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化瘀解毒方含药血清对人肺癌A549细胞凋亡的作用及机制

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中国老年学杂志 2023年第1期43卷 163-166页

作者：魏征张俊萍河南省中医药研究院河南郑州450004 河南中医药大学第一附属医院河南中医药大学

目的研究化瘀解毒方含药血清(HJRMS)对人肺癌A549细胞凋亡的影响,探明HJRMS诱导促进人肺癌A549细胞凋亡的作用及机制。方法运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测HJRMS对人肺癌A549细胞活力的影响,确定HJRMS作用于人肺癌A549细胞的半数抑... 详细信息

目的研究化瘀解毒方含药血清(HJRMS)对人肺癌A549细胞凋亡的影响,探明HJRMS诱导促进人肺癌A549细胞凋亡的作用及机制。方法运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测HJRMS对人肺癌A549细胞活力的影响,确定HJRMS作用于人肺癌A549细胞的半数抑制浓度(IC50)。利用流式细胞技术检测不同浓度HJRMS对人肺癌A549细胞凋亡的影响。利用Western印迹检测HJRMS对人肺癌A549凋亡相关蛋白表达情况的影响。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)用来检测HJRMS对人肺癌A549细胞凋亡相关蛋白信使RNA(mRNA)表达水平的影响。结果MTT结果显示,随着HJRMS浓度的不断增加,人肺癌A549细胞的增殖受到明显抑制,细胞活力下降明显(P<0.05),呈明显的浓度依赖性。流式细胞技术结果显示,HJRMS可以显著促进肺癌细胞的凋亡,随着HJRMS浓度的增加,细胞的凋亡逐渐显著增多(P<0.05)。Western印迹结果显示,HJRMS可以明显提高B细胞淋巴瘤(Bcl)-2细胞凋亡抵抗(Bad)蛋白和Caspase-3等促凋亡蛋白的表达(P<0.05),同时显著抑制肺癌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2的表达(P<0.05)。qRT-PCR结果表明,HJRMS可以有效抑制肺癌细胞中Bcl-2 mRNA的表达丰度(P<0.05),同时显著促进Bad mRNA的表达水平(P<0.05)。结论HJRMS可以明显抑制人肺癌A549细胞的增殖活力,促进人肺癌A549细胞的凋亡,其作用很可能是通过提高Bad mRNA表达丰度,抑制Bcl-2蛋白的表达来实现的。

关键词：化瘀解毒方肺癌凋亡

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化瘀解毒方对胃癌细胞凋亡的作用及机制

中国实验方剂学杂志 2020年第21期26卷 62-67页

作者：魏征张爱华李亚峰梁瑞峰崔伟峰王艳春张俊萍河南省中医药研究院郑州450004 河南省人民医院郑州450000

目的:观察化瘀解毒方(Huayu Jiedu recipe,HYJDR)对胃癌细胞凋亡的影响,探讨HYJDR对胃癌细胞凋亡的作用机制,为HYJDR的临床运用提供实验依据。方法:运用噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测HYJDR(5,10,15,20,25,30 g·L-1)对胃癌SGC-7901细胞活力影响,测定HYJDR对SGC-7901细胞的半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)。利用碘化丙啶(propidium iodide,PI)和hoechst双荧光染色检测HYJDR对胃癌SGC-7901细胞的凋亡影响情况。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HYJDR对胃癌凋亡相关蛋白表达情况的影响。实时荧光聚合酶链反应(Realtime-polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测HYJDR对胃癌细胞凋亡相关蛋白信使RNA(mRNA)表达水平的影响。结果:与空白组比较,HYJDR质量浓度>10 g·L-1时可以明显抑制胃癌细胞的增殖活力,随着HYJDR浓度的增加,细胞活力下降明显(P<0.05),呈明显的浓度依赖性。HYJDR可以促进胃癌细胞的凋亡,随着HYJDR浓度的增加,细胞的凋亡逐渐增多。与空白组比较,HYJDR可以明显抑制胃癌细胞凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)表达(P<0.05),同时提高Bcl-2细胞凋亡抵抗蛋白(Bcl-2 antagonist of cell death,Bad)和Bcl-2相关蛋白X(Bcl-2-associated X,Bax)等促凋亡蛋白表达(P<0.05)。PCR结果显示,与空白组比较,HYJDR(5,10 g·L-1)组可以有效抑制胃癌细胞中Bcl-2 mRNA表达(P<0.05),HYJDR各组促进Bad mRNA表达(P<0.05)。结论:HYJDR可以明显促进胃癌细胞SGC-7901的凋亡,其作用很可能是通过提高Bad mRNA表达,抑制Bcl-2蛋白表达来实现的。

