温度、压制时间和制霜压力,以确定千金子最佳机械压榨制霜工艺;采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对千金子制霜前后脂肪油成分进行分析。结果:优选得到最佳机械压榨制霜工艺条件:取千金子种仁碾成泥状(粒度约为40~60目),在50℃、50 MPa的压力下压制1次,压制时间为10 min。千金子生品和霜品脂肪油中共检出14种共有脂肪酸甲酯,制霜前后脂肪油中脂肪酸成分组成基本一致,相对含量略有差别,但变化不大。结论:优选得到的千金子机械压榨制霜工艺稳定可靠,简便易行,可为千金子霜饮片生产和质量控制提供参考。

关键词：千金子炮制工艺正交试验脂肪油气相色谱-质谱联用

千金子制霜前后提取物通过调控脂筏介导Caco-2细胞中TLR4信号通路的作用机制研究

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中草药 2023年第22期54卷 7474-7481页

作者：王慧楠魏晓彤石双慧王梦琳马思媛胡宇峰姜明瑞张婧秋王英姿北京中医药大学中药学院北京102488

目的探究千金子Euphorbiae Semen制霜前后提取物通过调控脂筏介导Caco-2细胞中Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)信号通路的作用机制。方法将Caco-2细胞分为千金子生品低、中、高剂量(50、200、800μg/mL)组及千金子霜品低、中、... 详细信息

目的探究千金子Euphorbiae Semen制霜前后提取物通过调控脂筏介导Caco-2细胞中Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)信号通路的作用机制。方法将Caco-2细胞分为千金子生品低、中、高剂量(50、200、800μg/mL)组及千金子霜品低、中、高剂量(50、200、800μg/mL)组和对照组,利用流式细胞术检测Caco-2细胞膜脂筏丰度;采用激光共聚焦实验检测Caco-2细胞中TLR4与脂筏的共定位;利用Western blotting检测Caco-2细胞中TLR4、核因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)、p-NF-κB p65和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)的蛋白表达;ELISA检测Caco-2细胞上清液中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量;Caco-2细胞转染TLR4后检测IL-1β和TNF-α的含量变化。结果与对照组比较,千金子生品提取物可以显著增加Caco-2细胞膜脂筏的丰度(P千金子生品提取物相比,千金子霜品提取物对Caco-2细胞膜脂筏丰度、TLR4向脂筏募集、TLR4介导的信号通路传导和促炎因子分泌的影响均明显减弱(P千金子制霜减毒的作用机制可能与通过调控脂筏丰度干扰TLR4向脂筏募集,最终影响脂筏中包含的TLR4信号蛋白的传导有关。

关键词：千金子制霜减毒脂筏 Toll样受体4 Caco-2细胞千金子甾醇

多奈哌齐和美金刚与千金子活性P-糖蛋白调控剂联用的药代动力学

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应用与环境生物学报 2022年第2期28卷 372-378页

作者：陈泳洁李攀向玲杨春梅张帆焦威川北医学院药学院南充637800 中国科学院成都生物研究所天然产物研究中心成都610041 中国科学院大学北京100049

利用UPLC-MS/MS方法,建立大鼠血浆中千金子活性P-糖蛋白调控剂[Euphorbia factor L2(1)和3,5-dibenzoyl-15-hydroxylathyrol(2)]作用下多奈哌齐和美金刚的检测方法,进而考察两种P-糖蛋白调控剂对阿尔兹海默症药物的药代动力学影响.采用A... 详细信息

利用UPLC-MS/MS方法,建立大鼠血浆中千金子活性P-糖蛋白调控剂[Euphorbia factor L2(1)和3,5-dibenzoyl-15-hydroxylathyrol(2)]作用下多奈哌齐和美金刚的检测方法,进而考察两种P-糖蛋白调控剂对阿尔兹海默症药物的药代动力学影响.采用Agilent C-18(50 mm×2.1 mm,1.8μm),以乙腈∶水(5 mmol/L乙酸铵,0.2%甲酸)=70∶30为流动相,流速为0.2 mL/min,金刚烷胺为内标定量.通过优化制备条件、质谱参数、色谱参数,建立UPLC-MS/MS检测方法.将36只大鼠随机分为6组,仅灌胃给药多奈哌齐或美金刚组,先灌胃给药多奈哌齐或美金刚联合静脉注射1或2组,采用UPLC-MS/MS方法检测大鼠血药浓度并计算药代动力学参数.结果显示,多奈哌齐和美金刚分别在范围0.5-250 ng/mL和1.0-250 ng/mL中线性关系良好,方法学验证结果符合标准.药代动力学研究表明,多奈哌齐和美金刚在大鼠体内代谢受到P-糖蛋白调控剂影响.化合物1降低多奈哌齐的C_(max)、T_(max)、AUC_((0-t))和t_(1/2)的均值,升高CL/F,升高美金刚的C_(max)、T_(max)、AUC_((0-t))和t_(1/2)的均值,降低CL/F.化合物2使多奈哌齐和美金刚的T_(max)均值和AUC_((0-t))都升高,C_(max)都降低.上述结果为以P-糖蛋白调控剂为主要二次代谢产物,特别是以Lathyrane型二萜类似物为主要成分的药用植物与阿尔茨海默症药物相互作用的药代动力学研究提供了参考和方法基础.(图6表5参15)

