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化浊解毒抑溃方对溃疡性结肠炎大鼠IL-4及ODC的影响

化浊解毒抑溃方对溃疡性结肠炎大鼠IL-4及ODC的影响

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作者：师虹艳河北医科大学

学位级别：硕士

目的:溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种复发率高的、慢性非特异性顽固性炎症性肠病。本实验通过观察化浊解毒抑溃方对溃疡性结肠炎大鼠的一般情况、疾病活动指数(DAI)、结肠粘膜组织病理学改变、血清白细胞介素-4(IL-4)含量... 详细信息

目的:溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种复发率高的、慢性非特异性顽固性炎症性肠病。本实验通过观察化浊解毒抑溃方对溃疡性结肠炎大鼠的一般情况、疾病活动指数(DAI)、结肠粘膜组织病理学改变、血清白细胞介素-4(IL-4)含量及结肠组织中鸟氨酸脱羧酶(ODC)表达水平,探讨化浊解毒抑溃方治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法:随机将60只体重在250g-300g健康雄性Wistar大鼠分为6组,分别为正常对照组(NK)、模型组(M)、美沙拉嗪组(MSG)、化浊解毒抑溃方高剂量组(HG)、中剂量组(MG)、低剂量组(LG),各组10只。适应性喂养1周后,NK组常规饲养,其余各组大鼠以2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trini-trobenzene esulfonic acid,TNBS)/乙醇联合造模法建立UC大鼠模型。造模后,观察4天,随机抽取1只大鼠(正常组除外)断头解剖,取结肠组织,观察结肠粘膜充血水肿、溃疡形成,说明造模成功。NK组及M组继续正常饲养,MSG组给予西药美沙拉嗪混悬液灌胃,HG、MG和LG组分别给予高、中、低三种浓度的化浊解毒抑溃方灌胃。灌胃期间观察大鼠体重、毛发色泽、精神状况、大便性状等一般情况的变化,并进行DAI评分,连续灌胃2周。灌胃给药结束后,禁食不禁水24小时,采取断头取血法测定大鼠血液中IL-4水平的含量,取病变较明显处结肠粘膜组织检测ODC的表达水平。结果:1一般情况观察及DIA评分NK组大鼠状态与常无异,余各组大鼠造模后精神萎靡,嗜蜷卧,食量、活动量等显著减少,喜扎堆,反应迟钝,拱背,被毛松散哑黄无光泽,体重明显下降,粪便质稀或伴粘液脓血。经灌胃给药治疗后,MSG组、HG组、MG组及LG组大鼠一般情况均有改善,其中HG组改善最明显,MSG组、MG组情况改善无明显差别,均低于HG组,高于LG组。DAI评分结果显示:HG组(0.403±0.288)、MG组(0.890±0.362)、LG组(1.325±0.255)和MSG组(0.900±0.296)均比M组(2.488±0.246)低,差异有统计学意义(P0.05),MSG组、MG组均低于LG组,差异有统计学意义(P溃疡数量最多,腺体结构紊乱,环形皱襞消失,破坏较重,充血、水肿明显。HG组黏膜表面偶有浅表性小溃疡,可见大量新生腺体,溃疡大多处于愈合期;MG组、MSG组黏膜欠光滑,有少量溃疡创面;LG组黏膜有较多溃疡,腺体结构破坏重,新生腺体少,粘膜充血、水肿,浆细胞、淋巴细胞等炎性细胞浸润明显。3 IL-4含量及ODC含量的测定IL-4含量比较:HG组(0.831±0.045)、MG组(0.737±0.067)、LG组(0.683±0.053)和MSG组(0.742±0.073)含量均高于M组(0.587±0.059),差异具有统计学意义(P0.05)。ODC含量比较:MG组(0.188±0.022)、LG组(0.152±0.005)和MSG组(0.185±0.014)及HG组(0.282±0.044)中ODC含量高于NK组(0.110±0.010),差异有统计学意义(P0.05);MG组、MSG组及HG组ODC含量均高于LG组,差异有统计学意义(P化浊解毒抑溃方能够改善溃疡性结肠炎大鼠的一般情况,修复受损肠粘膜,降低DAI评分,并呈现出一定的量-效关系,高剂量组改善情况优于中、低剂量组及西药组。2化浊解毒抑溃方能够改善溃疡性结肠炎大鼠的一般情况,修复受损结肠粘膜组织,其作用机制可能是通过升高抑炎因子IL-4水平抑制炎症反应,上调ODC表达水平促进粘膜修复。