关键词：化瘀解毒方胃癌凋亡机制

化瘀解毒方改善子宫内膜异位症小鼠肠道菌群及粪便代谢组

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中国实验方剂学杂志 2021年第9期27卷 202-214页

作者：赵倩倩倪喆鑫毕艳丽孙帅程雯俞超芹上海中医药大学上海201203 海军军医大学第一附属医院(上海长海医院) 上海200433

目的:探讨化瘀解毒方(HYJDP)对子宫内膜异位症模型小鼠肠道菌群、粪便代谢物和异位病灶的影响。方法:将正常雌性C57BL/6J小鼠分为正常组(CO),子宫内膜异位症组(EM),化瘀解毒方组(CM),CO和EM组予生理盐水灌胃,CM组予HYJDP汤药灌胃。采用... 详细信息

目的:探讨化瘀解毒方(HYJDP)对子宫内膜异位症模型小鼠肠道菌群、粪便代谢物和异位病灶的影响。方法:将正常雌性C57BL/6J小鼠分为正常组(CO),子宫内膜异位症组(EM),化瘀解毒方组(CM),CO和EM组予生理盐水灌胃,CM组予HYJDP汤药灌胃。采用非靶向代谢组学检测小鼠粪便上清中代谢物,运用接受者操作特性曲线(ROC)分析筛选重要差异代谢物;采用16S rRNA高通量测序方法检测小鼠肠道菌群结构,并用Spearman相关系数表示差异代谢物与肠道菌群之间关联程度;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠肠壁组织、血清及腹腔液中脂多糖(LPS)含量;运用免疫组化检测异位病灶中波形蛋白(Vimentin)和钙黏蛋白(E-cadherin)表达情况。结果:HYJFD能够恢复子宫内膜异位症小鼠肠道菌群紊乱代谢物水平,以homoveratric acid,melilotoside C和physapubescin 3种代谢物水平恢复为特征,homoveratric acid,melilotoside C和physapubescin EM分别与CO,CM比较时变量权重值(VIP)值均超过2且ROC分析中AUC值均>0.9。与EM组比较,HYJDP能够恢复子宫内膜异位症小鼠肠道菌群中LachnospiraceaeNK4A136group,Lactobacillus,Blautia等物种丰度(P<0.05)。EM组腹腔液上清LPS水平明显高于CO组(P<0.05),并明显高于CM组(P<0.05)。子宫内膜异位灶Vimentin和E-cadherin蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:HYJFD能够改善子宫内膜异位症小鼠肠道内环境,降低体内LPS水平,减轻异位灶纤维化,是治疗子宫内膜异位症的有效药物。

关键词：子宫内膜异位症化瘀解毒方肠道菌群代谢组学脂多糖

化瘀解毒方对梗阻性肾病大鼠肾脏NLRP3、Caspase1、IL-1β表达的影响

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中国中西医结合杂志 2017年第4期37卷 470-475页

作者：梁文杰马雪莲王萱熊云昭王香婷许庆友河北医科大学中西医结合学院石家庄050017 河北中医学院河北省中西医结合肝肾病证重点实验室石家庄050091

目的观察化瘀解毒方对梗阻性肾病大鼠肾脏核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3[NOD(nucleotide-binding oligomerization domain)-like receptor protein 3,NLRP3]、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、IL-1β表达的影响。方法将40只清洁级SD大鼠随机分为假手术组(10只)、造模组(30只),采用单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)手术复制梗阻性肾病模型,成功后随机分为模型组、西药组和中药组,每组各10只。西药组给予依普利酮100 mg/(kg·d),中药组给予化瘀解毒方13.7 g/(kg·d),假手术组和模型组给予等量生理盐水,连续给药10天。检测各组血清IL-1β含量,检测肾脏NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白及mRNA表达,检测肾脏TUNEL阳性细胞率。结果假手术组NLRP3表达不明显,Caspase-1及IL-1β呈弱表达,仅见少量TUNEL阳性细胞。与假手术组比较,模型组血清IL-1β含量升高(P化瘀解毒方可下调NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白及mRNA表达,减轻肾组织炎症损伤。

关键词：化瘀解毒方梗阻性肾病 NOD样受体蛋白3 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1 白细胞介素-1β