关键词：千金子 P-糖蛋白调控剂多奈哌齐美金刚 UPLC-MS/MS 药代动力学

千金子生品和霜品提取物中主要二萜醇酯类成分在大鼠肠道菌群中的体外代谢研究

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中华中医药杂志 2023年第6期38卷 2579-2585页

作者：姜明瑞岳珠珠王志成魏晓彤王梦琳石双慧张婧秋陈梦雨王英姿北京中医药大学中药学院北京102488

目的:通过大鼠肠道菌群体外实验,分析千金子生品和霜品提取物中主要二萜醇酯类成分在大鼠肠道菌群中的代谢情况。方法:建立同时测定千金子素L_(1)、L_(2)、L_(3)、L_(7a)、L_(7b)、L_(8)的HPLC定量分析方法,并用该方法测定千金子生品和... 详细信息

目的:通过大鼠肠道菌群体外实验,分析千金子生品和霜品提取物中主要二萜醇酯类成分在大鼠肠道菌群中的代谢情况。方法:建立同时测定千金子素L_(1)、L_(2)、L_(3)、L_(7a)、L_(7b)、L_(8)的HPLC定量分析方法,并用该方法测定千金子生品和霜品提取物中各成分在体外大鼠肠道菌群作用下各个时间点的含量,随后基于UHPLC-Q-Exactive HF,进一步分析千金子制霜前后主要二萜醇酯类成分的体外代谢情况。结果:千金子生品与霜品提取物中千金子素L_(1)、L_(2)、L_(3)、L_(7a)、L_(7b)、L_(8)在体外的代谢产物一致,但代谢速率不同,千金子霜品组在代谢初期代谢速率最大。采用Q-Exactive HF结合Xcalibur软件共分析鉴定出了6个代谢产物,千金子制霜前后提取物中6个二萜醇酯类成分在体外的主要代谢途径为水解和甲基化。结论:千金子生品与霜品提取物能够在大鼠肠道菌群作用下转化为多种代谢产物,该结果为进一步研究其在体内的作用机制提供实验依据。

关键词：肠道菌群代谢超高效液相色谱串联四极杆-轨道阱质谱法千金子制霜减毒

安徽省稻田千金子对氰氟草酯和噁唑酰草胺的抗性及其靶标分子机制

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植物保护学报 2023年第4期50卷 1089-1095页

作者：韩云静孟紫为武健张勇周凤艳安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所合肥230031

为明确安徽省稻田杂草千金子Leptochloa chinensis对氰氟草酯和噁唑酰草胺的抗性,从安徽省12个市38个县(市、区)稻区千金子发生较严重的田块中共采集72个千金子种群,采用整株生物测定法检测其对氰氟草酯和噁唑酰草胺的抗性,筛选同时对... 详细信息

为明确安徽省稻田杂草千金子Leptochloa chinensis对氰氟草酯和噁唑酰草胺的抗性,从安徽省12个市38个县(市、区)稻区千金子发生较严重的田块中共采集72个千金子种群,采用整株生物测定法检测其对氰氟草酯和噁唑酰草胺的抗性,筛选同时对噁唑酰草胺和氰氟草酯有疑似抗性的千金子种群并测定其对这2种药剂的抗性水平,同时利用分子生物学技术检测千金子高抗种群的乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase,ACCase)基因是否发生抗性位点氨基酸突变。结果显示,在72个千金子种群中,13个千金子种群已对氰氟草酯产生抗性,5个千金子种群已对噁唑酰草胺产生抗性;AH-1、AH-3、AH-7、AH-34和AH-72这5个千金子种群同时高抗氰氟草酯和噁唑酰草胺,其中对氰氟草酯的抗性指数介于21.98~65.52之间,对噁唑酰草胺的抗性指数介于11.76~27.19之间;这5个种群的ACCase基因片段均在2027位点发生氨基酸突变,色氨酸突变为半胱氨酸;此外AH-3和AH-72这2个种群在1999位点也由色氨酸突变为半胱氨酸,表明安徽省千金子已经对氰氟草酯和噁唑酰草胺产生交互抗性,且ACCase基因突变可能是产生抗性的主要原因。