关键词：溃疡性结肠炎化浊解毒抑溃方中医药 IL-4 ODC 动物实验

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化浊解毒抑溃方对溃疡性结肠炎大鼠IL-10及β-防御素2表达的影响

化浊解毒抑溃方对溃疡性结肠炎大鼠IL-10及β-防御素2表达的影响

引用

作者：闫一慧河北医科大学

学位级别：硕士

目的：通过对大鼠进行溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)造模及药物干预,观察大鼠一般状态、肠黏膜组织病理学形态、白细胞介素-10(interleukin-10, IL-10)及p-防御素2含量的变化,探讨化浊解毒抑溃方治疗溃疡性结肠炎的作用机制,为... 详细信息

目的：通过对大鼠进行溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)造模及药物干预,观察大鼠一般状态、肠黏膜组织病理学形态、白细胞介素-10(interleukin-10, IL-10)及p-防御素2含量的变化,探讨化浊解毒抑溃方治疗溃疡性结肠炎的作用机制,为临床治疗提供实验依据。方法：将60只清洁健康雄性Wistar大鼠按随机数字表随机分为6组,分别为空白对照组(A组),模型组(B组),美沙拉嗪组(C组),化浊解毒抑溃方高剂量组(D1组)、中剂量组(D2组)、低剂量组(D3组),每组10只。空白对照组正常饲养,余各组大鼠均以三硝基苯磺酸(trinitrobenzesulfonic, TNBS)／乙醇联合造模方法建立UC大鼠模型。自造模成功后第4天开始,各组正常饲养,其中治疗组在正常饲养基础上给予药物灌胃,C组在正常饲养基础上予美沙拉嗪混悬液灌胃,D1、D2和D3组予不同剂量的化浊解毒抑溃方灌胃。连续灌胃2周,观察记录各组大鼠精神、被毛、粪便、体重、活动、饮食等一般状态的变化,并行疾病活动指数(disease activity index, DAI)评分。治疗结束后各组大鼠禁食不禁水24小时,断头处死并采取血液,用放射免疫法测定各组大鼠血清中IL-10的含量,解剖取其结肠组织,常规石蜡包埋,切片并经HE染色,观察结肠黏膜有无缺损、糜烂及溃疡等情况,检测肠黏膜组织中p-防御素2的表达情况。结果：1一般状态A组大鼠精神良好,余各组大鼠造模后精神萎靡,反应迟钝,被毛暗黄,进食减少,体重减轻,粪便稀溏或夹有粘液脓血。药物干预后各治疗组大鼠一般状态均有改善,活动增加,进食增多,其中Dl组改善最为明显,C组与D2组改善情况无明显差别,但均不及D1组,均优于D3组。2 DAI评分结果C、D1、D2、D3组与B组相比,评分均低,差异有统计学意义(P0.05)。3肠黏膜组织病理学观察A组大鼠肠黏膜组织未见异常;B组大鼠黏膜溃疡灶多,伴有明显的糜烂、充血及水肿,腺体结构破坏;D1组肠黏膜尚可,存在极少量浅表性溃疡面,可见新生腺体;C及D2组黏膜欠光滑,炎性细胞浸润,可见少量溃疡灶;D3组溃疡灶偏多,腺体结构欠清,黏膜充血水肿。4指标检测IL-10的表达B、C、D1、D2、D3组IL-10的表达较A组低,差异有统计学意义(P0.05)。p-防御素2的表达B、C、D1、D2、D3组p-防御素2的表达较A组高,差异有统计学意义(P0.05)。结论：化浊解毒抑溃方能使UC大鼠的一般状态及肠黏膜的损伤情况得到改善,其治疗UC的机制可能与增加IL-10含量、下调p-防御素2的表达,减轻炎性反应,促进黏膜修复有关。

关键词：化浊解毒抑溃方溃疡性结肠炎实验研究中医药 IL-10 β-防御素2

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