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化瘀解毒方对胃癌上皮间质转化作用的研究

中国免疫学杂志 2019年第24期35卷 3038-3041,3047页

作者：魏征张爱华李亚峰梁瑞峰张俊萍河南省中医药研究院

目的:探讨化瘀解毒方(HYJD)对TGF-β1诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化(EMT)的影响,为化瘀解毒方的临床应用及进一步成药开发提供理论和实验基础。方法:运用细胞因子TGF-β1诱导人胃癌SGC-7901细胞进行EMT造模,同时设置阴性对照组... 详细信息

目的:探讨化瘀解毒方(HYJD)对TGF-β1诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化(EMT)的影响,为化瘀解毒方的临床应用及进一步成药开发提供理论和实验基础。方法:运用细胞因子TGF-β1诱导人胃癌SGC-7901细胞进行EMT造模,同时设置阴性对照组、模型组和不同浓度解毒化瘀方处理实验组。MTT法检测解毒化瘀方对胃癌细胞生长抑制作用;Western blot法检测细胞EMT生物标志分子(Bio-marker)E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达水平;Transwell小室法用来检测胃癌细胞体外的侵袭和转移能力。结果:TGF-β1能够成功诱导SGC-7901细胞发生EMT,使细胞的形态发生改变。与模型组相比:HYJD能显著抑制胃癌细胞的增殖,呈明显的剂量依赖性。HYJD能下调人胃癌SGC-7901细胞的EMT标志蛋白N-钙黏蛋白、波形蛋白的表达水平,同时上调E-钙黏蛋白的表达水平,显著抑制人胃癌SGC-7901细胞的EMT进程,呈明显的剂量依赖性;HYJD能降低人胃癌SGC-7901细胞的穿膜细胞数。结论:HYJD能明显抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,同时可以抑制胃癌细胞的EMT进程并逆转SGC-7901细胞的EMT进程,从而抑制胃癌细胞的侵袭转移。

关键词：化瘀解毒方胃癌上皮间质转化侵袭转移

化瘀解毒方联合胰岛素对应激状态下2型糖尿病患者血糖的影响

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中医杂志 2014年第20期55卷 1757-1759页

作者：赵天豫张沛然中日友好医院国际医疗部北京市朝阳区樱花园东街2号100029

目的观察化瘀解毒方联合胰岛素治疗应激状态下2型糖尿病患者的临床疗效。方法将70例应激状态下2型糖尿病患者分为治疗组[给予胰岛素皮下注射,起始总量为0.4～0.6IU/（kg·d）,并加用化瘀解毒方]38例和对照组（给予胰岛素）32例。两组共... 详细信息

目的观察化瘀解毒方联合胰岛素治疗应激状态下2型糖尿病患者的临床疗效。方法将70例应激状态下2型糖尿病患者分为治疗组[给予胰岛素皮下注射,起始总量为0.4～0.6IU/（kg·d）,并加用化瘀解毒方]38例和对照组（给予胰岛素）32例。两组共治疗14天。观察两组患者的血糖情况、血糖达标时间、血糖达标时间、日胰岛素使用剂量、低血糖发生率、最大血糖波动幅度（LAGE）。结果两组患者治疗后早餐前、早餐后、午餐前、午餐后、晚餐前、晚餐后及睡前血糖水平均较治疗前明显降低（P〈0.01）,两组治疗后同时段血糖水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）。与对照组比较,治疗组日胰岛素使用剂量明显减少,血糖达标时间明显缩短,低血糖发生率明显降低,LAGE明显降低（P〈0.05）。结论 2型糖尿病应激状态下,胰岛素联合化瘀解毒方较单独使用胰岛素可明显缩短血糖达标时间,减少日胰岛素使用剂量,降低低血糖发生率及缩小血糖波动幅度。

关键词：化瘀解毒方 2型糖尿病应激状态胰岛素血糖

化瘀解毒方诱导人胃癌MKN-45细胞凋亡及其分子机制研究

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中药材 2021年第2期44卷 442-446页

作者：毛臻李金花刘泧澍甘肃省人民医院中医科甘肃兰州730000

目的:探讨化瘀解毒方诱导人胃癌MKN-45细胞凋亡的作用及其分子机制。方法:体外培养对数生长期胃癌MKN-45细胞,阳性对照组采用环磷酰胺(CTX)粉针剂处理,实验组加入梯度浓度的化瘀解毒方提取物(0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、40 mg/mL... 详细信息