关键词：千金子氰氟草酯噁唑酰草胺抗性突变位点靶标抗性

千金子制霜前后提取物对TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的影响研究

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北京中医药大学学报 2023年第6期46卷 780-789页

作者：王慧楠姜明瑞王志成岳珠珠魏晓彤王梦琳石双慧张婧秋陈梦雨刘芊芊王英姿北京中医药大学中药学院北京102488

目的研究千金子制霜前后提取物对Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路的影响差异。方法42只BALB/c小鼠按体质量随机分为空白对照组,千金子生品低、中、高剂量组(10.49、20.98、41.... 详细信息

目的研究千金子制霜前后提取物对Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路的影响差异。方法42只BALB/c小鼠按体质量随机分为空白对照组,千金子生品低、中、高剂量组(10.49、20.98、41.96 g/kg)和千金子霜品低、中、高剂量组(10.49、20.98、41.96 g/kg),每组6只,连续灌胃7 d。酶联免疫吸附测定法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,蛋白质印迹法和实时荧光PCR法检测结肠组织TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白和mRNA表达。30只BALB/c小鼠按体质量随机分为空白对照组、千金子生品组、千金子生品+TAK-242组、千金子霜品组、千金子霜品+TAK-242组,每组6只。各给药组灌胃相应药液(20.98 g/kg),连续7 d,千金子生品+TAK-242组和千金子霜品+TAK-242组于给药第1、5、6、7天给药前30 min腹腔注射TAK-242溶液(3 mg/kg)。采用蛋白质印迹法和实时荧光PCR法检测结肠组织NLRP3、NF-κB p65蛋白表达,以及NLRP3、IL-1βmRNA表达。结果千金子生品可导致IL-1β和TNF-α大量释放,上调TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白和mRNA表达(P千金子制霜后对IL-1β、TNF-α分泌,以及TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白和mRNA表达的促进作用减弱(P千金子生品可能通过激活TLR4介导的NF-κB/NLRP3通路,促进TNF-α和IL-1β释放,诱导结肠组织产生炎性反应,而制霜后对TLR4/NF-κB/NLRP3通路传导及促炎因子分泌的上调作用明显减弱,提示其制霜减毒的作用机制可能与致炎能力下降及干预TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路有关。

关键词：千金子制霜减毒 TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路炎性反应小鼠

千金子制霜前后提取物通过肝X受体-腺苷三磷酸结合盒转运体A1信号通路对Caco-2细胞中胆固醇外流的影响

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中国临床药理学杂志 2023年第2期39卷 201-205页

作者：王佩华岳珠珠魏晓彤王梦琳石双慧王英姿北京中医药大学中药学院北京102488

目的研究千金子制霜前后提取物通过肝X受体(LXR)-腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)信号通路对Caco-2细胞中胆固醇外流的影响差异。方法将Caco-2细胞分为7组:对照组、千金子生品提取物低、中、高剂量组和千金子霜品提取物低、中、高剂... 详细信息

目的研究千金子制霜前后提取物通过肝X受体(LXR)-腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)信号通路对Caco-2细胞中胆固醇外流的影响差异。方法将Caco-2细胞分为7组:对照组、千金子生品提取物低、中、高剂量组和千金子霜品提取物低、中、高剂量组。对照组仅加入细胞培养液,低、中、高剂量组分别加入生药量为50,200和800μg·mL^(-1)的千金子生品或霜品提取物。用实时荧光定量聚合酶链反应检测LXRα和ABCA1 mRNA的表达水平,用胆固醇流出实验检测胆固醇外流率。结果千金子生品提取物低、高剂量组和千金子霜品提取物低、高剂量组及对照组的LXRαmRNA相对表达水平分别为0.37±0.03,0.13±0.01,0.53±0.05,0.48±0.03和1.00±0.05,ABCA1 mRNA相对表达水平分别为0.25±0.02,0.06±0.01,0.63±0.06,0.32±0.02和1.01±0.15,胆固醇流出率分别为(37.11±0.21)%,(29.98±0.44)%,(48.38±0.76)%,(37.66±0.25)%和(48.69±0.82)%。千金子生品提取物低、高剂量组的上述指标与对照组相比,差异均有统计学意义(均P千金子霜品提取物组的上述指标与千金子生品提取物组相比,差异均有统计学意义(P千金子生品提取物可能通过抑制LXR-ABCA1信号通路影响膜脂成分胆固醇的流出,而制霜后作用明显减弱,提示千金子制霜减毒作用机制可能与LXR-ABCA1信号通路调控胆固醇外流有关。

关键词：千金子肝X受体腺苷三磷酸结合盒转运体A1 胆固醇外流 Caco-2细胞制霜减毒