目的:探讨化瘀解毒方诱导人胃癌MKN-45细胞凋亡的作用及其分子机制。方法:体外培养对数生长期胃癌MKN-45细胞,阳性对照组采用环磷酰胺(CTX)粉针剂处理,实验组加入梯度浓度的化瘀解毒方提取物(0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、40 mg/mL)处理,采用MTT法分析细胞增殖情况,采用流式细胞仪检测细胞周期变化与细胞凋亡,采用Western blot法检测细胞内NF-κB P65、Bcl-2、Bax、Caspase-3、c-Myc蛋白表达。结果:化瘀解毒方提取物能抑制人胃癌MKN-45细胞的增殖并促进细胞凋亡;化瘀解毒方提取物处理MKN-45细胞72 h后,G_(0)/G_(1)期比例及Bax、Caspase-3蛋白表达显著升高,S、G_(2)/M期比例及NF-κB P65、Bcl-2、c-Myc蛋白表达显著降低(P化瘀解毒方的作用呈浓度依赖性。结论:化瘀解毒方可抑制人胃癌MKN-45细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与阻断细胞周期、抑制NF-κB通路激活、上调Bax、Caspase-3蛋白和下调NF-κB P65、Bcl-2、c-Myc蛋白表达有关。

关键词：化瘀解毒方 MKN-45细胞胃癌凋亡分子机制

化瘀解毒方对过表达PDK1和Akt人胃癌SGC-7901细胞侵袭转移的影响

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中华中医药学刊 2017年第10期35卷 2498-2500,I0007,I0008页

作者：魏征张社峰赵玉瑶赵晓东赵法新张俊萍河南省中医药研究院附属医院河南郑州450000

目的:利用细胞瞬时转染技术,探讨过表达PDK1和Akt后化瘀解毒方抑制人胃癌SGC-7901细胞侵袭转移的机制。方法:先后将SGC-7901细胞瞬时转染PDK1质粒和Akt质粒,采用matrigel基质胶观察细胞黏附作用;利用Transwell细胞培养系统检测细胞迁移... 详细信息

目的:利用细胞瞬时转染技术,探讨过表达PDK1和Akt后化瘀解毒方抑制人胃癌SGC-7901细胞侵袭转移的机制。方法:先后将SGC-7901细胞瞬时转染PDK1质粒和Akt质粒,采用matrigel基质胶观察细胞黏附作用;利用Transwell细胞培养系统检测细胞迁移、侵袭作用;利用免疫共沉淀观察PDK1和Akt的结合力。结果:过表达Akt可以阻止化瘀解毒方提取物诱导的SGC-7901细胞黏附能力、迁移、侵袭能力下降。免疫共沉淀显示化瘀解毒方提取物通过抑制PDK1和Akt的结合进而抑制Akt磷酸化。结论:化瘀解毒方抑制胃癌细胞黏附、迁移、侵袭,其作用机制与抑制PI3K/Akt通路有关。

关键词：化瘀解毒方细胞瞬时转染细胞迁移细胞侵袭 PI3K/Akt通路

化瘀解毒方联合化瘀散结灌肠液治疗子宫内膜异位症50例临床观察

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中医杂志 2018年第23期59卷 2027-2030页

作者：单婧俞超芹程雯翟东霞张丹英俞瑾孙帅姚睿嫔白玲玲海军军医大学附属长海医院上海市杨浦区长海路168号200433

目的观察化瘀解毒方联合化瘀散结灌肠液治疗子宫内膜异位症(EM)的临床有效性及安全性。方法将75例EM患者随机分为治疗组50例和对照组25例。治疗组予化瘀解毒方联合化瘀散结灌肠液治疗;对照组予孕三烯酮胶囊口服,每次2. 5 mg,每周2次。治... 详细信息

目的观察化瘀解毒方联合化瘀散结灌肠液治疗子宫内膜异位症(EM)的临床有效性及安全性。方法将75例EM患者随机分为治疗组50例和对照组25例。治疗组予化瘀解毒方联合化瘀散结灌肠液治疗;对照组予孕三烯酮胶囊口服,每次2. 5 mg,每周2次。治疗3个月经周期后评价两组的临床疗效,观察两组治疗前后疼痛评分、卵巢子宫内膜异位囊肿大小、血清CA125水平、子宫内膜异位症生活质量量表(EPH-5)评分,以及药物的安全性及不良事件。结果治疗组、对照组总有效率分别为84. 78%和86. 36%。治疗后两组患者疼痛评分、EPH-5评分及血清CA125水平均较治疗前降低,囊肿缩小(P 0. 05)。治疗组不良事件发生率(4. 35%)明显低于对照组(68. 18%)。结论化瘀解毒方联合化瘀散结灌肠液可有效治疗EM患者,明显减轻疼痛症状,缩小卵巢子宫内膜异位囊肿,降低血清CA125水平,改善生活质量,且安全性较好。

关键词：子宫内膜异位症化瘀解毒方化瘀散结灌肠液疼痛生活质量